Emprego de anticorpos monoclonais no desenvolvimento de um ensaio imunofluorométrico de alta sensibilidade para a dosagem de FSH: estudo dos níveis séricos em meninos normais nos diferentes estádios puberais / Use of monoclonal antibodies in the development of a high sensibility immunofluorometric assay to the FSH: study of the serum levels in normal boys at the pubertal stages

Produzimos sete anticorpos monoclonais contra FSH, que foram isolados e caracterizados. Dois reconhecem exclusivamente FSH, sendo que um deles (EllP3), escolhido para anticorpo de captura no desenvolvimento de um ensaio imunofluorométrico. Para marcaçao com Európio escolhemos um monoclonal anti subunidade alpha. O ensaio desenvolvido pode ser efetuado em aproximadamente 4 horas, apresenta sensibilidade em torno de OO5 UI/L e alto grau de precisao. A dosagem de 82 amostras de soro de rotina diagnóstica por este método e por um ensaio imunofluorométrico comercial, mostrou alto grau de correlaçao entre os resultados (r=0,988). Dosagens foram efetuadas também em 75 soros de meninos normais nos diferentes estadios puberais, sendo em todos êles o nível de FSH detectável, variando de O,3 a lO, l UI/L. Diferenças significativas foram observadas entre os níveis dos grupos Gl vs. G4+5 (P<0,001), Gl vs. G3 (p

Desenvolvimento de um ensaio imunofluorométrico para a medida da molécula inteira da gonaatrofina coriônica (hCG) no soro / Development of an immunofluorometric assay for serum measurement of the whole molecule of human chorionic gonatropin (hCG)

Tendo como base dois anticorpos monoclonais produzidos em nosso laboratório, um específico contra a subunidade beta de hCG/LH (E2P1) e outro específico contra um epítopo descontínuo presente na molécula inteira da hCG (F1P16), desenvolvemos um ensaio imunométrico específico para a molécula inteira de hCG. O monoclonal E2P1 foi adsorvido a placas de microtitulaçåo e o monoclonal F1P16 foi marcado com Európio; o ensaio consta de duas incubaçöes sequenciais de 1h cada e leitura final de fluorescência em fluorômetro tempo-sincronizado. A sensibilidade calculada foi de 1,8 UI/L; o perfil de imprecisåo mostrou erro inferior a 19 por cento entre os valores de 5 a 3000 UI/L; o coeficiente de variaçåo interensaio mostrou-se de 8 por cento para uma amostra de valor médio de 1065 UI/L (n=15) e de 13,9 por cento para outra de valor médio de 28 UI/L (n=15). A comparaçåo com método equivalente (Delphia hCG) nåo mostrou nenhuma discordância em 300 amostras dosadas sequencialmente, sendo que em 1388 amostras onde os valores eram iguais ou superiores a 20 UI/L pelo Delfia, obtivemos alto índice de correlaçåo (r=0,988). Os valores obtidos pelo nosso método mostraram-se discreta, porém, significativamente mais elevados, com medianas de 4610 e 4370 UI/L, respectivamente