Hemagglutination in gill capillaries of sheepshead, Archosargus probatocephalus (Perciformes: Sparidae), infected by a myxosporidean / Hemaglutinação em capilares branquiais de sargo-de-dente, Archosargus probatocephalus (Perciformes: Sparidae) infectado por um mixosporídeo

Abstract During a survey Myxozoa, four specimens of the sheepshead (18 ± 1.5 cm and 59 ± 2.5 g) (Archosargus probatocephalus) were collected in the Ipioquinha river (Maceió/AL). Transmission electron microscopy observations revealed erythrocyte agglutinations in gill capillaries located near spherical cysts containing myxospores of the genus Henneguya. This hemagglutination partially or totally obstructed the gill capillaries. Erythrocytes occurred in close adherence to each other, with a closed intercellular space. A few lysed erythrocytes were observed among agglutinated cells. The reduced lumen of the capillaries was partially filled with amorphous dense homogenous material adhering to the erythrocytes. In addition, heterogeneous masses of irregular lower electron density were observed in the reduced channel of the capillary. The agglutinated erythrocytes appeared dense and homogenous, lacking cytoplasmic organelles. The nuclei had the appearance of normal condensed chromatin masses, generally without visible nucleoli. This occurrence of hemagglutination only in the capillaries located in close proximity to the developing myxozoan cysts suggests that parasite development may be a factor triggering erythrocyte agglutination. This is supported by previous experimental studies that showed a probable correlation between parasitic infections and hemagglutination. Nonetheless, further studies are necessary in order to better understand the physicochemical processes involved in this phenomenon.

Resumo Durante pesquisa de mixozoários foram coletados quatro espécimes do peixes sargo-de-dente (18 ± 1.5 cm e 59 ± 2.5 g) (Archosargus probatocephalus), no rio Ipioquinha (Maceió/AL). Observações por microscopia eletrônica de transmissão revelaram aglutinação de eritrócitos em capilares branquiais localizados próximos a cistos esféricos, contendo mixosporos do gênero Henneguya. Essa hemaglutinação obstruiu parcial ou totalmente os capilares branquiais. Os eritrócitos apareceram em forte aderência entre si, com espaço intercelular fechado. Foram observados poucos eritrócitos lisados entre as células aglutinadas. O lúmen reduzido dos capilares foi parcialmente preenchido com material homogêneo denso amorfo aderido aos eritrócitos, além de massas livres heterogêneas de densidade eletrônica baixa e irregular observadas no canal reduzido dos capilares. Os eritrócitos aglutinados pareciam densos e homogêneos, sem organelas citoplasmáticas. Os núcleos apareceram como massas normais de cromatina condensada, geralmente sem nucléolos visíveis. A ocorrência de hemaglutinação apenas nos capilares, localizados nas proximidades dos cistos mixozoários, sugere que o desenvolvimento parasitário pode ser um fator desencadeante da aglutinação eritrocitária. Isso é corroborado por estudos experimentais anteriores que mostraram uma provável correlação entre infecções parasitárias e hemaglutinação. No entanto, novos estudos são necessários para melhor compreender os processos físico-químicos envolvidos neste fenômeno.

Detection of anti-Toxoplasma gondiiantibodies in wild free-living birds and mammals from the northwest region of São Paulo state, Brazil / Detecção de anticorpos anti-Toxoplasma gondiiem aves e mamíferos silvestres de vida livre da região noroeste do estado de São Paulo, Brasil

Toxoplasmosis is a protozoonosis caused by an obligate intracellular parasite named Toxoplasma gondii, which can infect humans and a large number of homeothermic animal species with worldwide distribution. The present study aimed to detect anti-T. gondii antibodies from serological samples of free-living wild animals from the northwest region of São Paulo state, Brazil. Thirty-two samples (eight from birds and 24 from mammals) were analyzed by the modified agglutination test (MAT) using 5 cut-off points for birds and 25 for mammals. Seropositivity was observed in 25% (2/8) of birds, including the species Rupornis magnirostris (roadside hawk) and Caracara plancus (southern caracara), and 29.2% (7/24) animals were seropositive among mammals, including one hoary fox (Lycalopex vetulus), two maned wolves (Chrysocyon brachyurus), one black howler monkey (Alouatta caraya), two crab-eating foxes (Cerdocyon thous) and one gray brocket deer (Mazama gouazoubira). The results obtained with the present study indicate the exposure to T. gondiiof free-living wild animals from the northwest region of São Paulo state and, therefore, that they probably play a role in the transmission and maintenance of T. gondii in the environment they inhabit. Thus, identification of the infection in several animal species in the region indicates the environmental contamination of the area. Studies of this nature may help to understand the importance of the prevention and control of this disease in Brazil.(AU)

