Effect of the signaling lymphocytic activation molecule (SLAM) in the modulation of T cells in immune response to Leishmania braziliensis in vitro / Efeito da molécula de sinalização para ativação linfocítica (SLAM) na modulação de células T na resposta imune à Leishmania braziliensis in vitro

Introduction: Signaling lymphocyte activation molecule (SLAM) is a self-ligand receptor on the surface of activated T- and B-lymphocytes, macrophages, and DC. Studies have shown PBMC from healthy individuals exposed to Leishmania differ in IFN-γ production. Objective: We investigated the role of SLAM signaling pathway in PMBC from high (HP) and low (LP) IFN-γ producers exposed to L. braziliensis in vitro. Methods: PBMC from 43 healthy individuals were cultured with or without antigen, α-SLAM, rIL-12 and rIFN-γ. The cytokines production was evaluated by ELISA, and SLAM expression by flow cytometry. Results: L. braziliensis associated with rIFN-γ or rIL-12 reduced early SLAM but did not modify this response later in HP. α-SLAM did not alter CD3+SLAM+ expression, and not affected IFN-γ and IL-13 production, in both groups, but increased significantly IL-10 in HP. Leishmania associated with α-SLAM and rIL-12 increased IFN-γ in LP, as well as IL-13 in HP. LP group presented low IFN-γ and IL-13 production, and low SLAM expression. Conclusion: Collectively, these findings suggest that when PBMC from healthy individuals are sensitized with L. braziliensis in vitro, SLAM acts in modulating Th1 response in HP individuals and induces a condition of immunosuppression in LP individuals. (AU)

Introdução: A molécula de sinalização para ativação linfocítica (SLAM) é um receptor autoligante na superfície de linfócitos T e B ativados, macrófagos e DC. Estudos têm mostrado que PBMC de indivíduos saudáveis expostos à Leishmania diferem na produção de IFN-γ. Objetivo: Nós investigamos o papel da via de sinalização de SLAM em PMBC de altos produtores de IFN-γ (AP) e baixos (BP) expostos à L. braziliensis in vitro. Métodos: PBMC de 43 indivíduos saudáveis foram cultivadas com ou sem antígeno, α-SLAM, rIL-12 e rIFN-γ. Foi avaliada a produção de citocinas por ELISA e expressão de SLAM por citometria de fluxo. Resultados: L. braziliensis associado a rIFN-γ ou rIL-12 reduziu a expressão inicial de SLAM, mas não modificou esta resposta mais tarde em AP. α-SLAM não alterou a expressão de CD3+SLAM+, e não afetou a produção de IFN-γ e IL-13, em ambos os grupos, mas aumentou significativamente IL-10 em AP. Leishmania associada a α-SLAM e rIL-12 aumentou IFN-γ em BP, assim como IL-13 em AP. BP apresentaram baixa produção de IFN-γ e IL-13 e baixa expressão de SLAM. Conclusão: Coletivamente, esses achados sugerem que quando PBMC de indivíduos saudáveis são sensibilizados por L. braziliensis in vitro, SLAM atua na modulação da resposta Th1 em indivíduos AP e induz uma condição de imunossupressão em indivíduos BP. (AU)

Protection mediated by chemokine CXCL10 in BALB/c mice infected by Leishmania infantum

BACKGROUND Visceral leishmaniasis (VL) caused by Leishmania infantum is characterised by the loss of the ability of the host to generate an effective immune response. Chemokines have a direct involvement in the pathogenesis of leishmaniasis, causing a rapid change in the expression of these molecules during infection by Leishmania. OBJECTIVES Herein, it was investigated the role of CXCL10 in controlling infection by L. infantum. METHODS RAW 264.7 macrophages were infected with L. infantum in vitro and treated or not with CXCL10 (25, 50 and 100 ng/mL). Parasite load, as well as nitric oxide (NO), IL-4 and IL-10 production were assessed at 24 and 48 h after infection. In vivo, BALB/c mice were infected and treated or not with CXCL10 (5 μg/kg) at one, three and seven days of infection. Parasite load, IFN-g, IL-4, TGF-β and IL-10 were evaluated one, seven and 23 days post treatment. FINDINGS In vitro, CXCL10 reduced parasitic load, not dependent on NO, and inhibited IL-10 and IL-4 secretion. In vivo, CXCL10 was able to reduce the parasite load in both liver and spleen, four weeks after infection, representing a higher decrease in the number of parasites in these organs, also induced IFN-γ at day 23 after treatment, correlating with the decrease in parasite load, and reduced IL-10 and TGF-β. MAIN CONCLUSIONS This study suggests a partial protective role of CXCL10 against L. infantum, mediated by IFN-g, not dependent on NO, and with suppression of IL-10 and TGF-β. These data may provide information for the development of new approaches for future therapeutic interventions for VL.

