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1.
Rev. cuba. farm ; 49(4)oct.-dic. 2015.
Article in Spanish | LILACS, CUMED | ID: lil-780743

ABSTRACT

Objetivo: comparar la actividad antimicrobiana de meropenem genérico y meropenem innovador, frente a cepas resistentes de interés clínico mediante la técnica de micro dilución. Método: se determinó la concentración mínima inhibitoria y la concentración máxima bactericida según el protocolo de micro dilución del Clinical and Laboratory Standars Institute. Resultado: se determinó una concentración mínima inhibitoria de 320 µg/mL y una concentración máxima bactericida de 640 µg/mL para Staphylococcus aureus con ambos antibióticos, Escherichia coli presentó una concentración mínima inhibitoria de 640 µg/mL y una concentración máxima bactericida de 1 280 µg/mL con los dos antibióticos y por último Klebsiella pneumoniae tuvo una concentración mínima inhibitoria de 5 120 µg/mL y una concentración máxima bactericida de 2 0480 µg/mL con ambos antibióticos. Conclusión: no existen diferencias significativas en las concentración máxima bactericida y la concentración mínima inhibitoria de meropenem genérico y meropenem innovador(AU)


Objective: To compare the antimicrobial activity of generic meropenem and innovative meropenem on resistant strains of clinical interest by using the microdilution technique. Method: The minimum inhibitory concentration and maximum bactericidal concentration were determined by the microdilution according to the protocol set by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Result: Minimum inhibitory concentration (MIC) of 320 µg / mL and a maximum bactericidal concentration (MBC) of 640 µg/mL for both antibiotics against Staphylococcus aureus. MIC reached 640 µg/mL and MBC of 1 280 µg/mL in both antibiotics for Escherichia coli whereas the MIC was 5 120 µg/mL and WBC of 20 480 µg /mL with both antibiotics against Klebsiella pneumoniae. Conclusion: No significant differences were observed in minimum inhibitory concentration and maximum bactericidal concentration between generic meropenem and innovative meropenem(AU)


Subject(s)
Humans , Pseudomonas Infections/drug therapy , Reference Drugs , Anti-Infective Agents/therapeutic use , Colombia
2.
Rev. cuba. farm ; 48(2)abr.-jun. 2014.
Article in Spanish | LILACS, CUMED | ID: lil-731959

ABSTRACT

Objetivo: establecer las condiciones de producción a nivel de laboratorio de la alfa toxina de Clostridium septicum IRP15 para la formulación de una vacuna veterinaria y la optimización del proceso de producción. Métodos: se caracterizó y estandarizó la edad apropiada del inóculo para los cultivos en un fermentador New Brunswick Scientific 7 L. Las condiciones de cultivo fueron: cepa C. septicum IRP15, medio de cultivo VBH, 5 L/vaso de 7 L, inóculo de 250 mL (5 por ciento), 37 ºC, 24 h, bajo agitaciones prueba de 0, 25 y 50 r.p.m. Se estableció el perfil cinético morfológico, de biomasa, consumo de sustrato y producción de toxina. Resultados: para las fermentaciones de 0 y 25 r.p.m. no se presentó fase de adaptación; el microorganismo creció de manera exponencial hasta las 4 y 6 h de fermentación, consumiendo simultáneamente la mayor cantidad de glucosa presente en el medio. A partir de estas horas y hasta las 24, se realizó la prueba de DL50 en ratones y se destaca que a 25 r.p.m. se obtuvo el mayor título de toxina (1/23). En las fermentaciones a 50 r.p.m. se observó que el microorganismo experimenta una fase de adaptación de 4 h aproximadamente; con un retardo en producción de biomasa, consumo de glucosa y producción de toxina, condición que no resulta óptima para la producción del antígeno. Conclusiones: la producción de toxina se presenta en la fase logarítmica y durante la fase estacionaria, asociándose así al crecimiento y al fenómeno de esporulación(AU)


