Validation of an HPLC-UV method for the identification and quantification of bioactive amines in chicken meat / Validação de metodologia por HPLC/UV para identificação e quantificação de aminas bioativas em carne de frango de corte

A high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection (HPLC-UV) method was validated for the study of bioactive amines in chicken meat. A gradient elution system with an ultraviolet detector was used after extraction with trichloroacetic acid and pre-column derivatization with dansyl chloride. Putrescine, cadaverine, histamine, tyramine, spermidine, and spermine standards were used for the evaluation of the following performance parameters: selectivity, linearity, precision, recovery, limits of detection, limits of quantification and ruggedness. The results indicated excellent selectivity, separation of all amines, a coefficient of determination greater than 0.99 and recovery from 92.25 to 102.25% at the concentration of 47.2mg.kg-1, with a limit of detection at 0.3mg.kg-1 and a limit of quantification at 0.9mg.kg-1 for all amines, with the exception of histamine, which exhibited the limit of quantification, of 1mg.kg-1. In conclusion, the performance parameters demonstrated adequacy of the method for the detection and quantification of bioactive amines in chicken meat.(AU)

Um método de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) para pesquisa de aminas bioativas em carne de frango foi validado. Foi utilizado um sistema de gradiente de eluição com detector ultravioleta, após extração com ácido tricloroacético e derivação pré-coluna com cloreto de dansila. Os padrões de putrescina, cadaverina, histamina, tiramina, espermidina e espermina foram utilizados para avaliação dos seguintes parâmetros de desempenho: seletividade, linearidade, precisão, recuperação, limites de detecção, limites de quantificação e robustez. Os resultados mostraram excelente seletividade e separação de todas as aminas, coeficiente de determinação superior a 0,99, recuperação entre 92,25 e 105,25% na concentração 47,2mg.kg-1, limites de detecção de 0,3mg.kg-1 e limite de quantificação de 0,9mg.kg-1 para todas as aminas, com exceção da histamina, que apresentou o limite de quantificação mais alto, de 1mg.kg-1. Foi concluído que os parâmetros de desempenho demonstraram adequação do método para detecção e quantificação de aminas bioativas em carne de frango.(AU)

Identificação espécie-específica de carnes e produtos cárneos de origem bubalina e bovina pela técnica de PCR-RFLP / Species-specific identification of red-meat and meat derivative products with the PCR-RFLP technique

Para avaliar a viabilidade da metodologia da Reação em Cadeia da Polimerase associada com o Polimorfismo de Fragmentos de DNA (PCR-RFLP) na identificação de fraude intencional e contaminação acidental em produtos cárneos de origem bubalina, in natura e processados, foram testadas amostras puras e amostras de carnes com misturas controladas, produzidas em laboratório, com adição de 1%, 5%, 10% e 50% de carne bovina em carne de búfalo, homogeneizada crua e em amostras autoclavada. Foram comparados, ainda, diferentes métodos de extração, usando um kit comercial e a técnica clássica, utilizando fenol/clorofórmio. O resultado estatístico foi obtido por tabela de contingência, analisada pelo teste do qui-quadrado (χ2) e do exato de Fisher. A especificidade encontrada foi altamente significativa (P<0,0001). Observou-se também sensibilidade altamente significativa nas diluições a partir de 10% (P<0,0001). A técnica tem alta especificidade e sensibilidade para detectar até mesmo contaminação de 1%, mas a repetibilidade desse resultado impede a aplicação oficial desse método para a inspeção de contaminação acidental, sendo recomendada somente para inspeção de fraude a partir de 10% de substituição. Em carnes autoclavadas, a eficácia do teste é menor. A técnica pode ser empregada para certificação de produto específico (selo de identidade de espécie).

