Agaricus brasiliensis polysaccharides stimulate human monocytes to capture Candida albicans, express toll-like receptors 2 and 4, and produce pro-inflammatory cytokines

Agaricus brasiliensis é um cogumelo medicinal com atividades imunomoduladoras e antitumorais atribuídas aos ß-glucanos presentes na fração polissacarídica de seu corpo de frutificação. Uma vez que os ß-glucanos aumentam a imunorresponsividade celular, neste estudo objetivamos avaliar o efeito de uma fração rica em polissacarídeos tratados com ácido (ATF) de A. brasiliensis sobre a capacidade de monócitos humanos de aderir / fagocitar células de levedura C. albicans . expressão de receptores de reconhecimento de padrões e sua capacidade de produzir citocinas. Métodos: A adesão / fagocitose de C. albicans marcada com FITC foi avaliada por citometria de fluxo. As células foram incubadas com anticorpos marcados com fluorocromo específicos para TLR2 e 4, ßGR e MR e também avaliadas por citometria de fluxo. Os monócitos foram cultivados com ATF, e os sobrenadantes da cultura foram coletados para análise da produção de citocinas in vitro por ELISA (TNF-α, IL-1ß, IL-12 e IL-10). Resultados: ATF aumentou significativamente a aderência / fagocitose de C. albicans por monócitos e isso foi associado com expressão aumentada de TLR2 e TLR4, enquanto nenhum efeito foi observado em ßGR ou MR. Além disso, a expressão de TLR4 e TLR2 foi associada a níveis mais elevados de produção in vitro de TNF-α e IL-1, respectivamente. A produção de IL-10 também foi aumentada pelo tratamento com ATF, mas não encontramos associação entre sua produção e a expressão de receptores Toll-like. Conclusão: Nossos resultados nos forneceram evidências de que polissacarídeos de A. brasiliensis afetam monócitos humanos provavelmente através da modulação de receptores Toll-like.(AU)

Agaricus brasiliensis polysaccharides stimulate human monocytes to capture Candida albicans, express toll-like receptors 2 and 4, and produce pro-inflammatory cytokines

Abstract Background Agaricus brasiliensis is a medicinal mushroom with immunomodulatory and antitumor activities attributed to the -glucans presented in the polysaccharide fraction of its fruiting body. Since -glucans enhance cellular immunoresponsiveness, in this study we aimed to evaluate the effect of an acid-treated polysaccharide-rich fraction (ATF) of A. brasiliensis on the ability of human monocytes to adhere/phagocyte C. albicans yeast cells, their expression of pattern recognition receptors and their ability to produce cytokines. Methods Adhesion/phagocytosis of FITC-labeled C. albicans was evaluated by flow cytometry. Cells were incubated with specific fluorochrome-labeled antibodies for TLR2 and 4, GR and MR and also evaluated by flow cytometry. Monocytes were cultured with ATF, and culture supernatants were collected for analysis of in vitro cytokine production by ELISA (TNF-, IL-1, IL-12 and IL-10). Results ATF significantly increased the adherence/phagocytosis of C. albicans by monocytes and this was associated with enhanced expression of TLR2 and TLR4, while no effect was observed on GR or MR. Moreover, expression of TLR4 and TLR2 was associated with higher levels of in vitro production of TNF- and IL-1, respectively. Production of IL-10 was also increased by ATF treatment, but we found no association between its production and the expression of Toll-like receptors. Conclusion Our results provided us with evidence that A. brasiliensis polysaccharides affect human monocytes probably through the modulation of Toll-like receptors.

