Research of Salmonella spp. and evaluation of pathogenicity, cytotoxicity of Escherichia coli isolates proceeding from sparrows (Passer domesticus) / Pesquisa de Salmonella spp. e avaliação da patogenicidade, citotoxidade de isolados de Escherichia coli procedentes de pardais (Passer domesticus)

The aim of this study was to research the occurrence of Salmonella spp. and Escherichia coli in feces samples of sparrows, as well as to identify the pathogenicity, cytotoxicity and sensitivity profile of the isolates to antimicrobial use. Two hundred and twenty eight sparrows were captured in eight farms. The in vitro pathogenicity test was performed by the isolates culture on congo red-magnesium oxalate Agar, whilst the in vivo pathogenicity test was performed in one day-old chicks. In order to study the cytotoxic effects of indicators, samples were inoculated into Vero cells. The results obtained for Escherichia coli isolation confirmed the presence of this microorganism in 30 (13.2%) of the evaluated samples. Out of those isolates, 10 (33.3%) presented the capacity of absorbing ongo red. As for in vivo pathogenicity a 68.0% of mortality rate of the evaluated samples was observed. Out of 20 isolates tested for cytotoxin production, none of them presented cytotoxic effect in the Vero cells. The Salmonella spp was isolated only in one sample (0.04%), and it was identified as Salmonella enterica subspecies houtenae. Results obtained through this research indicate the need for new studies to identify other virulence factors of E. coli samples and to delineate the phylogenetic profile of the isolates in order to establish a relation with colibacillosis outbreaks in chickens and broilers in the studied region, as well as to analyze the critical points in the aviculture productive chain to identify the source of Salmonella enterica subspecies houtenae.

Objetivou-se com este estudo pesquisar a ocorrência de Salmonella spp. e Escherichia coli em amostras de fezes de pardais, além de avaliar a patogenicidade, citotoxicidade e perfil de sensibilidade dos isolados frente a antimicrobianos. Foram capturados 228 pardais em oito granjas. O teste de patogenicidade in vitro foi realizado por meio do cultivo dos isolados em ágar oxalato de magnésio acrescido de vermelho de congo, enquanto o teste de patogenicidade in vivo foi realizado em pintos de um dia. Para o estudo dos indicadores dos efeitos citotóxicos, as amostras foram inoculadas em células Vero. Os resultados obtidos quanto ao isolamento de Escherichia coli confirmaram a presença deste microorganismo em 30 (13,2%) amostras analisadas. Destes isolados, dez (33,3%) apresentaram capacidade de absorção do vermelho congo. Quanto à patogenicidade in vivo observou-se uma taxa de mortalidade de 68,0% das amostras analisadas. Dos 20 isolados testados quanto à produção de citotoxina, nenhum apresentou efeito citotóxico nas células Vero. Obteve-se o isolamento de Salmonella spp. em apenas uma amostra (0,04%), sendo tipificada em Salmonella enterica subespécie houtenae. Os resultados obtidos nesta pesquisa indicam a necessidade da realização de novos estudos para identificar outros fatores de virulência das amostras de E. coli e traçar o perfil filogenético dos isolados para estabelecer uma relação com surtos de colibacilose em galinhas e frango de corte na região estudada, além de analisar os pontos críticos na cadeia produtiva da avicultura para identificar a origem da Salmonella enterica subespécie houtenae.

Perfil de resistência a antimicrobianos de Staphylococcus spp. isolados de frangos de corte e poedeiras comerciais no estado de Pernambuco / Resistance of Staphylococcus spp., to antimicrobials isolated from broilers and commercial layers in the state of Pernambuco, Brazil

