ABSTRACT
A detecção e quantificação de carotenóides em alimentos por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) demanda de padrões analíticos com alto grau de pureza. A aquisição comercial destes padrões é morosa e dispendiosa. Além disso, determinados diasteroisômeros não estão disponíveis no mercado e alterações dos compostos podem ocorrer durante seu transporte. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi obter isômeros cis-licopeno a partir de licopeno todo-trans de melão-de-São-Caetano (Momordica charantia L.) e beta-criptoxantina a partir de caqui (Diospyros kaki L.) para utilização como padrões analíticos na análise de alimentos. Licopeno todo-trans extraído do arilo de sementes de melão-de-São-Caetano foi convertido a cis-licopeno. A isomerização e separação das frações contendo isômeros do licopeno foram realizadas em coluna cromatográfica aberta de sílica ativada e a verificação da isomerização e o isolamento foram realizados por CLAE. Foram detectados 94,2% de licopeno todo-trans entre os carotenóides totais dos arilos de sementes. A isomerização em coluna de sílica aberta ativada produziu 29 isômeros ¬cis-licopeno em três frações coletadas. Nas primeiras frações de melão-de-São-Caetano e de caqui foram isolados um isômero cis-licopeno e beta-criptoxantina com pureza de 91,3% e 92,8%, respectivamente, o que permite seu uso como padrões analíticos para análises. Após 1 ano conservados à -18 oC em ampola de borossilicato selada à vácuo, em ambiente escuro, não houve alteração significativa nas concentrações do cis-licopeno e da beta-criptoxantina, permitindo ainda seu uso como padrões analíticos. A metodologia empregada mostrou-se viável para a conversão de licopeno todo-trans em cis-licopenos e para o isolamento e purificação de padrões analíticos para CLAE.
Detection and quantification of carotenoids in foods can be carried out by high performance liquid chromatography (HPLC), but analytical standards must be employed. However, these analytical standards are expensive, some isomers are not available for trade, time consuming between purchase and reception and chemical changes may occur during long transportation. Therefore, the objective of this study was to obtain cis-lycopene isomers from all-trans lycopene present in bitter melon (Momordica charantia L.) and beta-cryptoxanthin from persimmon (Diospyros kaki L.), for use as analytical standards in foods analysis. All-trans lycopene extracted from bitter melon seed arils was converted to cis-lycopene. The isomerization and separation of the fractions containing cis-isomers were done in silica column. Confirmation of isomerization and isolation of cis-lycopene were performed by HPLC. A total of 94.2% of all-trans lycopene were detected in the seed arils. Isomerization in silica column produced 29 cis-lycopene isomers in 3 fractions collected. In the first fraction, a cis-lycopene with a purity of 91.3% was isolated which allows its use as analytical standard for analysis using HPLC. After sample preparation, ?-cryptoxanthin was isolated by silica column. Analysis by HPLC revelead ?-cryptoxanthin with purity of 92.8%. After one year stored at -18 °C in sealed borosilicate glass ampoule under vacuum, in the dark,, no significant change in concentration of cis-lycopene and ?-cryptoxanthin occured, still allowing them use as analytical standards. The methodology was feasible for the conversion of all-trans lycopene to cis-lycopene and for the isolation and purification of analytical standards by HPLC.