A toxoplasmose é uma protozoonose causada por um parasita intracelular obrigatório denominado Toxoplasma gondii, que pode infectar os humanos e um vasto número de espécies animais homeotérmicas, apresentando distribuição mundial. O presente estudo objetivou a detecção de anticorpos anti-T. gondii a partir de amostras sorológicas de animais silvestres de vida livre da região noroeste do estado de São Paulo. Foram analisadas 32 amostras (oito de aves e 24 de mamíferos) por meio do teste de aglutinação modificado (MAT), utilizando ponto de corte 5 para as aves e 25 para os mamíferos. Soropositividade foi observada em 25% (2/8) das aves, incluindo as espécies Rupornis magnirostris (gavião-carijó) e Caracara plancus (carcará); entre os mamíferos, 29,2% (7/24) foram soropositivos incluindo uma raposa-do-campo (Lycalopex vetulus), dois lobos-guará (Chrysocyon brachyurus), um bugio-preto (Alouatta caraya), dois cachorros-do-mato (Cerdocyon thous) e um veado-catingueiro (Mazama gouazoubira). Os resultados obtidos com o presente estudo indicam a exposição dos animais selvagens de vida livre a T. gondii na região noroeste do estado de São Paulo e, portanto, que provavelmente apresentam papel na transmissão e manutenção de T. gondii no meio ambiente em que vivem. Assim, a identificação da infecção em várias espécies de animais na região indica a contaminação ambiental da área. Estudos dessa natureza podem ajudar no entendimento sobre a prevenção e o controle dessa importante doença no Brasil.(AU)

Presence of anti-Leptospira spp. antibodies in captive yellow-spotted river turtles (Podocnemis unifilis) in the Eastern Amazon / Presença de anticorpos anti-Leptospira spp. em tracajás (Podocnemis unifilis) na Amazônia Oriental

ABSTRACT: We describe anti-Leptospira spp. agglutinin in yellow-spotted river turtles (Podocnemis unifilis)in the Amazon region. Ninety-eight serum samples from individuals housed at the Bosque Rodrigues Alves Zoobotanical Garden of Amazonia, Belém, PA, Brazil, were subject to the microscopic agglutination test (MAT) using 19 different Leptospira spp. antigen serogroups. Thirty-four of the 98 samples (35%) were reactive, with titers ranging from 100 to 3200, and eight 8 reactive samples (23.5%) co-agglutinated under two or more serovars.The most common serogroup was Hebdomadis (26.9%, 7/26), followed by Semaranga (23%, 6/26), Shermani (19.2%, 5/26), Djasiman (11.5%, 3/26), and Australis (7.7%, 2/26); Bataviae, Javanica, and Sejroewere represented by a single sample each (3.9%). The presence of turtles reactive to anti-Leptospira spp. antibodies implies exposure to the pathogen.

RESUMO: Este trabalho descreve a detecção de aglutininas anti-Leptospira spp. em tracajás (Podocnemis unifilis) na região Amazônica. Obtivemos 98 amostras de soro, as quais foram submetidas ao teste de aglutinação microscópica (MAT), utilizando 31 antígenos de diferentes sorogrupos de Leptospira spp. Das 98 amostras de soro coletadas, 35% (34/98) reagiram apresentando titulações de 100 a 3200; 23,53% dessas amostras (8/34) coaglutinaram na presença de dois ou mais sorovares. O sorogrupo mais comum foi Hebdomadis com 26,9% (7/26), seguido de Semaranga com 23% (6/26), Shermani com 19,2% (5/26), Djasiman com 11,5% (3/26), e Australis com 7,7% (2/26). Bataviae, Javanica, e Sejroe foram representados com apenas uma amostra (3,9%). A presença de tracajás reagentes a anticorpos contra Leptospira spp. implica na exposição ao patógeno.

Seroepidemiology of Toxoplasma gondii in domestic cattle, sheep, goats and pigs from São Tomé and Príncipe / Soroepidemiologia de Toxoplasma gondii em bovinos, ovinos, caprinos e suínos domésticos de São Tomé e Príncipe

Abstract Despite the global importance of the zoonotic parasite Toxoplasma gondii, little is known regarding its infection in the Democratic Republic of São Tomé and Príncipe (DRSTP). This is the first report of antibodies to T. gondii in cattle, sheep, goats and pigs from the DRSTP. Antibodies were assessed by the modified agglutination test (MAT), with a cut-off titer of 100 for cattle and 20 for sheep, goats and pigs. The present study revealed an overall seroprevalence of 55.8%; 27.1% in 48 cattle, 68.4% in 98 sheep, 70.1% in 97 goats and 43.7% in 103 pigs. The south geographical area for cattle, the central area for sheep, and adult age and living in the central region for goats were found to be risk factors for seropositivity to T. gondii. These results support the scenario of a considerable presence of sporulated oocysts as well as of infected intermediate hosts in the local environment. Consumption of raw or undercooked meat should be considered as an important potential source of infection for animals and humans in the DRSTP.

Resumo Apesar da importância global do parasita zoonótico Toxoplasma gondii, pouco se conhece sobre sua infecção na República Democrática de São Tomé e Príncipe (RDSTP). Esse é o primeiro relato de anticorpos para T. gondii em bovinos, ovinos, caprinos e suínos da RDSTP. Os anticorpos foram pesquisados pelo teste de aglutinação direta modificada (TADM), com um título de corte de 100 para bovinos e de 20 para ovinos, caprinos e suínos. O presente estudo revelou uma soroprevalência global de 55,8%: 27,1% em 48 bovinos, 68,4% em 98 ovinos, 70,1% em 97 caprinos e 43,7% em 103 suínos. A área geográfica sul para os bovinos, a área central para os ovinos, bem como a idade adulta e a região central para os caprinos foram considerados fatores de risco para soropositividade a T. gondii. Esses resultados suportam o cenário de uma considerável presença de oocistos esporulados, bem como de hospedeiros intermediários infectados no ambiente local. O consumo de carne crua ou mal passada deve ser considerado como uma importante fonte potencial de infecção para animais e seres humanos na RDSTP.

