ABSTRACT
Paratuberculosis is a chronic granulomatous enteritis caused by Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (Map), which affects wild and domestic ruminants. Map is shed in feces from infected animals. Transmission of the infection takes place by oral ingestion of the bacterium from contaminated food and water with feces. With the objective to establish a paratuberculosis diagnosis in ovine by nested-PCR from fecal samples, 204 fecal and serum ovine samples were studied. Feces were evaluated by nested-PCR and bacterial culture, serum samples were analyzed by agar gel immunodiffusion (AGID). Nested-PCR yielded a 210 bp amplification product that corresponds to Map-IS900, in 61 out of 204 samples. From these, 43 were from AGID positive animals and 18 from negative animals. Seventeen Map strains were isolated by bacterial culture and AGID detected 91 positive animals. Nested-PCR allowed to detect, sooner, greater number of animals shedding bacillus, even when they had resulted negative to the serological test. This result is considered important because generally these animals, while remaining in the farm, constitute the main source of infection for the herd. Nested-PCR should be considered as an alternative, when a prompt result is required to know the health status of the herd with respect to paratuberculosis.
La paratuberculosis es una enteritis granulomatosa de curso crónico ocasionada por Mycobacterium avium subespecie paratuberculosis (Map), afecta a rumiantes domésticos y silvestres. Map es excretada en las heces de animales que desarrollan la enfermedad, y la transmisión de la infección se da mediante la ingestión de alimentos y agua contaminados por heces de animales infectados. Con el objetivo de establecer el diagnóstico de paratuberculosis en ovinos por medio de la PCR-anidada a partir de muestras de heces, se trabajaron 204 muestras de heces y sueros de ovinos; las heces se evaluaron por PCR-anidada y cultivo bacteriológico, las muestras de sueros fueron analizadas por medio de inmunodifusión en agar gel (lDGA). Con la PCR-anidada se obtuvo un producto de amplificación 210 pb que corresponde a la IS900 de Map, en 61 de las 204 muestras. De éstas, 43 eran de animales positivos a IDGA y 18 negativos. Mediante cultivo bacteriológico se aislaron 17 cepas de Map; en este contexto, la IDGA detectó a 91 animales como positivos. La PCR-anidada permitió detectar en menor tiempo a mayor cantidad de animales que estaban eliminando al bacilo, aun cuando habían resultado negativos a la prueba serológica; este resultado se considera importante, ya que generalmente estos animales, al permanecer dentro de la granja, constituyen la principal fuente de infección para el rebaño. Se debe considerar a la PCR-anidada como alternativa, cuando se requiera el diagnóstico en breve tiempo, para conocer el estado sanitario del rebaño con respecto a paratuberculosis.
ABSTRACT
Se realizó un estudio bacteriológico en 9 muestras con examen de esputo positivo y 41 muestras con examen de esputo negativo, obtenidas de pacientes humanos con problemas respiratorios crónicos, con tos persistente y mala respuesta al tratamiento contra tuberculosis. Las muestras se sembraron por duplicado en los medios de cultivo de Lowenstein-Jensen y Stonebrink. Todas las 9 muestras con examen positivo a ZN fueron también positivas al aislamiento de micobacterias; de las 41 muestras negativas a ZN, 10 (24.0 por ciento) fueron también positivas al aislamiento. Trece de estos crecimientos se identificaron como M.tuberculosis, tres correspondieron a M.bovis y en tres se identificó un crecimiento mixto que correspondió a ambas micobacterias. El hecho de que 24.0 por ciento de las muestras negativas al examen de frotis de esputo resultaran positivas al cultivo remarca la importancia del diagnóstico por aislamiento de la micobacteria. Además del aislamiento, la tipificación bioquímica también es importante ya que esto decidirá el tratamiento apropiado debido a que M.bovis es naturalmente resistente a la pirazinamida