Effects of immunization with Streptococcus mutans surface antigens in auto-reactivity of BALB/c mice/ Efeitos da imunização com antígenos de superfície de Streptococcus mutans naauto-reatividade de camundongos BALB/c mice

BALB c mice were hiperimmunized with surface antigens of Streptococcus mutans, GS5 strain. The immunization increased significantly anti-heart and anti-myosin IgG, free and present in immunecomplexes. In Western-blotting, the autoantibodies displayed a notable reactivity with cardiac myosin and cardiac tissue proteins, mainly with a 35 kDapeptide. The histological analysis of hearts demonstrated absence of significant damage in valves and myocardium, and immunohistochemistry showed absence of antibodies linked in cardiac tissue. The treatment with cyclophosphamide was able to reduce autoantibody levels but did not alter de histological aspect of heart. These findings demonstrated that surface antigens S. mutans, GS5 strain, were able to induce autoantibody synthesis without potential to initiate cardiac damage.

Camundongos BALB/c foram hiperimunizados com antígenos de superfície de Streptococcus mutans, cepa GS5. Observamos que a imunização elevou significativamente os níveis de IgGs anticoração e antimiosina livres e presentes em imunocomplexos. No Western-blotting, estes auto-anticorpos reagiam com miosina cardíaca e principamente umabanda de 35 kDa do extrato cardíaco. A análise histológica dos corações demonstrou ausência de alterações significativas nas válvulas ou miocárdio. Também não foram encontrados anticorpos ligados ao tecido cardíaco. O tratamento com ciclofosfamida foi capaz de reduzir os níveis de auto-anticorpos, não alterando porém o aspecto histológico do coração. Os resultados deste trabalho mostraram que os antígenos de superfície desta cepa de S. mutans não foram capazes deiniciar uma lesão cardíaca em camundongos BALB/c, embora elevassem consideravelmente o nível de anticorpos livres e ligados em imunocomplexos para coração e miosina.

Estudo do anticorpo monoclonal 56G anti-Streptococcus mutans: papel na prevenção e colonização da superfície de corpos de prova confeccionados com resina composta / Evaluation of a 56G Anti - Streptococcus mutans monoclonal antibody: role in the prevention of colonization on surface of composite resin

Neste trabalho foi realizada uma análise, in vitro, da capacidade do anticorpo monoclonal (Acmo) 56G anti-Streptococcus mutans de impedir ou interferir na aderência e colonização de S.mutans (cepa GS5) à superfície de corpos de prova confeccionados com Resina Composta Híbrida TPH (Dentsply). Vinte corpos de prova foram preparados, desinfetados com gluconato de clorexidina ou esterilizados por radiação gama com cobalto 60 e incubados em tubos de ensaio contendomeio sacarosado e um inóculo de S. mutans. Metade dos corpos de prova constituiu o grupo tratado e, por isso,recebeu uma alíquota do Acmo; a outra metade destinou-se ao grupo controle. As películas bacterianas aderidas sobre as pastilhas de resina dos grupos tratado e controle foram quantificadas e comparadas através da dosagem de carboidratos e proteínas presentes nas mesmas, além da determinação do número de UFC/ml. Verificou-se que não havia diferença entre a desinfecção com clorexidina e a esterilização por radiação gama, e que o biofilme bacteriano formado na presença doAcmo não diferia daquele formado na sua ausência, tanto nas dosagens de carboidratos e proteínas (p=0,577 e p=0,705, respectivamente) quanto na microbiológica (p=0,488). Conclui-se que o Acmo 56G não foi efetivo na prevenção da colonização da superfície dos corpos de prova confeccionados em resina pelo S. mutans.