Avaliação das reações de Hemaglutinação Indireta (HI) e Aglutinação Modificada (MAT) na detecção de anticorpos IgG anti-T. gondii em exsudatos cárneos bovinos / Evaluation of indirect Hemagglutination (HI) and Modified Agglutination (MAT) reactions in the detection of anti-T. gondii IgG antibodies in bovine meat exudates

Toxoplasmose é uma zoonose parasitária com ampla distribuição mundial provocada pelo Toxoplasma gondii, considerado um dos protozoários mais bem sucedidos do planeta, pois infecta cerca de um terço da população mundial. Dentre as formas de transmissão, o consumo de carne mal cozida, contendo cistos, tem sido considerado um fator de risco para aquisição desta zoonose. Uma abordagem alternativa para o controle da toxoplasmose pela ingestão de carne bovina seria a sorologia dos bovinos, já que animais soropositivos albergam cistos teciduais. Contudo, a obtenção de soro para esta avaliação, nem sempre é factível, dada a dificuldade de coleta de sangue durante a linha de abate e sua ausência em cortes comerciais. O exsudato cárneo é uma alternativa para detecção de anticorpos anti - T. gondii em cortes comerciais de carne, que foi a proposta deste estudo para avaliar o desempenho dos testes de Hemaglutinação Indireta (HI) e Aglutinação Modificada (MAT) quando comparados ao ELISA usando exsudato cárneo. Este estudo mostrou que a acurácia dos testes de aglutinação não foi viável devido aos baixos índices de sensibilidade e especificidade quando comparados ao ELISA. Estes dados demonstram a importância da escolha de testes eficientes como ELISA para aplicação no controle da qualidade e inocuidade de cortes comerciais de carne bovina.

Toxoplasmosis is a parasitic zoonosis with a wide worldwide distribution caused by Toxoplasma gondii, which is considered one of the most successful protozoa on the planet, since it can infect a third of the world population. Among the forms of transmission, consumption of undercooked meat has been considered as a risk factor for the acquisition of this zoonosis. An alternative approach to toxoplasmosis control by beef ingestion could be the serological diagnosis in cattle, since seropositives animals harbor tissue cysts. However, the use of serum for this evaluation is not always feasible due to the difficulty of blood collection during slaughter and its absence in commercial beef cuts. Meat exudate is an alternative for the detection of anti-T. gondii antibodies in commercial beef cuts, which was the propose of this study to evaluate the performance of Indirect Hemagglutination (HI) and Agglutination Modified (MAT) tests compared to ELISA using meat exudates. This study showed that the agglutination tests accuracy was not viable due to low sensitivity and specificity indexes when compared to ELISA. These data demonstrate the importance of choosing accurate tests such as ELISA for application in quality control and safety of commercial beef cuts.

Avaliação das reações de Hemaglutinação Indireta (HI) e Aglutinação Modificada (MAT) na detecção de anticorpos IgG anti-T. gondii em exsudatos cárneos bovinos / Evaluation of indirect Hemagglutination (HI) and Modified Agglutination (MAT) reactions in the detection of anti-T. gondiiIgG antibodies in bovine meat exudates

Toxoplasmose é uma zoonose parasitária com ampla distribuição mundial provocada pelo Toxoplasma gondii, considerado um dos protozoários mais bem sucedidos do planeta, pois infecta cerca de um terço da população mundial. Dentre as formas de transmissão, o consumo de carne mal cozida, contendo cistos, tem sido considerado um fator de risco para aquisição desta zoonose. Uma abordagem alternativa para o controle da toxoplasmose pela ingestão de carne bovina seria a sorologia dos bovinos, já que animais soropositivos albergam cistos teciduais. Contudo, a obtenção de soro para esta avaliação, nem sempre é factível, dada a dificuldade de coleta de sangue durante a linha de abate e sua ausência em cortes comerciais. O exsudato cárneo é uma alternativa para detecção de anticorpos anti - T. gondii em cortes comerciais de carne, que foi a proposta deste estudo para avaliar o desempenho dos testes de Hemaglutinação Indireta (HI) e Aglutinação Modificada (MAT) quando comparados ao ELISA usando exsudato cárneo. Este estudo mostrou que a acurácia dos testes de aglutinação não foi viável devido aos baixos índices de sensibilidade e especificidade quando comparados ao ELISA. Estes dados demonstram a importância da escolha de testes eficientes como ELISA para aplicação no controle da qualidade e inocuidade de cortes comerciais de carne bovina. (AU)

Toxoplasmosis is a parasitic zoonosis with a wide worldwide distribution caused by Toxoplasmagondii, which is considered one of the most successful protozoa on the planet, since it can infect a third of the world population. Among the forms of transmission, consumption of undercooked meat has been considered as a risk factor for the acquisition of this zoonosis. An alternative approach to toxoplasmosis control by beef ingestion could be the serological diagnosis in cattle, since seropositives animals harbor tissue cysts. However, the use of serum for this evaluation is not always feasible due to the difficulty of blood collection during slaughter and its absence in commercial beef cuts. Meat exudate is an alternative for the detection of anti-T. gondii antibodies in commercial beef cuts, which was the propose of this study to evaluate the performance of Indirect Hemagglutination (HI) and Agglutination Modified (MAT) tests compared to ELISA using meat exudates. This study showed that the agglutination tests accuracy was not viable due to low sensitivity and specificity indexes when compared to ELISA. These data demonstrate the importance of choosing accurate tests such as ELISA for application in quality control and safety of commercial beef cuts. (AU)

Seroprevalence of Toxoplasma gondii and Leishmania spp. in domestic donkeys from Portugal / Soroprevalência de Toxoplasma gondii e Leishmania spp. em jumentos domésticos de Portugal

Abstract Toxoplasma gondii and Leishmania infantum are zoonotic protozoal parasites. Serum samples were obtained from 186 donkeys (Equus africanus asinus) from Portugal and assessed for antibodies to T. gondii by the modified agglutination test (MAT). For titration of antibodies to Leishmania spp. the direct agglutination test was used (DAT). Eleven donkeys were seropositive for T. gondii with titres of 20 (n = 7), 80 (n = 2), 640 (n = 1) and ≥ 2560 (n = 1). One donkey was seropositive for Leishmania spp. (titre of 800). Donkeys in Portugal are exposed to and can be infected with T. gondii and Leishmania spp.

