ABSTRACT
The genus Acanthamoeba comprises free-living amebae identified as opportunistic pathogens of humans and other animal species. Morphological, biochemical and molecular approaches have shown wide genetic diversity within the genus. In an attempt to determine the genetic relatedness among isolates of Acanthamoeba we analyzed randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) profiles of 11 Brazilian isolates from cases of human keratitis and 8 American type culture collection (ATCC) reference strains. We found that ATCC strains belonging to the same species present polymorphic RAPD profiles whereas strains of different species show very similar profiles. Although most Brazilian isolates could not be assigned with certainty to any of the reference species, they could be clustered according to pattern similarities. The results show that RAPD analysis is a useful tool for the rapid characterization of new isolates and the assessment of genetic relatedness of Acanthamoeba spp. A comparison between RAPD analyses and morphological characteristics of cyst stages is also discussed (au)
Subject(s)
Animals , Humans , Acanthamoeba Keratitis/parasitology , Acanthamoeba/genetics , Random Amplified Polymorphic DNA Technique , Acanthamoeba/growth & development , Acanthamoeba/isolation & purification , DNA Primers/analysis , Genetic Variation , Life Cycle Stages/geneticsABSTRACT
Caracterizaçäo antigênica de tripomastigotas metacíclicos de Trypanosoma cruzi provenientes do vector e de cultura. Tripomastigotas metacíclicos da cepa CL de Trypanosoma cruzi, originários de triatomíneos e de cultura axênica, foram comparativamente analisados quanto a sua composiçäo antigênica e características imunogênicas. Os vários parâmetros examinados mostraram que as duas formas metacíclicas säo semelhantes. Assim, soros de camundongos imunizados com qualquer uma das formas metacíclicas precipitaram uma proteína de superfície de 82Kd de tripomastigotas metacíclicos de cultura marcados com 131I. Soros de camundongos protegidos contra infecçäo aguda por T. cruzi, por imunizaçäo com formas metacílicas de cultura inativadas, de uma cepa diferente (G), detectaram por imunoblotting uma proteína de 77Kd em ambas as formas metacíclicas da cepa CL. Um anticorpo monoclonal, produzido contra as formas metacíclicas da cepa G, e específico para tripomastigotas metacíclicos, reagiu com formas metacíclicas da cepa CL tanto do vetor quanto de cultura. As duas formas metacíclicas mostraram suscetibilidade semelhante à lise por vários soros anti-T. cruzi, em uma reaçäo mediada por complemento