ABSTRACT
@#[摘 要] 目的：探究miR-133a-5p调控血清外泌体源性纤连蛋白1（fibronectin1，FN1）的表达对胃贲门腺癌（gastric cardia adenocarcinoma，GCA）细胞增殖、黏附和M1型巨噬细胞极化的影响。方法：借助GEO数据库分析GCA组织中的差异表达基因，进行功能富集分析。采用qPCR检测FN1在GCA组织、血清、血清外泌体和细胞中的表达。向GCA患者血清外泌体中转染FN1的过表达载体及其对照质粒，向HGC-27细胞中转染miR-133a-5p模拟物及其对照，将转染后的HGC-27细胞和外泌体共培养，再将此细胞与THP-1细胞共培养。采用CCK-8和细胞黏附实验分别检测各组HGC-27细胞的增殖和黏附情况，WB法、ELISA分别检测细胞中CD86、iNOS的水平以及对巨噬细胞分泌IL-6、IL-1β的影响。采用双荧光素酶报告基因实验验证FN1 mRNA和miR-133a-5p之间的相互作用关系。结果：与健康人对照组相比，GCA组织、血清、血清外泌体和细胞中的FN1表达水平显著上调（均P<0.05），FN1高表达的血清外泌体与GCA患者的TNM分期（P=0.032 9）和淋巴结转移有关联（P=0.012 7）。富含FN1的血清外泌体能够被GCA细胞内化，与过表达FN1的外泌体共培养能够提高HGC-27细胞的增殖和黏附能力，抑制THP-1细胞中IL-6、IL-1β、CD86和iNOS的表达，抑制M1型巨噬细胞极化（（P<0.05或P<0.01）。miR-133a-5p在GCA组织和细胞中较对照组显著降低，可负调控FN1的表达，过表达miR-133a-5p能够通过降低GCA细胞增殖和黏附能力，促进IL-6、IL-1β、CD86和iNOS的表达，部分逆转FN1对GCA细胞恶性行为的促进作用（P<0.05或P<0.01）。结论：miR-133a-5p可通过抑制血清外泌体分泌FN1对GCA细胞的恶性行为起抑制作用，对M1型巨噬细胞极化起促进作用。