Reproductive disorders in does experimentally infected by Toxoplasma gondii / Distúrbios reprodutivos em cabras experimentalmente infectadas por Toxoplasma gondii

The aim of this study was to describe the reproductive disorders related to experimental infection by artificial insemination with semen contaminated with Toxoplasma gondii of four goats in the chronic phase of the infection. In the end of the study, the does were submitted to necropsy, and PCR and histopathological evaluations were performed. Among infected does that exhibited embryonic loss, two were in anestrus and two exhibited repeated estrus. One of the latter animals exhibited clinical signs of estrus at seven-day intervals, whereas the other had a 21-day estrous cycle. However, both does were naturally mated on subsequent natural estrous and were not able to get pregnant until the end of the experiment (90 d). Two of the goats exhibited abnormalities in the ultrasound examinations, one of which was an ovarian cyst, while the other was a hydrosalpinx, both of which were confirmed in the post-mortem examination. The main microscopic injuries in this group were neutrophilic infiltration of the lungs, interstitial glomerulonephritis and neutrophilic infiltration of the liver. T. gondii DNA was found in the organs (heart and brain) of three does. In conclusion, does infected with Toxoplasma gondii in semen at the time of artificial insemination display reproductive disorders in the chronic phase of infection that might be associated with toxoplasmosis.

Objetivou-se descrever os distúrbios reprodutivos associados à infecção experimental por Toxoplasma gondii através da inseminação artificial com sêmen contaminado em quatro cabras no estágio crônico da infecção. As características do trato reprodutor foram avaliadas através de ultrassonografia transretal, visando o diagnóstico gestacional ou de desordens reprodutivas, após a infecção experimental. Ao final do experimento, os animais foram necropsiados e avaliações histopatológicas e PCR foram realizados. Dentre os animais infectados que exibiram mortalidade embrionária, duas apresentaram anestro e duas apresentaram repetição de estro, sendo que destas uma apresentou intervalos entre estros reduzido (sete dias) e outra em intervalo regular (21 dias). Todavia, ambas foram submetidas a monta natural durante os estros naturais subsequentese não foi confirmada gestação até o final do experimento (90 dias). Duas cabras exibiram alterações nos exames de ultrassonografia, sendo identificadas um cisto ovariano, e uma hidrossalpinge, ambas confirmadas no exame post-mortem. As principais lesões microscópicas nesse grupo foram infiltração neutrofílica dos pulmões, glomerulonefrite intersticial e infiltração neutrofílica do fígado. O DNA de T. gondii foi encontrado nos órgãos (coração e cérebro) de três cabras. Em conclusão, cabras infectadas comsêmen contendoT. gondii no momento da inseminação artificial apresentam distúrbios reprodutivos na fase crônica da infecção que podem estar associados à toxoplasmose.

Risk factors associated with Toxoplasma gondii infection in free-range chickens in the semiarid region of Brazil / Fatores de riscos associados com a infecção de Toxoplasma gondii em galinhas de vida livre na região do semiárido do Brasil

Abstract This study aimed to investigate the frequency of anti-Toxoplasma gondii antibodies in serum from 629 chickens on 39 family farms in seven municipalities in the semiarid region, Pernambuco, Brazil, and to identify risk factors associated with T. gondii infection. The risk factors were studied in 421 samples from 29 farms. Anti-T. gondii antibodies were investigated by indirect fluorescent antibody test with a 1:16 cutoff. The frequency of positive chickens was 27.9% (176/629) and 94.8% of the farms studied had chickens infected by T. gondii. Multivariate analysis showed variables significantly associated with anti-T. gondii antibodies in serum: slaughter of animals on the farm, reproductive disorders in sheep, consumption of fetal adnexa and placentas by chickens, presence of sheep in the property and birth of sheep the property. The results suggest that there is a complex relationship between general management practices for different animal species raised on the same farm and the prevalence of T. gondii infection in chickens. In addition, the results draw attention to the risk of human infection by T. gondii via consumption of infected chicken meat, because the farming conditions and the low human development indices observed in the region studied result in inappropriate meat preparation practices.