DISTINCT CELLULAR MIGRATION INDUCED BY Leishmania infantum chagasi AND SALIVA FROM Lutzomyia longipalpis IN A HEMORRHAGIC POOL MODEL / Migração celular distinta induzida por Leishmania infantum chagasi e saliva de Lutzomyia longipalpis em um modelo de pool hemorrágico

Recruitment of a specific cell population after Leishmania infection can influence the outcome of the disease. Cellular migration in response to Leishmania or vector saliva has been reported in air pouch model, however, cellular migration induced by Leishmania associated with host's blood and vector saliva in this model has not been described. Herein we investigated cellular migration into air pouch of hamster after stimulation with combination of L. chagasi and host's blood and Lutzomyia longipalpis saliva. Migration induced by saliva was 3-fold more than those induced by L. chagasi alone. Additionally, L. chagasi associated with blood and saliva induced significantly even more leukocytes into air pouch than Leishmania alone. L. chagasi recruited a diverse cell population; however, most of these cells seem to have not migrated to the inflammatory exudate, remaining in the pouch lining tissue. These results indicate that L. chagasi can reduce leukocyte accumulation to the initial site of infection, and when associated with vector saliva in the presence of blood components, increase the influx of more neutrophils than macrophages, suggesting that the parasite has developed a strategy to minimize the initial inflammatory response, allowing an unlimited progression within the host. This work reinforces the importance of studies on the salivary components of sand fly vectors of leishmaniasis in the transmission process and the establishment of the infection.

O recrutamento de uma população de células específicas após infecção por Leishmania pode influenciar o resultado da doença. A migração celular em resposta a Leishmania ou saliva do vetor tem sido reportada utilizando o modelo da bolsa de ar subcutânea, entretanto, a migração celular induzida por Leishmania associada com o sangue do hospedeiro e saliva do vetor neste modelo ainda não foi descrita. Neste trabalho foi investigada a migração celular no modelo da bolsa de ar subcutânea em hamster após a estimulação com a combinação de L. chagasi, sangue do hospedeiro e saliva de Lutzomyia longipalpis. A migração induzida por saliva foi três vezes maior do que a induzida por L. chagasi sozinha. Adicionalmente, L. chagasi associada com sangue e saliva induziu significativamente ainda mais leucócitos no exsudato inflamatório do que o estímulo com Leishmania sozinha. L. chagasi recrutou uma população de células distintas, no entanto, a maioria dessas células parece não ter migrado para o exsudato inflamatório, permanecendo no tecido da bolsa de ar. Estes resultados indicam que L. chagasi pode reduzir o acúmulo de leucócitos para o local inicial da infecção e que quando associada à saliva do vetor e na presença de componentes do sangue aumenta o influxo de mais neutrófilos do que macrófagos, sugerindo que o parasito desenvolveu uma estratégia para minimizar a resposta inflamatória inicial, permitindo uma progressão ilimitada dentro do hospedeiro. Este trabalho reforça a importância de mais estudos sobre os componentes da saliva dos vetores das leishmanioses no processo de transmissão e no estabelecimento da infecção.

In vitro initial immune response against Leishmania amazonensis infection is characterized by an increased production of IL-10 and IL-13

