Biological activities and phytochemical screening of leaf extracts from Zanthoxylum caribaeum L. (Rutaceae) / Atividades biológicas e prospecção fitoquímica de extratos vegetais das folhas de Zanthoxylum caribaeum L. (Rutaceae)

The Brazilian flora is known for its vast biodiversity; however, many species have been still little studied regarding to their chemical composition and biological potential. Thus, this study aimed to determine the antimicrobial, antioxidant and acaricidal activity of the extracts of leaves of Zanthoxylum caribaeum L. In addition, phytochemical screening of these extracts was carried out to determine the main classes of secondary metabolites present in Z. caribaeum. Using the Z. caribaeum leaves, aqueous and organic extracts were obtained using the following solvents (ethanol, methanol, hexane, acetone, dichloromethane and ethyl acetate). The antimicrobial activity of extracts was determined by broth microdilution method, and to detect antioxidant activity the method of capturing the free radical 2,2-diphenyl-1-picryl hydrazyl (DPPH) was used. The acaricidal activity of the extracts was tested on Dermanyssus gallinae (De Geer) (Acari: Dermanissidae). Ethanolic and methanolic extracts presented antimicrobial activity for most of the bacterial strains tested, as well as for yeast Candida albicans. The ethanolic extract presented high free radical sequestration potential (71.2%) and antioxidant capacity (the lowest IC50 value - 24.39 µg mL-1). The crude extracts obtained with methanol and acetone were the most promising. In general, phytochemical screening indicated the presence of steroids, flavanones, flavones, flavonols, saponins, tannins, triterpenoids and xanthones.

A flora brasileira é conhecida pela sua vasta biodiversidade, no entanto, muitas espécies ainda são pouco estudadas quanto à composição química e ao potencial biológico. Assim, esse trabalho teve como objetivo determinar a atividade antimicrobiana, antioxidante e acaricida dos extratos vegetais das folhas de Zanthoxylum caribaeum L. Adicionalmente, foi realizada triagem fotoquímica desses extratos para determinar as principais classes de metabólitos secundários presentes em Z. caribaeum. Empregando-se as folhas de Z. caribaeum foram obtidos o extrato aquoso e orgânicos, utilizando os seguintes solventes (etanol, metanol, hexano, acetona, diclorometano e acetato de etila). A atividade antimicrobiana dos extratos foi determinada pelo método de microdiluição em caldo, e para detecção da atividade antioxidante foi empregado o método de captura do radical livre 2,2-difenil-1-picril hidrazil (DPPH). A atividade acaricida dos extratos foi avaliada frente a Dermanyssus gallinae (De Geer) (Acari: Dermanissidae). Os extratos brutos etanólico e metanólico apresentaram atividade antimicrobiana para a maioria das cepas bacterianas testadas, e também para a levedura Candida albicans. O extrato etanólico apresentou elevado potencial de sequestro de radicais livres (71,2%) e o menor valor de IC50 (24,39µg mL-1), revelando, portanto, sua capacidade antioxidante. No que se refere à atividade acaricida, os extratos obtidos com metanol e acetona foram os mais promissores. De modo geral, a triagem fitoquímica indicou a presença de esteroides, flavanonas, flavonas, flavonóis, saponinas, taninos, triterpenóides e xantonas.

Pathogenicity of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana fungi to Tetranychus ludeni (Acari: Tetranychidae) / Patogenicidade de fungos Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana ao Tetranychus ludeni (Acari: Tetranychidae)

The use of acaricides is the main control method for Tetranychus ludeni (Acari: Tetranychidae) in horticultural crops. This mite has been recorded causing damage to sweet potato (Ipomoea batatas L.). The use of pathogenic fungi is an alternative to chemical control. The objective was to evaluate the pathogenicity of the fungi Metarhizium anisopliae (Meetch) Sorok, and Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. to phytophagous mite T. ludeni in sweet potato plants. Conidial suspensions of M. anisopliae and B. bassiana, at concentrations of 106 and 107 con.mL-1 were applied to sweet potato leaves. After 24 hours, five females of T. ludeni newly emerged were released on the leaves. The bioassay was arranged in a completely randomized design with factorial arrangement 2 × 2 (two species of fungi and two concentrations) plus the control (distilled water), with 10 repetitions per treatment. The evaluation consisted of observing of three biological parameters of the mite: mortality, oviposition, and repellency, after 24, 48, 72, and 96 hours of contact with the fungi. The isolates of M. anisopliae cause high mortality rates of T. ludeni in laboratory. Beauveria bassiana has the potential to suppress future generations of mite, reducing its oviposition rate. Repellency behavior was not observed.(AU)