Immunization of Balb/c mice with modified auto-antigens for induction of autoimmune sialoadenitis

Sjögren's syndrome is an autoimmune disease characterized by sialoadenitis and elevated titers of autoantibodies. To assess whether it is possible to induce inflammatory changes in salivary gland tissues, a series of immunizations in Balb/c mice have been undertaken, using salivary gland extract, modified or not, added to several adjuvants. Mice's humoral immune response to salivary gland antigens was monitored by ELISA. Inflammatory cells infiltrating gland tissue were seen 3 months after immunization with salivary gland extract modified with pepsin (AgGp) and metaperiodate (AgGMp). Although pathological progression was not observed, the histopathological picture was similar to the initial phase of Sjõgren's syndrome. In addition, a monoclonal antibody reactive with 3 gland polypeptides and anhydrase carbonic II was rescued among B cells from immunized mice. Thus, immunizations with modified autoantigens were able to initiate pathological damage to glandular tissue and stimulate the proliferation of auto-reactive B cells.

A Síndrome de Sjögren é uma doença auto-imune caracterizada por desenvolvimento de sialoadenite e títulos elevados de auto-anticorpos. Com o objetivo de induzir alterações inflamatórias no tecido das glândulas salivares foram realizadas várias imunizações em camundongos BALB/c utilizando extratos de glândulas salivares, modificados ou não, em vários adjuvantes. A resposta humoral para antígenos salivares foi monitorada por ELISA. Células inflamatórias infiltrando o tecido glandular foram vistas 3 meses pós-imunização com extrato de glândula salivar modificado com pepsina (AgGp) e metaperiodato (AgGMp). Embora a evolução patológica não tenha sido observada, o quadro histopatológico foi semelhante à fase inicial da Síndrome de Sjõgren. Também foi possível notar, a partir das células B dos animais imunizados, a produção de anticorpos monoclonais reativos com 3 polipeptídeos glandulares e anidrase carbônica II. Assim, a imunização com auto-antígenos glandulares modificados foi capaz de iniciar o processo patológico no tecido glandular e induzir a proliferação de células B produtoras de auto-anticorpos.

Efeito do anticorpo monoclonal 56G sobre o crescimento de Streptococcus mutans em caldo e no acúmulo de placa bacteriana in vitro / Effect of monoclonal antibodies 56G on the growth of Streptococcus mutans in broth and

O anticorpo monoclonal (Acmo) anti-Streptococcus mutans 56G foi analisado quanto ao efeito na aderência e crescimento da placa bacteriana in vitro, e quanto ao crescimento em caldo e no comprimento da cadeia do estreptococo. O Acmo foi purifi cado em proteína A - Sepharose e testado em ELISA frente a quatro cepas de S. mutans (ATCC 35668, SP, GS5, CD28A). O Acmo reconheceu com maior intensidade a cepa GS5. As placas bacterianas formadas in vitro na presença do Acmo apresentou menos carboidrato total (polissacarídeo extracelular) que o grupo controle e essa diferença foi signifi cante (p>0,001). A placa bacteriana do grupo tratado, formada sobre uma lamínula de vidro, era diferente da placa controle e apresentava agregados menores que cobriam a lamínula quase completamente. O Acmo 56G não infl uenciou o crescimento bacteriano, nem o comprimento da cadeia de S. mutans.Os resultados desse trabalho sugerem que o Acmo testado deve reconhecer a glicosiltransferase (GTF) de S. mutans presente na superfície bacteriana, interferindo na síntese de glucano por essa enzima.

Production of monoclonal antibodies against Streptococcus mutans antigens

Several studies have been conducted in the last decades aiming to obtain an anti-caries vaccine, however some studies have demonstrated cross reactivity between Streptococcus mutans surface antigens and the human cardiac tissue. In this work, the reactivity of five anti-Streptococcus mutans monoclonal antibodies (MoAb) (24A, 56G, C8, E8 and F6) was tested against oral streptococci, cardiac antigens and skeletal and cardiac myosins, aiming to evaluate the specificity of these MoAb. The hybrid producers of immunoglobulins of the IgG2b class were cloned by limit dilution and expanded in vivo. MoAb were tested by ELISA. The hybrid 24A reacted with S. mutans CCT 1910, S. salivarius CCT 0365 and S. pyogenes T23. No reactivity difference was observed among the tested species. Cross reactivity with heart and cardiac myosin was not confirmed and only reaction with myosin of skeletal muscle was observed (p = 0.0381). The hybrid 56G reacted with all the tested microorganisms and there was statistically significant difference between S. mutans and S. pyogenes T23 (p < 0.001). This hybrid also reacted with myosin of skeletal muscle (p = 0.0095). C8, E8 and F6 presented low reactivity against oral streptococci strains and no reactivity against cardiac antigens. The data of this study showed that the 24A and 56G anti-S. mutans MoAb presented reactivity with S. pyogenes and S. salivarius, reinforcing the occurrence of common antigens between these species. The tested MoAb presented low cross-reactivity with myosin of skeletal muscle, but anti-heart activity could not be confirmed.