Resumo Objetivou-se investigar a prevalência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em 629 soros de galinha em 39 propriedades da agricultura familiar em sete municípios de Pernambuco, Brasil e identificar os fatores de risco associados à infecção. Para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii empregou-se a reação de imunofluorescência indireta com ponto-de-corte 1:16. O estudo dos fatores de risco foi realizado em 29 propriedades, totalizando 421 amostras. A prevalência de aves positivas foi de 27,9% (176/629) e 94,8% das propriedades tinham galinhas infectadas por T. gondii. Na análise multivariada, obteve-se como variáveis significativas associadas com anticorpos anti-T. gondii a ocorrência de abate de animais na propriedade, relato de distúrbios reprodutivos em ovinos, ingestão de anexos fetais e placentas pelas galinhas, presença de ovinos na propriedade e nascimento de ovinos na propriedade. Os resultados sugerem relações complexas entre o manejo das espécies animais criados nas propriedades e a prevalência da infecção nas galinhas. Em adicional, chama-se atenção para o risco de infecção humana por T. gondii via consumo de carne de galinha infectada, uma vez que as condições de criação e os baixos índices de desenvolvimento observados na região resultam em inapropriada preparação da carne para consumo.

Detection of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in bovine milk from the state of Pernambuco, Brazil

Abstract The aim of this study was to detect the IS900 region of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) in bovine milk samples using real-time polymerase chain reaction (qPCR) and conventional PCR, and to study the agreement between these tests. A total of 121 bovine milk samples were collected from herds considered positive for MAP, from the State of Pernambuco, Brazil. MAP DNA was detected in 20 samples (16.5%) using conventional PCR and in 34 samples (28.1%) using qPCR. MAP DNA was detected in all of the 6 animal farms studied. Moderate agreement was found between qPCR and conventional PCR results, where the sensitivity and specificity of conventional PCR in relation to qPCR were 50% and 96.6%, respectively. Thus, the IS900 region of MAP was found in bovine milk samples from the State of Pernambuco. To the best of our knowledge, this is the first report of MAP DNA found in bovine milk in Northeast Brazil. We also demonstrated the qPCR technique is more sensitive than conventional PCR with respect to detection of MAP in milk samples.

Occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibodies and parasite DNA in backyard chicken breeding in Northeast, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e DNA do parasita em galinhas de criações domésticas no Nordeste, Brasil

Abstract The aim of the present study was to investigate the occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibodies and parasite DNA in backyard chickens bred in the metropolitan area of Recife, Brazil. In total, 212 serum samples were collected from 16 properties, and 12 backyard chickens were collected in the six sanitary districts of Recife. An indirect immunofluorescence assay (IFA) was used to investigate the occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibodies. Polymerase chain reaction (PCR) was used to detect T. gondii DNA in brain, heart, liver and lung specimens. Of the samples analyzed by serology, 86/212 (40.56%) were positive; of the samples analyzed by PCR, 2/12 (16.7%) were positive, with both samples positive by both tests (serological and molecular). The presence of antibody anti-T. gondii and parasite DNA in tissues of these animals are worrying aspects for public health because there is a risk of transmission of the parasite to humans through eating undercooked or raw meat. Based on the results, the adoption of preventive measures to prevent the cats access to the chickens creations should be encouraged, since these animals were identified in most of the studied properties.

Resumo O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e de DNA do parasito em galinhas de criações domésticas, na região metropolitana de Recife, Brasil. No total, 212 amostras de soro foram coletadas de aves de 16 estabelecimentos e de 12 galinhas de criações domésticas nos seis distritos sanitários de Recife. Para a pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii foi utilizada a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) foi utilizada para detectar o DNA de T. gondii em fragmentos de cérebro, coração, fígado e pulmão. Das amostras analisadas por sorologia, 86/212 (40,56%) foram positivas. Das amostras analisadas por PCR, 2/212 (16,7%) foram positivas, em ambos os testes (sorológicos e moleculares). A presença de anticorpos anti-T. gondii e de DNA parasitário nos tecidos desses animais são aspectos preocupantes para saúde pública, porque há o risco de transmissão do parasita para humanos através da ingestão de carne mal cozida ou crua. Com base nos resultados obtidos, a adoção de medidas preventivas que evitem o acesso de gatos às criações de galinhas deve ser incentivada, uma vez que esses animais foram identificados na maioria das propriedades estudadas.

