Effect of Low-Level Laser Therapy (660 nm) on Angiogenesis in Wound Healing: A Immunohistochemical Study in a Rodent Model

The aim of the present investigation was to evaluate the angiogenesis on dorsal cutaneous wounds in a rodent model treated with λ660 nm laser light. New vessel formation is a multistep process involving vessel sprouting, endothelial cell migration, proliferation and tube formation. Although several in vivo studies have shown that laser phototherapy influences tissue repair, a fully understanding of angiogenesis mechanisms are not yet known. Twenty-four young adult male Wistar rats weighing between 200 and 250 g were used. Under general anesthesia, one excisional wound was created on the dorsum of each animal and they were randomly distributed into two groups: one control and one treated with laser (λ660 nm, 16 mW, 10 J/cm2). Each group was subdivided into three subgroups according to the animal death timing (2, 4 and 6 days). Laser irradiation started immediately after surgery and was repeated every other day during the experiment and marked with Sirius Red, specific for collagen, and immunomarked with anti-TGF-β and anti-von Willebrand factor. Marked sections underwent histological analysis by light microscopy and the mean area of the wound of each animal was calculated and analyzed by ANOVA and Tukey's test (α=0.05). Although at some death periods, collagen expression and number of blood vessels on irradiated animals were higher than in the control ones, no significant differences were found at any time in relation to TGF-β expression (p>0.05). It was concluded that laser treatment (λ660 nm) contributed to increase angiogenesis.

O objetivo do trabalho foi avaliar a angiogênese em feridas cutâneas no dorso de ratos tratados com o laser de λ660 nm. A neovascularização é um processo que envolve o aparecimento vascular, a migração das células endoteliais, a proliferação e a formação tubular. Embora diversos estudos in vivo demonstrem que a fototerapia laser influencia no reparo tecidual, uma compreensão completa dos mecanismos da angiogênese ainda não é conhecida. Foram utilizados 24 ratos Wistar novos, machos e adultos pesando entre 200 e 250 g. Uma ferida excisional foi criada no dorso de cada animal sob anestesia geral e os animais foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos: G0 (controle) e G1 (laser λ660 nm, 16 mW, 10 J/cm2). Cada grupo foi subdividido em três subgrupos de acordo com o sincronismo da morte dos animais (2, 4 e 6 dias). A irradiação laser foi iniciada imediatamente após a cirurgia, sendo repetida diariamente durante a experiência, avaliada por meio de vermelho de Sirius, específico para o colágeno e avaliação imunológica com anti-TGF-β e o Fator anti-von Willebrand. As seções marcadas foram submetidas à análise histológica no foto-microscópio, onde a área média de cada subgrupo foi calculada e analisada usando o teste ANOVA e de Tukey (α=0,05). Os valores dos animais irradiados foram maiores em certos períodos da morte, na expressão do colágeno e no número de vasos em comparação com os grupos controles. Nenhuma diferença significativa foi encontrada na expressão do TGF-β entre os grupos nos períodos. Conclui-se que o tratamento com laser λ660 nm contribuiu para o aumento da angiogênese.

Influence of laser therapy and muscle relaxant on the masseter muscle under occlusal wear: an ultrastructural study / Influencia de la terapia laser y relajante muscular en el músculo masetero bajo oclusión: un estudio ultraestructural

The aim of this study was to analyze the influence of low-intensity laser therapy and muscle relaxant in the characteristic ultra structural masseter muscle occlusal wear. Animals and Methods: 40 male Wistar rats were randomly divided into four groups: the control group (GI), occlusal wear (G-II), laser occlusal wear (G-III), and the muscle relaxant occlusal wear (G-IV). Under general anesthesia given intraperitoneally, animals in groups II, III and IV had unilateral amputation of upper and lower molar cusps to simulate an occlusal wear situation. The masseter muscle G-III received laser therapy (830nm, 4J/cm2, 40mW, f ~ 2mm) and the procedure was subsequently repeated every other day for 14/30 days. G-IV animals were treated with daily injection of dantrolene ® (2.5 mg / kg in 0.5 ml of H2O). From 24 hours after the elimination peak. The animals were euthanized with an overdose of anesthesia on days 14 and 30 after the removal of the cusps and the ipsilateral masseter muscle was excised and divided in two, one half was routinely processed for light microscopy and other for electron microscopy. There was no statistical difference between each experimental group and the control and between periods in each experimental group. However, the muscle fibers in the G-II showed the most pronounced changes. There is no causal relationship between muscles fibers injuries and occlusion and, despite signs of muscular tissue injury were more evident in the occlusal wear group. Results indicates a moderate action of laser therapy and muscle relaxants in skeletal muscle...