Diversos estudos foram realizados nas últimas décadas com o intuito de se obter uma vacina anticárie dentária, mas alguns trabalhos têm demonstrado reatividade cruzada entre antígenos de superfície de Streptococcus mutans e tecido cardíaco humano. Neste trabalho, foi testada a reatividade de cinco anticorpos monoclonais (AcMo) anti-Streptococcus mutans (24A, 56G, C8, E8 e F6) contra estreptococos orais, antígenos cardíacos e miosinas esquelética e cardíaca, no intuito de avaliar a especificidade desses AcMo. Os híbridos produtores de imunoglobulinas da classe IgG2b foram clonados por diluição limite e expandidos in vivo. Os AcMo foram testados por ELISA. O híbrido 24A reagiu com S. mutans CCT 1910, S. salivarius CCT 0365 e S. pyogenes T23. Nenhuma diferença de reatividade foi detectada entre as espécies analisadas. Reatividade cruzada com coração e miosina cardíaca não foi confirmada, existindo somente reação com miosina de músculo esquelético (p = 0,0381). O híbrido 56G reagiu com todos os microrganismos testados e houve diferença estatisticamente significante entre S. mutans e S. pyogenes T23 (p < 0,001). Este híbrido também reagiu com miosina de músculo esquelético (p = 0,0095). C8, E8 e F6 apresentaram baixa reatividade contra cepas de estreptococos orais e nenhuma reatividade com antígenos cardíacos. Os dados deste trabalho demonstraram que os AcMo 24A e 56G anti-S. mutans reagiram com S. pyogenes e S. salivarius, confirmando a existência de antígenos comuns entre essas espécies. Esses AcMo avaliados apresentaram baixa reatividade cruzada com miosina de músculo esquelético, porém a atividade anticoração não foi confirmada.

Estudo da interação entre anticorpos monoclonais anti-Streptococcus mutans e / Evaluation of the interactions between anti-Streptococcus mutans monoclonal antibodies and oral streptococci antigens

Nesse trabalho estudou-se a reatividade de dois anticorpos monoclonais (Acmo) anti-Streptococcus mutans (24A e 56G) desenvolvidos no Laboratório de Imunologia da Faculdade de Odontologia de São José dos Campos-UNESP, frente às cepas de estreptococos orais (S. salivarius, S. mutans e S. pyogenes) pelo ELISA e Western blot. Estes anticorpos eram da classe IgG2b e foram purificados em proteína A. O Acmo 56G mostrou ser o mais reativo com S. mutans. Testado no Western Blot (WB) com o antígeno citoplasmático (AgC) de S.mutans, 56G marcou uma única banda de 53kDa. Com o antígeno de superfície (AgSu) e com células inteiras dos microrganismos estudados, 56G reagiu com componentes de pesos moleculares mais elevados como 116 e 155 kDa. Foi detectada reatividade cruzada do Acmo 56G, no WB, com outros estreptococos orais (S. pyogenes, S. salivarius, S. sobrinus), constatando o compartilhamento de antígenos entre as espécies testadas, o que pode ser um fator importante no desenvolvimento de doenças, como a febre reumática.