Ocorrência e fatores de risco associados às infecções por Toxoplasma gondii e Neospora caninum em cães no município de Natal, Estado do Rio Grande do Norte, Nordeste do Brasil / Occurrence and risk factors associated with Toxoplasma gondii and Neospora caninum infections in dogs in the county of Natal, Rio Grande do Norte state, Northeastern Brazil

O objetivo do presente trabalho foi determinar a frequência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum, bem como identificar fatores de risco em cães do município de Natal, Estado do Rio Grande do Norte, Nordeste do Brasil. Para tanto, foram colhidas amostras de sangue de 476 cães atendidos em clínicas veterinárias no período de março de 2011 e maio de 2012. Para o diagnóstico sorológico das infecções, foi utilizada a reação de imunofluorescência indireta (RIFI), adotando-se como pontos de corte as diluições 1:64 (T. gondii) e 1:50 (N. caninum). Das 476 amostras, 55 (11,5%; IC 95%=8,8%-14,8%) foram soropositivas para T. gondii, e 31 (6,5%; IC 95%=4,5%-9,1%) para N. caninum. As variáveis idade > 48meses (OR=4,68) e acesso à rua (OR=4,91) foram identificadas como fatores de risco para T. gondii, enquanto que para N. caninum, os fatores de risco foram limpeza semanal/quinzenal/mensal do ambiente onde o animal vive (OR=2,77) e presença de ratos (OR=2,34). Conclui-se que as infecções por T. gondii e N. caninum, detectadas por sorologia, estão presentes em cães atendidos em clínicas veterinárias do município de Natal, bem como se recomenda a correção dos fatores de risco identificados.

The aim of this survey was to determine the frequency of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neosporacaninum antibodies, as well as to identify risk factors in dogs from the county of Natal, Rio Grande do Norte state, Northeastern Brazil. Blood samples were collected from 476 dogs attended at veterinary clinics from March 2011 to May 2012. For the serological diagnosis of the infections the indirect fluorescent antibody test (IFAT) adopting the dilutions 1:64 (T. gondii) and 1:50 (N. caninum) as cut-off points, was used. Of the 476 samples 55 (11.5%, 95% CI=8.8%-14.8%) were seropositive to T. gondii, and 31 (6.5%, 95% CI=4.5%-9.1%) to N. caninum. The variables age >48 months (OR=4.68) and access to street (OR=4.91) were identified as risk factors for T. gondii, while for N. caninum, risk factors were weekly/fortnightly/monthly cleaning of the environment where the animal stay (OR=2.77) and presence of rodents (OR=2.34). It is concluded that infectionsdue to T. gondii and N. caninum detected by serology are present in dogs attended at veterinary clinics in the county of Natal, as well as it is recommended the correction of the risk factors identified.

Detection of Ureaplasma spp. in semen samples from sheep in Brazil

A study was conducted to verify the presence of mycoplasmas and ureaplasmas DNA in sheep semen samples from the State of Pernambuco. The PCR assay was conducted of according with standard protocols with generic primers. Mollicutes DNA was detected in 26.0% and Ureaplasma spp. in 12.0% of semen samples.

Seroprevalence of antibodies to Neospora caninum in dogs in the state of Alagoas, Brazil / Soroprevalência de anticorpos anti-Neospora caninum em cães no estado de Alagoas, Brasil

This study investigated occurrences of antibodies to anti-Neospora caninum in dogs in the state of Alagoas, Brazil, and the risk factors associated with the infection. To investigate antibodies against N. caninum, an indirect immunofluorescence antibody test (IFAT) was used. To identify risk factors associated with infection by N. caninum, univariate analyses on variables of interest were conducted. The study analyzed 237 samples from dogs of both sexes and different breeds and ages, both from rural and from urban areas. Ten animals (4.2%) were seropositive: five (4.8%) from rural areas and five (3.8%) from urban areas. Regarding sex, five (4.0%) were male and five (4.5%) were female. In relation to breed, four animals of undefined breed and six of defined breed were positive. The ages of the seropositive animals ranged from two months to eleven years. Results show there are no significant associations between seropositivity and the variables analyzed. Results indicate neosporosis must be included in differential diagnosis of dog neurological disorders.

