Evaluación del Potencial Genotóxico de 4 extractos vegetales de la medicina tradicional boliviana / Evaluation of the potential one genotoxic of 4 vegetable of the Bolivian traditional medicine

Los sistemas de pruebas citogenéticas basados en la detección de Intercambio entre Cromátides Hermanas (SCE), retraso de la cinética del ciclo celular (RCC) y presencia de Micronúcleos (Mn) en células binucleadas, son ampliamente utilizados como métodos de prospección sensibles para evaluar el potencial genotóxico. Se evaluó el potencial genotóxico de 4 extractos vegetales de la herbolaria medicinal boliviana, (chaetophylax boliviensis, Guetarda acreana, Heliocarpus americanus y Solanum americanum) utilizando pruebas de corto plazo como: SCE, RCC y Mn por bloqueo de la citocinesis en linfocitos humanos. Se estudió la dependencia de la producción de SCE y MN, en presencia de diferentes dosis (20, 40, 80, 160 y 320 ug/ml), de los 4 extractos vegetales. Se utilizó un control negativo y un control histórico positivo con mitomicina C (MMC). Los resultados obtenidos de SCE, MN en células binucleadas y el PRI fueron evaluados mediante el análisis de varianza (ANVA). Para el análisis de las diferencias de promedios de las dosis en relación al grupo control negativo se utilizó la prueba de comparaciones múltiples de Dunnett. Los resultados obtenidos de estos experimentos sugieren la existencia de actividad clastogénica de 2 extractos estudiados (Helicarpus americanus y Solanum americanum), utilizando pruebas in vitro en linfocitos humanos. Estos extractos crudos mostraron tener pronunciados efectos genotóxicos con niveles estadísticos altamente significativos (p < 0.001) y una cinética dosis dependiente, tanto para SCE como para Mn, evidenciando que son agentes mutagénicos directos. Los otros 2 extractos (Chaetothylax boliviensis y Guettarda acreana) presentaron comportamiento no definido, propio de un extracto crudo, debido probablemente a la interacción de varios componentes moleculares, que provocan inducción o inhibición de SCE o Mn dosis dependiente. Estas extractos requieren estudios posteriores en celulas CHO-K1 y con activación metabólica

Métodos de obtención y purificación de ADN humano para su aplicación en Genética Molecular / Method of obtaining and purification of ADN human for its application in genetic molecular

Es de gran importancia la obtención de ácido desoxirribonucleico (ADN) humano de alta pureza a partir de glóbulos blancos, para su aplicación en estudios de Genética Molecular utilizando técnicas de hibridización y amplificación por reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Existen secuencias de ADN altamente repetitivas llamadas minisatélites que por hibridación con sondas permiten la identificación genética de las personas, refiriéndose como Impresiones Digitales de ADN (Fingerprintig). La amplificación del segmento Apo E mediante la técnica de PCR, es utilizada como marcador genético en estudios de Genética de poblaciones. Se realizaron tres métodos de obtención y purificación de ADN, dos fueron extracciones orgánicas (Métodos A y B), y uno extracción no orgánica (Método C). Solo las muestras de ADN obtenidas por el método B y C resultaron tener alta concentración y pureza, por lo tanto respectivamente utilizadas para hibridación con sonda en la técnica de Impresiones Digitales de ADN y en amplificación por PCR del segmento Apo E, respectivamente. En este trabajo, se han logrado desarrollar dos métodos de obtención y purificación de ADN humano para ser empleados en trabajos de Genética Molecular