Anticorpos para colágeno tipos I, II, IV e laminina na periodontite crônica / Antibodies for collagen types I, II, IV and laminin in chronic periodontitis

O objetivo deste estudo foi analisar anticorpos IgG para colágenos tipos I, II, IV e laminina, presentes em indivíduos clinicamente saudáveis e em pacientes com periodontite crônica. Detectaram-se os anticorpos por ELISA, em amostras do fluido gengival, coletados com cones de papel absorvente, comumente usados em endodontia. Os resultados mostraram níveis significativamente maiores desses anticorpos em sítios doentes do que em sítios saudáveis (p < 0,01 por cento). As maiores reatividades foram observadas para laminina e colágeno tipo IV, que poderiam ser sugeridos como marcadores de doença periodontal

Análise de anticorpos IgG e IgA anti-streptococcus mutans na gengivite em crianças / Anti-Streptococcus mutans IgG and IgA analysis in children with or without gingivitis

Streptococcus mutans tem sido fortemente implicado como um dos agentes causadores da cárie dentária, sendo freqüentemente isolado da placa dentária humana. Neste estudo, examinamos a reatividade dos anticorpos IgG e IgA anti-S.mutans em amostras de fluido gengival de crianças com e sem gengivite, a fim de medir a participaçäo deste microrganismo na reaçäo inflamatória envolvendo os tecidos gengivais. Nossos achados mostraram um nível aumentado de IgG anti-S.mutans no fluido gengival de crianças com gengivite

Anticorpos específicos anti-Streptococcus mutans na cárie dentária / Streptococcus mutans especific antibodies in dental carie

Neste trabalho, usando ELISA e DOT-BLOT os autores analisaram os níveis séricos e salivares de IgG e IgA para antígenos solúveis e de superfície de Streptococcus mutans. Três grupos de indivíduos foram analisados: a)Sem lesäo de cárie (n=10); b)Com lesäo de cárie (n=10) e c)Com cárie tratada (n=9). Indivíduos sem lesäo de cárie apresentavam títulos mais altos de IgA na saliva para antígenos solúveis de S.mutans. Anticorpos para antígenos de superfície foram detectados pelo DOT-BLOT na fraçäo IgG sérica e, seus níveis eram mais elevados nos indivíduos com lesäo de cárie

IgA anti-streptococcus mutans em crianças com e sem cárie dentária / Anti-streptococcus mutans IgA in children with and without dental caries

A cárie dentária é uma doença infecciosa crônica que necessita pelo menos quatro componentes para desenvolver-se: hospedeiro suscetível, microbiota patogênica, dieta rica em sacarose e tempo. Este trabalho estuda as correlaçöes existentes entre estreptococos salivares do grupo mutans, placa bacteriana e anticorpos IgA anti-Streptococcus mutans em crianças com e sem experiência de cárie. Para tanto, utilizou-se o meio Mitis Salivarius (DIFCO) para determinar o número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC/ml), o Indice de Higiene Oral Simplificado (IHOS) para mensurar a quantidade de placa bacteriana e a técnica ELISA para detectar anticorpos anti-S. mutans. Os resultados obtidos mostraram que näo existe uma correlaçäo entre os níveis salivares de estreptococos (UFC/ml) e IgA anti-S. mutans na populaçäo estudada. No grupo com cárie, uma correlaçäo positiva, estatisticamente, foi observada entre o Indice de placa e IgA específica

Auto-anticorpos naturais em pacientes com e sem doença periodontal / Autoantibodies in healthy and periodontal diseased subjects

Foi analisada a resposta de auto-anticorpo natural do fluido gengival de indivíduos com o periodonto saudável e com periodontite. Pesquisaram-se duas diferentes especificidades: antitransferrina e antifibronectina. Os resultados mostraram que os níveis de auto-anticorpos para as duas proteínas estavam elevados na maioria dos indivíduos com doença periodontal quando comparados aos controles, principalmente com relaçäo à fibronectina

Avaliaçäo microbiológica da cavidade anoftálmica e de próteses oculares acrílicas / Bacteriological evaluation of anophthalmic socket and the ocular prosthesis surface

