Multiplication, rooting in vitro, and acclimatization of Brassavola tuberculata Hook. (Orchidaceae), an orchid endemic to the brazilian atlantic rainforest / Multiplicação, enraizamento in vitro e aclimatização de Brassavola tuberculata Hook (Orchidaceae), uma orquídea endêmica da mata atlântica brasileira

The objective of this study was to promote the establishment of an in vitro culture of Brassavola tuberculata, testing different concentrations of naphthalene acetic acid (NAA) and 6-benzylaminopurine (BAP) on multiplication and rooting, evaluating different substrates during acclimatization, as well as the effect of in vitro treatments. After germination, the seedlings of B. tuberculata were subjected to culture on MS medium supplemented with different concentrations of NAA and BAP, and multiplication and rooting were assessed. During acclimatization, different substrates were tested: S1, Plantmax® and vermiculite (1: 1); S2, Plantmax® and grit (1: 1); and S3, dust fern. Also the effect of the in vitro culture treatments was evaluated: T1, control; T5, (2.5 µM NAA +5 µM BAP); and T7, (5 µM NAA + 0 µM BAP). The favorable balance of cytokinins promoted by treatment T5 yielded the largest number of shoots and leaves in B. tuberculata. The greatest length of leaves and roots, and highest root number were observed in the treatment T7, favored by the presence of auxin. This treatment had a positive effect with respect to plant acclimatization: T7 associated with substrate S1 provided the most suitable conditions for acclimatization of seedlings of B. tuberculata, providing greater number and length of leaves, and high survival rate.

Objetivou-se, com este trabalho, promover o estabelecimento do cultivo in vitro de Brassavola tuberculata, testando diferentes concentrações de ANA e BAP na multiplicação e no enraizamento, e avaliar diferentes substratos e o efeito dos tratamentos de cultivo in vitro na aclimatização. Após a germinação das sementes, as plântulas de B. tuberculata foram submetidas ao cultivo em meio MS suplementado com diferentes concentrações de ácido naftaleno acético (ANA) e 6-benzilaminopurina (BAP), sendo avaliados a multiplicação e o enraizamento. Foram testados diferentes substratos: S1 (Plantmax e vermiculita (1:1)); S2 (Plantmax e areia (1:1)) e S3 (pó de xaxim) na aclimatização e, posteriormente, o efeito dos tratamentos do cultivo in vitro: T1 (controle), T5 (2,5 ANA + 5 BAP) e T7 (5 ANA + 0 BAP), na aclimatização. O balanço favorável às citocininas promovido pelo tratamento T5 (2,5 µM ANA + 5 µM BAP) promoveu maior número de brotos e de folhas em B. tuberculata. O maior comprimento das folhas, das raízes e maior número de raízes foi observado no tratamento T7 (5 µM ANA e 0 µM BAP), favorável a auxina. Este tratamento apresentou efeito positivo com relação a aclimatização das plantas: T7 associado ao substrato S1, Plantmax e vermiculita (1:1) proporcionou melhores condições para a aclimatização das plântulas de B. tuberculata, propiciando maior número e comprimento das folhas, e elevada taxa de sobrevivência.

Diodos emissores de luz e concentrações de BAP na multiplicação in vitro de morangueiro / Light-emitting diodes and BAP concentrations in the in vitro strawberry multiplication

Realizou-se um estudo para avaliar o efeito de fontes de luz na micropropagação de morangueiro, com níveis crescentes de BAP no meio de cultivo. Para tanto, inocularam-se gemas de brotações da cultivar 'Sabrosa' em meio MS com 30g L-1 de sacarose, 100mg L-1 de mio-inositol, 7g L-1 de ágar e BAP (0; 0,3; 0,6; 0,9; e 1,5mg L-1), em pH 5,8. Os explantes foram cultivados a 25+2°C, com 16 horas de fotoperíodo e luminosidade de 20µmol m-2 s-1, esta última fornecida por diferentes fontes de luz (LED azul-EDEB 3LA1, LED verde-EDET 3LA1, LED vermelho-EDER 3LA3, lâmpada fluorescente Growlux e lâmpada fluorescente branca). Os tratamentos foram dispostos em delineamento inteiramente ao acaso em um fatorial 5x5 (concentrações de BAP x fontes de luz), com seis repetições. O experimento foi repetido em três subcultivos sucessivos de 35 dias cada. Nestes avaliaram-se o número de brotações por explante e a altura das brotações. Ao final do terceiro subcultivo, determinaram-se, ainda, as concentrações de carotenoides e de clorofilas a e b, independentemente do nível de BAP. Maior número de brotações por explante foi obtido sob LEDs vermelhos e verdes. Concentrações de BAP no meio de cultura entre 0,82 e 1,22mg L-1, dependendo da fonte de luz, proporcionaram maior multiplicação in vitro de brotações. Sob todas as fontes de luz foram obtidas brotações de maior comprimento em meio isento de BAP. Brotações cultivadas sob LEDs vermelhos apresentaram maior quantidade de pigmentos fotossintéticos, enquanto aquelas sob LEDs verdes e lâmpadas Growlux apresentaram a menor.