The initial encounter of Leishmania with its host's immune system is important in the outcome of infection. Previous studies have shown that PBMCs from healthy volunteers (HV) exposed to Leishmania differ in IFN-γ production. We have expanded such observations evaluating the profile and kinetics of cytokines (IFN-γ, IL-12p70, IL-10, IL-13), chemokines (CCL5, CCL3, CCL4, CXCL10), and chemokine receptors (CCR1,CCR5, CXCR3, CCR4) in vitro L. amazonensis-stimulated of HV's PBMCs. HVs were divided in groups of high (HR) or low (LR) IFN-γ responders. In both groups, HR and LR, after L. amazonensis infection there was a predominance of IL-10 and IL-13 over IFN-γ production, while IL-12 was produced in similar amount. Regarding chemokines, a more striking difference was observed for CCL3 expression that was lower at 12 hours and 48 hours post infection in LR than in HR. Interestingly, a downregulation of CCR5 and a greater expression of CCR4 were found in low IFN-γ responders. These data suggest that early after L. amazonensis infection there is a cytokine milieu dominated by IL-13 and IL-10, and despite of this environment, IFN-γ is produced, supporting the complexity of the response. It is noteworthy that the pattern of immune response is mounted in first hours after Leishmania stimulation, with the definition of the differentiation of Th1 versus Th2 cells. It remains to be determined if such an in vitro difference has an in vivo counterpart in terms of susceptibility to infection.

Microepidemia de doença de Chagas aguda por transmissão oral no Ceará. / Microepidemics of acute Chagas' disease by oral transmission in Ceará.

No Brasil, em virtude das ações de controle, a transmissão vetorial da doença de Chagas foi reduzida. Por outro lado, vêm se destacando casos de transmissão por via oral. Esse trabalho relata a investigação de um surto de doença de Chagas aguda ocorrido no interior do Ceará no ano de 2006, cuja transmissão se deu provavelmente por via oral. O estudo foi realizado através de revisão de prontuários; entrevistas com pacientes, familiares e profissionais de saúde; achados laboratoriais e da investigação ambiental e entomológica. A microepidemia acometeu 8 integrantes de uma família que estiveram juntos nas férias do mês de janeiro de 2006. Duas mulheres e seis crianças, com idade variando entre 2 e 35 anos. Todos apresentaram quadro inicial de febre, cefaleia, náuseas, vômitos, mialgia e diarreia. Três semanas após o início dos sintomas apresentaram quadro de edema de membros inferiores e de face. Ao exame físico, além de edema, todos apresentaram hepatoesplenomegalia e linfoadenomegalia. O diagnóstico foi confirmado através da demonstração direta de amastigota em linfonodo, tecido muscular e medula. Anticorpos IgM contra Trypanosoma cruzi foram detectados em soro pelo método de hemaglutinação indireta. Todas as culturas para Trypanosoma cruzi foram positivas. A possível fonte de contaminação foi uma sopa à qual tinham sido adicionados coentro e cebolinha liquidificados, provenientes de uma horta domiciliar.

In Brazil, due to control actions, vectorial transmission of Chagas? disease has been largely reduced. On the other hand, oral transmission cases are showing up. This work reports the investigation of an outbreak of acute Chagas? disease in the inland of Ceará state in the year 2006 in which transmission occurred probably by oral route. This research was done through analysis of medical records, interviews with patients, their relatives and health professionals, laboratory data and environmental and entomological investigation. The microepidemics hit eight members of a family that were together on vacations in January 2006: two women and six children, ages ranging from 2 to 35 years. All of them shown initial clinical manifestations of headache, nausea, vomit, myalgia and diarrhea. Three weeks after these initial symptoms they shown edema of the lower limbs and face. Under clinical examination, besides edema, all of them shown hepatosplenomegaly and lymphadenomegaly. Diagnostic was confirmed by direct visualization of amastigota forms in lymph nodes, muscular tissue and bone marrow. IgM antibodies against Trypanosoma cruzi were detected on the serum by indirect hemagglutination assay. All cultures for Trypanosoma cruzi were positive. The probable contamination source was a stew into which liquid coriander and scallion from an orchard were added.

Avaliação da dosagem de interleucina-5 e imunoglobulina e em pacientes com giardíase com ou sem eosinofilia / Evaluation of dosage of interleucina-5 and immunoglobulin e in patients with giardíase with or without eosinophilia

Giardíase é uma protozoose intestinal causada por Giardia lamblia. A eosinofilia (>500/mm3) nas parasitoses é geralmente encontrada nas infecções por nematódeos e raramente é referida na literatura em relação à infecção por G. lamblia. Este estudo foi desenhado a fim de determinar a relação entre IL-5 e presença de eosinofilia em crianças e adolescentes com giardíase. Foram selecionadas 38 crianças e adolescentes na faixa etária de 0-18 anos portando exclusivamente G. lamblia e 32 crianças e adolescentes com giardíase. Foram selecionadas 38 crianças e adolescentes. Foram excluídas nesta fase do projeto pacientes portadoras de outros parasitas. No momento da entrega do material fecal era coletado sangue para a realização do hemograma, dosagem da IgE e IL-5. A casuística foi dividida em 3 grupos. Grupo 1: portadores de giardíase e eosinofilia (N:20), Grupo 2: portadores de giardíase sem eosinofilia (N:18) e Grupo 3: pacientes com ausência de parasitose (N:32). Resultados: Nos casos de giardíase, 52.6 apresentaram eosinofilia. Grupo 1: 100.