Lipid profile and glycemic response of rats fed on a semi-purified diet supplemented with Agaricus brasiliensis mushroom / Perfil lipídico e resposta glicêmica de ratos alimentados com uma ração semi-purificada suplementada com o cogumelo Agaricus brasiliensis

The search for more healthy alimentary habits has stimulated the study of new food sources. Edible mushrooms, such as the genus Agaricus, may be underscored. Current assay evaluates the dietary influence of diets supplemented with the mushroom Agaricus brasiliensis on the metabolic profile of lipids and glycemic behavior in rats. A trial with 28 male Wistar rats in 4 groups with 7 rats each was carried out during 32 days. Diets given to these groups were AIN-93 (CAS) for Group 1; AIN-93 with 1% cholesterol (CAS + COL) for Group 2; the same for Group 3 and 4, but supplemented with or without mushrooms [ (COG) and (COG + COL) respectively]. Analyses of all samples for cholesterol, triacylglycerols, hepatic cholesterol and hepatic lipids on the 32nd day showed that Agaricus mushroom modified the lipid profile, reduced total cholesterol by 16% and triacylglycerols by 26.9% and increased HDL by 60.2%, coupled to reduction of lipid and cholesterol levels in the liver and a higher elimination of lipids in the stool. Glycemic curve decreased significantly between fifteen and sixty minutes in rats fed on Agaricus supplemented diets.

A busca por hábitos alimentares saudáveis tem incentivado o estudo de novas fontes alimentares. Destacam-se os cogumelos comestíveis, como os do gênero Agaricus. Este trabalho avaliou a influência da ração semi-purificada, suplementada com o cogumelo Agaricus brasiliensis no perfil de lipídios, em ratos. Foi realizado experimento com 28 ratos machos Wistar, em 32 dias. Os animais foram separados em quatro grupos de sete dos quais o primeiro recebeu dieta AIN-93 (CAS), o segundo recebeu dieta AIN-93 adicionada de 1% de colesterol (CAS + COL) e o terceiro e o quarto grupos foram alimentados com dieta AIN-93 suplementada com cogumelos sem (COG) e com (COG + COL) adição de colesterol a 1%, respectivamente. No 32.º dia, amostras foram coletadas para análises de colesterol, triglicerídeos, colesterol hepático da gordura hepática. O estudo mostrou que Agaricus brasiliensis influenciou o perfil lipídico, diminuindo o colesterol total (-16%) e os triglicérides (- 26,9%), além de aumentar o HDL (+ 60,2%). É possível afirmar que nutrientes contidos em Agaricus brasiliensis são moduladores do perfil lipídico de ratos, diminuindo a deposição de lipídios hepáticos e aumentando a sua eliminação fecal. A curva glicêmica mostrou declínio significativo entre quinze e sessenta minutos em ratos alimentados com dieta contendo o cogumelo.

Análise do potencial antioxidante do consumo oral da farinha produzida com micélio de Agaricus brasiliensis em hamsters hipercolesterolêmicos / The antioxidant potential of oral intake of flour produced from Agaricus brasiliensis mycelium in hamsters with hypercholesterolemia

O sistema de defesa antioxidante inibe ou reduz os danos causados às células pelas espécies reativas de oxigênio. Alguns compostos antioxidantes presentes na dieta auxiliam na defesa antioxidante do plasma. O potencial antioxidante do consumo oral de farinha produzida com micélio de Agaricus brasiliensis fermentado sobre grãos de trigo foi analisado nos plasmas de hamsters Golden Syrian machos hipercolesterolêmicos, que foram divididos em quatro grupos: P(dieta padrão), H (dieta hipercolesterolêmica padrão), C (dieta padrão + 10 % de farinha de trigo contendo micélio de A. brasiliensis), e HC (dieta hipercolesterolêmica padrão + 10 % de farinha de trigo contendo micélio deA. brasiliensis). Os animais foram alimentados durante 40 dias e depois sacrificados para coletar materiais biológicos.A análise da capacidade antioxidante mostrou que a dieta do grupo C induziu maior aumento significativo da concentração de antioxidantes no plasma (0,39 mg.mL-1, expresso em ácido ascórbico). O grupo HC apresentou maiorcapacidade antioxidante do que grupo H (p < 0,05), pois inibiu 20,2 % do branqueamento da crocina. O grupo H inibiu10,4 %, porém o grupo HC demonstrou capacidade antioxidante semelhante ao do grupo P (16,64 %). O consumo da farinha de trigo contendo micélio de A. brasiliensis estimulou a proteção antioxidante no plasma dos animais...

