Experimental infection of calves with recombinants of bovine herpesvirus 5 defective in glycoprotein E (gE), thymidine kinase (TK) and both, gE/TK / Infecção experimental de bezerros com recombinantes do herpesvírus bovino tipo 5 defectivos na glicoproteína E (gE), timidina quinase (TK) e ambos, gE/TK

This article describes an investigation on the virulence/attenuation of bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5) recombinants deleted in the genes encoding glycoprotein E (BoHV-5gEΔ), thymidine kinase (BoHV-5TKΔ), and both gE and TK (BoHV-5gEΔTKΔ). Seronegative calves (80 to 90 days-old) inoculated with the parental strain (SV-507/99, n=5) shed virus in nasal secretions for up to 15 days (average 10.8 days). Duration of virus shedding was 11 days for BoHV-5gΔ, 9.6 days for BoHV-5TKΔ and 6.2 days for BoHV-5gEΔTKΔ groups. The highest titers were observed between days 1 and 6 post-infection (pi) for SV-507/99 (10(6.8)TCID50/mL), 10(5.1)TCID50/mL (BoHV-5gEΔ), 10(5.9)TCID50/mL (BoHV-5TKΔ) and 10(4.7)TCID50/mL (BoHV-5gEΔTKΔ). Calves inoculated with the parental virus presented anorexia, profound apathy and loss of body condition. Two calves were euthanized in extremis on days 10 and 11 pi; infectious virus was recovered from several areas of the brain. In contrast, calves inoculated with the recombinants remained healthy and a few presented a mild and transient nasal secretion. Dexamethasone (Dx) administration at day 42 pi resulted in virus shedding by all controls calves (mean duration 3.7 days), by 2/5 of BoHV-5TKΔ calves (two days) and 2/5 of BoHV-5gEΔ (one day). No virus shedding was detected in BoHV-5gEΔTKΔ calves upon Dx treatment. PCR examination of brain sections of calves euthanized at day 30 post Dx treatment revealed the presence of latent viral DNA widely distributed in the brain of SV-507/99 calves. Latent viral DNA was detected in a few sections (3/30) of the brains of BoHV-5gEΔ calves and was not detected in the brains of calves inoculated with BoHV-5TKΔ and BoHV-5gEΔTKΔ. These results show that the single BoHV-5 mutants (gE and tk-deleted) are attenuated for calves and establish and/or reactivate latent infection inefficiently. The double mutant BoHV-5gEΔTKΔ is fully attenuated and appears not to establish or not reactivate efficiently from latent infection. Thus, these recombinants, especially the double mutant BoHV-5gEΔTKΔ, display an adequate phenotype for use in modified-live vaccine formulations.

Este artigo descreve uma investigação da virulência/atenuação de recombinantes do herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5) com deleções nos genes da glicoproteína E (BoHV-5gEΔ), timidina quinase (BoHV-5TKΔ), e ambos gE e TK (BoHV-5gEΔTKΔ). Bezerros soronegativos (80-90 dias de idade) inoculados com o vírus parental SV-507/99 (n=5) excretaram o vírus em secreções nasais por até 15 dias (média de 10,8 dias). Nos animais inoculados com os recombinantes, a duração da excreção viral foi de 11 dias (BoHV-5gEΔ), 9,6 dias (BoHV-5TKΔ) e 6,2 dias (BoHV-5gEΔTKΔ). Os maiores títulos foram observados entre os dias 1 e 6 pós-inoculação (pi), sendo de 10(6,8)TCID50/mL para o SV-507/99, 10(5,1)TCID50/mL (BoHV-5gEΔ), 10(5,9)TCID50/mL (BoHV-5TKΔ) e 10(4,7)TCIΔ50/mL (BoHV-5gEΔTKΔ). Os bezerros inoculados com o vírus parental apresentaram anorexia e apatia; três deles mostraram apatia profunda e perda da condição corporal. Dois bezerros foram eutanasiados in extremis nos dias 10 e 11 pi, respectivamente e o vírus foi isolado de várias regiões do encéfalo. Já os bezerros inoculados com os recombinantes permaneceram saudáveis; alguns apresentaram uma secreção nasal serosa transitória. Administração de dexametasona (Dx) no dia 42 pi resultou em excreção viral por todos os bezerros inoculados com o vírus parental (duração média de 3,7 dias), por 2 de 5 bezerros dos grupos BoHV-5TKΔ (dois dias) e BoHV-5gEΔ (um dia). Os bezerros inoculados com o duplo mutante BoHV-5gEΔTKΔ não excretaram o vírus após o tratamento com Dx. Pesquisa de DNA viral por PCR no dia 30 pós-Dx revelou uma ampla distribuição do DNA do vírus parental no encéfalo; poucas seções (3/30) foram positivas no encéfalo dos animais do grupo BoHV-5gEΔ, e não detectou-se DNA latente no encéfalo dos animais dos grupos BoHV-5TKΔ e BoHV-5gEΔTKΔ. Esses resultados demonstram que os mutantes simples (gE and tk-deletados) são atenuados para bezerros e estabelecem e/ou reativam infecção latente ineficientemente. Já o duplo mutante BoHV-5gEΔTKΔ é atenuado e parece não estabelecer e/ou não reativar eficientemente a infecção latente. Portanto, os vírus recombinantes, e em especial o duplo mutante BoHV-5gEΔTKΔ apresentam um fenótipo compatível com a sua inclusão em vacinas vivas modificadas.