Resumo Toxoplasma gondii e Leishmania infantum são protozoários parasitas com potencial zoonótico. Foram obtidas amostras de soro de 186 jumentos (Equus africanus asinus) e avaliadas para anticorpos anti-T. gondii pelo teste de aglutinação direta modificada (TADM), em Portugal. Para a titulação de anticorpos anti-Leishmania spp. foi usado o teste de aglutinação direta (TAD). Onze jumentos foram soropositivos para T. gondii com títulos de 20 (n = 7), 80 (n = 2), 640 (n = 1) e ≥ 2560 (n = 1). Um jumento foi soropositivo para Leishmania spp. (título de 800). Os jumentos em Portugal estão expostos e podem ser infectados com T. gondii e Leishmania spp.

Anti-Toxoplasma gondii antibodies in mammals, birds and reptiles at the zoological-botanical park in João Pessoa, Paraíba, Brazil / Anticorpos anti-Toxoplasma gondii em mamíferos, aves e répteis no parque zoobotânico em João Pessoa, Paraíba, Brasil

The purpose of this study was to verify the occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibodies in 51 wild animals at the Arruda Câmara Zoological-Botanical Park in João Pessoa, PB, Brazil. Blood samples from different bird, mammal and reptile species were analyzed using the Modified Agglutination Test (MAT) with a cut-off point of 1:25. Anti-T. gondii antibodies were detected in 62.4% of the 51 tested animals. The following frequencies were found: 68.9% (20/29) in mammals, 80% (8/10) in birds, and 33.3% (4/12) in reptiles. This paper reports for the first time the occurrence of anti-T. gondii antibodies in birds of the species Pionites leucogaster (caíque), Anodorhynchus hyacinthinus (hyacinth macaw), Pavo cristatus (Indian peafowl), Urubitinga urubitinga (Brazilian eagle), and Buteo melanoleucus (black-and-white hawk-eagle). Reptiles of the species Caiman crocodilus (spectacled caiman), Chelonoidis carbonaria (red-footed tortoise) and Paleosuchus palpebrosus (Cuvier's dwarf caiman) were seropositive for T. gondii, although the significance of the presence of these anti-T. gondii antibodies in this group of animals requires a more in-depth study. We conclude that the frequency of antibodies found in the animals of this zoo is high and that the prophylactic measures that aim to diminish the environmental contamination by oocysts are necessary.(AU)

Este trabalho teve como objetivo verificar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em 51 animais silvestres mantidos no Parque Zoobotânico Arruda Câmara, João Pessoa, Brasil. Para isso, foram avaliadas amostras sanguíneas de diferentes espécies de aves, mamíferos e répteis por meio do Teste de Aglutinação Modificado (MAT) com ponto de corte de 1:25. Dos 51 animais testados, 62,4% apresentaram anticorpos anti-T. gondii. Nos mamíferos, a frequência encontrada foi de 68,9% (20/29), em aves foi de 80% (8/10) e em répteis de 33,3% (4/12). Pela primeira vez é relatada a ocorrência de anticorpos anti-T. gondii em aves das espécies Pionites leucogaster (marianinha-de-cabeça-amarela), Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande), Pavo cristatus (pavão), Urubitinga urubitinga (gavião-preto) e Buteo melanoleucus (águia-chilena). Répteis das espécies Caiman crocodilus (jacaretinga), Chelonoidis carbonaria (jabuti) e Paleosuchus palpebrosus (jacaré-anão) foram soropositivos para T. gondii, embora o significado da presença desses anticorpos anti-T. gondii precise ser mais bem estudado nesse grupo de animais. Conclui-se que é alta a frequência de anticorpos encontrados nos animais do zoológico estudado e que medidas profiláticas que visem diminuir a contaminação ambiental por oocistos são necessárias.(AU)

Estudio preliminar serológico de Leptospira spp. en un rebaño ovino de la sabana de Bogotá / Preliminary serological study of Leptospira spp. in a sheep flock on the savannah of Bogotá / Estudo preliminar sorológico de Leptospira spp. em um rebanho ovino da savana de Bogotá

El objeto de la investigación fue realizar un estudio serológico de la leptospirosis en un rebaño ovino de la sabana de Bogotá, con el propósito de detectar la presencia de este agente y ampliar el conocimiento sobre su tendencia en nuestro medio. Se realizaron dos visitas a la granja, una durante el periodo seco (enero) y otra en la época lluviosa (mayo), donde se chequearon 250 animales en cada uno de los dos periodos, pertenecientes a 100 machos y 150 hembras de diferentes razas existentes en la granja. Se evaluó la presencia de anticuerpos contra los seis serovares que se han reconocido como los más frecuentes en Colombia en las diferentes especies domésticas. La prueba utilizada fue la de microaglutinación. Los resultados obtenidos en el estudio indicaron que el serovar más frecuente en los ovinos fue L. interrogans serovar Icterohaemorrhagiae, seguido por L. interrogans serovar Bratislava, L. borgpetersenii serovar Hardjo, L. interrogans serovares Canicola, Pomona y Grippotyphosa. Se concluye que la leptospirosis en ovinos asociada a los títulos reportados para los diferentes serovares, a pesar de no haberse reportado casos clínicos durante el estudio, hace pensar en la presencia del agente en el rebaño, lo que orientaría nuevos estudios tendientes a profundizar en el efecto que tendría en la reproducción.

