Can centrifugation force compromise the plasmatic membrane, acrosome and DNA integrity of goat spermatozoa? / A força de centrifugação pode comprometer a integridade de membrana plasmática, acrossomal e DNA de espermatozoides caprinos?

Protocols for cooling or freezing goat semen usually recommend centrifugation for seminal plasma removal. However, little is known about the effect of this process on goat sperm viability and functionality. The present study evaluated the effects of centrifugation force on the plasma membrane, acrosomes, and DNA integrity of goat semen. Four ejaculates from each of the four different Anglo Nubian male goats were used. Semen samples were obtained using artificial vagina, and immediately after collection, ejaculates were diluted using Ringer's sodium lactate solution and split into three groups: Control (CG, without centrifugation), G1 (centrifugation 600 x g/10 min), G2 (centrifugation 1200 x g/10 min). After centrifugation, seminal plasma was removed, the sperm pellets were resuspended using Tris-egg yolk extender (80 x 106 spermatozoa/mL) and the sperm morphology was analyzed. Samples were cooled at 5°C for 5, 24, 36, and 48 h and then sperm plasma membrane and acrosome integrity (PMAI, %) and sperm DNA fragmentation index (SDF, %) were evaluated at each time-point, using a flow cytometer. Additionally, sperm movement was determined using computer semen analysis (CASA) after 5, 24, and 48 h of refrigeration period. The semen centrifugation did not induce additional sperm morphology defect or reduction in sperm kinetics in the experimental groups. Differences were not observed (p > 0.05) in PMAI and SDF among different groups, in any of each time-point of the cooling process. In conclusion, centrifugation, even at high speeds, did not affect goat sperm integrity and functionality when submitted to refrigeration process. (AU)

A maior parte dos protocolos de refrigeração e criopreservação do sêmen caprino recomenda o uso de centrifugação para remoção do plasma seminal. No entanto, não existe consenso sobre o risco que esse tipo de processamento pode ocasionar à viabilidade espermática. Nesse contexto, o presente trabalho investigou os possíveis efeitos deletérios da centrifugação sobre a integridade estrutural e DNA de espermatozoides caprinos. Para a pesquisa foram selecionados quatro reprodutores para colheita de sêmen (n = 4 ejaculados/bode). Cada ejaculado foi fracionado em três alíquotas iguais, diluídas em ringer e divididas em três grupos: Controle (GC, não centrifugado), G1 (centrifugação a 600 g/10 minutos) e G2 (centrifugação a 1200 g/10 minutos). As amostras seminais por grupo foram diluídas em meio Tris gema respeitando-se a concentração final de 80 milhões de espermatozoides/mL e foram submetidas à avaliação de morfologia espermática. Todas as amostras foram acondicionadas a 5°C, sendo analisadas nos momentos 5, 24, 36 e 48 horas do processo de refrigeração por meio da avaliação da integridade de membrana plasmática e acrossomal (MPAI, %) e índice de fragmentação de DNA (IDF, %). Adicionalmente, a cinética espermática foi avaliada com o emprego de um sistema computadorizado de análise (CASA) nos momentos 5, 24 e 48 horas da refrigeração. A centrifugação não induziu a manifestação de defeitos morfológicos ou redução significativa da cinética de espermatozoides caprinos. Não foram observadas diferenças para a integridade de membrana plasmática e para o índice de fragmentação de DNA quando comparados, respectivamente, GC, G1 e G2 em cada um dos quatro momentos experimentais. Conclui-se que mesmo quando empregadas altas forças de rotação não ocorre lesão à ultraestrutura dos espermatozoides caprinos submetidos ao processo de refrigeração.(AU)

Morphometric changes in the hoof capsule of Criollo foals from birth to weaning / Alterações morfológicas na capsula do casco em potros Crioulos do nascimento ao desmame

ABSTRACT: South America has numerous Criollo horse breeding farms; however, information on foal hoof growth is still limited and identifying the ideal periods to apply corrective trimming is a frequent concern for horse owners. In the present study, a morphometric analysis of hoof growth was performed on 46 Criollo foals from birth to weaning (0-8 months). Results showed that hoof growth rate was higher in the first four months followed by a decrease until the eighth month. Average growth rate of the hoof was 0.21cm per month, whereas that of the heel was 0.14cm per month. However, no significant differences were observed between medial and lateral heel length or between limbs. Coronary band perimeter and solar width showed an average increase of 0.97cm and 0.46cm per month, respectively, and were significantly correlated (r=0.99, P≤0.01). The characteristic most positively correlated to biometric variables was foal age, followed by solar width, toe length, and coronary band perimeter. In conclusion, hoof length increase in Criollo foals was more intensive during the first four months of life.

RESUMO: A América do Sul possui um grande número de criatórios da raça Crioula, no entanto, há uma carência de informações sobre o desenvolvimento natural dos cascos dos potros, tornando a identificação de períodos ideais para o casqueamento corretivo uma dúvida frequente entre os criadores. Portanto, o objetivo deste estudo foi realizar a biometria natural (do nascimento aos 8 meses) no casco de 46 potros da raça Crioula. Os resultados indicaram uma taxa de crescimento mais rápido nos primeiros 4 meses, com subsequente desaceleração até o desmame. O crescimento médio do casco foi em média 0,21cm mo-1, enquanto o comprimento do talão foi de 0,14cm mo-1. Não foram observadas diferenças significativas no equilíbrio médio/lateral do casco ou entre os membros durante o período experimental. O perímetro da banda coronária e a largura solar do casco apresentaram um crescimento médio de 0,97 e 0,46cm mo-1, respectivamente, e foram altamente correlacionados (r=0,99, P≤0,01). A idade dos potros foi a característica mais correlacionada positivamente, seguida da largura solar, do comprimento do casco e do perímetro da banda coronária. Nós concluímos que o crescimento do casco em potros da raça Crioula foi mais intenso durante os quatro primeiros meses de vida.