Este estudo foi realizado com o objetivo de pesquisar Staphylococcus spp. de frangos de corte sadios e frangos de corte e poedeiras comerciais que apresentassem sinais clínicos respiratórios. Foram colhidos swabs dos seios infra-orbitários de 55 frangos de corte sadios, 35 com sinais respiratórios, e 30 poedeiras comerciais também com sinais respiratórios. Cada amostra foi composta por um "pool" de cinco aves, totalizando 24 amostras coletadas de 24 granjas comerciais. Para o isolamento foi utilizado o exame bacteriológico, com posterior avaliação das características morfológicas, tintoriais e bioquímica para determinação da espécie. Verificou-se a produção de hemólise, formação de biofilme em ágar Vermelho Congo (ACR), detecção do gene mecA pela PCR e avaliação da suscetibilidade a 13 drogas antimicrobianas. Das 24 amostras processadas, foram isolados 16 Staphylococcus, cinco isolados foram coagulase-positiva (SCP) e 11 coagulase-negativa (SCN), e nos testes de hemólise e formação de biofilme, três isolados apresentaram-se hemolíticos e seis foram positivos, respectivamente. Na avaliação por meio da PCR, para detecção do gene mecA todos os isolados apresentaram resultados negativo. Observaram-se que 15 isolados foram resistentes a cinco ou mais antibióticos, e que as drogas associadas apresentaram melhor perfil de sensibilidade. A resistência a antimicrobianos e cepas produtoras de biofilme podem interferir na resposta terapêutica de aves que apresentam sinais clínicos.

This study had the objective of researching Staphylococcus spp. on healthy broilers and commercial broilers and layers, with clinical respiratory signs. Swabs were taken from the infraorbital sinus of 55 healthy broilers, 35 with respiratory signs and 30 commercial layers also with respiratory signs. Each sample was composed of a pool of five birds, totaling 24 collected samples from 24 commercial flocks. The bacteriological exam was used for the isolation, with a later evaluation of the morphological, tintorial and biochemical characteristics to determine the species. The production of hemolysis, formation of a biofilm in Congo Red Agar, detection of the gene mecA by the PCR and susceptibility to 13 antimicrobial drugs, was verified. From the 24 processed samples, 16 Staphylococcus spp. were obtained isolates, five samples were coagulasis-positive (SCP) and 11 coagulasis-negative (SCN). As to hemolysis and the formation of biofilm tests three samples presented themselves to be hemolytic and six were positive, respectively. In the PCR evaluation for the detection of the mecA gene, all isolates showed negative results. It was observed that 15 E coli isolates were resistant to five or more antibiotics, and that the associated drugs presented better sensibility. The resistance to antimicrobials and biofilm productive strains can interfere in the therapeutic response of birds that present clinical signs.

Risk factors associated with buffalo mastitis in the Brazilian Northeast / Fatores de risco associados à mastite bubalina no Nordeste brasileiro

Risk factors for subclinical mastitis were studied in 474 buffaloes cows proceeding from four dairy farms located in the states of Pernambuco, Alagoas, Bahia and Ceará, Brazil. Milk samples (n=1896) of lactating buffaloes cows were examined for somatic cells count (SCC) and microbiologic exam, and a questionnaire composed by objective questions was applied in order to obtain animals and herd management data. Risk factors analysis was performed in two stages: univariate and mutivariate analysis. Two analysis were performed, one considering the animal classification for SCC as the dependent variable (<400,000 - negative; >400,000 - positive) and another, considering the microbiologic exam result (positive and negative). In the multivariate analysis considering SCC as dependent variable, the lack of teat washing was the only variable identified as a risk factor, so that farms without this procedure before the milking presented risk of infection of 2.68 (I.C. 1.49-4.83). In the multivariate analysis considering the microbiologic exam as dependent variable, it was observed that properties that performed the cleaning of the milking equipment manually presented risk of 1.85 (I.CI. 1.32-3.64), which was higher than those properties that performed the cleaning mechanically (p=0.019). Risk factors for the occurrence of subclinical mastitis in dairy buffaloes in Brazilian Northeast farms were related to the characteristics of improper milking management. Risk factors identified in this study must be carefully corrected in order to reduce the frequency of mastitis cases, and therefore, contribute for disease control and prevention in the herds.