The research aimed to conduct a serological study on leptospirosis in a sheep flock on the savannah of Bogotá, in order to detect the presence of this agent and to broaden knowledge on its tendency in our field. There were two visits to the farm, one during the dry season (January) and another one in the rainy season (May), to check 250 animals in each season, which were 100 males and 150 females of different races living on the farm. Microscopic agglutination test was used to determine the presence of antibodies to the six serovars that have been identified as the most frequent in Colombia in different domestic species. The results of the study indicated that the most common serovar in sheep was L. interrogans serovar Icterohaemorrhagiae, followed by L. interrogans serovar Bratislava, L. borgpetersenii serovar Hardjo, L. interrogans serovars Canicola, Pomona and Grippotyphosa. The research concluded that, even though there were no clinical cases reported during the study, leptospirosis associated with different serovars in sheep suggests the presence of the agent in the herd; new studies would be necessary to deepen our knowledge on the effect this would have on reproduction.

O objetivo da pesquisa foi realizar um estudo serológico da leptospirose em um rebanho ovino da savana de Bogotá, com o propósito de detectar a presença deste agente e ampliar o conhecimento sobre a sua tendência em nosso meio. Realizaram-se duas visitas à granja, uma durante o período seco (janeiro) e outra na época de chuva (maio), onde se examinaram 250 animais em cada um dos dois períodos, pertencentes a 100 machos e 150 fêmeas de diferentes raças existentes na granja. Avaliou-se a presença de anticorpos contra os seis serovares reconhecidos como os mais frequentes na Colômbia nas diferentes espécies domésticas. A prova utilizada foi a de micro aglutinação. Os resultados obtidos no estudo indicaram que o sorovar mais frequente nos ovinos foi L. interrogans sorovar Icterohaemorrhagiae, seguido por L. interrogans sorovar Bratislava, L. borgpetersenii sorovar Hardj o, L. interrogans serovares Canicola, Pomona e Grippotyphosa. Conclui-se que a leptospirose em ovinos associada aos títulos reportados para os diferentes serovares, apesar do fato de que não se haja reportado casos clínicos durante o estudo, faz pensar na presença do agente no rebanho, o que orientaria novos estudos com tendência a aprofundar no efeito que teria na reprodução.

Ocorrência de anticorpos anti-toxoplasma gondii em aves silvestres de três unidades de conservação federais da Paraíba e da Bahia / Occurrence of antibodies to toxoplasma gondii in wild birds from three federal conservation units of Paraíba and Bahia, Brazil

A vigilância e monitoramento de doenças em animais silvestres são imprescindíveis no contexto ambiental e de saúde pública, pois estes animais agem como sentinelas, refletindo alterações ambientais precocemente, o que proporciona maior eficácia no monitoramento ambiental e permite o acesso rápido a informações sobre as condições da área. Neste contexto, as aves são importantes no ciclo biológico do Toxoplasma gondii e na epidemiologia da toxoplasmose, principalmente porque seus tecidos representam importantes fontes de proteína na alimentação de felídeos e humanos. Objetivou-se detectar anticorpos anti-T. gondii, por meio do teste de aglutinação modificada em aves silvestres de três Unidades de Conservação (UC) Federais dos Estados da Paraíba e Bahia. No período de dezembro de 2011 a outubro de 2013 foram capturadas com redes de neblina 222 aves silvestres pertencentes a 67 espécies, 27 famílias e 12 ordens. Após a captura, foi colhido sangue de cada animal e separado o soro, que foi submetido ao Teste de Aglutinação Modificada (MAT≥1:25) utilizando taquizoítos inativados na formalina e 2-mercaptoetanol. Dentre as 222 amostras analisadas, três (1,3%) foram sororreagentes: 1 de 16 (6,2%) pipira-preta Tachyphonus rufus (título 50), 1 de 5 (20%) juriti-gemedeira Leptotila rufaxilla (título 50) e 1 de 1 (100%) caneleiro-enxofre Casiornis fuscus (título 25). Este é o primeiro relato da ocorrência de anticorpos anti-T. gondii nas referidas espécies de aves silvestres de vida livre nas duas UC Federais estudadas.

Surveillance and monitoring of wildlife pathogens are essential in the environmental context and human public health, as these animals act as sentinels, reflecting environmental changes early on, whath gives more efficient environmental monitoring and allows quick access to information on the conditions of area. Birds are important in the epidemiology and life cycle of Toxoplasma gondii, because their tissues are important source of protein in the diet of felids and humans. The objective was to determine antibodies to Toxoplasma gondii in wild birds from three Federal Conservation Units of the states of Paraíba and Bahia by Modified Agglutination Test (MAT). From December 2011 to October 2013, 222 wild birds of 67 species from 27 families and 12 Orders were captured with mist nets. Blood samples were then collected and the serum was separated by centrifugation. The sera were tested (MAT≥1:25) using formalin-fixed whole tachyzoites and 2-mercaptoethanol. Antibodies to T. gondii were found in 3 of 222 (1.3%) birds: in 1 of 16 (6.2%) white-lined tanager (Tachyphonus rufus, titer 50), in 1 of 5 (20%) gray-fronted dove (Leptotilla rufaxila, titer 50), and in 1 of 1 (100%) ashy-throated casiornis (Casiornis fuscus, titer 25). This is the first report of occurrence of antibodies to T. gondii in these tree bird species from two Federal Conservation Units.