Bioacumulação de zinco em micélio de Agaricus subrufescens / Zinc bioaccumulation in Agaricus subrufescens mycelium / Bioacumulación de zinc en micelio de Agaricus subrufescens

Fungos basidiomicetos têm a capacidade de bioacumular metais pesados, no entanto existem poucos trabalhos sobre bioacumulação de zinco em micélio de Agaricussubrufescens. O objetivo deste trabalho foi avaliar a bioacumulação de zinco em micélio vegetativo de A. subrufescens cultivado em meio sólido e líquido. O fungo foi crescido em meio sólido ou em meio líquido a base de extrato de malte adicionado de ZnSO4 a fim de obter zero; 2,5; 5; 7,5; 10; 15 ou 20 ppm de zinco. Os meios foram inoculados e após 14 dias foi determinada a biomassa e a bioacumulação de zinco. A adição de zinco no meio de cultivo inibiu o crescimento micelial e induziu a bioacumulação na biomassa tanto no cultivo sólido como no líquido. Adições acima de 7,5 ppm de zinco inibiram totalmente o crescimento micelial. O fungo crescido em meio de cultivo líquido sofre maior inibição do crescimento com a adição de zinco e maior bioacumulação que no meio sólido...

Fungi basidiomycetes have the ability to bioaccumulate heavy metals, but there are few studies on zinc bioaccumulation in the mycelium of Agaricus subrufescens. The objective of this study is to evaluate the zinc bioaccumulation in the mycelium of A. subrufescens cultivated in solid and liquid culture media. Mycelium was grown on solid or liquid medium in malt extract base added with ZnSO4 to obtain zero, 2.5, 5, 7.5, 10, 15 or 20-ppm zinc. Mycelial biomass and zinc bioaccumulation were determined 14 days after inoculation in the culture media. Addition of zinc in culture medium inhibited mycelial growth and induced biomass bioaccumulation both in solid and in liquid culture. Additions higher than 7.5-ppm zinc completely inhibited mycelial growth in culture medium. Mycelial growth in liquid culture presented greater increase of growth inhibition with the addition of zinc and greater bioaccumulation than in solid medium...

Hongos basidiomicetos tienen la capacidad de bioacumular metales pesados, sin embargo hay pocos estudios sobre la bioacumulación de zinc en el micelio de Agaricus subrufescens. El objetivo de este estudio ha sido evaluar la bioacumulación de zinc en el micelio de A. subrufescens cultivado en medio sólido y líquido. El hongo ha crecido en medio sólido o líquido a base de extracto de malta agregado de ZnSO4 para obtener cero; 2.5, 5, 7.5, 10, 15 o 20 ppm de zinc. Los medios fueron inoculados y después de 14 días se determinó la biomasa y la bioacumulación de zinc. La adición de zinc en el medio del cultivo inhibió el crecimiento micelial y indujo la bioacumulación de la biomasa tanto en el cultivo sólido como en el líquido. Adiciones superiores a 7.5 ppm de zinc inhibieron completamente el crecimiento del micelio. El hongo crecido en medio de cultivo líquido sufre mayor inhibición del crecimiento con la adición de zinc y mayor bioacumulación que en el medio sólido...

Cereal grains and glycerol in Agaricus blazei cryopreservation / Grãos de cereais e glicerol na criopreservação de Agaricus blazei

Agaricus blazei is an important commercial basidiomycete studied for its biological activity. However, little has been studied about the preservation techniques of this basidiomycete, and cryopreservation is one alternative. The aim of this study was to evaluate the physical and chemical effects of different cultivation media and glycerol on A. blazei cryopreservation at -20 ºC and at -70 ºC. A solid cultivation medium consisting of agar with ground whole cereal grains (hard endosperm wheat, medium hard endosperm wheat or hard endosperm rye) or malt extract agar, or whole cereal grains (hard endosperm wheat, medium hard endosperm wheat or hard endosperm rye) without agar was used. Cultivation media had zero or 5% glycerol addition. Cultivation medium grains or disks containing mycelia were transferred to cryotubes with glycerol at 5% with or without water and then were cryopreserved at -20 ºC or at -70 ºC. After one-year or two-year cryopreservation, fungus viability was evaluated. The results showed that the physical structure of whole grains of hard and medium hard wheat is effective (p≤0.01) for two-year cryopreservation at -70 ºC as well as the use of glycerol in the cultivation medium or as a cryoprotectant (p≤0.01) at -70 ºC. Cryopreservation at -20 ºC was ineffective (p≤0.01) to preserve fungus viability.