The present study aimed at evaluate the viability of PCR-RFLP (Polymerase Chain Reaction - Restriction Fragment Length Polymorphism) for identification of fraud and/or accidental contamination in buffalo meat - fresh and processed. Pure, autoclaved and controlled fraud samples, produced in the laboratory with the addition of 1, 5, 10 and 50% of beef in raw homogenized buffalo meat samples, were tested. Furthermore, different extraction methods, using a commercial kit and classical technique using phenol-chloroform, were compared. The statistical result was obtained by contingency table analyzed by chi-square and the Fisher exact test. The specificity was highly significant (p <0.0001), and the sensitivity was highly significant in dilutions from 10% (p <0.0001). Despite its accuracy and precision, capable to detect a contamination level of 1%, PCR-RFLP technique is not recommended for inspection in cases of accidental contamination. This is due to the need of test repetition in levels of contamination lower than 10%. The efficiency of this test is lower to autoclaved meat. The PCR-RFPL technique can be used for certification of food made with specific species (species identification certification stamp).

Evaluation of tumor markers carcinoembryonic antigen, cytokeratin 19 fragment and cancer-associated antigen 72-4 in neoplastic and non-neoplastic canine effusions differentiation / Avaliação dos marcadores tumorais antígeno carcinoembrionário, fragmento de citoqueratina 19 e antígeno associado ao câncer 72-4 na diferenciação de efusões neoplásicas e não neoplásicas caninas

The concentration of tumor markers in body fluids can be used for diagnosis and prognosis of patients. This study aimed to investigate the performance of tumor markers cytokeratin 19 fragment (CYFRA 21-1), cancer-associated antigen 72-4 (CA 72-4) and carcinoembryonic antigen (CEA) in the neoplastic and non-neoplastic canine effusions. In thirty-two neoplastic (n=16) and non-neoplastic (n=16) samples of canine thoracic or abdominal effusions, tumor markers were measured. Significant statistical difference was found only for the CYFRA 21-1 marker. The levels were significantly higher for the neoplastic group. The lack of significance between groups for markers CA 72-4 and CEA can be explained by the presence of other diseases in the non-neoplastic group, causing elevated levels of these markers. This study concludes that CYFRA 21-1 performed well, showing good sensitivity, specificity and accuracy in the diagnosis of neoplastic effusions in dogs. However, further investigations are necessary in patients with malignancy as those with benign effusions...

Os níveis de marcadores tumorais em líquidos corporais podem ser usados para diagnóstico e prognóstico de pacientes. Este estudo objetiva investigar o desempenho dos marcadores tumorais fragmento de citoqueratina 19 (CYFRA 21-1), antígeno asociado ao câncer 72-4 (CA 72-4) e antígeno carcinoembrionário (CEA) em efusões caninas neoplásicas e não neoplásicas. Os marcadores tumorais foram mensurados em 32 amotras de efusões torácicas e abdominais de cães, 16 neoplásicas e 16 não neoplásicas. Foi encontrada diferença estatística somente para o marcador CYFRA 21-1, onde os níveis foram significativamente altos no grupo neoplásico. A falta de significância entre os grupos de marcadores CA 72-4 e CEA pode ser explicada pela presença de outras doenças no grupo não neoplásico, o que causou elevação dos níveis destes marcadores. Este estudo conclui que o marcador CYFRA 21-1 teve bom desempenho, pois mostrou boa sensibilidade, especificidade e acurácia no diagnóstico de efusões neoplásicas em cães. Entretanto, mais estudos são necessários tanto em pacientes portadores de efusões benignas quanto malignas...

Fração total de células mononucleares intra-articular em cães submetidos à reconstrução do ligamento cruzado / Total fraction of mononuclear intra-articular cells in dogs undergoing cruciate ligament reconstruction

Avaliou-sea ação da fração total de células mononucleares autógenas da medula óssea (FCMO) por aplicação intra-articular, após a correção cirúrgica do ligamento cruzado rompido. Foram utilizados 20 cães, os quais sofreram desmotomia do ligamento cruzado cranial e caudal unilaterais, 21 dias antes do reparo cirúrgico. Dez animais receberam as células autógenas no momento da correção. As avaliações se deram por estudo radiográfico, exames clínicos e biópsias aos 50 e 90 dias pós-operatórios. O grupo que recebeu a FCMO apresentou crescimento ósseo intra-articular ao estudo radiográfico, contudo os 20 animais apresentaram célulasCD34 positivas em suas amostras biopsiadas, indicando haver presença de células-tronco em ambos os grupos. Conclui-se que,para o modelo experimental proposto, não se recomenda o uso da fração total de células mononucleares e que trabalhos experimentais com o uso de células-tronco nas articulações devem evitar modelos cujo foco de lesão mantenha contato direto com a medula óssea.

