Uso da citometria de fluxo no diagnóstico sorológico da COVID-19 / The use of flow cytometry for the serological diagnosis of COVID-19

A pandemia da COVID-19 tem tido um impacto devastador em todo o mundo e levou ao rápido desenvolvimento de testes diagnósticos. Diferentes tecnologias vêm sendo utilizadas para a detecção de imunoglobulinas frente à infecção por SARS-CoV-2. Ensaios imunoenzimáticos (ELISA), quimioluminescentes e imunocromatográficos estão disponíveis e, no geral, apresentam poder diagnóstico limitado, principalmente para a detecção de IgA. A citometria de fluxo tem surgido como alternativa para o desenvolvimento de métodos sensíveis e específicos para a COVID-19 aplicados para diagnóstico, triagem e estratificação da doença. A citometria de fluxo é uma tecnologia óptica baseada em laser que detecta características físico-químicas de células ou partículas em um fluido heterogêneo. O artigo explora a citometria de fluxo para o diagnóstico da COVID-19 em duas estratégias para a detecção de anticorpos no soro ou plasma, uma utilizando antígenos virais expressos na superfície de células de mamíferos e outra com estes elementos imobilizados em microesferas (beads). A possibilidade de detecção rápida de múltiplos anticorpos simultaneamente, com pequeno volume de amostra e elevada sensibilidade e especificidade, torna a citometria de fluxo uma metodologia promissora para o laboratório clínico, como ferramenta de referência para auxiliar na contenção do processo pandêmico da COVID-19 e futuros eventos similares.

The COVID-19 pandemic has had a devastating impact around the world and has led to the rapid development of diagnostic tests. Different technologies have been used to detect immunoglobulins produced against SARS-CoV-2 infection. Immunoenzymatic (ELISA), chemiluminescent and immunochromatographic assays are available and, in general, they have limited diagnostic accuracy, especially for the detection of IgA. Flow cytometry has emerged as an alternative for the development of sensitive and specific methods for COVID-19 applied for diagnosis, screening and stratification of the disease. Flow cytometry is a laser-based optical technology that detects physicochemical characteristics of cells or particles in a heterogeneous fluid. The article explores flow cytometry for the diagnosis of COVID-19 in two strategies for detecting antibodies in serum or plasma, the first one using viral antigens expressed on the surface of mammalian cells and the other one with these elements immobilized on microspheres (beads). The possibility of rapid detection of multiple antibodies simultaneously, with a small sample volume and high sensitivity and specificity, makes flow cytometry a promising methodology for the clinical laboratory, as a reference tool to help stop the COVID-19 pandemic process and similar future events.

Componentes químicos del aceite esencial de Ocotea paranaensis (Lauraceae) y sus propiedades antioxidantes, anticancer y antimicrobianas / Chemical constituents of Ocotea paranaensis (Lauraceae) essential oil and their antioxidant, anticancer and antimicrobial properties

La composición química del aceite esencial obtenido de las ramas de Ocotea paranaensis se estudió por cromatografía de gases/espectrometría de masas (CG/MS). Se identificaron veintisiete compuestos, que comprenden el 94,82% de los componentes totales. El aceite se caracterizó por una concentración relativamente alta de sesquiterpenos (62,96%), sesquiterpenos oxigenados (33,33%) y diterpeno (3,70%). En cuanto a los compuestos principales, se destacaron Z-nerolidol (19,16%), germacreno D (12,92%) y α-bulnesene (8,47%), que correspondieron al 40,55% de las sustancias encontradas. El aceite esencial analizado de Ocotea paranaensis tiene una buena acción reductora de fosfomolibdeno y es moderadamente tóxico para la Artemia salina (LC50 = 147,91 µg/mL). Mostró potencial hemolítico y actividad moderada contra Staphylococcus aureus (concentración inhibitoria mínima MIC = 250 µg/mL) y Pseudomonas aeruginosa (MIC = 500 µg/mL). No se observaron resultados satisfactorios de citotoxicidad en el linaje H460 y HeLa.

The chemical composition of the essential oil obtained from the branches of Ocotea paranaensis was studied by gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS). Twenty-seven compounds, comprising 94.82% of the total components, were identified. The oil showed relatively high concentration of sesquiterpenes (62.96%), oxygenated sesquiterpenes (33.33%), and diterpene (3.70%). Regarding the major compounds, Z-nerolidol (19.16%), germacrene D (12.92%) and α-bulnesene (8.47%) could be highlighted, which corresponded to 40.55% of the substances that were found. The essential oil from Ocotea paranaensis has phosphomolybdenum reducing action and is moderately toxic to the Artemia salina (LC50 = 147.91 µg/mL). It showed haemolytic potential and moderate activity against Staphylococcus aureus, (minimum inhibitory concentration MIC = 250 µg/mL) and Pseudomonas aeruginosa (MIC = 500 µg/mL). No satisfactory cytotoxicity results were observed in lineage H460 and HeLa.