Agaricus blazei é um basidiomiceto de importância comercial amplamente estudado quanto à sua atividade biológica. Entretanto, pouco foi estudado sobre as técnicas de preservação deste basidiomiceto, sendo a criopreservação uma alternativa. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos físicos e químicos de diferentes meios de cultivo e do glicerol na criopreservação de A. blazei à -20 ºC e à -70 ºC. Foi usado meio de cultivo sólido composto por ágar com farinha de grãos inteiros de cereais (trigo textura dura ou semidura ou centeio textura dura) ou ágar extrato de malte, ou grãos de cereais inteiros (trigo textura dura ou semidura ou centeio textura dura) sem ágar. Os meios de cultivo tiveram adição de glicerol (zero ou 5%). Grãos ou discos de meio de cultivo contendo o micélio foram transferidos para criotubos com glicerol a 5%, ou com ou sem água, sendo, em seguida, criopreservados (-20 ºC ou -70 ºC). Após um ou dois anos de criopreservação foi avaliada a viabilidade do fungo. Os resultados mostraram que a estrutura física de grãos inteiros de trigo semiduro ou duro é efetiva (p≤0,01), quando em -70 ºC para criopreservação por dois anos, assim como o uso de glicerol tanto no meio de cultivo ou como solução crioprotetora (p≤0,01). A criopreservação a -20 ºC mostrou-se ineficaz (p≤0,01) na manutenção da viabilidade do fungo.

Cryopreservation of Agaricus blazei in liquid nitrogen using DMSO as cryoprotectant / Criopreservação de Agaricus blazei em nitrogênio líquido usando DMSO como crioprotetor

The preservation of Agaricus blazei is generally done using successive subcultivations that are laborious and are subject to contaminations or genetic degenerations, resulting in loss of biotechnological interest characteristics. An alternative process would be cryopreservation, but there are no reports of methodologies for this basidiomycete in liquid nitrogen. Thus, the objective of this study was to evaluate mycelial viability of A. blazei strains after cryopreservation in liquid nitrogen in order to establish the initial parameters of species preservation. Five strains grown on malt extract agar (MEA) were used. Disks of MEA containing A. blazei mycelium were transferred for screwcap cryovials containing the cryoprotectant, 10% dimethyl sulfoxide. Then, they were cooled at 8 ºC for 30 min and kept at -196 ºC with liquid nitrogen. After 1.5 year of cryopreservation, the cryovials were thawed in water bath at 30 ºC for 15 min. The disks with mycelia were transferred to MEA culture media without cryoprotectant and kept at 28 ºC for 30 days. A. blazei strains respond differently to the cryopreservation method at -196 ºC by varying mycelial viability recovery. Cryopreservation with liquid nitrogen, using dimethyl sulfoxide as cryoprotectant, is not the most appropriate one for A. blazei preservation.

