Isolated total RNA and protein are preserved after thawing for more than twenty-four hours

OBJECTIVE: The preservation of biological samples at a low temperature is important for later biochemical and/or histological analyses. However, the molecular viability of thawed samples has not been studied sufficiently in depth. The present study was undertaken to evaluate the viability of intact tissues, tissue homogenates, and isolated total RNA after defrosting for more than twenty-four hours. METHODS: The molecular viability of the thawed samples (n = 82) was assessed using the A260/A280 ratio, the RNA concentration, the RNA integrity, the level of intact mRNA determined by reverse transcriptase polymerase chain reaction, the protein level determined by Western blotting, and an examination of the histological structure. RESULTS: The integrity of the total RNA was not preserved in the thawed intact tissue, but the RNA integrity and level of mRNA were perfectly preserved in isolated defrosted samples of total RNA. Additionally, the level of β-actin protein was preserved in both thawed intact tissue and homogenates. CONCLUSION: Isolated total RNA does not undergo degradation due to thawing for at least 24 hours, and it is recommended to isolate the total RNA as soon as possible after tissue collection. Moreover, the protein level is preserved in defrosted tissues.

Influência do puerpério e da fase pós-puerperal no lipidograma de vacas da raça Holandesa criadas no Estado de São Paulo / Influence of puerperium and post-puerperal phase on the lipid profile of health Holstein cows

Com o objetivo de avaliar a influência do puerpério fisiológico e da fase pós-puerperal no lipidograma de vacas sadias foram colhidas 104 amostras de sangue por punção da veia coccígea de fêmeas da raça Holandesa criadas no Estado de São Paulo. O lipidograma foi avaliado pela determinação dos teores séricos de colesterol, triglicérides, ácidos graxos não esterificados, beta-hidroxibutirato, e teores plasmáticos de glicose. Observou-se que os teores séricos de colesterol aumentaram gradativamente, enquanto os teores de ácidos graxos não esterificados diminuíram gradativamente com a evolução do puerpério. Na fase pós-puerperal (mais de 45 dias pós-parto) ocorreu a estabilização dos valores de colesterol e de ácidos graxos não esterificados.

Aiming to assess the influence of physiological puerperium and post puerperal phase on the lipid profile of health cows 104 blood sampleswere collected by coccygeal vein puncture of Holstein cows raised inthe State of São Paulo. Lipid profile assessment was measured byserum levels of cholesterol, triglycerides, nonesterified fatty acids, âhydroxybutyrate and plasma glucose level. With regard to puerperiumand post-puerperal phase influence on the lipid profile, gradual increaseof serum cholesterol level and decrease of nonesterified fatty acidswere observed with puerperal evolution. The values of cholesterol and nonsterified fatty acids were stabilized during post-puerperal phase(greater than 45 day postparturm).

Influência dos fatores raciais na função hepática de bovinos da raça Holandesa e Jersey / Influence of breed factor on the hepatic function in Holstein and Jersey cattle

Para avaliar a influência de fatores raciais sobre a função hepática de bovinos foram colhidas 134 amostras de sangue, sendo 67 animais da raça Jersey e 67 da raça Holandesa, criados em São Paulo. No soro sangüíneo realizaram-se as seguintes determinações: proteinograma; atividade enzimática da aspartato aminotransferase (AST), gama glutamiltransferase (GGT), bilirrubinas indireta, direta e total. A avaliação do proteinograma demonstrou a influência dos fatores raciais, pois os valores médios da proteína total dos bovinos da raça Jersey (6,37±0,90 g/dl) foram menores do que os animais da raça Holandesa (6,82±0,97 g/dl).Essas variações foram decorrentes as frações protéicas que correspondem as globulinas, sendo os teores médios obtidos para bovinos da raça Jersey (3,13 ± 0,81g/dl) menores do que os encontrados para bovinos da raça Holandesa (3,73 ± 0,99 g/dl). Os valores das alfa-, beta- e gama-globulinas obtidos nos animais da raça Jersey (iguais a 0,89±0,14 g/dl; 0,71±0,14 g/dl; 2,03±0,38 g/dl) foram menores do que os encontrados para bovinos da raça Holandesa (iguais a 1,00±0,16 g/dl; 0,76±0,15 g/dl; 2,20±0,45 g/dl). A avaliação da atividade enzimática revelou a influência dos fatores raciais nos resultados da AST, sendo os valores dos bovinos Jersey (49,27±17,87 U/l) maiores do que os da raça Holandesa (34,76±10,61 U/l), enquanto para a GGT não foram observadas diferenças significativas entre os resultados da raça Jersey (19,46±33,11 U/l) e da raça Holandesa (19,08±33,26 U/l). A avaliação dos teores séricos de bilirrubinas evidenciou variações sob influência racial para os teores de bilirrubinas indireta e total, sendo os valores obtidos para a raça Jersey (0,40±0,33 mg/dl de bilirrubina indireta e 0,44±0,33 mg/dl de bilirrubina total) maiores do que os observados para a raça Holandesa (0,22±0,19 mg/dl de bilirrubina indireta e 0,25±0,19 mg/dl de bilirrubina total).