Reference intervals for hematological parameters of animals bred and kept at the vivarium of the Faculty of Medicine of the State University of São Paulo / Intervalos de referência para alguns parâmetros hematológicos de animais criados e mantidos pelo Biotério da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo

Knowledge of specific hematological parameters of laboratory animals used in experiments is highly relevant to evaluate functional alterations of their vital organs. Hematological reference rates for rats, mice, rabbits and hamsters, bred in conventional healthy conditions and derived from the Vivarium of the FMUSP's Vivarium Center are established. One hundred and twenty mice of the strains BALB/c, C57BL / 6 and Swiss, 80 Wistar rats, 80 Golden hamsters and 80 New Zealand rabbits, males and females, apparently normal and healthy, over 10-weeks-old, were employed in current experiment. The analysis was determined by flow cytometry process (CELM CC510) involving the separation of erythrocytes and leukocytes, and cell identification by the suspension method and quantification. Hematological derivatives such as hematometric indexes (application of equations) and morphological quantification of leukocytes and erythrocytes were determined by scanning/differential (Panótico-commercial), whereas hemoglobin dosage was determined by spectrophotometry (CELM E210D). Results are given as means and standard deviants of hematological profiles in the blood of the animals grouped by species, strain and sex. Data are an important asset for researchers in their analysis of experimental results. CEAU Certificate n.° 251/11 HCFMUSP.

Conhecer os parâmetros hematológicos individuais de animais de laboratório utilizados na experimentação é importante para avaliar as alterações funcionais dos seus órgãos vitais. Este trabalho estabelece valores de referência hematológicos de roedores e lagomorfos criados em condições sanitárias convencionais, provenientes do Biotério do Centro de Bioterismo da FMUSP. Foram utilizados 120 camundongos das linhagens BALB/c, C57BL/6 e Swiss, 80 ratos Wistar, 80 hamster Golden e 80 coelhos New Zealand, machos e fêmeas, aparentemente normais e saudáveis, todos acima de 10 semanas. A análise foi determinada pelo processo de citometria de fluxo (CELM CC510) para a separação de eritrócitos e leucócitos, e a identificação celular pelo método em suspensão e quantificação. Os derivados hematológicos como índices hematimétricos (aplicação de equações), a quantificação morfológica dos leucócitos e eritrócitos foram determinados por varredura/diferencial (Panótico-comercial) e a dosagem de hemoglobina por espectrofotometria (Celm E210D). Os resultados estão apresentados pelas médias e pelos erros padrões dos perfis hematológicos encontrados no sangue dos animais, os quais estão agrupados por espécie, linhagem e sexo. Os perfis servirão como valiosa ferramenta aos pesquisadores na análise de seus resultados experimentais. Certificado CEAU n° 251/11 HCFMUSP.

Protocolo da extraçäo de DNA de material parafinado para análise de microssatélites em leiomioma / DNA extraction from paraffin material protocol in order to analyse microssatellites in uterine leiomyoma

É apresentada a padronizaçäo de protocolo de extraçäo de DNA de material parafinado para análise da instabilidade de microssatélites de genes relacionados ao leiomioma uterino, utilizando-se 30mg a 40mg de tecido retirado de blocos de parafina. Os blocos säo desparafinizados por banhos de xilol a 65ºC, reidratados com soluções de concentrações decrescentes de ETOH e água deionizada. A extraçäo de DNA é obtida através das etapas de lise celular, com soluçäo Promega, digestäo de proteínas por proteinase K, precipitaçäo com proteínas com soluçäo Promega e precipitaçäo do DNA com ETOH 70 por cento gelado e ressuspendido com soluçäo Promega. Este protocolo resulta em um DNA viável para uso na reaçäo em cadeia da polimerase (PCR)

Inbred F344 rats as a biologic model of intra-abdominal sepsis

Aiming to design a biologic model of acute intra-abdominal sepsis for experimental studies, conventional, isogenic rats F344 were infected with the bacteria Escherichia coli (E.coli), strain 11775, serotype H7:01:K1. Six hours after inoculation with E. coli, the animals - males and females - showed the following symptoms: piloerection, hyperpnea and decreased motor activity. The lethal dosis (LD50), was 6 x 10(5) CFU/ml, analyzed in 32 males and 32 females. The highest mortality rate was observed on the first 24 hours. Liver dysfunction, common in intra-abdominal sepsis, was evaluated at 0, 24, 48 and 168 hours after inoculation, by means of serum enzyme activities. Study of the migration of polymorphonuclear-neutrophil cells (PMN) and mononuclear-macrophage ones (MN) showed a significant increase of PMN in E. coli inoculated males (z > 4.7; P<0.003) and females (z > 6.2; P < 0.0003), when compared to control groups. As for MN cells, there were no differences between inoculated and control groups, in males (z = 2.3; P = 0.0107) and in females (z = 1.8; P = 0.0359) as well. In conclusion, these results show that inbred F344 rats are adequate biologic models for studies of acute, intra-abdominal sepsis