Objective: to set the laboratory production conditions of Clostridium septicum IRP15 alpha toxin for the formulation of a veterinary vaccine and the optimization of the productive process. Methods: the appropriate inoculum age for the cultures was characterized and standardized in a 7L New Brunswick Scientific biorreactor. The conditions of culturing were C. septicum IRP15 strain, VBH medium at 5 L/7 L glass, 250 mL (5 percent) inoculum, 37 ºC, and 24 h under shaking conditions of 0, 25 y 50 r.p.m. The following kinetic parameters were monitored: morphological changes, biomass production, glucose consumption and toxin production. Results: for the shaking conditions at 0 and 25 r.p.m., C. septicum did not show an adaptation phase growth. The bacteria kept growing at the log phase up to 4-6 hours of fermentation respectively, thus consuming the highest amount of glucose from the medium. As from the growth phase hours till the 24 h of cultivation, the 50 percent lethal dose (LD50) in mice assay was conducted and at 25 r.p.m. condition, the best titre of toxin was reached (1/23). The cultures at 50 r.p.m. condition showed that the bacteria experienced adaptation phase for almost four hours, resulting in delayed biomass production, glucose consumption and toxin production. These results suggested that 50 r.p.m. is not useful for the antigen production. Conclusions : the toxin production occurred at the log phase and during the stationary phase, thus it is associated to growth and to sporulation(AU)


Subject(s)
Animals , Vaccines/therapeutic use , Clostridium/immunology , Clostridium Infections/veterinary , Laboratory Chemicals/therapeutic use , Colombia
3.
Rev. cuba. invest. bioméd ; 32(4): 445-456, oct.-dic. 2013.
Article in Spanish | LILACS-Express | LILACS | ID: lil-705697

ABSTRACT

Objetivo: se diseñó un medio de cultivo a base de peptonas vegetales para la producción de biomasa de Clostridium chauvoei. Métodos: se seleccionaron nueve peptonas vegetales y dos caldos con peptona vegetal para sustituir la peptona de origen animal en el medio Clostridium modificado. Se desarrolló una fermentación relacionada con la producción de masa celular, verificando la absorbancia y el porcentaje de transmitancia (%T), la segunda etapa involucró los ensayos de patogenicidad, determinando el titulo de DL50. Resultados: las peptonas vegetales 1-B, 8-M, 10-M, 11-M fueron seleccionadas por presentar un % T cercano al del medio Clostridium modificado. Luego se realizó una prueba de letalidad (DL50) en cobayos. Los cultivos con estas peptonas vegetales presentaron DL50 entre diluciones 10-8 y 10-9, en contraste con los cultivos realizados con el medio control que fue de 106.5 Conclusiones: las peptonas vegetales 1-B, 8-M, 10-M y 11-M favorecieron la producción de biomasa de Clostridium chauvoei a pH 8,2. Las peptonas vegetales probadas mostraron una letalidad mayor comparada con la del medio base.


Objective: a culture medium based on vegetable peptones was designed for the production of Clostridium chauvoei biomass.Methods: nine vegetable peptones and two vegetable peptone broths were selected to substitute animal peptone in the modified Clostridium medium. A fermentation process was developed which was related to the production of cell mass, and absorbance and transmittance percentage (%T) were verified. The second stage included pathogenicity assays to determine LD50 titers. Results: vegetable peptones 1-B, 8-M, 10-M, 11-M were selected, for their % T was close to that of the modified Clostridium medium. A lethality test (LD50) was then performed on guinea pigs. Cultures with these vegetable peptones presented LD50 between 10-8 and 10-9 dilutions, in contrast to the 106.5 obtained in cultures with the control medium. Conclusions: vegetable peptones 1-B, 8-M, 10-M and 11-M stimulated the production of Clostridium chauvoei biomass at pH 8.2. The vegetable peptones tested showed greater lethality than the base medium.

4.
Rev. cuba. farm ; 47(2): 178-184, abr.-jun. 2013.
Article in Spanish | LILACS-Express | LILACS | ID: lil-683076

ABSTRACT

Objetivo: validar e implementar una metodología para el análisis microbiológico de un producto líquido preservado con parabenos, elaborado en una industria farmacéutica, según las técnicas de análisis propuestas por la United States Pharmacopeia (USP), versión XXXIV, 2011. Métodos: para los ensayos cuantitativos se trabajó con Staphylococcus aureus y Candida albicans, y para los ensayos cualitativos con Escherichia coli, Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa. Resultados: se obtuvieron resultados acordes con lo establecido por la USP. La metodología descrita se consideró reproducible y robusta al tener la capacidad de no ser afectada por variaciones al desarrollar la técnica, lo cual genera resultados confiables y precisos. Conclusiones: todos los parámetros de validación cumplen la especificación según la USP, lo que muestra conformidad en la totalidad de los parámetros evaluados.