O uso de acaricidas é o principal método de controle de Tetranychus ludeni (Acari: Tetranychidae) em cultivos hortícolas. Esse ácaro foi registrado causando danos em batata-doce (Ipomoea batatas (L.). A utilização de fungos patogênicos é uma alternativa ao controle químico. O objetivo foi avaliar a patogenicidade dos fungos Metarhizium anisopliae (Meetch) Sorok. e Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. ao ácaro fitófago T. ludeni em batata-doce. Suspensões conidiais de M. anisopliae e B. bassiana, nas concentrações de 106 e 107 con.mL-1, foram aplicadas sobre folhas de batata-doce. Após 24 horas, cinco fêmeas recém-emergidas foram liberadas sobre as folhas. O bioensaio foi inteiramente randomizado, com arranjo fatorial 2 × 2 (duas espécies de fungos e duas concentrações) e controle (água destilada), com 10 replicações por tratamento. A avaliação consistiu na observação de três parâmetros biológicos do ácaro: mortalidade, oviposição e repelência, após 24, 48, 72 e 96 horas de contato com os fungos. Os isolados de M. anisopliae causam altas taxas de mortalidade de T. ludeni em laboratório. Beauveria bassiana tem potencial para suprimir futuras gerações do ácaro, reduzindo a taxa de oviposição. Comportamento de repelência nos ácaros não foi observado.(AU)

Aspectos biológicos de Tetranychus ludeni Zacher, 1913 (Acari: Tetranychidae) alimentados com folhas de batata-doce pulverizadas com o 2,4-D / Biological aspects of Tetranychus ludeni Zacher, 1913 (Acari: Tetranychidae) fed on sweet potato leaves sprayed with 2,4-D

Batata-doce [Ipomoea batatas (L.) Lam.] apresenta grande versatilidade de usos no Brasil. Com a ampliação das áreas de cultivo, essa espécie estará sujeita à contaminação por herbicidas. Eventualmente, organismos não alvos podem ser expostos aos resíduos. O objetivo deste trabalho foi avaliar aspectos biológicos do ácaro Tetranychus ludeni alimentado com folhas de batata-doce pulverizadas com diferentes doses do herbicida 2,4-D. O experimento foi conduzido no Laboratório de Controle Biológico da Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM), em Diamantina, Minas Gerais. Foram utilizadas 175 fêmeas de T. ludeni e 6 doses de 2,4-D, em g.ha-1 (8,06; 20,15; 40,30; 80,60; 201,50; e 806,00), mais o tratamento-controle com água destilada. Adotou-se delineamento inteiramente casualizado, com sete tratamentos e cinco repetições, contendo cinco fêmeas de T. ludeni em cada repetição. Foram avaliados a mortalidade inicial do ácaro em 24 h, o número de ovos, as ninfas e a longevidade das fêmeas. Os dados foram submetidos à análise de variância, sendo as médias significativas analisadas pelo teste de Duncan. Observou-se que doses maiores desse herbicida podem aumentar a mortalidade e reduzir a longevidade das fêmeas de T. ludeni.(AU)

Sweet potato [Ipomoea batatas (L.) Lam.] presents great versatility of uses in Brazil. With the expansion of crop areas, this species is subject to contamination by herbicides. Eventually, non-target organisms can be exposed to residues . The aim of this study was to evaluate biological aspects of the mite Tetranychus ludeni fed on sweet potato leaves sprayed with different doses of the herbicide 2,4-D. The experiment was conducted at the Biological Control Laboratory of Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM), Diamantina, Minas Gerais, Brazil. Altogether, 175 females of T. ludeni and six doses of 2,4-D, in g.ha-1 (8.06, 20.15, 40.30, 80.60, 201.50, and 806,00) were used, plus the control done with distilled water. It was adopted a completely randomized design with seven treatments and five replications with five females each. Early mortality of T. ludeni (24 h), the number of eggs, nymphs and longevity of females were evaluated. Data were subjected to analysis of variance, being the significant mean analyzed by Duncan test. It was observed that high doses of the herbicide may increase the mortality and decrease longevity of females of T. ludeni.(AU)

Toxicidade e repelência de extratos de plantas da caatinga sobre Tetranychus bastosi Tutler, Baker & Sales (Acari: Tetranychidae) em pinhão-manso / Toxicity and repellency of caatinga plant extracts on the Tetranychus bastosi Tutler, Baker & Sales in physic nut