Antibodies to Leishmania spp. in domestic felines / Anticorpos anti-Leishmania spp. em felinos domésticos

Abstract Leishmaniasis is a vector-borne zoonotic disease caused by protozoa in the genus Leishmania, typical of rural and peri-urban environments. The causative agent of American visceral leishmaniasis is Leishmania (Leishmania) infantum chagasi and the main insect vector in Brazil is Lutzomyia longipalpis. Dogs (Canis familiaris) are important in the transmission of the disease, as a reservoir closely related to humans and an infection source for phlebotomine vectors. Since 1990, an increasing number of feline leishmaniasis cases have been reported, suggesting that domestic cats (Felis catus) might be involved in the epidemiology of the disease. The present study analyzed the prevalence of anti-Leishmania spp. antibodies in naturally infected domestic cats from various neighborhoods in the municipality of Belém, Pará, Brazil, using the indirect immunofluorescence assay (IFA) and the direct agglutination test (DAT). Among the 443 samples tested, 18 (4.06%) presented positive reactions in the IFA. The observed titers were 40 IU in 4.97% of the samples and 80 IU in 0.90%. In the DAT test, positive results were found in 25 (5.64%) of the samples. The observed titers were also 40 IU (4.97%) and 80 IU (0.68%). The agreement rate between the two tests was considered low (Kappa coefficient = 0.10).

Resumo As leishmanioses são zoonoses vetoriais causadas por protozoários do gênero Leishmania, características de ambientes rurais e periurbanos. A leishmaniose visceral americana (LVA) é causada pela Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, cujo principal vetor no Brasil é Lutzomyia longipalpis. O cão (Canis familiaris) possui papel ativo na transmissão da doença, pois é um reservatório muito próximo do humano e uma fonte de infecção para o flebotomíneo. O aumento do número de casos de leishmaniose felina, descritos na literatura a partir de 1990, sugere que gatos também podem atuar na epidemiologia dessa enfermidade. O presente estudo avaliou a prevalência de anticorpos anti-Leishmania spp. em gatos domésticos (Felis catus) de diferentes bairros do Município de Belém, Pará (PA), pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e pelo Teste de Aglutinação Direta (TAD), utilizando-se como ponto de corte o título de 40 UI. Entre os 443 gatos estudados, 18 (4,06%) apresentaram reação sorológica positiva na RIFI. Os títulos observados foram de 40 UI em 0,90%. No TAD, foi encontrada positividade em 25 (5,64%) animais. Os títulos observados foram de 40 UI, em 4,97% dos gatos, e 80 UI, em 0,68%. A concordância entre os testes foi considerada baixa (coeficiente Kappa: 0,10).

The prevalence of antibodies to Toxoplasma gondii in horses in Changji Hui Autonomous Prefecture, Xinjiang, northwestern China / Prevalência de anticorpos contra Toxoplasma gondiiem cavalos na Região de Uygur, Xinjiang, Noroeste da China

Toxoplasmosis is a worldwide zoonosis caused by Toxoplasma gondii, which can infect warm-blooded animals and humans. The present study was performed to investigate the seroprevalence of T. gondii in horses in Xinjiang, northwestern China. A total of 637 blood samples were collected from seven regions in Changji Hui Autonomous Prefecture, Xinjiang in 2011 and assayed for T. gondiiantibodies using the modified agglutination test (MAT). Risk factors (age, gender, and region) related to seroprevalence were determined by a multivariate logistic regression analysis. A total of 200 horses (31.4%, 95% CI 27.79–35.00) were seropositive for T. gondii. Age, gender, and region present no association with seroprevalence (p>0.05) in the logistic regression analysis. The results indicated that T. gondii is widely prevalent in horses in Xinjiang, northwestern China, representing a serious threat to animal and human health. Therefore, more careful measures should be performed to control and prevent T. gondii infection in horses from Xinjiang, northwestern China.

A toxoplasmose é uma zoonose global causada pelo Toxoplasma gondii, o qual pode infectar animais de sangue quente e seres humanos. Este estudo foi realizado com o objetivo de investigar a soroprevalência em cavalos para T. gondii, na região de Xinjiang, no Noroeste da China. Em 2011, foram recolhidas 637 amostras de sangue em sete distritos da Prefeitura Autônoma de Changji Hui do Xinjiang, as quais foram testadas para a presença de anticorpos, utilizando-se o teste de aglutinação modificado (MAT). Foram estimados fatores de risco relacionados com a soroprevalência (idade, sexo e distrito), através de uma análise de regressão logística multivariada. Um total de 200 equinos (31,4%, 95% IC 27,79 – 35,00) foi positivo para T. gondii. Idade, sexo e região estudada não apresentaram associação com a soroprevalência (p>0,05) na análise de regressão logística. Os resultados revelam que a infecção por T. gondii tem uma prevalência generalizada em todo o território de Xinjiang, no Noroeste da China, constituindo uma séria ameaça à saúde de animais e de humanos. Consequentemente, propõe-se que sejam adotadas medidas reforçadas para o controle e prevenção da infecção de cavalos por T. gondii, no Xinjiang, Noroeste da China.