Histological and histochemical analysis of the gonadal development of males and females of Armases rubripes (Rathbun 1897) (Crustacea, Brachyura, Sesarmidae) / Análise histológica e histoquímica do desenvolvimento gonadal de machos e fêmeas de Armases rubripes (Rathbun, 1897) (Crustacea, Brachyura, Sesarmidae)

The objective of this study was to provide information on the histological characteristics of the gonads of male and female Armases rubripes crabs, and to try to establish a relationship between the microscopic and macroscopic stages previously identified. Thirty-six crabs were collected by hand between February 2003 and January 2004 in banks of Spartina alterniflora on Sahy Beach in Mangaratiba, Rio de Janeiro state, Brazil. The histological analysis of the ovaries of A. rubripes demonstrated a gradual process of development of the oocytes. According to their cellular characteristics, five types of cells were distinguished: oogonia, oocyte I, oocyte II, oocyte III and oocyte IV. The ovaries showed four stages during gonadal activity: stage I (rudimentary), stage II (developing or maturing), stage III (developed or mature) and stage IV (resting). The results of the histochemical analyses showed that the ovaries vary according to the gonad development stage. The histological aspect of one section of the male gonad was always the same in all of the seminiferous tubules, where the lumen of these tubules always contained spermatozoa and/or spermatids. It was not possible to characterize the three stages of gonad development in the males. This agrees with previous reports in the literature. However, in the females there was a relationship between the gonad stages distinguished macroscopically and the results obtained through the histological and histochemical analysis, due to the presence of different cell types, as well as the lysis process and reabsorption of the oocytes in spent females.

O objetivo deste estudo foi fornecer informações sobre as características histológicas das gônadas de machos e de fêmeas de Armases rubripes, tentando estabelecer uma relação entre os estágios microscópicos e os macroscópicos anteriormente identificados. Foram coletados manualmente 36 caranguejos, durante o período de fevereiro de 2003 a janeiro de 2004, em bancos de Spartina alterniflora na praia do Sahy Mangaratiba, Estado do Rio de Janeiro. A análise histológica dos ovários de A. rubripes demonstrou um processo gradual de desenvolvimento dos oócitos. De acordo com sua característica celular, cinco tipos de células foram distinguidos: ovogônias, oócito I, oócito II, oócito III, oócito IV. Os ovários revelaram quatro estágios de atividade gonadal: estágio I (rudimentar), estágio II (em desenvolvimento ou em maturação), estágio III (desenvolvido ou maduro), estágio IV (desovada). Os resultados das análises histoquímicas permitem afirmar que os ovários variam de acordo com o estágio de desenvolvimento gonadal. O aspecto histológico de uma sessão de gônada masculina é sempre o mesmo em todos os túbulos seminíferos, onde o lúmen deste túbulo sempre contém espermatozóides e/ou espermátides. Não foi possível a caracterização de três estágios de desenvolvimento gonadal em machos, conforme descrito previamente na literatura. Entretanto, em fêmeas, houve uma relação entre os estágios gonadais distinguidos macroscopicamente e os resultados obtidos através da análise histológica e histoquímica, devido à presença de diferentes tipos celulares, assim como processo de lise e reabsorção dos oócitos em fêmeas desovadas.

