Evidencia del polimorfismo 511C>T en el gen de la acil-CoA deshidrogenasade cadena corta en Colombia / Evidence of 511C>T polymorphism in the short chain acyl-CoA dehydrogenase gene in Colombia / Evidência do polimorfismo 511C>T no gene da acil-CoA desidrogenase de cadeia curta na Colômbia

La acil-CoA deshidrogenasa de cadena corta (SCAD) cataliza la reacción inicial de la ß-oxidación de los ácidos grasos de cadena corta. La deficiencia hereditaria de SCAD ha sido reportada y han sido descritos pocos casos de la misma. El presente estudio pretendió determinar la posible presencia del polimorfismo 511C>T en Caldas (Colombia), debido a que las variantes 625G>A y 511C>T en el gen de la acil-CoA deshidrogenasa de cadena corta están presentes en el 14% de algunas poblaciones estudiadas, causando algunas veces su deficiencia. El presente estudio es descriptivo. Muestras de sangre de 300 voluntarios fueron estudiadas para el polimorfismo 511C>T mediante la técnica de polimorfismo de conformación de la cadena simple, utilizando ADN amplificado por reacción en cadena de la polimerasa. Los resultados fueron confirmados por secuenciación. El polimorfismo fue identificado en tres personas aparentemente sanas. Existe evidencia de la presencia del polimorfismo 511C>T en el gen de la acil-CoA en Colombia, lo que significa que algunas personas de esta población pueden tener riesgo de sufrir su deficiencia.

Short-chain acyl-CoA dehydrogenase (SCAD) catalyzes the initial reaction in short-chain fatty acid ß-oxidation. Hereditary SCAD deficiency has been reported and only few cases of this disorder have been described. The present study was conducted to determine the possible presence of the 511C>T variation in the short-chain acyl-CoA dehydrogenase gene in Caldas (Colombia), as the 625G>A and 511C>T variations are present in 14% of some studied populations causing its deficiency on some occasions. The present study is descriptive, blood samples of three hundred adult volunteers were tested for 511C>T polymorphism, analysing the polymerase chain reaction amplified cDNA, using a single-stranded conformation polymorphism assay. The results were confirmed by direct bidirectional cycle sequencing using DNA from the positive patients. The polymorphism was identified and confirmed in three healthy persons. This is evidence of the presence of 511C>T polymorphism in the short chain acyl-coA dehydrogenase gene in Colombia, which means that some people in these populations can be at risk of suffering SCAD deficiency.

A acil-CoA desidrogenase de cadeia curta (SCAD) catalisa a reação inicial da b-oxidação dos ácidos graxos de cadeia curta. Foi reportada a deficiência hereditária de SCAD e poucos casos da deficiência foram descritos. O presente trabalho quis determinar a possível presença do polimorfismo 511C>T em Caldas (Colômbia), devido a que as variantes 625G>A e 511C>T no gene da acil-CoA desidrogenase de cadeia curta estão presentes em 14% de algumas populações estudadas, produzindo algumas vezes sua deficiência. O presente estudo é descritivo. Amostras de sangue de 300 voluntários foram analisadas para o polimorfismo 511C>T através da técnica de polimorfismo de conformação da cadeia simples, utilizando DNA amplificado por reação em cadeia da polimerase. Os resultados foram confirmados por sequenciamento. O polimorfismo foi identificado em três pessoas aparentemente saudáveis. Existe evidência da presença do polimorfismo 511C>T no gene da acil-CoA na Colômbia, o que significa que algumas pessoas desta população correm o risco de sofrer sua deficiência.

Estudio de la deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga con hipoglicemia / Study of very long chain acyl-CoA deshydrogenase with hypoglycemia / Estudo da deficiência de acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa com hipoglicemia

La acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga (VLCAD, very long chain acyl-Co A dehydrogenase) es considerada una enzima limitante en el sistema de beta-oxidación de ácidos grasos de cadena muy larga. Con base en la clínica presentada en esta deficiencia se han informado 3 fenotipos: VLCAD-C por presentar cardiomiopatía dilatada, VLCAD-H caracterizada por episodios de hipoglicemia y VLCAD-M en la cual se presentan episodios de miopatía con rabdomiólisis. Los estudios in vitro, que buscan intermediarios de la degradación mitocondrial de ácidos grasos, facilitan el diagnóstico de alteraciones hereditarias o adquiridas de la actividad de esta enzima. En el presente trabajo se analiza la producción de metabolitos en fibroblastos de pacientes con deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga con hipoglicemia (VLCAD-H), incubados con ácido oleico deuterado. Se incubaron fibroblastos de cinco pacientes con deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga (VLCAD) con hipoglicemia y de diez controles en presencia de ácido oleico deuterado. Se encontró un perfil característico luego de la incubación de fibroblastos con esta deficiencia. Los valores de D²C12:1 fueron similares entre los pacientes y los controles, mientras que los valores de D²C14:1 y D²C16:1 fueron encontrados significativamente más elevados en los fibroblastos de los pacientes. Este sustrato podría ser usado para realizar diagnóstico in vitro de la deficiencia de VLCAD-H.