Objective: to validate and to implement a methodology for microbiological analysis of a liquid product preserved with parabens produced by a pharmaceutical company, based on the United States Pharmacopeia analytical methods, XXXIV version, 2011. Methods: the quantitative tests were carrying out for Staphylococcus aureus and Candida albicans, and qualitative tests for Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa. Results: the results were consistent with those established by the USP. The described methodology was considered reproducible and robust because of its capacity of being unaffected by variations when implementing the technique, thus generating reliable and accurate results. Conclusions: all validation parameters met the USP specification, showing compliance with all the evaluated parameters.

5.
Univ. sci ; 17(1): 72-81, Jan.-Apr. 2012. ilus, tab
Article in English | LILACS | ID: lil-650128

ABSTRACT

Objetivo. Evaluar el método de dilución neutralización propuesto en la Norma Técnica Colombiana 5473 de 2007, mediante la utilización de un desinfectante en gel a base de alcohol. Materiales y métodos. El ensayo se efectuó utilizando Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442, Staphylococcus aureus ATCC 6538 y Enterococcus hirae ATCC 10541, como microorganismos de ensayo. Las temperaturas del estudio fueron 20±1°C como temperatura obligatoria y 36±1°C y se emplearon cuatro tiempos de contacto entre el desinfectante y los microorganismos evaluados (0, 2, 5 y 10 minutos). El método fue realizado bajo condiciones limpias (0,3 g/L de albumina de suero bovino) y sucias (3g/L de albumina de suero bovino y 3g/L de eritrocitos de oveja). Resultados. La implementación del método arrojó resultados precisos en cada una de las seis repeticiones realizadas en el ensayo. Los resultados obtenidos demostraron una reducción logarítmica superior a cinco, evidenciando la actividad bactericida ejercida por el desinfectante frente a los microorganismos control. El establecimiento de las condiciones experimentales y de la metodología demostró no incidir negativamente en el crecimiento de cada una de las cepas. Igualmente, el neutralizante utilizado no inhibió el desarrollo de los organismos de ensayo. Conclusiones. Se verificó el método mediante el cumplimiento de los límites establecidos por la norma. Los resultados sugieren que el método evaluado mediante la implementación del protocolo establecido en la Norma Técnica Colombiana 5473 de 2007, permite evaluar la eficacia de un desinfectante bajo condiciones experimentales escogidas y controladas.


Objective. Evaluate the dilution-neutralization method proposed in the Colombian Technical Norm 5473/07, by using a gel, alcohol-based disinfectant. Materials and methods. This study was done using Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442, Staphylococcus aureus ATCC 6538, and Enterococcus hirae ATCC 10541 as the assay microorganisms. The study was carried out at 20±1°C as obligatory temperature and additionally at 36±1°C. Four contact times between microorganisms and the disinfectant were evaluated (0, 2, 5 and 10 minutes). The assay was done both under clean conditions (0.3 g/L of bovine serum albumin), and unclean conditions (3 g/L of bovine serum albumin and 3g/L of sheep erythrocytes). Results. The implementation of this method produced precise results in all of the six repetitions used during the assay. The obtained results demonstrated a logarithmic reduction higher than five, demonstrating the bactericidal activity exerted by the disinfectant on the control microorganisms. The established experimental conditions and methodology did not affect negatively the growth of any of the strains of microorganisms. Similarly, the neutralizing used did not inhibit the development of the microorganisms of the assay. Conclusions. The method was verified by means of the fulfillment of the limits set by the rule. Our results suggest that the method evaluated by means of the implementation of the protocol established in the Colombian Technical Norm 5473/07, allows evaluating the effectiveness of a disinfectant under selected and controlled experimental conditions.