Immunocytochemical study of gastrintestinal endocrine cells in insectivorous bats (Mammalia: Chiroptera) / Estudo imunocitoquímico das células endócrinas gastrintestinais de morcegos insetívoros (Mammalia: Chiroptera)

The regional distribution and relative frequency of endocrine cells in the stomach and intestine of Phyllostomidae: Lonchorhina aurita and Molossidae: Molossus molossus bats were studied immunohistochemically. Three types of immunoreactive (IR) endocrine cells - to serotonin (5-HT), gastrin (GAS) and enteroglucagon (GLUC) - were found in the gastric mucosa and four types of IR cells were identified in the intestinal mucosa. This study showed an interespecfic difference in the regional distribution and relative frequency of endocrine cells in the Chiropteran alimentary tract.

A distribuição regional e a freqüência relativa das células endócrinas no estômago e intestino dos morcegos insetívoros Phyllostomidae: Lonchorhina aurita e Mormoopidae: Molossus molossus foram estudadas pelo método de imunohistoquímica. Três tipos de células endócrinas imunorreativas (IR) à serotonina (5-HT), gastrina (GAS) e enteroglucagon (GLUC) foram localizadas na mucosa gástrica e quatro tipos de células endócrinas IR à 5-HT, GAS, colecistoquinina (CCK) e GLUC foram identificadas na mucosa intestinal. Este estudo mostrou uma diferença interespecífica na distribuição regional e na freqüência relativa das células endócrinas no trato alimentar de Chiropteros.

The importance of excretion by Chironomus larvae on the internal loads of nitrogen and phosphorus in a small eutrophic urban reservoir / Excreção por quironomídeos em reservatório urbano

Measurements of ammonium and phosphate excretion by the Chironomus larvae were conducted in order to evaluate the importance of these chironomids for the internal loads of a small eutrophic urban reservoir. Ammonium and phosphate excretion rates by Chironomus larvae of small size (6-10 mm total length) were significantly higher than those of the Chironomids having medium (9-11 mm) and large (11-16 mm) sizes. A dependence in relation to temperature was recorded for the ammonium and phosphate excretions that was significantly higher at 25 °C than at 20 and 15 °C. Through a linear relation between biomass (dry weight) and total length and, between excretion and biomass and, data on chironomids densities, after an intense sampling in 33 sites distributed all along the reservoir bottom, the mean phosphate and ammonium excretion rates corresponded to 2,014 ± 5,134 µg.m-2/day and 1,643 ± 3,974 µg.m-2/day, respectively. Considering the mean biomass (34 mg.m-2) of Chironomus, the lake area (88,156 m²) and the mean excretion rates, the contribution of benthic chironomids to the internal loads would be 181 KgP and 147 KgN. for the sampling months (October-November 1998). These values showed that the internal loads by excretion from Chironomus larvae correspond to approximately 33 percent of the external loads of phosphorus in the lake and, in the case of nitrogen, to only 5 percent.

Medidas de excreção de amônia e fosfato por larvas de Chironomus foram executadas com a finalidade de avaliar a importância desses quironomídeos nas cargas internas de um pequeno reservatório urbano eutrófico. Taxas de excreção de amônia e fosfato significativamente mais elevadas foram encontradas nas larvas de Chironomus de pequeno (6-10 mm) tamanho, em relação às de tamanho médio (9-11 mm) e grande (11-16 mm). Uma dependência em relação à temperatura foi registrada para a excreção de amônia e fosfato, significativamente mais alta a 25 °C do que a 20 e 15 °C. Depois da obtenção das relações lineares entre biomassa (peso seco) e comprimento total e excreção com biomassa e dos dados de densidade de quironomídeos, após amostragem em 33 pontos distribuídos por todo o reservatório, foi possível estimar uma taxa média de excreção de fosfato de 2014 ± 5134 µg.m-2/dia e, de amônia em 1643 ± 3974 µg.m-2/dia. Considerando a biomassa média (34 mg.m-2) de quironomídeos, a área do lago (88.156 m²) e as taxas médias de excreção, a contribuição dos quironomídeos bênticos para as cargas internas seria de 181 KgP e 147 KgN, para o mês da amostragem (outubro-novembro de 1998). Esses valores mostraram que as cargas internas por excreção pelas larvas de Chironomus correspondem aproximadamente a 33 por cento das cargas externas de fósforo para o lago e, somente 5 por cento no caso de nitrogênio.