RESUMO O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito repelente e a toxicidade dos extratos aquosos de Myracrodruon urundeuva Fr. All (Anacardiaceae), Croton blanchetianus Baill (Euphorbiaceae) e Ziziphus joazeiro Mart. (Rhamnaceae,) sobre o ácaro Tetranychusbastosi Tutler, Baker & Sales associado à cultura do pinhão- manso Jatropha curcas L. Para cada extrato as concentrações utilizadas foram 0, 5%, 10%, 15%, 20% e 25%. Avaliou-se, em teste sem chance de escolha, a mortalidade de fêmeas adultas de T. bastosi submetidas às diferentes concentrações de cada extrato. O delineamento estatístico foi o inteiramente casualizado, com seis tratamentos (testemunha e concentrações dos extratos) e 10 repetições. Os dados foram submetidos à análise de regressão. Também foi avaliado o efeito repelente dos referidos extratos sobre T. bastosi, nas concentrações supracitadas. Foi calculado o índice de repelência, percentual de repelência, classificação e índice de segurança. Os dados de percentual de repelência de adultos no tratamento e testemunha foram analisados pelo teste T de Student a 5% de probabilidade. De uma forma geral os extratos demonstraram efeito tóxico para adultos de T. bastosi nas concentrações testadas. O extrato de Z. joazeiro apresentou as maiores taxas de mortalidade (90%) média dos indivíduos. No que se refere à repelência destes extratos, todos os tratamentos se mostraram repelentes para fêmeas de T. bastosi, classificados como tratamentos repelentes, exceto para a dosagem de 5% do extrato de M. unrundeuva.

ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the repellent effect and toxicity of aqueous extracts of M. urundeuva All Br. (Anacardiaceae), Crotonblanchetianus Baill( Euphorbiaceae ) and Ziziphus joazeiro Mart. (Rhamnaceae) on the mite Tetranychus bastosi Tutler, Baker & Sales associated with Jatropha curcas. For each extract, the concentrations used were 0, 5%, 10 %, 15 %, 20% and 25%. It was evaluated, at a no-choice test, the mortality of adult females of T. bastosi submitted to different concentrations of each extract. The experimental design was completely randomized with six treatments (control and concentrations of the extracts) and 10 repetitions. The data were subjected to regression analysis. The repellent effect of the extracts over the T. bastosi, in the concentrations already mentioned was also evaluated. The repellency index, percentage repellency, classification and safety index were assessed. The data of percentage repellency of adults in treatment and control were analyzed by the T test Student a 5% probability. In general, the extracts showed toxic effect on adults of T. bastosi for the concentrations tested. The extract of Z. joazeiro indicated d the highest average mortality rates (90 %) of individuals. Regarding the repellency of these extracts, all treatments have proved to be repellants for the females of T. bastosiclassified as repellent treatment, except for the 5% dose of the extract of M. unrundeuva.

Primeiro registro no Brasil de Erythrina velutina Willd. como hospedeira de Tetranychus neocaledonicus (Acari: Tetranychidae) / First Brazilian report of Erythrina velutina Willd. as host of Tetranychus neocaledonicus (Acari: Tetranychidae)

Os ácaros tetraniquídeos representam importantes pragas para diversas culturas agrícolas em todo o mundo. Durante a prospecção em mudas de Erytrina velutina no distrito de São Cristovão, Estado de Sergipe, Brasil, a ocorrência destes foi observada em 15 por cento das mudas que foram levadas ao laboratório para a caracterização dos danos. As mudas apresentavam sintomas de redução e encarquilhamento do limbo. Foram coletados 100 indivíduos destas plantas, os quais foram montados em lâminas de microscopia para a identificação taxonômica. Os ácaros foram identificados como pertencentes à espécie Tetranychus neocaledonicus (Acari: Tetranychidae). Este é o primeiro relato em E. velutina, como hospedeira para T. neocaledonicus no Brasil.

Spider mites are important pests to several crops worldwide. During prospecting in Erytrina velutina specimens from São Cristovão District, Sergipe State, Brazil, their occurrence was observed in 15 percent seedlings, which were taken to the laboratory for description of damages. The seedlings presented leaf blade reduction and crumpling symptoms. One hundred mites were collected from these seedlings and mounted on microscope slides for taxonomic identification. The identified mites belonged to the species Tetranychus neocaledonicus (Acari: Tetranychidae). This is the first report of E. velutina as host for T. neocaledonicus in Brazil.

Plano de amostragem presença-ausência para Oligonychus yothersi (McGregor) (Acari: Tetranychidae) na cultura da erva-mate / Presence-absence sampling plan for Oligonychus yothersi (McGregor) (Acari: Tetranychidae) on mate-tea orchard

O ataque de ácaros na cultura da erva-mate tem freqüentemente provocado perdas pela queda precoce das folhas. Assim, há necessidade de se monitorar a população desses artrópodes e adotar estratégias de manejo. O objetivo deste trabalho foi avaliar a confiabilidade da amostragem presença-ausência para Oligonychus yothersi (McGregor) na erva-mate. O trabalho foi realizado em um erval comercial, em Cascavel, PR, de abril de 1999 a julho de 2000. Coletas quinzenais de 240 folhas foram feitas em diferentes partes de 10 plantas escolhidas ao acaso. A contagem dos ácaros nas folhas foi realizada em laboratório com auxílio de microscópio estereoscópico. Foi determinado o padrão de agregação através dos coeficientes a e b da lei da potência de Taylor; a proporção de folhas infestadas e o número de amostras requeridas foram estimados através de modelo matemático. O. yothersi apresentou distribuição agregada. A proporção de folhas infestadas calculada pelo modelo matemático mostrou ser um parâmetro confiável para estimar a densidade populacional do ácaro. O número de amostras requeridas foi pequeno, viabilizando a aplicação prática do método de amostragem presença-ausência para O. yothersi na cultura da erva-mate.