Objetivo. Avaliar o método de diluição-neutralização proposto na "Norma Técnica Colombiana 5473 de 2007", pela utilização de um desinfectante gel à base de álcool. Materiais e métodos. O teste foi realizado utilizando Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442, Staphylococcus aureus ATCC 6538 e Enterococcus hirae ATCC 10541, como microrganismos de ensaio. As temperaturas do estudo foram de 20 ± 1°C como temperatura requerida e 36 ± 1°C e foram utilizados quatro tempos de contacto entre o desinfectante e os microorganismos avaliados (0, 2, 5 e 10 minutos). O método foi realizado sob condições limpas (0,3 g/L de albumina sérica bovina) e sujas (3g/L de albumina sérica bovina e 3g/L de eritrócitos de carneiro). Resultados. A implementação do método produz resultados precisos sobre cada uma das seis repetições realizadas no ensaio. Os resultados mostraram uma redução logarítmica superior a cinco, o que evidencia a actividade bactericida exercida pelo desinfectante contra os microrganismos control. O estabelecimento das condições experimentais e da metodologia provou não incidir negativamente no crescimento de cada uma das cepas. Similarmente, o neutralizador utilizado não inibiu o desenvolvimento dos organismos do experimento. Conclusões. Verificou-se o método através do cumprimento dos limites estabelecidos pela norma. Os resultados sugerem que o método avaliado através da aplicação do protocolo estabelecido pela "Norma Técnica Colombiana 5473 de 2007", permite avaliar a eficácia de um desinfectante em condições experimentais seleccionadas e controladas.


Subject(s)
Disinfection , Disinfectants/analysis , /analysis , Sanitation/standards
6.
Rev. cuba. farm ; 45(3): 355-360, jul.-set. 2011.
Article in Spanish | LILACS-Express | LILACS | ID: lil-615170

ABSTRACT

Se validó la técnica para la cuantificación de tilosina en polvo, para lo cual previamente se estandarizó la técnica recomendada por la United States Pharmacopeia versión 30 del 2007, con el fin de ajustarse y dar cumplimiento a la normativa internacional. La muestra se compuso del 10 por ciento de tilosina fosfato y 90 por ciento de Carrier 40-60. El microorganismo sometido a prueba fue Micrococcus luteus ATCC 9341 y se empleó el método de difusión en agar. Los resultados de las pruebas se sometieron al programa de validación microbiológica "Validation Manager". El método de difusión en agar cumplió con los valores esperados, y así quedó validada la técnica.


The quantification technique of powdered tylosin was validated. To this end, the technique recommended by the United States Pharmacopeia, 30th version, 2007 was standardized to adapt it to and to comply with the international regulations. The sample was composed of 10 percent tylosin phosphate and 90 percent Carrier 40-60. The agar diffusion was used to test the micro-organism Micrococcus luteus ATCC 9341 and all results were microbiologically validated by the program "Validation Manager". The agar diffusion method met the prospective values, thus validating the technique.

7.
Rev. cuba. farm ; 45(2): 216-225, Apr.-June 2011.
Article in Spanish | LILACS-Express | LILACS | ID: lil-615146

ABSTRACT

Se desarrolló y validó un método analítico para la determinación cuantitativa de bacitracina zinc al 15 por ciento y bacitracina metilen disalicilato al 11 por ciento, por el método de cilindro en placa (difusión en agar), con el fin de ser usado en el control de calidad de las materias primas y productos farmacéuticos. Se evaluaron los parámetros de especificidad, selectividad, linealidad del sistema, y del método, exactitud, límite de cuantificación y precisión. Mediante el diseño experimental y la evaluación estadística de los resultados, se demostró que el método analítico es específico, selectivo, lineal, preciso (CV< 5 por ciento) y exacto (sesgo< 3 por ciento, Gexp< Gtab y t exp< t tab) en el intervalo de las concentraciones estudiadas. El límite de cuantificación y de detección fue de 0,02 y 0,005 UI/mL respectivamente. Las características de desempeño analítico cumplen con los requisitos para la aplicación analítica propuesta.


An analytical method was developed and validated for quantitative determination of 15 percent zinc bacitracine and 11 percent disalicylate methylene-bacitracine by the plate-cylinder method (agar diffusion) to be used in quality control of raw products and pharmaceutical products. Specificity, selectivity, system and method linearity, accuracy, quantification and precision parameters were assessed. By the experimental design and the statistic evaluation of results, it was demonstrated that the analytical method is specific, selective, linear, precise (CV< 5 percent) and exact (bias < 3 percent, Gexp< Gtab< t exp< t tab) during the study concentrations. The quantification and detection limit was of 0.02 and 0.005 Ul/mL, respectively. The analytical performance characteristics fulfill the requirement for the proposal analytical implementation.

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