Very-long-chain acyl-CoA dehydrogenase (VLCAD) is considered a rate-limit-ing enzyme in a very-long-chain fatty acid beta-oxidation system. Based on clinical presentation three phenotypes have been reported for this deficien-cy, as follows: VLCAD-C presenting cardiomiopathy, VLCAD-H characterized by episodes of hypoglycemia, and VLCAD-M including episodes of myopathy with rhabdomyolysis. In vitro studies, searching for intermediates of mitochondrial fatty acid degradation, are a tool for diagnosis of inherited or acquired alterations of this enzyme activity. The present work analizes the metabolite production in fbroblasts from patientes with VLCAD-H deficiency, incubated with deuterated oleic acid. Fibroblasts from ten controls and fve patients with VLCAD deficiency with hypoglycemia (VLCAD-H) were incubated in the presence of deuterated oleic acid. A characteristic profle was found after incuba-tion of fbroblasts with this deficiency. D²C12:1 values were similar between patients and controls, while values of D²C14:1 and D²C16:1 were significantly higher in the fbroblasts of patients. Therefore, this substrate could be used for in vitro diagnosis of VLCAD-H deficiency.

A acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa (VLCAD, very long chain acyl-Co A dehydrogenase) é considerada uma enzima limitante no sistema de beta-oxidação de ácidos graxos de cadeia muito longa. Com base na clínica apresentada nesta deficiência, foram informados três fenótipos: VLCAD-C por apre-sentar cardiomiopatia dilatada, VLCAD-H caracterizada por episódios de hipoglicemia e VLCAD-M em que ocorrem episódios de miopatia com rabdomiólise. Os estudos in vitro, em busca de intermediários da degradação mitocondrial de ácidos graxos, são uma ferramenta para o diagnóstico de alterações here-ditárias ou adquiridas da atividade desta enzima. O presente trabalho analisa a produção de metabólitos em fibroblastos de pacientes com deficiência de acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa, com hipoglicemia (VLCAD-H), incubadas com ácido oleico deuterado. Foram incubados fibroblastos de cinco pacientes com deficiência de acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa (VLCAD) com hipoglicemia, e de dez controles em presença de ácido oleico deuterado. Foi achado um perfil característico após a incubação de fibroblastos com esta deficiência. Os valores D²C12:1 foram semelhantes entre os pacientes e os controles, ao passo que os valores de D2C14:1 e D²C16:1 foram significativamente mais elevados nos fibroblastos dos pacientes. Este substrato poderia ser utilizado para realizar diagnóstico in vitro da deficiência VLCAD-H.

Implementación diagnóstica de la deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga / Diagnostic implementation of very long chain acyl-CoA dehydrogenase deficiency / Implementação diagnóstica da deficiência de acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa

La enzima acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga (VLCAD) es un homodímero que cataliza la reacción inicial de la ß-oxidación mitocondrial de los ácidos grasos. El presente estudio tuvo como objetivo el análisis de los metabolitos producidos por fibroblastos incubados en presencia de sustratos tritiados vs. deuterados, como herramienta diagnóstica de la deficiencia de VLCAD. Fue encontrada severamente deprimida la oxidación de los sustratos tritiados en los fibroblastos de pacientes con esta enfermedad, asimismo la incubación con sustratos deuterados aportó un perfil característico en esta deficiencia. El método de valoración de agua tritiada, aunque inespecífico, debido a que la oxidación de sustratos tritiados también puede estar deprimida en otras deficiencias, es un buen método para sugerir una deficiencia de acil- CoA deshidrogenasa de cadena muy larga, si el análisis se compara con otros hallazgos propios de la deficiencia enzimática. Sin embargo, la determinación de los metabolitos deuterados es más específica, por encontrarse un perfil característico que muestra niveles elevados de los ácidos grasos octanoico, decanoico, dodecenoico, dodecanoico, tetradecenoico, tetradecanoico y hexadecenoico, lo que la hace diferente de otras deficiencias enzimáticas.

Very long-chain acyl-CoA dehydrogenase (VLCAD) is a homodimer that catalyzes the initial reaction of fatty acid ß-oxidation. The objective of the present study was to analyse the metabolites produced by fibroblasts incubated with tritiated vs. deuterated substrates, as a diagnostic tool for the diagnosis of VLCAD deficiency. A severe depression for oxidizing the tritiated substrates was observed for these patients' fibroblasts, and a characteristic profile for this deficiency was found when incubating fibroblasts with deuterated substrates. The method which evaluates the production of tritiated water is nonspecific as the oxidation of tritiated substrates can be found depressed in other fatty acid ß-oxidation disorders; however this method can suggest VLCAD deficiency if the tritiated water measurement is compared with others findings related to this deficiency. On the other hand the measurement of deuterated metabolites is more specific as a characteristic profile was found for this deficiency showing increased levels of the following organic acids: octanoic, decanoic, dodecenoic, dodecanoic, tetradecenoic, tetradecanoic and hexadecanoic, which is different from other fatty acid ß-oxidation disorders.

A enzima acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa (VLCAD) é um homodímero que catalisa a reação inicial da ß-oxidação mitocondrial dos ácidos graxos. O presente estudo teve como objetivo a análise dos metabólitos produzidos por Ibroblastos incubados em presença de substratos tritiados vs. deuterados, como ferramenta de diagnóstico da deIciência de VLCAD. Foi encontrada severamente deprimida a oxidação dos substratos tritiados nos Ibroblastos de pacientes com esta doença, do mesmo modo a incubação com substratos deuterados deu um perIl característico nesta deIciência. O método de avaliação de água tritiada, embora não especíIco, devido a que a oxidação de substratos tritiados também pode estar deprimida em outras deIciências, é um bom método para sugerir uma deIciência de acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa, se a análise é comparada com outros achados próprios da deIciência enzimática. Entretanto, a determinação dos metabólitos deuterados é mais especiIca, devido a que se encontra um perIl característico que mostra níveis elevados dos ácidos graxos octanoico, decanoico, dodecenoico, dodecanoico, tetradecenoico, tetradecanoico e hexadecenoico, o que a torna diferente de outras deIciências enzimáticas.