Foram estudados os fatores de risco para mastite subclínica em 474 búfalas procedentes de quatro propriedades de exploração leiteira situadas nos Estados de Pernambuco, Alagoas, Bahia e Ceará. Amostras de leite (n=1896) de búfalas em lactação foram examinadas para contagem de células somáticas (CCS) e exame microbiológico, e um questionário constituído de perguntas objetivas foi aplicado para obtenção de dados dos animais e do manejo do rebanho. A análise dos fatores de risco foi efetuada em duas eta-pas: análise univariada e multivariada. Foram realizadas duas análises, uma considerando a classificação dos animais quanto à CCS como variável dependente (<400.000 - negativo; > 400.000 - positivo) e outra considerando o resultado do exame microbiológico (positivo e negativo). Na análise multivariada considerando-se a CCS como variável dependente a única variável identificada como fator de risco foi não lavar os tetos antes da ordenha, onde aquelas propriedades que não lavavam os tetos antes da ordenha apresentaram o risco de infecção de 2,68 (I.C. 1,49-4,83). Na análise multivariada considerando o microbiológico como variável dependente constatou-se que aquelas propriedades que realizavam limpeza manual do equipamento de ordenha apresentavam um risco 1,85 (I.C. 1,32-3,64) maior do que aquelas propriedades que realizavam esta limpeza de forma mecânica (p=0,019). Os fatores de risco para ocorrência de mastite subclínica em báfalas leiteiras em propriedades na região nordeste do Brasil foram relacionados às características de manejo inadequado da ordenha. Os fatores de risco identificados nesse estudo devem ser cuidadosamente corrigidos para reduzir a frequência de casos de mastite e assim contribuir para o controle e prevenção da doença nos rebanhos.

Sparrows (Passer domesticus L) as intermediary hosts of Toxoplasma gondii in poultry farms from the agreste region of Pernambuco, Brazil / Pardais (Passer domesticus L) como hospedeiro intermediário do Toxoplasma gondii em granjas avícolas no agreste de Pernambuco

This paper aimed to identify Toxoplasma gondii infection in house sparrows (Passer domesticus, Linneaus 1758) coming from poultry farms in the "agreste" region of the Brazilian state of Pernambuco. 151 sparrows (Passer domesticus) captured in eight broiler, egg layer and commercial laying poultry farms, were used. Indirect hemagglutination test was used to research anti-T. gondii antibodies. Animals that presented titration of 1:16 were destined to DNA research through Polymerase Chain Reaction (PCR) technique, followed by Nested-PCR. It was observed that, from 151 analyzed samples. 91 (60.3 percent) were reagents and 60 (39.7 percent) were not reagents. It was verified, through analysis of the distribution of infected animals frequency per farm, that in only one farm (12.5 percent) no animal reagent to T. gondii was captured. It was also observed that three (30.00 percent) of the ten samples destined to DNA research for T. gondii were positive to PCR and four (40.00 percent) were positive to Nested-PCR. Anti-T gondii antibodies occurrence and the molecular identification of the agent confirmed natural T. gondii infection in sparrows from poultry farms in Brazil. Other studies must be carried out to highlight the real importance of these animals in the epidemiological chain and their efficiency in the transmission of the parasite to felines. Therefore, researches that use parasite isolation and molecular techniques to determine genomic profile of the agent present in these poultry farms are needed.

Objetivou-se com este trabalho identificar a infecção por Toxoplasma gondii em pardais domésticos (Passer domesticus, Linneaus 1758) procedentes de granjas avícolas no agreste do estado de Pernambuco. Foram utilizados 151 pardais (Passer domesticus) capturados em oito granjas de frango de corte, matrizes e poedeiras comerciais. Para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondi utilizou-se o teste de hemaglutinação indireta, aqueles animais que apresentaram titulação 1:16 foram encaminhados para pesquisa do DNA por meio da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) seguida do Nested-PCR. Das 151 amostras analisadas observou-se que 91 (60,3 por cento) foram reagentes e 60 (39,7 por cento) não reagentes. Na análise da distribuição de freqüência dos animais infectados por granja constatou-se que em apenas uma (12,5 por cento) não foi capturado animal reagente para T. gondii. Das dez amostras que foram encaminhadas para pesquisa do DNA do T. gondii, observou-se que três (30,00 por cento) foram positivas ao PCR e quatro (40,00 por cento) ao Nested-PCR. A ocorrência de anticorpos anti-T. gondii e a identificação molecular do agente confirmam a infecção natural por T. gondii em pardais em granjas avícolas no Brasil. Outros estudos devem ser conduzidos para elucidar a real importância destes animais na cadeia epidemiológica e sua eficiência da transmissão do parasito para felinos. Para tal serão necessárias pesquisas que utilizem técnicas de isolamento do parasito e molecular para determinar o perfil genômico do agente presente nestas granjas.