El objetivo del estudio fue analizar la influencia de la terapia láser de baja intensidad y del relajante muscular sobre las características ultraestructurales del músculo masetero en el desgaste oclusal. 40 ratas macho Wistar, se dividieron al azar en cuatro grupos: grupo de control (GI), desgaste oclusal (G-II), laserterapia desgaste oclusal (G-III), y relajante muscular desgaste oclusal (G-IV). Bajo anestesia general por vía intraperitoneal, los animales de los grupos II, III y IV sufrieron amputación unilateral de las cúspides de los molares superiores e inferiores para simular una situación de desgaste oclusal. El músculo masetero del G-III recibió la terapia con laser (830nm, 4J/cm2, 40mW, f ~ 2mm) después del procedimiento el cual se repitió durante 14/30 días. Los animales del G-IV fueron tratados con una inyección diaria de Dantroleno® (2,5 mg/Kg en 0,5 ml de H2O). Los animales fueron sacrificados con una sobredosis de anestesia general en los días 14 y 30. Después de la remoción de las cúspides el músculo masetero ipsilateral se extirpó y se dividió en dos, una mitad fue procesada para microscopía de luz y la otra para microscopía electrónica. No hubo diferencias estadísticamente significativas entre cada grupo experimental y el control, así como, entre los períodos en cada grupo experimental. Sin embargo, las fibras musculares en el G-II mostraron los cambios más pronunciados. En conclusión no existe relación causal entre las lesiones de las fibras musculares y la oclusión, a pesar que los signos de lesión de los tejidos musculares fue más evidente en el grupo con desgaste oclusal. Los resultados indican una acción moderada ejercida por la terapia láser y de los relajantes musculares sobre el músculo esquelético...

Efeito das radiações laser e LED associadas ou não no reparo de feridas cutâneas em dorso de ratos: estudo histológico / Effect of laser and LED radiations associated or not on dorsal cutaneous wound repair in a rodent model: histologic study

O objetivo do presente estudo foi avaliar histologicamente o reparo de feridas cutâneas em dorso de ratos submetidos ao tratamento com Laser e/ou LED, utilizando laser de diodo GaAlAs nos comprimentos de onda de λ660nm e λ790nm e LEDs em três comprimentos de onda. Foram utilizados 44 ratos da linhagem Wistar adultos jovens, machos, pesando entre 200 e 250 gramas. Após a realização de uma ferida excisional no dorso, os animais foram distribuídos aleatoriamente em onze grupos de estudo, com quatro animais cada: G0- Controle; G1- Laser λ660nm, 10J/cm2; G2- Laser λ790nm, 10J/cm2; G3- LED ~λ700nm, 15mW, 10J/cm2; G4- Laser λ660nm + LED ~λ700nm, 10J/cm2; G5- LED ~λ700nm, 16mW, 10J/cm2; G6- Laser λ790nm + LED ~λ700nm, 10J/cm2; G7- LED ~λ530nm, 10J/cm2; G7- Laser λ790nm + LED ~λ530nm, 10J/cm2; G8 - LED ~λ460nm, 10J/cm2; G10- Laser λ790nm + LED ~λ460nm, 10J/cm2. As irradiações foram realizadas durante sete dias comintervalos de 48 horas, e a morte animal ocorreu no oitavo dia. As peças foramremovidas, processadas histologicamente e coradas com HE e Picrosírius, e analisadas por microscopia óptica. Os resultados indicam que as radiações laser λ790nm, LED vermelha (~λ700nm)(15mW) e as associações LED vermelho com laser λ790nm e LED verde com laser λ790nm apresentarambiomodulação positiva sobre a quantidade de fibroblastos e de fibrascolágenas. A associação LED verde com laser λ790nm, dentre todos os tratamentos, resultou na deposição de colágeno mais significante e as radiações LED vermelha (15 e 16mW) e laser λ660nm exerceram o efeito debiomodulação positiva mais expressivo na proliferação de fibroblastos e naangiogênese. As radiações laser, LED e suas associações, dentro dos parâmetros especificados, exercem, de maneira geral, biomodulação positivasobre a proliferação de fibroblastos, a formação de tecido de granulação, adeposição de fibras colágenas e a angiogênese.

Utilização do laser de CO2 em lesões de hiperplasia gengival de pacientes ortodônticos / The use of the CO2 laser on the treatment of gingival hyperplasia in orthodontic patients

A presença de acessórios nos aparelhos ortodônticos fixos favorece o acúmulo de biofilme bacteriano. Além disso, a negligência com a higiene bucal, por parte dos pacientes, faz com que a hiperplasia gengival ocorra com freqüência. O tratamento desta, além de gengivectomia convencional, pode ser realizado com laser de dióxido de carbono. Por um lado, as vantagens do uso deste laser são: proporcionar uma excelente hemostasia, resultante do vedamento de pequenos vasos sanguíneos, possibilitando uma excelente visualização do campo operatório; diminuição da concentração e formação de cicatrizes; redução do edema, da dor pós-operatória e da possibilidade de difusão de células anormais, devida ao vedamento de vasos linfáticos. Por outro lado, as desvantagens são o custo elevado, o tamanho do equipamento e a necessidade de pessoal especializado. Neste artigo, demonstrou-se as vantagens desta técnica na remoção de lesões de hiperplasia gengival em pacientes portadores de aparelho ortodôntico fixo.