Pacientes portadores de prótese ocular estäo sujeitos a inflamaçöes, infecçöes e traumas, sendo que modificaçöes fisiológicas e morfológicas da cavidade anoftálmica, bem como o uso de próteses inadequadas, podem predispor a esses quadros. A perda do brilho e da lisura superficial da prótese pode levar a uma reduçäo na mobilidade da prótese ocular e acúmulo de secreçäo, gerando desconforto ao paciente. O objetivo deste trabalho foi avaliar a microbiota bacteriana e fúngica das secreçöes encontradas nas cavidades anoftálmicas e na superfície das próteses oculares de acrílico, como também avaliar a sensibilidade das cepas bacterianas isoladas, a diferentes antibióticos

Estudo comparativo da açäo antibacteriana in vitro de materiais restauradores e forradores: cimentos de ionômero de vidro, resinas e compômeros / In vitro comparative study on inhibitory capability of bacterial growth of restorative and lining materials: glass ionomer cements, compomers and composites

Quatro cimentos de ionômero, uma resina composta e dois compômeros: Vidrion N, Vidrion R, Viotremer, Fuji II LC, Tetric Ceram, Dyract e Compoglass foram analisados quanto à sua capacidade de inibiçäo de crescimento bacteriano. Essa capacidade foi avaliada medindo-se o halo de inibiçäo observado no meio de cultura. Para a realizaçäo dos testes, utilizaram-se cinco espécimes bacterianas encontradas na microbiota bucal humana: Streptococos mutans; Streptococcus salivarius; Streptococcus pyogenes; Stafilococcus aureus e Streptococcus sobrinus. Dos materiais analisados, somente o Vitremer apresentou atividade inibidora de crescimento bacteriano contra os microrganismos testados

Presença de leveduras do gênero Candida na saliva de pacientes com diferentes fatores predisponentes e de indivíduos controle / Presence of Candida genus yeasts in the saliva of patients with different predisposing factors and of control individuals

Os microrganismos do gênero Candida säo, em geral, comensais da cavidade bucal, mas, em determinados indivíduos e em situaçöes específicas, podem transformar-se na forma parasitária, produzindo candidoses bucais. O objetivo deste trabalho foi analisar a presença das espécies do gênero Candida na saliva de indivíduos controle, comparando com pacientes que apresentavam diferentes fatores predisponentes. Foram avaliados 493 pacientes, divididos em 7 grupos: prótese total, prótese parcial removível, periodontite crônica de adulto, respiraçäo bucal, aparelho ortodôntico fixo, aparelho ortodôntico removível e aparelho extrabucal. O grupo controle consistiu de 570 indivíduos que näo apresentavam nenhum desses fatores, divididos em 2 grupos: infantil e adulto. Foram realizados o isolamento e a identificaçäo das espécies do gênero Candida. Os resultados mostraram maior porcentagem de pacientes positivos para Candida nos grupos com fatores predisponentes em relaçäo aos controles. Houve predominância de isolamento de C. albicans em todos os grupos, porém, os pacientes com fatores predisponentes apresentaram diversidade maior de espécies

Influência da síndrome do respirador bucal na presença de Estreptococos do grupo mutans e imunoglobulinas anti-streptococcus mutans na saliva / Influence of mouthbreathing syndrome in the presence of mutans group streptococci and immunoglobulins against Streptococcus mutans in saliva

A síndrome do respirador bucal (SRB) acarreta alteraçöes no meio bucal e na microbiota, produzindo possível seleçäo de bactérias cariogênicas, o que poderá aumentar a suscetibilidade à cárie. O objetivo deste trabalho foi comparar o fluxo salivar, a presença de estreptococos do grupo mutans e os níveis de imunoglobulinas anti-Streptococcus mutans na saliva de pacientes com SRB e crianças normais. Utilizaram-se trinta crianças controle e trinta com SRB, nas quais foram realizadas avaliaçöes do fluxo salivar e contagens de estreptococos do grupo mutans, sendo atribuídos escores para as diferentes interpretaçöes destes testes. Foi realizada também a quantificaçäo de imunoglobulinas anti-Streptococcus mutans (IgA, IgC e IgM), por meio da técnica ELISA. A média da soma de escores nas contagens de estreptococos do grupo mutans para os respiradores bucais foi maior e significativa em relaçäo aos controles. O grupo respirador bucal apresentou média de fluxo salivar superior, porém sem significância estatística em relaçäo aos controles. A quantidade de IgA e IgM anti-Streptococcus mutans foi menor no grupo respirador bucal