Insights into the role of cervical mucus and vaginal pH in unexplained infertility / Sobre o papel do muco cervical e do PH vaginal na gênese da infertilidade inexplicada

Unexplained infertility diagnosis is made in the presence of a normal semen analysis when tubal patency and normal ovulatory function are established. Among several potential causes, unexplained infertility could be attributed to vaginal pH and cervical mucus abnormalities. Although the vaginal canal and the cervix generally function as effective barriers to sperm, and although the production of mucus is essential to transport them from the vagina to the uterine cavity, these factors receive little attention in the investigation of couples with unexplained infertility. A substantial reduction in sperm number occurs as they transverse the cervix. From an average of 200 to 300 million sperm deposited in the vagina, only a few hundred achieve proximity to the oocyte. Given this expected high spermatozoa loss, a slight modification in cervical mucus may rapidly transform the cervix into a "hostile" environment, which, together with changes in vaginal environment and cervix structure, may prevent natural conception and be a cause of infertility. In this review, we discuss the physiological role of the vaginal pH and cervical mucus in fertility, and describe several conditions that can render the cervical mucus hostile to sperm and therefore be implicated in the pathophysiology of unexplained infertility.

RESUMO O diagnóstico de infertilidade inexplicada baseia-se na presença de espermograma normal, constatadas também permeabilidade tubária e função ovulatória normais. Entre as várias causas potenciais de infertilidade inexplicada, a presença de muco cervical e pH vaginal anormais devem ser consideradas. Embora a produção adequada de muco cervical seja essencial para o transporte dos espermatozóides da vagina para a cavidade uterina, e tanto o canal vaginal quanto o colo do útero desempenham função importante como barreira à passagem dos espermatozóides, estes fatores recebem pouca atenção na investigação de casais com infertilidade inexplicada. Uma redução substancial do número de espermatozoides ocorre à medida que estes percorrem o trato reprodutivo feminino. Partindo de cerca de 200 a 300 milhões de espermatozoides depositados na vagina, apenas algumas centenas alcançam a proximidade do oócito. Alteracões do muco cervical podem rapidamente transformar o colo do útero num ambiente hostil, que em conjunto com alterações no ambiente vaginal e da estrutura de colo do útero, podem apresentar-se condicões impedientes para a concepção natural; desse modo, convertem-se em causa de infertilidade. Nesta revisão, discutimos o papel fisiológico do pH vaginal e do muco cervical na fertilidade, descrever várias condicões que podem tornar o muco cervical hostil aos espermatozoides e, por fim analisamos como estes fatores interferem na fisiopatologia da infertilidade inexplicada.

Evaluación serológica de Leptospira interrogans en equinos pertenecientes a un centro ecuestre de la provincia de Linares, Chile / Serological evaluation of Leptospira interrogans in horses from an equestrian center in Linares province, Chile / Avaliação serológica da Leptospira interrogans em equinos pertencentes a um centro equestre da província de Linares, Chile

Resumen La leptospirosis es una enfermedad bacteriana caracterizada por producir clínicamente en equinos signos clínicos inespecíficos como fiebre, anemia, depresión, y otros específicos, como aborto, muerte neonatal y uveítis recurrente. La finalidad del trabajo fue determinar la seroprevalencia en 55 equinos pertenecientes al Centro Ecuestre de la Escuela Artillería de Linares, Región del Maule. Las muestras (suero), fueron obtenidas de animales sin distinción de sexo o edad y analizadas mediante el método de Aglutinación Microscópica (MAT) para nueve serovares a títulos de dilución de 1/100 o superiores. Determinando una seropositividad general del 65,4%, distribuido en los serovares: Autumnalis (54,5%), Bratislava (52,7%), Canicola (20%), Copenhageni (12,7%) y Hardjo (7,3%), mientras que para Pomona, Grippothyphosa, Bataviae y Ballum no se obtuvieron sueros reaccionantes. Finalmente, no se observó diferencia estadística significativa (P≥0,05) en los individuos reaccionantes según sexo y edad, demostrándose que a mayor edad menor es la seropositividad.

Abstract Leptospirosis is a bacterial disease characterized in horses by nonspecific clinical signs such as fever, anemia, depression; and specific signs such as abortion, neonatal death, and recurrent uveitis. The objective was to determine seroprevalence in 55 horses from the equestrian center of Linares Artillery School, located in the Maule region. Serum samples were obtained from animals of both sexes and several ages. Samples were analyzed by Microscopic agglutination (MAT) for nine serovars with dilution titles of 1:100 or higher. The overall seropositivity was 65.4%, distributed in the following serovars: autumnalis (54.5%), bratislava (52.7%), canicola (20%), copenhageni (12.7%), and hardjo (7.3%); whereas reacting sera were not obtained for pomona, grippothyphosa, ballum, or bataviae. Finally, no statistically significant difference was observed between sex or age (P≥ 0.05). Seropositivity was lower in older than in younger horses.