The objective of this research was to evaluate the effect of different sources of light in strawberry micropropagation, under increasing levels of BAP in culture medium. 'Sabrosa' shoots were inoculated in MS medium supplemented with 30g L-1 sucrose, 100mg L-1 myo-inositol, 7 agar g L-1 and BAP (0; 0.3; 0.6; 0.9; e 1.5mg L-1), pH 5.8. The explants were cultivated at 25+2°C, 16 hours photoperiod and 20µmol m-2 s-1. The luminosity was supplied by different sources of light (blue-EDEB 3LA1 LED, green-EDET 3LA1 LED, red-EDER 3LA3 LED, Growlux fluorescent lamp and white fluorescent lamp). The experimental design was a factorial entirely randomized (5 concentrations of BAP x 5 light sources) with six replications. The experiment was repeated in three successive subcultures of 35 days each, being evaluated the shoot number per explant and shoot height. The carotenoids and chlorophyll a and b determinations were carried out after the third subculture, independently of BAP concentration. Shoot number per explant was higher under red and green LEDs. BAP concentrations between 0.82 and 1.22mg L-1 in culture medium showed higher multiplication rate depending on the light source. Shoot length was highest in culture medium without BAP under all light sources. Shoots cultivated under red LEDs showed higher concentration of photosynthetic pigments, while those under green LEDs and Growlux light bulbs showed the lowest.

Germinação e propagação in vitro de porongo / In vitro germination and propagation of bottlegourd

O objetivo foi desenvolver um protocolo de germinação e propagação in vitro de porongo (Lagenaria siceraria). Foram conduzidos experimentos de desinfestação e germinação de sementes inteiras e sem tegumento. O meio MS suplementado de 30g L-1 de sacarose foi utilizado para a propagação de explantes cotiledonares, ápices caulinares e segmentos nodais. Sementes inteiras de porongo somente germinaram sobre papel germitest. Sementes sem tegumento, desinfestadas pela imersão em álcool 70 por cento por 1min. e em solução de 3 a 4 por cento de hipoclorito de sódio por 10min, germinaram em meio de cultura contendo água destilada e 30g L-1 de sacarose, possibilitando o estabelecimento in vitro plântulas de porongo. Explantes cotiledonares produzem brotações adventícias, e ápices caulinares e segmentos nodais crescem e enraízam em meio MS, sem a adição de reguladores de crescimento. A organogênese direta a partir de explantes cotiledonares associada à regeneração de ápices caulinares e segmentos nodais facilita a propagação in vitro do porongo, o que oferece uma excelente oportunidade para explorar a cultura de tecidos, entre outras aplicações, como ferramenta auxiliar no melhoramento genético desta espécie.

The objective was to develop a protocol of 'in vitro' germination and propagation of bottlegourd (Lagenaria siceraria). Experiments of 'in vitro' disinfestation and germination were carried out with intact seeds and seeds without tegument. Cotyledonary explants, apical and nodal segments were propagated in MS medium, supplemented with 30g L-1 of sucrose. Bottlegourd intact seeds only germinated on germitest paper. Seeds without tegument, disinfected in alcohol 70 percent for 1min. and sodium hypochlorite (3 to 4 percent) for 10min., geminated in a culture medium of distilled water and 30g L-1 of sucrose, making possible the 'in vitro' establishment of bottlegourd seedlings. Cotyledonary explants produce adventitious shoots and apical and nodal segments grow and root in MS medium without growth regulators. Direct organogenesis of cotyledonary explants and regeneration of apical and nodal segments make easy bottlegourd 'in vitro' propagation and offer a good opportunity to use tissue culture as a complementary tool for breeding and genetics or other applications.