ABSTRACT
O presente trabalho teve como objetivo realizar uma análise comparativa das técnicas de Reação em Cadeia pela Polimerase(PCR) e Ensaio Imunoenzimático (ELISA SALVIA®) com o método microbiológico convencional para detecção e SalmonellaEnteritidis (SE), S. typhimurium (ST), S. gallinarum (SG) e S. pullorum (SP) em carne de frango. As amostras foram contaminadasartificialmente com diluições de 10-7, 10-8 e 10-9 para SE e ST e de 10-4, 10-5 e 10-6 para SG e SP, com cinco repetições decada diluição, totalizando 300 análises. Os testes foram realizados em cinco diferentes laboratórios para a validação dastécnicas. Na avaliação geral dos dados obtidos, a microbiologia convencional obteve 56,67% (170/300) de recuperação dasamostras contaminadas artificialmente, enquanto as técnicas de ELISA e PCR representaram 71% (213/300) e 75% (225/300), respectivamente. A análise dos resultados de detecção de Salmonella através dos testes ELISA e PCR, em relação aomicrobiológico convencional, apresentaram diferença estatística (p=0,0001, teste de MacNemar). Não houve diferença significativaentre os resultados da PCR e do ELISA. Os resultados alcançados demonstraram que, comparado ao microbiológicoconvencional, tanto o ELISA quanto a PCR foram eficazes para detecção dos sorovares de Salmonella nas amostras de carnede frango avaliadas.
ABSTRACT
Infectious laryngotracheitis virus (ILTV) cause mild to severe respiratory disease in chickens, the purpose of our study being to use Brazilian isolate of ILTV to reproduce ILTV disease in chickens by experimental infection and to compare three diagnostic methods (nested polymerase chain reaction (PCR), virus isolation, histopathology) for detection of ILTV. Forty-eight chickens intratracheally inoculated with ILTV and a further 48 with PBS, showing mild respiratory signs 48 hours post infection (PI) but no signs of infection after day 10 PI. Every 2 days PI, six birds were arbitrarily selected from the control and infected groups, sacrificed and the trachea collected. Both the nested PCR and virus isolation detected the virus from day 2 until day 12 PI. However, at day 12 PI, PCR detected ILTV DNA in 100% of the samples while the virus isolation method detected ILTV in only 33% of the samples. Tracheal histopathology showed intranuclear inclusion bodies on days 8 and 10 PI. The results indicate that the field-isolate of ILTV studied by us is of low pathogenicity and that our nested PCR protocol was able to detect positive samples over a longer infection period than many ILTV diagnostic test already described.
O vírus da laringotraqueíte (VLT) causa de leve a severa doença respiratório em galinhas, o propósito do nosso estudo foi usar um isolado brasileiro de VLT para reproduzir a doença em frangos através da infecção experimental e comparar três métodos de diagnóstico (nested PCR, isolamento viral e histopatologia) para detectar o VLT. Quarenta e oito frangos inoculados intratraquealmente com VLT e outros 48 com PBS, apresentaram sinais respiratórios leves 48 horas após a infecção (PI), mas nenhum sinal após o dia 10 PI. A cada dois dias, seis aves foram selecionados arbitrariamente do controle e do grupo infectado, sacrificados e as traquéias coletadas. Ambos nested PCR e isolamento viral detectaram o vírus do dia 2 até o dia 12 PI. No entanto, no dia 12 PI, a PCR detectou o DNA viral em 100% das amostras enquanto o isolamento viral detectou em somente 33% das amostras. Histopatologia da traquéia revelou corpúsculos de inclusão intranuclear nos dias 8 e 10 PI. Os resultados indicam que o VLT isolado de campo estudado é de baixa patogenicidade e que o protocolo de Nested PCR foi capaz de detectar amostras positivas por um período mais longo da infecção do que muitos testes de diagnósticos descritos.
ABSTRACT
The chicken anemia virus (CAV) is present in virtually every country investigated, Brazil including. The aim of this study was to determine what the difference in performance is between positive (progeny of breeders vaccinated or with natural infection) and negative broilers to the presence of antibodies against the CAV in currently intensive raising systems. As a result, it was observed that negative broilers were significantly heavier than positive broilers. Negative males had a final weight 5.43% higher than positive males. There was no significant difference among different treatments in relation to parameters as mortality and feeding conversion. These study indicated that the presence of antibodies against CAV in broilers - may it be through vaccination or natural infection of breeders - did not generate progeny with superior performance under the tested raising conditions.
O vírus da anemia das galinhas (CAV - "chicken anemia virus") está presente em praticamente todos os países investigados, inclusive no Brasil. O objetivo deste trabalho foi determinar qual a diferença de desempenho, comparando frangos positivos (progênie de matrizes vacinadas ou com infecção natural) com frangos negativos para a presença de anticorpos contra o CAV, no sistema atual de criação intensiva. Como resultado, foi observado que os frangos negativos foram significativamente mais pesados que os frangos positivos. Os machos negativos tiveram um peso final 5,43% superior ao dos machos positivos. Não houve diferença significativa entre os tratamentos em relação aos parâmetros de mortalidade e conversão alimentar. Este estudo indicou que a presença de anticorpos contra o CAV em frangos de corte, seja através da vacinação ou infecção natural das matrizes, não gerou uma progênie com melhor desempenho nas condições de criação testadas.
ABSTRACT
The presence of three virulence genes, invA, spvR, and spvC, was determined in Salmonella Enteritidis isolated from poultry, pigs, humans and food. All isolates were positive for the invA gene, with 91.2% being positive for spvR and 90.2% for spvC. There was no significant difference in the prevalence of the virulence genes between isolates from different sources. The results indicate that there is a putative high virulence potential for the S. Enteritidis isolates characterized.
A presença de três genes de virulência (invA, spvR e spvC) foi determinada em Salmonella Enteritidis isoladas de aves, suínos, humanos e alimentos. Todos os isolados foram positivos para o gene invA, 91,2% também foram positivos para o spvR e 90,2% para o spvC. Não existiu diferença significativa na prevalência dos genes de virulência entre isolados de diferentes origens. Os resultados indicaram que, provavelmente, exista um alto potencial de virulência nos isolados de S. Enteritidis caracterizados.