This study was performed to evaluate the action of the fraction of total mononuclear cells from the bone marrow (FCMO) applied intra-articularly after the surgical repair of an experimentally ruptured cruciate ligament. Twenty dogs which suffered one-sided cruciate desmotomy of the cranial and caudal cruciate ligament 21 days before the correction were used. Ten animals received the FCMO at the time of correction. The assessments were done through X-ray and clinical examinations, and biopsies at 50 and 90 days postoperatively. It was concluded that there was no clinical difference between the two groups until 90 days of evaluation. The group that received FCMO grew intra-articular bone shown on the X-ray study. All twenty animals, however, presented cells marked with CD34 antibodies on their biopsy samples, indicating the presence of stem cells in both groups. It is concluded thatfor theexperimental model, it is not recommended to use the mononuclear cell fraction,andin experimental studies with the use of stem cells in the joints models whose focus of injury keep direct contact with the bone marrow should be avoided.

Extração de DNA e avaliação da composição espécie-específica de queijos / DNA extraction and evaluation of the specie-specific composition of cheeses

Foram testados três métodos de extração de DNA em amostras de queijo, com o objetivo de identificar uma técnica eficiente para extração de DNA em amostras com várias limitações, como alto teor de gordura, alto grau de degradação do DNA e grande concentração de impurezas. A técnica que faz uso do tiocianato de guanidina mostrou-se mais adequada para identificação de adição intencional não declarada de leite bovino em queijos bubalinos, podendo ser empregada para certificação de produto específico (selo de Identidade de Espécie).

Three methods of DNA extraction were tested in cheese samples. The objective of this study was to identify an efficient technique for DNA extraction in different samples with several limitations, such as high fat tenor, high degree of DNA degradation and great sludge concentration. The technique using Guanidine thiocyanate was more appropriate for identification of intentional undeclared addition of bovine milk in buffalo cheeses. This technique can be used for certification of a specific product (stamp of Identity of Species).

Candidate gene linkage analysis indicates genetic heterogeneity in Marfan syndrome

Marfan syndrome (MFS) is an autosomal dominant disease of the connective tissue that affects the ocular, skeletal and cardiovascular systems, with a wide clinical variability. Although mutations in the FBN1 gene have been recognized as the cause of the disease, more recently other loci have been associated with MFS, indicating the genetic heterogeneity of this disease. We addressed the issue of genetic heterogeneity in MFS by performing linkage analysis of the FBN1 and TGFBR2 genes in 34 families (345 subjects) who met the clinical diagnostic criteria for the disease according to Ghent. Using a total of six microsatellite markers, we found that linkage with the FBN1 gene was observed or not excluded in 70.6 percent (24/34) of the families, and in 1 family the MFS phenotype segregated with the TGFBR2 gene. Moreover, in 4 families linkage with the FBN1 and TGFBR2 genes was excluded, and no mutations were identified in the coding region of TGFBR1, indicating the existence of other genes involved in MFS. Our results suggest that the genetic heterogeneity of MFS may be greater that previously reported.

Perfil físico-químico do soro de queijos mozarela e minas-padrão produzidos em várias regiões do estado de Minas Gerais / Physical-chemical profile of the whey of minas-padrão and mozzarella cheeses produced in some regions of Minas Gerais state