Association of Alport's syndrome with HDL-DR2 antigen in a group of unrelated patients

A few studies have evaluated HLA antigens in Alport's syndrome; however, there are no large population studies. In the present report, we studied 40 unrelated white patients with Alport's syndrome seen at the Unit of Renal Transplantation, Faculty of Medicine of Ribeirao Preto, Sao Paulo, Brazil. HLA-A, -B, -DR and -DQ antigens were typed using a complement-dependent microlymphocytotoxicity assay. A control white populations (N=403) from the same geographical area was also typed for HLA antigens. Although the frequencies of HLA-A and -B antigens of patients were not statistically different from controls, the frequency of HLA-DR2 antigen observed in patients (65 percent) was significantly increased in relation to controls (26 percent; P<0.001). The relative risk and etiologic fraction for HLA-DR2 antigen were 5.2 and 0.525, respectively. Although few immunological abnormalities have been shown in Alport's syndrome, in this report we emphasize the association of HLA molecules and Alport's syndrome. Besides the well-known inherited molecular defects encoded by tyope IV collagen genes in Alport's syndrome, the major histocompatibility alleles may be in linkage disequilibrium with these defective collagen genes.

Hemoglobinas anormais: perfil estatístico em doadores de sangue do Centro de Hematologia e Hemoterapia de Minas Gerais / Haemoglobinophaties in capable and uncapable blood samples donors from the Centro de Hematologia e Hemoterapia de Minas Gerais

As autoras apresentam um estudo sobre a frequência de hemoglobinopatias em amostras de sangue de doadores aptos e inaptos do Centro de Hematologia e Hemoterapia de Minas Gerais. Foram observados percentuais de 4,7 porcento e 6,7 para doadores aptos e inaptos em relaçäo à frequência de hemoglobinopatias. Devido aos possíveis prejuízos causados por transfusäo de sangue com hemoglobinopatias e levando em consideraçäo a significativa frequência desta alteraçäo, as autoras sugerem a intruduçäo dos principais métodos de diagnóstico nos serviços de Hemoterapia

A medida da tensao arterial na pratica medica de rotina. / The determination of blood pressure in routine medical practice

Em 11 sevicos medicos da cidade de Salvador (Bahia) foram levantados dados das fichas ou prontuarios dos 1.084 adultos atendidos em primeiras consultas entre zero e 24 horas do dia 20/07/82. Tal levantamento visou analisar as frequencias da medida da tensao arterial ( TA ) na pratica medica de rotina e dos tratamentos efetuados nos casos de hipertensao arterial detectados. A TA foi medicada em l8,7% dos pacientes, sendo que naqueles com idade >/ 35 anos a TA foi medida em 22%. Dos 203 pacientes com TA medida, 22,7% eram hipertensos e 80,4% destes tiveram prescrito ou iniciado o tratamento. Comentou-se a necessidade da melhoria da educacao e resposabilidade medicas, a necessidade da integracao clinico-epidemiologica, alem da participacao ativa da populacao para a detecao precoce da hipertensao arterial, no sentido de minimizar a morbi-mortalidade a ela consequente

Visualizacao arteriografica pre-operatoria dos arcos plantares. / Arteriographic preoperative visualization of plantar arch

Os autores apresentam tecnica arteriografica pre-operatoria que permite a avaliacao anatomica do leito arterial distal dos membros inferiores em 86% dos casos. Nos 14% restantes houve necessidade de complementacao arteriografica intra-operatoria, sendo que o exame pre-operatorio forneceu a indicacao do vaso a ser abordado em 100% dos casos. Sao exibidas imagens arteriograficas de variados padroes

Alteraciones en las poblaciones de linfocitos en pacientes con transplante renal. / Changes in lymphocyte populations in patients with renal transplantation

Se evaluaron las poblaciones de linfocitos en 13 pacientes con transplante renal (un ano o menos). Se demostro una disminucion en la poblacion de linfocitos T a traves de la roseta espontanea, RE: 47,33% +/- 7, 74 y roseta activa, RA: 32,6% +/- 8,69; en comparacion con los valores normales de RE 73,86% +/- 13,66% y RA: 40,83% +/- 6,90 respectivamente. Se obtuvieron valores incrementados de blastogenesis espontanea (19,45% +/- 11,20), con respecto a los valores normales de 12,5% +/- 5,5, lo que no se correlaciono con la aparicion de rechazo clinico como ha sido reportado por algunos investigadores. Los datos sugieren que la depresion de la inmunocompetencia celular no especifica del paciente transplantado, puede ser un factor importante en el no rechazo del transplante. Por lo que el estudio de la receptividad inmunologica puede ser de gran utilidad en la individualizacion del manejo terapeutico en el pos-transplante