Diferenciação de sorotipos de Actinobacillus pleuropneumoniae pela combinação de dois PCR multiplex / Differentiation of Actinobacillus pleuropneumoniae serotypes by the combination of two multiplex PCR

A pleuropneumonia suína é uma importante doença respiratória que ocasiona grandes perdas econômicas na suinocultura. O Actinobacillus pleuropneumoniae (APP) é o agente etiológico desta enfermidade que é classificado em 15 sorotipos. Estes secretam diferentes combinações das exotoxinas ApxI, ApxII, Apx III e ApxIV, que têm sido utilizadas na diferenciação dos sorotipos pela PCR multiplex (mPCR). A técnica descrita não permite a diferenciação dos sorotipos 2, 8 e 15 (apresentam mesmo padrão de amplificação) como também os sorotipos 12 e 13. Visando a melhorar a capacidade discriminatória desse procedimento, o presente trabalho descreve a combinação de um segundo mPCR baseado na amplificação de genes dos antígenos capsulares. O ensaio conjugado foi testado com cepas de referência pertencentes aos 15 sorotipos e também de 10 isolados de campo. A técnica proposta auxiliou na diferenciação dos 15 sorotipos testados (cepas de referência), como também proporcionou a identificação dos isolados de campo provenientes de casos clínicos, demonstrando que a técnica molecular é uma forma rápida e eficiente na identificação desse importante patógeno que afeta a criação de suínos, mesmo levando em consideração as limitações da técnica.

The swine pleuropneumonia is a major respiratory disease that causes great economic losses in pig farming. The Actinobacillus pleuropneumoniae (APP) is the etiologic agent of this disease and are classified into 15 serotypes. These secrete different combinations of exotoxins ApxI, ApxII, APX and ApxIV III have been used in the differentiation of serotypes by multiplex PCR (mPCR). The reported technique does not allow the differentiation of serotypes 2, 8 and 15 (exhibit same pattern of amplification) as well as serotypes 12 and 13. In order to improve the discriminatory capacity of this procedure, this paper describes the combination of a second mPCR based on amplification of genes of capsular antigens. The combined test was tested with reference strains belonging to 15 serotypes and also 10 field isolates. The proposed technique was capable of differentiating all 15 serotypes tested (reference strains), and was able to identify field isolates from clinical cases, demonstrating that the molecular technique is a quick and efficient identification of this important pathogen that affects the swine production. The proposed technique assisted in differentiating the 15 serotypes tested (reference strains), but also provided identification of field isolates from clinical cases, demonstrating that the molecular technique is a quick and efficient identification of this important pathogen that affects pig farming, even taking into account the limitations of the technique.

Quantificaçäo e distribuiçäo de células argirófilas e argentafins no estômago de suínos com e sem úlcera gástrica / Quantification and distribution of argirophils and argentafins cells in swine stomach with and without gastric ulcer

Com a finalidade de se conhecer a distribuiçäo e o número das células endócrinas do estômago de suínos com e sem úlcera gástrica da pars oesophagea procedeu-se ao presente trabalho. Os estômagos de 32 suínos adultos, com mucosa gástrica macroscopicamente normal e de outros 32 com úlcera gástrica da pars oesophagea, foram colhidos após o abate. Fragmentos de regiöes padronizadas da mucosa antral (n=2), mucosa oxíntica (n=2) e cárdica (n=2) foram fixados em Bouin e incluídos em parafina. Células argirófilas e argentafins foram demonstradas pelos métodos de Grimelius e Masson-Fontana, respectivamente, quantificadas e analisadas quanto à distribuiçäo nos diferentes tipos de mucosa. Nos animais estudados as células argirófilas foram mais frequentes na mucosa oxíntica, em relaçäo às mucosas antral e cárdica. Por sua vez, as células argentafins foram mais frequentes na mucosa antral do que na mucosa oxíntica (P<0,05). Näo ocorreram diferenças quanto a distribuiçäo e quanto ao número de células argirófilas e argentafins entre os dois grupos de animais estudados, com e sem úlcera gástrica.