Cepas de leishmania braziliensis com perfis genômicos diversos induzem processos inflamatórios diferentes em camundongos balb/c / Leishmania braziliensis isolates differing in their genomic profiles induce different inflammatory processes in balb/c mice

Dois artigos científicos resumem o estudo. No 1º é mostrado que duas cepas de L. braziliensis, isoladas de pacientes de diferentes Estados (Ceará e Bahia), são geneticamente diferentes e apresentam processos patológicos distintos em camundongos BALB/c. No 2º trabalho é demonstrada uma correlação entre padrões de expressão de quimiocinas, induzidas por estas 2 cepas de L. braziliensis,com a formação de lesão e a atração de leucócitos para o sítio inflamatório. O 3º trabalho é uma revisão sobre o papel das quimiocinas e receptores de quimiocinas nas interações parasito-hospedeiro em leishmaniose (...) Os principais achados são: 1. A L. braziliensis H3227 do Ceará apresentou genótipo diferente da L. braziliensis BA788 da Bahia (...) 2.A cepa H3227 levou ao desenvolvimento de lesões pequenas que se resolveram (...) 3. Em ambos os grupos de camundongos, a carga parasitária não deferiu (...) no sítio de infecção e começou a reduzir com 30 dias de infecção. Nos linfonodos drenantes (...) o nº de parasitos aumentou durante o decorrer do estudo. 4. Após a inoculação do parasito, a cepa BA788 pareceu ativar mais precocemente uma resposta mais intensa tipo Th1 (...) 5.Numa fase mais tardia, camundongos infectados com H3227 produziram mais IL-12p70 e IL-10 no sobrenadante de células recuperadas dos linfonodos (...) 6. As maiores lesões causadas por H3227, em camundongos BALB/c, foi diretamente correlacionada com o aumento progressivo da reação inflamatória (...) 7. A expressão mais precoce e intensa das quimiocinas CCL2/MCP-1, CCL3/MIP-1ª, CXCL1/KC, CCL11/eotaxina, XCL1/linfotactina e dos seus respectivos receptores correlacionou-se como maior influxo de leucócitos para as lesões induzidas por H3227 e com o aumento do processo inflamatório observado nos camundongos infectados com esta cepa, após 15 dias de infecção. 8.As diferenças observadas no processo inflamatório estavam correlacionadas com a virulência do parasito, uma vez que a cepa mais patogência H3227 mostrou-se um retrucador mais potente de todas as células observadas no sistema do bolsão inflamatório, do que a menos patogênica BA788 (...) os achados indicam que 2 cepas de L. braziliensis geneticamente diferentes (...) podem estabelecer processos patológicos distintos e induzir expressão de quimiocinas em diferentes tempos e/ou intensidades, levando ao recrutamento diverso de células e respostas inflamatórias diferenciadas que poderiam finalmente estar envolvidas em diferentes apresentações da doença.

Effect of Lutzomyia whitmani (Diptera: Psychodidae) salivary gland lysates on Leishmania (Viannia) braziliensis infection in BALB/c mice

Previous reports showed that Lutzomyia longipalpis saliva exacerbate Leishmania braziliensis infection in mice. The sand fly Lu. whitmani is one of the vectors of L. (Viannia) braziliensis (LVb), a causative agent of cutaneous leishmaniasis in the State of Ceará, Brazil. To determine whether saliva of Lu. whitmani could increase the infectivity of LVb in mice, we inoculated groups of BALB/c mice with LVb promastigotes in the presence or absence of the salivary glands lysate from Lu. whitmani. We found that coinjection with Lu. whitmani saliva increased size but not longevity of cutaneous LVb lesions in BALB/c mice, since the formed lesions gradually resolved. The mechanism(s) by which Lu. whitmani saliva might exacerbate LVb infection in BALB/c mice is speculated