A preservação de Agaricus blazei ocorre usualmente por subculturas sucessivas que são laboriosas e estão sujeitas a contaminações ou degenerações genéticas, com eventual perda das características de interesse biotecnológico. Uma alternativa a este processo é a criopreservação, no entanto não existem relatos de metodologias para este basidiomiceto com uso de nitrogênio líquido. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a criopreservação em nitrogênio líquido de linhagens de A. blazei, visando estabelecer os parâmetros iniciais de criopreservação para a espécie. Foram utilizadas cinco linhagens do fungo crescidas em meio de ágar-extrato de malte (MEA). Os discos de MEA contendo o micélio crescido foram transferidos em temperatura ambiente (25 ºC) para criotubos com rosca contendo o agente crioprotetor dimetilsulfóxido a 10%. Em seguida foram resfriados a 8 ºC por 30 min e mantidos a -196 ºC com nitrogênio líquido. Após 1,5 anos de criopreservação os criotubos foram descongelados por imersão em água a 30 ºC por 15 min. Os discos com micélio foram transferidos para meio de cultura MEA, sem o agente crioprotetor, e mantidos por 30 dias a 28 ºC. As linhagens de A. blazei respondem de forma diferente ao processo de criopreservação a -196 ºC com variação na recuperação da viabilidade do micélio. A criopreservação em nitrogênio líquido de A. blazei, com dimetilsulfóxido como crioprotetor, não é a forma mais adequada para a preservação desta espécie.

Production flush of Agaricus blazei on Brazilian casing layers

This study aimed to verify the biological efficiency and production flushes of Agaricus blazei strains on different casing layers during 90 cultivation days. Four casing layers were used: mixture of subsoil and charcoal (VCS), lime schist (LSC), São Paulo peat (SPP) and Santa Catarina peat (SCP); and two genetically distant A. blazei strains. The fungus was grown in composted substratum and, after total colonization, a pasteurized casing layer was added over the substratum, and fructification was induced. Mushrooms were picked up daily when the basidiocarp veil was stretched, but before the lamella were exposed. The biological efficiency (BE) was determined by the fresh basidiocarp mass divided by the substratum dry mass, expressed in percentage. The production flushes were also determined over time production. The BE and production flushes during 90 days were affected by the strains as well as by the casing layers. The ABL26 and LSC produced the best BE of 60.4 percent. Although VCS is the most used casing layer in Brazil, it is inferior to other casing layers, for all strains, throughout cultivation time. The strain, not the casing layer, is responsible for eventual variations of the average mushroom mass. In average, circa 50 percent of the mushroom production occurs around the first month, 30 percent in the second month, and 20 percent in third month. The casing layer water management depends on the casing layer type and the strain. Production flush responds better to water reposition, mainly with ABL26, and better porosity to LSC and SCP casing layers.

Viabilidade de agaricus blazei em diferentes condições de preservação / Viabilidad de agaricus blazei en diferentes condiciones de preservación / Viability of agaricus blazei under different preservation conditions

A técnica de transferências periódicas de fragmentos de micélio para novo meio de cultura é a mais utilizada para a preservação de Agaricus blazei. Entretanto, esta técnica apresenta maior risco de contaminação, degeneração genética e perda de caracteristicas biológicas. O desenvolvimento de técnicas de preservação que permitam a manutenção da viabilidade da espécie por mais tempo e a um menor custo é de interesse biotecnológico. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade de A. blazei crescido em dois meios de cultivo e preservado à +4 ºC ou -20 ºC em diferentes recipientes de contenção. O fungo foi crescido em meio de ágar-extrato de malte ou ágar-grão de trigo moído e preservado à +4 ºC ou -20 ºC em diferentes recipientes de contenção, simples ou duplos, com adição de soluções aquosas de glicerol, sacarose, glicose, água ultrapura ou sem adição de crioprotetor. Após 1 ou 12 meses o micélio preservado foi transferido para ágar-extrato de malte para avaliação da viabilidade micelial. Os crioprotetores glicerol, sacarose e glicose, associados com o meio de cultura ágar-extrato de malte ou ágar-grão de trigo moído, em recipiente de contenção simples ou duplo são efetivos para preservação à +4 ºC por períodos curtos, um mês, mas não são efetivos para períodos longos, 12 meses. Os crioprotetores, meios de cultivo e recipientes de contenção simples ou duplos não são efetivos para criopreservação do fungo à -20 ºC. Os recipientes simples são tão eficientes quanto os recipientes duplos para evitar contaminações e preservar o fungo.