O perfil físico-químico de soros de queijos mozarela e minas-padrão foi analisado em quatro das cinco macrorregiões com maior produção desses queijos no estado de Minas Gerais: Alto São Francisco, Zona Metalúrgica, Zona da Mata e Sul de Minas. Os valores média+desvio padrão encontrados para os componentes do soro de queijo mozarela foram: -0,565+0,031ºH para crioscopia; 6,19+0,26 para pH; 13,16+3,08ºD para acidez; 6,33+0,43g/100g para sólidos totais; 93,67+0,43g/100g para umidade; 0,77+0,26g/100g para gordura; 0,84+0,04g/100g para proteína; 4,42+0,68g/100g para lactose; 0,47+0,04g/100g para cinzas; 0,18+0,01g/100g para cloretos e 1,0253+0,0006 para densidade. Para soro de queijo minas-padrão, foram encontrados: -0,555+0,030ºH para crioscopia; 6,30+0,31 para pH; 12,48+2,07ºD para acidez; 6,28+0,51g/100g para sólidos totais; 93,97+0,54 g/100g para umidade; 0,70+0,21g/100g para gordura; 0,49+0,03g/100g para cinzas; 4,12+0,36 g/100g para lactose; 0,80+0,04g/100g para proteínas; 0,20+0,01g/100g para cloretos e 1,0249+0,0009 para densidade. Não houve diferença significativa entre os dois tipos de soro, mas encontrou-se diferença entre os soros de diferentes regiões para crioscopia, sólidos totais, umidade e densidade, e observou-se interação tipo de soro versus região para proteínas, acidez, gordura e cloretos. Os teores de lactose e resíduo mineral fixo (cinzas) não apresentaram nenhuma diferença significativa. Por não existir um padrão de identidade e qualidade específico para soros de queijo, esses resultados podem ser tomados como base para se desenvolver tais padrões.

The physical-chemical profile of the whey of mozzarella and minas-padrão cheeses was studied in four regions ("Alto São Francisco", "Zona Metalúrgica", "Zona da Mata" and "Sul de Minas") which produce milk and cheese in Minas Gerais. Due to the lack of a specific identity and a quality pattern for cheese whey, the results can be taken as a base to develop such patterns. The mean values found for mozzarella cheese whey were: - 0.565± 0.031ºH for freezing point; 6.19± 0.26 for pH; 13.16± 3.08ºD for titratable acidity; 6.33± 0.43g/100g for total solids; 93.67± 0.43g/100g for moisture; 0.77± 0.26g/100g for fat; 0.84± 0.04g/100g for protein; 4.42± 0.68g/100g for lactose; 0.47± 0.04 g/100g for ashes; 0.18± 0.01g/100g for chlorine and 1.0253± 0.0006 for density. In relation to minas-padrão cheese whey, the following mean results were obtained: - 0.555± 0.030ºH for freezing point; 6.30± 0.31 for pH; 12.48± 2.07ºD for titratable acidity; 6.28± 0.51g/100g for total solids; 93.97± 0.54 g/100g for moisture; 0.70± 0.21g/100g for fat; 0.80± 0.04g/100g for protein; 4.12± 0.36g/100g for lactose; 0.49± 0.03g/100g for ashes; 0.20± 0.01g/100g for chlorine and 1.0249± 0.0009 for density. No statistical difference between those types of whey was observed, but difference among wheys from regions for freezing point, total solids, moisture and density as well as interaction whey x regions for protein, titratable acidity, fat, and chorine were found. Only lactose and ash contents did not present any statistical difference.

Avaliação da qualidade microbiológica do soro de queijos Minas padrão e mozarela produzidos em quatro regiões do estado de Minas Gerais / Microbiological profile of the whey of nd mozzarella cheese produced in Minas Gerais state (Brazil)

The microbiological profile of whey from the queijo-de-minas (Minas padrão) and mozzarella type cheeses produced in four of five most important regions of Minas Gerais state was studied. The contamination percentage found is serious, mainly in terms of the result found in coliforms count at 45°C e coagulase-positive Staphylococci. The contamination of the whey would be too high, indicating the material as unsuitable for human consumption as well as for industrial means. Due to the lack of a specific identity and a quality pattern for cheese whey, the results can be taken as a base for standard developments, which are seen as necessary concerning the microbiological quality of such products.