Gastrite em suínos: freqüência, relaçäo com a úlcera gástrica e com a densidade de células endócrinas do estômago / Swine gastritis: frequency, relationship with gastric ulcer and with the density of stomach endocrine cells

Este trabalho teve como objetivos conhecer a freqüência de gastrite em suínos, bem como verificar a eventual relaçäo entre essa patologia e úlcera gástrica e a influência da gastrite sobre a gastrinemia e sobre a densidade de células endócrinas da mucosa gástrica. Para tal foram utilizados 64 suínos adultos, divididos em dois grupos: com e sem úlcera gástrica. A dosagem de gastrina foi realizada através de radioimunoensaio, enquanto a identificaçäo das células endócrinas se fez por meio de técnicas histoquímicas (Grimelius e Masson-Fontana modificada) e imunocitoquímica (PAP). Os resultados demonstraram que o processo inflamatório gástrico é mais freqüente na mucosa cárdica, seguida da antral e finalmente na mucosa oxíntica. Verificou-se também que a presença de gastrite näo alterou a densidade de células endócrinas e a gastrinemia em suínos. Foi ainda observada a inexistência de associaçäo entre gastrite e úlcera gástrica.

Freqüência de aglutininas anti-leptospiras em soros sangüíneos de suínos das microrregiöes de Viçosa e Ponte Nova - MG / Frequency of leptospiral agglutinins in swine blood sera at the microregions of Viçosa and Ponte Nova, State of Minas Gerais

Soros sangüíneos de 610 matrizes suínas provenientes de 63 granjas tecnificadas das microrregiöes de Viçosa e Ponte Nova - Minas Gerais foram analisadas por meio de teste de microaglutinaçäo rápida (MAR), empregando-se uma bateria de antígenos vivos composta de 16 diferentes sorotipos de leptospirose cultivadas em meio de Stuart. Verificou-se uma freqüência de 7,70% de soros reagentes nas microrregiöes estudadas, sendo que na de Viçosa a freqüência foi de 0,53% e na de Ponte Nova 10,95%. Os soros reagentes mostraram títulos que variaram de 1:100 a 1:12.800. O sorotipo pomona foi o mais freqüente nas microrregiöes estudadas. A freqüência de granjas com animais reagentes foi de 15,87% sendo que na microrregiäo de Viçosa foi de 4,00% na de Ponte Nova, 23,68%

Estudo comparativo de esquemas de vacinaçäo pré-exposiçäo contra raiva humana: importância do intervalo entre as doses e do controle laboratorial / Comparative study of schemes of pre-exposure vaccination against human rabies: importance of the interval between doses and laboratory control

Os serviços de saúde pública de diversos países, inclusive o Brasil, utilizam vacina produzida em cérebro de camundongo neonato na profilaxia da raiva e adotam um esquema de 3 doses aplicadas em dias alternados na vacinaçäo pré-exposiçäo. Três esquemas de vacinaçäo pré-exposiçäo contra raiva foram testados, observando os diferentes intervalos entre as doses; o grupo A recebeu vacina em dias alternados, o grupo B de 7/7 dias e o grupo C de l5/l5 dias. Os resultados evidenciam que em relaçäo aos percentuais de títulos acima de 5 os grupos näo se distinguem (P > = 0,01). Quanto ao percentual de pessoas com títulos acima de 0,5 UI os grupos B e C säo superiores ao A (P > = 0,01). O estudo das médias aritméticas mostra que o esquema C é superior aos demais nos dias 050 (P > = 0,005) e 156 (P > = 0,001) após o início da vacinaçäo. A fim de aumentar a segurança da vacinaçäo pré-exposiçäo, devem-se adotar esquemas com maior intervalo entre as doses e controlar laboratorialmente a resposta imunológica, evitando os riscos advindos de possíveis exposiçöes de pessoas que se julgarem pré-imunizadas. Isso evitaria, ainda, a aplicaçäo de tratamentos pós-exposiçäo completo às pessoas pré-vacinadas, quando expostas ao risco da raiva, reduzindo assim o risco de acidente pós-vacinal