Mite infestations to the culture of mate-tea frequently causes losses by the premature fall of the leaves. So, it is necessary to monitor the population of these arthropods, and to adopt management strategies for their control. The objective of this research was to evaluate the trustworthiness of presence-absence sampling for Oligonychus yothersi (McGregor) on mate-tea orchard. This study was conducted in Cascavel, Paraná State, from April 2001 to July 2000, in a mate-tea tree commercial plantation. Biweekly sampling of 240 leaves were collected in different parts of 10 plants, and the number of mites was counted. The aggregation pattern was determined through the coefficients a and b of Taylor's power law. The proportion of infested leaves and the number of required samples were estimated through mathematical model. The mite O. yothersi presented aggregate distribution. The proportion of infested leaves calculated by means of mathematical model showed to be a trustworthy parameter to estimate the population density of the mite. The number of required samples was small, making feasible the practical application of the presence-absence sampling method for O. yothersi in the culture of mate-tea.

Seleção de fungos entomopatogênicos para o controle de Oligonychus yothersi (McGregor) (Acari: Tetranychidae), na cultura da erva-mate (Ilex paraguariensis St. Hill.) / Entomopathogenic fungi selection to control Oligonychus yothersi (McGregor) (Acari: Tetranychidae) in Paraguay tea crops (Ilex paraguariensis St. Hill.)

The virulence of strains of the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae and Paecilomyces fumosoroseus was evaluated on Oligonychus yothersi (McGregor) in laboratory. The bioassays for strain selection and determination of LD50 and LT50 were elaborated withleaf disks of Paraguay tea infested with 10 adult females of the mite. Groups of five disks were sprayed with 1 ml of the suspension standardized in 1.0x107 conidia per ml (50 mites per treatment) of each strain. After that, the disks were maintained floating in distilled water in plastic boxes (3 cm diameter and 1.5 cmheight), in environmental chamber (temperature: 25 ± 1ºC; RH: 71 ± 10% and 12h photophase). Five days after the inoculation the total mortality was evaluated, and the dead mites were transferred to humid chamber. Six days after death, the sporulation in the cadavers was examined under an optical microscope. B. bassiana presented great potential as a microbial control agent, and can be incorporated in integratedpest management of the Paraguay tea red mite, O. yothersi. The B. bassiana strains UEL02, UEL08, UEL10, UEL50, CG082, CG166, CG375, CG424 and CG481, were the most virulent, with corrected and confirmed mortality higher than 70% and estimated value of CL50 varying between 1.9x106 and 6.0x107 conidia per ml and TL50 varying between 3.3 and 4.3 days.

A virulência de isolados dos fungos entomopatogênicos Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae e Paecilomyces fumosoroseus foi avaliada sobre Oligonychus yothersi (McGregor) emlaboratório. Os bioensaios de seleção e de determinação de CL50 e TL50 foram realizados com discos foliares de erva-mate previamente infestados com 10 fêmeas adultas do ácaro. Para cada isolado um conjunto de cinco discos foram pulverizado com 1 ml da suspensão padronizada em 1,0x107 conídios/ml (50 ácaros por tratamento). Após pulverizados os discos foram mantidos flutuando em água destiladaem caixas plásticas (3 cm diâmetro e 1,5 cm altura), em câmara tipo B.O.D. (temperatura: 25 ± 1oC; UR: 70± 10% e fotofase de 12h). A mortalidade total foi avaliada cinco dias após a inoculação. Os ácaros mortos foram transferidos para câmara úmida para confirmação de mortalidade, sendo examinados sob microscópio ocular seis dias após a morte. O fungo B. bassiana apresentou grande potencial comoagente de controle microbiano, podendo ser incorporado em programas de manejo integrado do ácaro vermelho da erva-mate, O. yothersi. Os isolados de B. bassiana UEL02, UEL08, UEL10, UEL50, CG082, CG166, CG375, CG424 e CG481 foram os mais virulentos. Eles apresentaram mortalidades corrigida econfirmada superiores a 70% e valores estimados de CL50 variando entre 1,9x106 e 6,0x107 conídios/ml e de TL50 variando entre 3,3 e 4,3 dias.