Testes de atividade de cárie: avaliação de diferentes métodos / Tests for caries activities: evaluation of different methodos

O conhecimento do risco de cárie de um indivíduo ou população é extremamente importante para o clínico ou em Saúde Pública, pois medidas preventivas mais intensas poderiam se concentrar apenas em indivíduos de alto risco, diminuindo o custo e aumentando a eficiência dos programas de prevenção. Assim, vários testes microbiológicos para avaliar a atividade de cárie foram propostos, buscando alcançar a praticidade e o baixo custo necessário para o uso clínico. O objetivo deste trabalho foi comparar alguns dos métodos mais utilizados na contagem de Estreptococos do grupo "mutans" e Lactobacilos; e na determinação da capacidade tampão da saliva. Foram utilizados 10 pacientes sem lesões de cárie evidentes, nos quais foram realizados os seguintes testes: contagem de Estreptococos de grupo "mutans" através dos métodos convencional, imersão da lâmina, micrométodo e espátula/língua; contagem de Lactobacilos através dos métodos tradicional, imersão da lâmina e micrométodo; e, capacidade tampão através do método convencional e uso de fitas e soluções indicadoras de pH. Os autores concluem que todos os métodos testados apresentam validade na determinação da atividade de cárie, variando sua indicação de acordo com a precisão nos resultados e a facilidade de execução

Descontaminaçäo da água de equipos odontológicos através de antisséptico / Water contamination of the odontlogic equipments using antisepsis

A contagem de bactérias heterotróficas da água fornece uma visäo da condiçäo de contaminaçäo microbiana nesse ambiente. Os reservatórios de água dos equipos odontológicos, podem possuir número elevado de microrganismos, devido à dificuldade de higienizaçäo interna dos mesmos. Com o objetivo de eliminar este problema, testou-se um antisséptico à base de cloramina em 10 equipos odontológicos, pelo período de 28 dias. Observou-se que inicialmente todos os equipos possuíam água com elevado número de bactérias heterotróficas e que estas foram eliminadas após adiçäo do referido produto. Testou-se também a açäo do antisséptico em bochechos, observando-se reduçäo em 10 vezes do número de bactérias aeróbias e anaeróbias da saliva. Em testes de sensibilidade cutânea, näo se observou nenhuma reaçäo adversa

Emprego da imunofluorescência direta no diagnóstico da paracoccidioidomicose / Direct immnunoflurescence as a diagnostic method of oral paracoccidioidomycosis

A técnica de imunofluorescência direta foi utilizada em pacientes portadores de lesöes bucais de paracoccidioidomicose para avaliaçäo de sua utilidade. O estudo demonstrou que a técnica utilizada constitui um método de diagnóstico confiável, além de revelar alguns aspectos da distribuiçäo do fungo nos tecidos infectados e da patogênese dessa micose em particular

Influência dos antígenos do sistema ABO(H) na saliva sobre a presença do gênero cândida na cavidade bucal / The influence of ABO(H) system antigens on the presence of the candida genus in the oral cavity

A secreçäo dos antígenos dos grupos sanguíneos ABO na saliva está associada ao estado de portador de Cândida na cavidade bucal e às candidoses. O objetivo deste estudo foi correlacionar a secreçäo ou näo dos antígenos do sistema ABO(H) na saliva com a presença do gênero Cândida na cavidade bucal. Apesar do pequeno número de pacientes näo secretores (5,44 por cento) encontrados na populaçäo estudada, o percentual de isolamento de leveduras foi maior nesses pacientes (72,22 por cento). A espécie mais encontrada nos dois grupos foi C. Albicans, seguida por C. Tropicalis e C. Glabrata. Nossos resultados sugerem, portanto, que os antígenos ABH secretados na saliva interferem na presença de leveduras do gênero Cândida na cavidade bucal, podendo atuar como fator de predisposiçäo às candidoses