Factors influencing electroporation-mediated gene transfer to Stylosanthes guianensis (Aubl.) Sw. protoplasts

In order to develop a high-efficiency and reproducible transformation protocol for Stylosanthes guianensis we assessed the biological and physical parameters affecting plant electroporation protoplasts. Energy input, as combinations of electric field strengths discharged by different capacitors, electroporation buffer and DNA form were evaluated. Transformation efficiency was assayed in vivo as transient reporter gene expression, using the GFP-coding gene mgfp5 driven by a CaMV 35S constitutive promoter. Energy input and electric field strength had a critical influence on transgene expression with higher transformation levels being achieved with 250 V.cm-1 discharged by 900 and 1000 muF capacitors. Linear plasmid DNA, the absence of chloride and the presence of calcium ions also increased transient gene expression, albeit not significantly

Trombose em artérias coronárias normais causando infarto agudo do miocárdio em pacientes alcoólatra / Thrombosis in normal coronary arteries causing acute myocardial infarction in an alcoholic patient

Paciente jovem, etilista, que sofreu infarto agudo do miocárdio. Após terapêutica trombolítica sem sucesso, a cineangiocoronariografia na fase aguda evidenciava trombos em múltiplas artérias. Um 2§ CATE, realizado no 7§ dia de internação revelou coronárias normais. Não havia nenhum distúrbio do metabolismo lipídico, assim como outro fator de risco de doença arterial coronária, a não ser o fato de ser tabagista de oito a 10 cigarros ao dia, há dois anos, o que nos levou a acreditar que o abuso de álcool etílico possa ter contribuído para esse evento.

Imunogenicidade de hemoglobina de Balistes vetula. / Immunogenicity of hemoglobin of Balistes vetula

Com o objetivo de obter soro anti-hemoglobina de peixe marinho, hemolisado de eritrocitos da especie Balistes vetula foi preparado e inoculado em carneiros. Esse hemolisado, na eletroferose em gel de poliacrilicamida e em acetato de celulose, sempre apresentou existencia de um unico componente hemoglobinico. O esquema de imunizacao utilizado constou de injecoes quinzenais de 1 ml de uma emulsao preparada com adjuvante completo de Freund e solucao de hemoglobina na ordem de 10-3M em partes iguais (v/v). Os animais foram sangrados e o soro titulado por tecnica de imunodifusao dupla bi-dimensional.A especificidade dos soros em diferentes tempos de imunizacao foi testada usando hemoglobina de outras especies. Apos 12 meses de inoculacao foi obtido um soro de baixa especificidade capaz de reconhecer hemoglobinas de varias especies de peixes e hemoglobina de anfibio. Os resultados foram discutidos em funcao da capacidade apresentada pela hemoglobina de induzir a formacao de anticorpos bem como a diminuicao de sua especificidade com o decorrer do processo de imunizacao