Inibição do metabolismo de células odontoblastóides induzida por sistemas adesivos autodondicionates / Inhibition of the odontoblast-like cells metabolism by self-etching adhesive systems

O objetivo da presente pesquisa foi avaliar a citotoxicidade de sistemas adesivos autocondicionantes sobre células de linhagem odontoblástica MDPC-23. Para o experimento, 30.000 células/cm2 foramsemeadas em compartimentos contendo meio de cultura (DMEM) completo e mantidas em cultura por 72 horas. Extratos dos adesivos dentinários Adper Prompt, Xeno III, AdheSE, Clearfil SE Bond (CSEB) e Clearfil Protect Bond (CPB) foram obtidos aplicando-se 5uL de cada sistema sobre discos de papel filtro. Após fotoativação por 10s, os discos foram imersos em DMEM por 24h. Tampão fosfato (TF) foi aplicado como grupo controle. Para a avaliação dos efeitos citotóxicos, o meio de cultura em contato com as células por 72 horas foi substituído pelos extratos experimentais e controle e mantidos em contato com as células por 4h. A viabilidade celular foi mensurada pelo teste de MTT e a morfologia celular avaliada em MEV. Também o pH dos extratos foi determinado em um pHmetro digital. Em ordem decrescente, a redução do metabolismo celular causada pelo Adper Prompt, CPB, CSEB, Xeno III, e AdheSE foi de 92,45%, 86,39%, 80,22%, 14,69% e 10,11%, respectivamente, sendo que ausência de correlação entre citotoxicidade e pH foi observada. Exceto para o Xeno III e AdheSE, os demais agentes adesivos apresentaram redução do metabolismo celular estatisticamente significante (Testes Mann-Whitney e Kruskall-Wallis) quando comparado ao grupo controle (TF). Os adesivos autocondicionantes investigados apresentaram efeito citotóxico de variada intensidade, provavelmente modulado pelas diferenças em suas composições químicas e solubilidade em meio aquoso

This study evaluated the cytotoxicity of contemporary self-etching adhesive systems on the immortalized odontoblast cell line MDPC-23. The cells (30.000 cells/cm2) were seemed in wells and incubated for 72 hours in complete culture medium (DMEM). Extracts of the adhesive systems Adper Prompt, Xeno III, AdheSE, Clearfil SE Bond and Clearfil Protect Bond were obtained by applying 5uL of each adhesive onround-shaped filter papers. After light-curing for 10 seconds, the filter papers with the bonding agents were immersed in DMEM for 24h. Phosphate buffer saline solution (PBS) was used as control group. Then, the experimental and control extracts were applied on the cultured cells and incubated for four additional hours and the pH of the extracts was determined. The cytotoxic effects were evaluated by the MTT assay and the cell morphology by SEM. Kruskall-Wallis and Mann-Whitney tests demonstrated a significant difference among the bonding agents and the control group, except for Xeno III and AdheSE, which presented the lowest cytotoxic effects. Adper Prompt, conversely, was the most toxic material. The bonding agents Adper Prompt, Clearfil Protect Bond, Clearfil SE Bond, Xeno III, and AdheSE decreased the cell metabolic activity by 92.45%, 86.39%, 80.22%, 14.69% and 10.11%, respectively. No correlation was observed between pH of the extracts and the cytotoxicity. The resin-based materials caused variable cytotoxic effects, probably related to their particular chemical composition and solubility in wet environment

Avaliação in vitro do metabolismo de celulas imortalizadas de linhagem odontoblástica MDPC-23 submetidas à aplicação do laser de baixa potência / In vitro evaluation of the metabolism of the immortalized odontoblast-like cells MDPC-23 submitted to the low power laser therapy

Desde que o laser interage com os tecidos, agindo como biomodulador e bioestimuladordo processo de reparação, é de se esperar que a terapia com a luz laser possa, de alguma maneira,estimular o metabolismo dos odontoblastos, ativando a síntese de proteínas específicas. Objetivo:avaliar a atividade metabólica das células odontoblastóides MDPC-23 ante à estimulação comlaser de baixa intensidade. Material e Método: Células MDPC-23 foram cultivadas em situaçãonormal ou associadas à deficiência nutricional parcial (baixas concentrações de soro fetal bovino- 2,5 e 5%), e, então, foram submetidas à aplicação de luz laser com comprimentos de onda de 830nm no infravermelho (AsGaAl) e de 685 nm na luz visível (InGaAlP), ambos emitindo radiaçãocontínua e pontual. Finalmente, o metabolismo dessas células foi avaliado pelo teste de MTT, sendoos valores numéricos obtidos submetidos à análise estatística. Resultado: Foi demonstrado que,de acordo com os padrões de irradiação utilizados para este experimento, não houve um aumentosignificante no metabolismo celular. Conclusão: Foi possível concluir, dentro das condiçõesexperimentais, que o metabolismo das células odontoblastóides MDPC-23 é biomodulado pelolaser vermelho e infravermelho próximo quando essas células são colocadas em estado de estressepor deficiência nutricional.

Since the laser light acts as bio-modulator and bio-stimulator of the healing process,one may expect that a specific laser therapy could also stimulate the odontoblasts to synthesizeand deposit dentinal matrix in order to prevent in vivo dentinal sensitivity. Objective: The aimof this study was to evaluate the metabolic activity of an odontoblast-cell line (MDPC-23)submitted to the low power laser therapy. Material and Methods: MDPC-23 cells were platted(3 x 104 cells/cm2) and incubated with complete medium (10% fetal bovine serum – FBS) orwith nutritional deficiency (2.5% FBS or 5% FBS) in order to simulate stress conditions for theMDPC-23 cells. The cells were suibmitted to the laser irradiation by using wave lengths of 830 nmin the infra-red ray (AsGaAl) or 685 nm in the visible light (InGaAlP), both emitting continuousand punctual radiation. Finally, the cell metabolism was evaluated by the MTT assay and thenumerical scores obtained were submitted to the statistical analysis. Results: It was demonstratedthat the standardized experimental techniques of irradiation employed in this experiment causedno significant increase in the cell metabolism. Conclusion: According to the experimental conditions, it was possible to conclude the metabolism of the MDPC-23 odontoblastic-like cellsis bio-modulated by the red laser and next infra-red ray when these cells are in stress conditioninduced by nutritional deficiency.