Continuous mycelial subculturing is frequently used for the preservation of Agaricus blazei. However, this technique has a higher risk of contamination, genetic degeneration and loss of biological characteristics. The development of preservation techniques that allow maintaining the viability of this species longer and at lower costs is of biotechnological interest. Thus, the objective of this study was to evaluate the viability of A. blazei grown in two culture media and preserved at +4 ºC or -20 ºC in different containment vessels. The fungus was grown on malt extract agar or grounded wheat grain agar culture medium and preserved at +4 ºC or -20 ºC in different containment vessels, single or double ones, with the addition of aqueous solutions of glycerol, saccharose, glucose, ultrapure water or without addition of cryoprotectant. After 1 or 12 months, the preserved mycelium was transferred to malt extract agar for assessment of mycelial viability. Glycerol, saccharose and glucose associated with malt extract agar or grounded wheat grain agar culture medium, in single or double containment vessels, are effective for preservation at +4 ºC for a short period, one month, but they are not effective for a longer period, 12 months. Cryoprotectants, culture media and single or double containment vessels are not effective for fungus cryopreservation at -20 ºC. Simple containment vessels are as efficient as double ones to prevent contamination and to preserve the fungus.

La técnica de transferencias periódicas de fragmentos de micelio para nuevo medio de cultura es la más utilizada para la preservación de Agaricus blazei. Sin embargo, esta técnica presenta mayor riesgo de contaminación, degeneraciones genéticas y pérdidas de características biológicas. El desarrollo de técnicas de preservación que permitan la manutención y viabilidad de la especie por más tiempo y con un costo más bajo es de interés biotecnológico. De esta manera, el objetivo de este estudio fue evaluar la viabilidad de A. blazei sembrado en dos medios de cultivo y preservados en +4 ºC o -20 ºC en diferentes recipientes de contención. El hongo se cultivó en medio de extracto de agar de malta o agar de grano de trigo molido y preservado en +4 ºC o -20 ºC en diferentes recipientes de contención simple o doble, con adición de soluciones acuosas de glicerol, sacarosa, glucosa, agua ultra pura o sin adición de crioprotector. Después de 1 o 12 meses, el micelio preservado fue transferido para extracto de agar de malta para evaluación de la viabilidad del micelio. Los crioprotectores glicerol, sacarosa y glucosa, asociados con el medio de cultura extracto de agar de malta o de agar de grano de trigo molido, en recipiente de contención simple o doble son eficaces para la preservación a +4 ºC por períodos cortos, un mes, pero no son eficaces por períodos largos, como 12 meses. Los crioprotectores medios de cultivo y recipientes de contención simples o dobles no son eficaces para la criopreservación del hongo a -20 ºC. Recipientes simples son tan eficaces como los dobles para evitar contaminaciones y preservar el hongo.

Microbial diversity in a bagasse-based compost prepared for the production of Agaricus brasiliensis / Diversidade microbiana em composto a base de bagaço de cana preparado para produção de Agaricus brasiliensis

Edible mushrooms are renowned for their nutritional and medicinal properties and are thus of considerable commercial importance. Mushroom production depends on the chemical composition of the basic substrates and additional supplements employed in the compost as well as on the method of composting. In order to minimise the cost of mushroom production, considerable interest has been shown in the use of agro-industrial residues in the preparation of alternative compost mixtures. However, the interaction of the natural microbiota present in agricultural residues during the composting process greatly influences the subsequent colonisation by the mushroom. The aim of the present study was to isolate and identify the microbiota present in a sugar cane bagasse and coast-cross straw compost prepared for the production of Agaricus brasilienses. Composting lasted for 14 days, during which time the substrates and additives were mixed every 2 days, and this was followed by a two-step steam pasteurisation (55 - 65ºC; 15 h each step). Bacteria, (mainly Bacillus and Paenibacillus spp. and members of the Enterobacteriaceae) were the predominant micro-organisms present throughout the composting process with an average population density of 3 x 10(8) CFU/g. Actinomycetes, and especially members of the genus Streptomyces, were well represented with a population density of 2 - 3 x 10(8) CFU/g. The filamentous fungi, however, exhibited much lower population densities and were less diverse than the other micro-organisms, although Aspergillus fumigatus was present during the whole composting process and after pasteurisation.