Comparaçäo de metodologias para estimaçäo de parâmetros genéticos em populaçäo de aves submetida à seleçäo / Comparison of methodologies for estimation of genetic parameters in a roast chicken population under selection

O trabalho utilizou peso corporal de 11.700 aves de corte e conversäo alimentar de 2.400 aves e produçäo de pintos de 560 fêmeas selecionadas para reproduçäo, em cada uma de quatro geraçöes de seleçäo (1992-1995) para comparar estimativas de parâmetros genéticos obtidas por meio do Método III de Henderson, incluindo todas as observaçöes disponíveis de peso corporal no 42º dia de idade (PC), conversäo alimentar (CA) e produçäo de pintos (PP) com as obtidas pela máxima verossimilhança restrita - REM, em diferentes composiçöes de arquivos, definidos em: 1 - análise de uma geraçäo de seleçäo com todas as informaçöes (RUC) de PC, CA e PP; 2 - análise de duas geraçöes de seleçäo incluindo ou näo PP; 3 - análise de três geraçöes de seleçäo incluindo ou näo PP; e 4 - análise de quatro geraçöes de seleçäo incluindo ou näo PP. As estimativas de herdabilidade de PC, CA e PP obtidas pelo Método III de Henderson e pelo REML, utilizando populaçöes com uma geraçäo de seleçäo (RUC2, RUC3 e RUC4), apresentaram diferenças de pequena relevância. As estimativas de correlaçäo genética (r g) entre pares de características apresentaram valores com diferentes magnitudes. Os valores de r g entre PC e PP e entre CA e PP obtidos pelo método III de Henderson ao longo das geraçöes sugeriram presença de vieses causados pela mudança de freqüência gênica, em conseqüência do processo de seleçäo. As estimativas REML foram mais estáveis no decorrer do programa de seleçäo e melhor refletiram as relaçöes biológicas entre características estudadas. Dessa forma, o REML foi mais adequado para obter estimativas dos parâmetros genéticos dessa populaçäo submetida a processo de seleçäo

Exigências de proteína bruta e energia metabolizável para codornas japonesas machos criadas para a produçäo de carne / Energy and protein requirements for male Japanese quails reared for meat production

O experimento objetivou estimar as exigências de proteína bruta (PB) e energia metabolizável (EM) para máximo desempenho de machos de codornas japonesas criadas para a produçäo de carne e determinaçäo da idade de abate que resultasse em peso máximo das aves. Quatrocentos e cinqüenta codornas foram utilizadas em delineamento experimental de blocos ao acaso, com cinco repetições de seis codornas por unidade experimental. Os tratamentos, de dietas formuladas a partir da combinaçäo de cinco níveis de PB (18, 20, 22, 24 e 26 por cento) e três níveis de EM (2800, 3000 e 3200kcal/kg de raçäo), foram alocados nas parcelas e os quatro períodos experimentais nas sub-parcelas. As variáveis estudadas durante os quatro períodos (5 a 16; 16 a 27; 27 a 38 e 38 a 49 dias de idade) foram consumo de raçäo (CR), ganho de peso (GP), conversäo alimentar (CA) e peso vivo (PV). No período total (5 a 49 dias de idade) foram estudados consumo de raçäo acumulado (CRA), ganho de peso acumulado (GPA) e conversäo alimentar acumulada (CAA). As exigências estimadas de PB e EM durante o primeiro (5 a 16) e terceiro (27 a 38) períodos foram 26 e 2800 e 18 por cento e 3200kcal/kg de raçäo, respectivamente. A exigência de PB no segundo período (16 a 27 dias de idade) foi de 26 por cento, näo sendo possível estimar a exigência energética. No quarto (38 a 49 dias de idade) período experimental a exigência estimada de EM foi de 3200kcal/kg de raçäo, näo sendo possível estimar a exigência protéica. No período total as exigências protéica e energética, estimadas para máximos ganhos de peso acumulados, foram de 26 por cento e 3200kcal/kg de raçäo, respectivamente. As idades estimadas que resultaram em PV máximo dependeram do nível de PB e de EM da dieta, variando de 57 a 85 e 60 a 74 dias, respectivamente