Histologic and histomorphometric study of bone repair under acute Trypanosoma cruzi infection in rats

Trypanosoma cruzi (T. cruzi) is an intracellular protozoan pathogen that causes American trypanosomiasis (Chagas disease). The aim of this study was to evaluate the histopathological effects of acute infection by T. cruzi on bone repair. Wistar rats were used throughout. The animals were assigned to two groups: Control Group (CG n =20) and Experimental Group (EG n =20). All the animals were anesthetized, at t0 the first lower right molar was extracted. The EG animals were inoculated subcutaneously at t0 with 0.1 mL of 105 trypomastigotes of the virulent strain Tulahuen of T. cruzi. The CG animals were administered an equivalent volume of saline solution subcutaneously. The animals in both groups were euthanized at 15 days post-infection and tooth extraction. The mandibles were resected, fixed in formalin solution, radiographed, decalcified and embedded in paraffin. Bucco-lingually oriented sections were obtained at the level of the mesial tooth socket of the first lower molar, and stained with hematoxylin-eosin. Total alveolar volume (TV) and bone volume (TBV/TV) in the apical third of the tooth socket were evaluated histomorphometrically. The histological analysis revealed an alteration in post-extraction bone tissue repair in animals infected by T. cruzi. A reduction in osteogenic activity was observed concomitant with a rise in quiescent and eroded bone surfaces. Histomorphometric evaluation revealed a significant reduction (19%) in total alveolar volume (TV) and bone volume (TBV/TV) (24%) in the apical third of the tooth socket in animals infected with T. cruzi in comparison to non-infected animals (p<0.05). The results obtained using this experimental model showed decreased osteogenesis in bone tissue repair under acute Trypanosoma cruzi infection in rats.

El Trypanosoma cruzi (T. cruzi) es un protozoario intracelular que causa Trypanosomoniasis Americana (Enfermedad de Chagas). El objetivo del presente trabajo fue el estudio histopatologico del efecto de la infeccion aguda por Trypanosoma cruzi sobre la reparacion del tejido oseo. Se utilizaron ratas Wistar macho que fueron asignadas a dos grupos: Grupo Control (GC n =20) y Grupo Experimental (GE n =20). Los animales de ambos grupos, bajo anestesia general intraperitoneal, fueron sometidos a t0, a exodoncia del primer molar inferior derecho, en el GE fueron inoculados,a t0 por via subcutanea en la region inguinal izquierda con 0.1 mL de 105 tripomastigotes de la cepa virulenta Tulahuen de Trypanosoma cruzi. A los animales del GC se les administro el volumen equivalente de solucion salina por via subcutanea. A los animales de ambos grupos se les practico la eutanasia a los 15 dias. Se resecaron las mandibulas, se fijaron en solucion de formol al 10%, se radiografiaron, se descalcificaron y se incluyeron en parafina. Se obtuvieron cortes orientados en sentido vestibulo-lingual a nivel del alveolo mesial del primer molar inferior derecho y se colorearon con hematoxilina-eosina para su posterior estudio histologico e histomorfometrico. Histologicamente se observo una menor actividad osteogenica a expensas de un incremento de las superficies quiescentes y de las superficies erosivas en el GE. En la evaluacion histomorfometrica se detecto disminucion estadiasticamente significativa del volumen oseo total (19%) y del volumen trabecular en el tercio apical del alveolo (24%) en el GE con respecto al GC (p<0.05). Los resultados obtenidos en este modelo experimental evidencian una disminucion de la osteogenesis en la reparacion osea en ratas con infeccion aguda por Trypanosoma cruzi.

La transmision de la enfermedad de Chagas en Salta y la deteccion de casos congenitos / The transmission de Chagas disease in Salta and the detection of congenital cases

Se presenta una revisión y actualización de datos sobre las tasas de seroprevalencia para el Trypanosoma cruzi en la Provincia de Salta en las tres últimas décadas, con especial referencia a la detección de casos congénitos y a los beneficios económicos de prevenir la enfermedad de Chagas. Los datos seroepidemiológicos obtenidos en conscriptos de 20 años de edad revelaron una disminución de la seroprevalencia, del 22.7 al 11.1 por ciento entre 1965 y 1985. En estudiantes universitarios, las cifras actuales son más bajas (0.96 por ciento). Las encuestas realizadas en 1996 revelaron seropositividad en más de 15 por ciento de las embarazadas analizadas, sobre todo en la zona Norte de la provincia. Esta situación trae aparejado un alto riesgo de aparición de casos congénitos de infección y, a la vez, una oportunidad para el ensayo de estrategias más adecuadas para su detección. Mediante la aplicación sistemática de Microstrout, Hemocultivo y PCR, se está logrando aumentar la detección temprana de niños con infección congénita. En aborígenes del Chaco salteño encontramos en 1992-94 tasas globales de seroprevalencia del 37 por ciento, con 5 localidades de altísima transmisión, en las que se observó más de un 54 por ciento de infectados. Estas cifras indican que, en vastas zonas del territorio provincial, la lucha contra la vinchuca no sólo debe reducirse a acciones de vigilancia, sino de renovado ataque y nuevas inversiones en rociado, control de bancos de sangre y control de embarazadas para prevenir la transmisión congénita. Un análisis realizado del rédito económico de las operaciones de rociado, sólo para el Departamento de Anta, arroja un valor actual neto que supera los 7 millones de dólares, con tasas internas de retorno de más de 60 por ciento.

Aporte de las técnicas de biología molecular al diagnóstico de la enfermedad de Chagas / Contribution of the molecular biology technics at Chaga's disease

El diagnóstico parasitológico en la Enfermedad de Chagas se ve dificultado por la escasez de parásitos en el material diagnóstico y por los inconvenientes que surgen al emplear las técnicas serológicas para descubrir casos agudos, casos de enfermedad congénita o bolsas de transfusión contaminadas. La Reacción en Cadena de Polimerasas (PCR) ha superado la sensibilidad de las técnicas convencionales de diagnóstico parasitológico porque no sólo es capaz de detectar indirectamente a los parásitos como unidad, sino también a segmentos específicos de ADN que están representados centenares de veces en cada parásito. Presentamos aquí las experiencias que hemos podido realizar hasta ahora para detectar al Trypanosoma cruzi en bolsas de transfusión y en sangre de neonatos de madres chagásicas. En 52 bolsas de transfusión analizadas por 2 métodos serológicos y por PCR encontramos que esta técnica (como así también el hemocultivo y el xerodiagnóstico) tiene poca concordancia (52 por ciento) con la serología. La técnica PCR confirmó 12 de 14 muestras seronegativas (85,7 por ciento es especificidad), pero sólo 15 de 38 seropositivas (39,5 por ciento), lo que indicaría que las pruebas serológicas no señalan, necesariamente, aquellas bolsas que contienen parásitos. La detección precoz del Trypanosoma cruzi en la sangre del recién nacido de madre chagásica es esencial para diagnosticar y tratar la Enfermedad de Chagas congénita, pero con frecuencia los métodos empleados fallan por falta de sensibilidad. Hemos aplicado la técnica PCR y el hemocultivo en forma sistemática a 34 hijos de madres chagásicas, detectando hasta ahora 2 casos congénitos que no habían sido diagnosticados por el método usual de microstrout. El alto costo del método PCR lo hace muy poco recomendable para el tamizaje de los bancos de sangre. Sin embargo, para el diagnóstico de Chagas congénito, esta técnica sería económicamente rentable si se usa como complemento de otros métodos en los centros de diagnóstico perinatal de las zonas endémicas.