ABSTRACT
El ñame (Dioscorea alata L.), ampliamente usado como fuente de calorías en África, Asia y el Caribe, es una planta herbácea y trepadora que se reproduce generalmente de forma vegetativa y produce un tubérculo comestible de gran tamaño con alto contenido de almidón. Varios microorganismos fitopatógenos, incluyendo virus, hongos y bacterias, afectan al cultivo. Plantas enfermas de la zona de Guarataro, estado Bolívar, Venezuela, fueron colectadas en el 2003, año en que hubo ~80% de pérdidas en la producción de ñame de la zona a causa de una enfermedad desconocida. Hojas colectadas de plantas enfermas con lesiones acuosas y necróticas fueron esterilizadas superficialmente y transferidas a solución salina para permitir la difusión de bacterias desde los bordes del tejido y ser luego sembradas en medio LB agar. Como controles se emplearon agua y medio LB. Colonias amarillas, brillantes y lisas, fueron visibles a las 24-48h de incubación a 30ºC. Varios aislados fueron inoculados en las pruebas de hipersensibilidad en tabaco y de patogenicidad en plántulas de ñame cultivadas in vitro. Varios grados de respuesta de hipersensibilidad en tabaco fueron observados. Las plántulas de ñame inoculadas mostraron lesiones acuosas en la lámina foliar, las cuales no se observaron en los controles. Aislados bacterianos fueron observados mediante microscopía de luz, revelando bacterias bacilares Gram negativas. Varios flagelos peritricos fueron observados por microscopía electrónica. Los resultados de las pruebas bioquímicas y fisiológicas indicaron que los aislados corresponden a Pantoea agglomerans (Enterobacteriacea). Se discuten diferentes metodologías para la identificación de bacterias.
Water yam (Dioscorea alata L.), a staple crop in Africa, Asia and the Caribbean, is a herbaceous twining vine plant generally reproduced by vegetative sections and highly affected by several phytopathogenic organisms including virus, fungi and bacteria. Diseased plants were collected from Guarataro, Bolívar State, Venezuela, in 2003. That year an unknown disease led to ~80% loss of water yam production. The leaves from diseased plants have watery or necrotic lesions on the leaf lamina. Pieces of necrotic tissue were surface sterilized, then transferred to saline solution and the bacteria allowed to diffuse into the solution from the edge of the dissected tissue. The bacteria were isolated on LB agar media. Yellow, shining, smooth colonies with regular margins were visible within 24-48h of incubation at 30ºC. Several isolates were inoculated on tobacco plants. Water and LB media were used as negative controls. Several degrees of hypersensitivity response resulted from the inoculation of tobacco. However, inoculation of in vitro water yam plants showed watering lesions on the leaf lamina inoculated with bacteria cultures and no lesions on water and media inoculated leaves. Bacterial cells observed by light microscopy showed Gram-negative regular rods. Several peritricous flagella were observed under EM. Data from biochemical and physiological tests indicated that the isolates belong to the Enterobacteriaceas family specifically to Pantoea agglomerans. Different methodologies for bacterial identification are discussed.
O inhame (Dioscorea alata L.), amplamente usado como fonte de calorias na África, Ásia e no Caribe, é uma planta herbácea e trepadeira que se reproduz geralmente de forma vegetativa e produz um tubérculo comestível de grande tamanho com alto conteúdo de amido. Vários microorganismos fitopatógenos, incluindo vírus, fungos e bactérias, afetam ao cultivo. Plantas enfermas da zona de Guarataro, estado Bolívar, Venezuela, foram coletadas em 2003, ano em que houve ~80% de perdas na produção de inhame dessa zona a causa de uma enfermidade desconhecida. Folhas coletadas de plantas enfermas com lesões aquosas e necróticas foram esterilizadas superficialmente e transferidas a uma solução salina para permitir a difusão de bactérias desde as bordas do tecido e ser logo plantadas em meio LBA. Como controles foram empregados água e meio LBA. Colônias amarelas, brilhantes e lisas, foram visíveis às 24-48h de incubação a 30ºC. Vários isolados foram inoculados nas provas de hipersensibilidade em tabaco e de patogenicidade em plântulas de inhame cultivadas in vitro. Vários graus de resposta de hipersensibilidade em tabaco foram observados. As de plântulas de inhame inoculadas mostraram lesões aquosas na lâmina foliar, as quais não se observaram nos controles. Isolados bacterianos foram observados mediante microscopia de luz, revelando bactérias bacilares Gram negativas. Vários flagelos perítricos foram observados por microscopia eletrônica. Os resultados das provas bioquímicas e fisiológicas indicaram que os isolados correspondem a Pantoea agglomerans (Enterobacteriacea). Discutem-se diferentes metodologias para a identificação de.