Os cogumelos comestíveis são apreciados pelas suas propriedades nutricionais e medicinais e, por essa razão, possuem alto valor econômico. A produção de cogumelos depende da composição química dos substratos básicos, dos suplementos utilizados e da preparação do composto no qual o fungo será cultivado. Considerando-se que os custos de produção precisam ser minimizados, os resíduos agroindustriais representam uma fonte alternativa e econômica para a preparação do composto. A interação da microbiota natural dos resíduos agrícolas durante o processo de compostagem influencia a subseqüente colonização do cogumelo. Visando-se a produção de A. brasiliensis, o presente trabalho objetivou isolar e identificar a microbiota presente no composto preparado a partir de bagaço de cana e capim coast-cross. O processo de compostagem durou 14 dias com reviragens da pilha a cada dois dias, o qual foi seguido de pasteurização (55 65 ºC) em duas fases por 15 h cada. As bactérias (principalmente Bacillus, Paenibacillus e espécies da família Enterobacteriaceae) foram os microrganismos predominantes durante todo o processo com uma densidade populacional média de 3.0 x 10(8) UFC/g. Os actinomicetos, principalmente os do gênero Streptomyces, estiveram bem representados, com uma densidade populacional de 2.0 a 3.0 x 10(8) UFC/g. Os fungos filamentosos foi a classe de microrganismos com menor densidade populacional e menor diversidade, embora a espécie Aspergillus fumigatus esteve presente durante todo o processo de compostagem e também após a pasteurização do composto.

Avaliação in vivo da qualidade protéica do champignon do Brasil (Agaricusbrasiliensis Wasser et al. ) / In vivo protein quality evaluation of champignon do Brasil (Agaricus brasiliensis Wasser et al. )

OBJETIVO: O trabalho aqui descrito trata da avaliação de uma dieta experimental contendo Champingnon do Brasil (Agaricus brasiliensis) como fonte de proteína em um modelo experimental de ratos. MÉTODOS: Para este propósito, foram selecionados 24 ratos Wistar machos, recém desmamados (21 dias) divididos em 3 grupos de 8 animais cada, que foram alimentados com uma dieta padrão de caseína, ou com uma dieta experimental de proteína de Agaricus brasiliensis ambas contendo 10% de proteína e isoenergéticas ou ainda, com uma dieta com muito baixo teor de proteína. O ensaio biológico foi realizado em 28 dias, ao longo dos quais se determinou a concentração de nitrogênio na urina e nas fezes, além dos cálculos do Quociente de Eficiência Alimentar (ganho de peso dividido pelo consumo de dieta), do Quociente de Eficiência Protéica (ganho de peso dividido pelo consumo de proteína), da Razão Protéica Líquida (ganho de peso corrigido dividido pelo consumo de proteína) e da Digestibilidade Verdadeira. RESULTADOS: Os resultados demonstraram que quando o Champignon do Brasil foi utilizado como fonte exclusiva de proteína na dieta, os índices de qualidade protéica apresentaram-se baixos (Quociente de Eficiência Alimentar=0,08, Quociente de Eficiência Protéica=0,92 e Razão Protéica Líquida=3,00), quando comparados com a dieta padrão caseína (Quociente de Eficiência Alimentar=0,30, Quociente de Eficiência Protéica=3,05 e Razão Protéica Líquida=4,21). Os índices obtidos para o grupo Agaricus mostraram-se comparáveis àqueles apresentados por alguns tipos de proteína vegetal e podem ser explicados por sua limitação em aminoácidos essenciais, notadamente a lisina e a leucina, respectivamente primeiro e segundo aminoácido limitante. CONCLUSÃO: Os dados apontam para a utilização da proteína do Agaricus brasiliensis como uma boa fonte para complementação protéica, quando combinada com outras culturas vegetais comuns na dieta típica brasileira.

