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Article in Chinese | WPRIM | ID: wpr-965593

ABSTRACT

@#[摘 要] 目的:探讨hsa_circ_0140180在食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞中的表达水平及对其细胞恶性生物学行为的影响与分子机制。方法:收集2018年11月至2019年3月间在南充市中心医院胸心外科手术切除的6对ESCC组织和对应癌旁组织并进行全转录组测序,筛选出在ESCC组织中低表达的hsa_circ_0140180;建立过表达hsa_circ_0140180的TE-1和KYSE30细胞,qPCR法检测hsa_circ_0140180在人正常食管上皮细胞、ESCC细胞中的表达,以及过表达hsa_circ_0140180后TE-1和KYSE30细胞中miR-1287-5p的表达;CCK-8法和FCM检测过表达hsa_circ_0140180对TE-1和KYSE30细胞增殖和周期的影响;划痕实验和Transwell实验检测过表达hsa_circ_0140180对TE-1和KYSE30细胞迁移和侵袭能力的影响,双荧光素酶报告实验验证hsa_circ_0140180与miR-1287-5p的靶向关系。WB法检测过表达hsa_circ_0140180对TE-1和KYSE30细胞中EMT相关蛋白的表达及PI3K-Akt通路的磷酸化水平的影响。结果:转录组测序和qPCR结果显示,hsa_circ_0140180在ESCC组织和细胞中呈低表达(P<0.05或P<0.01),并确认其闭合环状分子特征且定位于细胞质。过表达hsa_circ_0140180能明显抑制ESCC细胞的迁移及侵袭能力(P<0.05),但不影响其增殖和周期。双荧光素酶报告基因实验证实hsa_circ_0140180靶向结合miR-1287-5并负调控其表达(P<0.01)。过表达hsa_circ_0140180能显著上调TE-1和KYSE30细胞中E-cadherin的表达((P<0.05),而显著下调Snail的表达(P<0.05)和PI3K-Akt通路的磷酸化水平(P<0.01或P<0.001)。结论:hsa_circ_0140180在ESCC细胞及组织中呈低表达,其可能通过调控miR-1287-5p表达来降低PI3K-Akt通路的磷酸化水平和抑制EMT进程,从而影响ESCC细胞的迁移及侵袭能力。

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