Investigou-se a ocorrência de anticorpos anti-Neospora caninum em cães no Estado de Alagoas, Brasil e os fatores de risco associados à infecção. Para a pesquisa de anticorpos contra N. caninum empregou-se a Reação de Imunofluorescênica Indireta (RIFI). Para identificar os fatores de risco associados à infecção pelo N. caninum foi realizada análise univariada das variáveis de interesse. Foram analisadas 237 amostras de cães de ambos os sexos, diferentes raças e idades e procedentes de áreas urbanas e rurais. Obteve-se 10 (4,2%) animais soropositivos, sendo cinco (4,8%) de áreas rurais e cinco (3,8%) de áreas urbanas. Com relação ao sexo, cinco (4,0%) eram machos e cinco (4,5%) fêmeas. Quanto às raças foram positivos quatro animais de raças indefinidas e seis de raças definidas. As idades dos animais soropositivos variaram de dois meses a 11 anos. Os resultados da análise estatística revelaram não haver associação significativa entre a soropositividade e as variáveis analisadas. Os resultados indicam a necessidade de incluir a neosporose no diagnóstico diferencial das desordens neurológicas caninas.

Occurrence and risk factors associated with infection by Toxoplasma gondii in goats in the State of Alagoas, Brazil / Ocorrência e fatores de risco associados à infecção por Toxoplasma gondii em caprinos do Estado de Alagoas

INTRODUCTION: Goats are considered very susceptible to infection by Toxoplasma gondii and when this occurs during pregnancy, it may cause fetal death with subsequent fetal resorption, abortion, mummification, stillborn or the birth of weak goats. The objective of this work was to determine the occurrence of and identify risk factors for T. gondii infection in goats in different mesoregions in the State of Alagoas. METHODS: The research was conducted on 24 goat breeding farms in 10 municipalities. A total of 454 blood samples were examined for anti-T. gondii antibodies by indirect immunofluorescence antibody test. To evaluate the risk factors of toxoplasmosis in goats, questionnaires were applied analyzing the farm's production system and nutritional, reproductive and sanitary management. RESULTS: Disease occurrence was 39 percent with 95.8 percent of farms presenting seropositive animals. Significant associations were observed for mesoregion (OR = 0.23; 95 percentCI = 0.09 - 0.57), age (OR = 0.36; 95 percentCI = 0.20 - 0.64), semi-intensive herd management (OR = 8.70; 95 percentCI = 1.87 - 40.43), access of cats to water provided for goats (OR = 3.38; 95 percentCI = 1.89-6.02) and cats feeding on placental remnants (OR = 2.73; 95 percentCI = 1.38 - 5.40). CONCLUSIONS: Toxoplasma gondii infection is disseminated in the State of Alagoas and the adoption of a program that monitors infection foci is required to reduce the risk factors identified in the present study.

INTRODUÇÃO: Caprinos são considerados susceptíveis à infecção por Toxoplasma gondii que quando ocorre durante a gestação pode causar morte fetal com subsequente reabsorção, aborto, mumificação, natimortos ou nascimento de cabritos fracos. Objetivou-se com este estudo determinar a ocorrência e identificar os fatores de risco associados à infecção por T. gondii em caprinos nas diferentes mesorregiões do Estado de Alagoas. MÉTODOS: A pesquisa foi realizada em 10 municípios, sendo analisadas 24 propriedades de produção caprina com aptidão mista. Foram coletadas amostras sanguíneas de 454 animais para realização da pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii através da prova sorológica de imunofluorescência indireta. Para o estudo dos fatores de risco, foram aplicados questionários com questões referentes ao sistema de produção e manejos nutricional, reprodutivo e sanitário. RESULTADOS: A ocorrência encontrada foi de 39 por cento com 95,8 por cento das propriedades apresentando animais positivos. Foi observada associação significativa para as variáveis: mesorregião (OR = 0,23; IC 95 por cento = 0,09 - 0,57), idade (OR = 0,36; IC 95 por cento = 0,20 - 0,64), sistema de criação semi-intensivo (OR = 8,70; IC 95 por cento = 1,87 - 40,43), acesso dos gatos à água fornecida aos animais (OR = 3,38; IC 95 por cento = 1,89 - 6,02) e gatos se alimentando de restos placentários (OR = 2,73; IC 95 por cento = 1,38 - 5,40). CONCLUSÕES: A infecção por T. gondii está disseminada no Estado de Alagoas, sendo necessária a realização de um programa de monitoramento dos focos da infecção no Estado com objetivo de reduzir os fatores de riscos identificados no presente estudo.