OBJECTIVE: The present work describes the biological evaluation of an experimental diet containing Champingnon do Brasil (Agaricus brasiliensis) as the main protein source for a rat experimental model. METHODS: For this purpose, 24 21-day-old male Wistar rats were divided into 3 groups of 8 animals each and were fed with a standard casein diet or an experimental Agaricus diet both with 10% protein and isoenergetic or a very low protein diet. A biological assay was done for 28 days by determining the concentration of nitrogen in the urine and stools and calculating the Food Efficiency Ratio (weight gain divided by food intake), Protein Efficiency Ratio (weight gain divided by protein intake), Net Protein Ratio (corrected weight gain divided by protein intake) and True Digestibility. RESULTS: The results showed that when Champignon do Brasil was used as the only source of protein in the diet, the Protein Quality indices were low (Food Efficiency Ratio=0.08, Protein Efficiency Ratio=0.92 and Net Protein Ratio=3.00) when compared with the standard casein diet (Food Efficiency Ratio=0.30, Protein Efficiency Ratio=3.05 and Net Protein Ratio=4.21). The indices obtained for Agaricus were comparable to some plant protein sources and can be explained by the first and second limiting amino acids, lysine and leucine, respectively. CONCLUSION: The data show that Agaricus brasiliensis is a good source of protein when combined with other vegetables that are common in the typical Brazilian diet.

Isolation and mycelial growth of Diehliomyces microsporus: effect of culture medium and incubation temperature

The false truffle is one of the main problems in the production of the Agaricus brasiliensis in Brazil and the control of this fungal competitor has been rather difficult due to difficulties in the isolation and cultivation of this pathogen. This experiment was conducted in three stages, the first consisting of the isolation of Diehliomyces microsporus starting from portions of the fruiting body and through the ascospores suspension; second, D. microsporus cultivated in vitro at 15, 20, 25, 30 and 35°C in six different culture media (CSDA, OCDA, PCDA, ODA, PDA, CDA); third, D. microsporus was inoculated on sterilized compost for formation of the fruiting body. The colony formation from tissue of D. microsporus starting from portions of fruiting body was more efficient than germination of the ascospores. Compost medium (CDA) allowed a larger diameter of the D. microsporus colony, followed by the medium made up of compost and potato mixture, favoring a denser composition. The largest mycelial growth speed of D. microsporus occurred when the culture was incubated at 28 and 30°C. Incubation temperatures lower than 15°C or above 35°C inhibited the mycelial growth of D. microsporus completely. The fruiting bodies were obtained easily in sterilized compost and later inoculated along with mycelial competitor.

A falsa trufa está sendo um dos principais problemas na produção do Agaricus brasiliensis cultivado no Brasil e o controle deste fungo competidor tem sido difícil, devido às dificuldades encontradas no isolamento e cultivo do patógeno. Este experimento foi conduzido em três etapas, sendo a primeira constituída pelo isolamento de Diehliomyces microsporus a partir de porções do ascostroma e através da suspensão de ascósporos; a segunda, o cultivo in vitro de D. microsporus nas temperaturas de 15, 20, 25, 30 e 35°C e em seis meios de cultura (CTDA, ACDA, BCDA, ADA, BDA e CDA) e a terceira pela inoculação de D. microsporus no composto (pasteurizado, composto esterilizado e composto esterilizado com camada de cobertura) para formação dos ascostromas. O isolamento de D. microsporus a partir de fragmentos do ascostroma recém coletado foi mais eficiente do que a germinação dos ascósporos; o meio de cultura à base de composto (CDA) proporcionou maior diâmetro da colônia de D. microsporus, seguido pelo meio constituído da mistura de composto e batata, favorecendo um micélio mais denso; a maior velocidade de crescimento de D. microsporus ocorreu quando a cultura foi incubada entre 28 e 30°C; temperaturas de incubação menor que15°C ou a acima de 35°C inibiu completamente o crescimento micelial de D. microsporus; a obtenção de frutificação de D. microsporus foi facilmente obtida em composto esterilizado e posteriormente inoculado com o competidor.