Resumo A leptospirose é uma doença bacteriana caracterizada por produzir em equinos alguns signos clínicos inespecíficos, como febre, anemia, depressão; e outros específicos, como aborto, morte neonatal e uveíte recorrente. A finalidade deste trabalho foi determinar a soroprevalência em 55 equinos pertencentes ao Centro Equestre da Escola de Artilharia de Linares, região de Maule no Chile. As amostras (soro) foram obtidas de animais sem distinção de sexo ou idade e analisadas pelo método de aglutinação microscópica (MAT) para nove serovares a títulos de diluição de 1/100 ou superiores. Determinando uma seropositividade geral de 65,4%, distribuído nos serovares: Autumnalis (54,5%), Bratislava (52,7%), Canicola (20%), Copenhageni (12,7%) e Hardjo (7,3%), enquanto que para Pomona, Grippothyphosa, Bataviae e Ballum não se obtiveram soros reacionantes. Finalmente, não houve diferença significativa (P≥0,05) nos indivíduos reacionantes segundo sexo e idade, conferindo que a maior idade menor é a seropositividade.

Comparative study between immunoturbidimetric and latex agglutination methods for the detection of rheumatoid factor / Estudo comparativo entre as técnicas de aglutinação em látex e de imunoturbidimetria para a detecção de fator reumatoide

INTRODUCTION: The rheumatoid factor (RF) is the most common antibody found in patients with rheumatoid arthritis. It is an inflammatory chronic disease characterized by articular involvement, inflammation of synovial fluid, tissue infiltration by leucocytes and joint destruction, which ultimately determine articular deformities. The rheumatoid factor is found in 70%-80% of the adult population and in 10% of the young population. OBJECTIVE: The aim of this research was to compare immunoturbidimetric and latex agglutination methods for the detection of RF in serum. RESULTS: The immunoturbidimetric method displayed sensitivity (95.2%), specificity (89.4%) and high positive correlation (R² = 0,8077) with the latex agglutination method in positive serum samples. CONCLUSION: The study allowed to demonstrate that both immunoturbidimetric and latex agglutination methods equally discriminate between negative and positive serum samples for RF.

INTRODUÇÃO: O fator reumatoide (FR) é o autoanticorpo mais comum encontrado em pacientes com artrite reumatoide, uma doença crônica inflamatória caracterizada pelo envolvimento articular com inflamação do líquido sinovial, infiltração de tecido por leucócitos e destruição das articulações, que acaba por determinar deformidades articulares. O FR é encontrado em 70%-80% da população adulta e em 10% da população juvenil. OBJETIVO: Comparar os métodos de imunoturbidimetria e aglutinação (prova do látex) para a determinação de FR em soro. RESULTADO: Foi possível observar que o método imunoturbidimétrico apresenta sensibilidade (95,2%), especificidade (89,4%) e correlação positiva elevada (R² = 0,8077) com o método de aglutinação pelo látex em amostras de soro positivas. CONCLUSÃO: O estudo permitiu demonstrar que o método imunoturbidimétrico e o método de aglutinação pelo látex são igualmente capazes de discriminar amostras negativas e positivas para FR.

Evaluation of modified agglutination test and enzyme-linked immunosorbent assay in detection of toxoplasma gondii antibody in human sera / Avaliação do método de aglutinação direta e do ensaio imunoenzimático na detecção de anticorpos para toxoplasma gondii em soros humanos

Toxoplasmosis is a zoonosis of high prevalence around the world, leading to serious congenital alterations and in immune compromised individuals. Its diagnosis is based in the detection of serum antibodies. This work aimed to compare serum antibody to Toxoplasma gondii detection by ELISA for IgG antibodies, and the MAT with the results of IFAT. From 73 samples examined by IgG-IFAT, 53 (72.6%) were positive, IgG-ELISA 55 (75.4%) and MAT, 58 (79.4%). No significative differences among results of tests are found. MAT shows high sensibility (100%) and lower specificity (75%), there were not false-negative results, but showed false-positives (25%). ELISA showed sensibility of 98.1% and specificity of 85,0%, false-negative rate of 1.9% and false-positive rate of 15.0%. MAT performance, when compared with IFAT, suggests the utilization of this method in diagnostic and epidemiological preliminary tests, besides ELISA has been used as a confirmatory test, for its specificity.

A toxoplasmose é uma zoonose de elevada prevalência em todo o mundo, podendo causar sérias alterações congênitas e em pacientes imunodeprimidos. Seu diagnóstico, na maioria das vezes, baseia-se na detecção de anticorpos séricos. Neste trabalho propôs-se comparar a detecção de anticorpos séricos para Toxoplasma pelo ELISA para IgG, e o MAD com os resultados da RIFI, em soros de indivíduos provenientes de um assentamento localizado em Eldorado, MS. Das 73 amostras examinadas pela RIFI-IgG, 53 (72,6%) amostras foram positivas, para o ELISA-IgG 55 (75,4%) e o MAD, 58 (79,4%). Não houve diferença significativa entre os resultados dos testes. O MAD apresentou alta sensibilidade (100%) e menor especificidade (75%), 25% de falso-positivos e sem resultados falso-negativos. Já o ELISA apresentou sensibilidade de 98,1% e especificidade de 85,0%, com taxa de falsos-negativos de 1,9% e de falso-positivos de 15,0%. A performance do MAD, quando comparado à RIFI, sugere a utilização deste método em provas de triagem diagnóstica e epidemiológica, enquanto que o ELISA seria utilizado como prova confirmatória, devido a sua especificidade.

Desempenho da tecnologia dos eritrócitos magnetizados (EM® Technology) nos testes imunoematológicos / Erythrocytes magnetized technology (EM® Technology) performance in immunohematology assays

A tecnologia dos eritrócitos magnetizados (E.M.®Technology) é uma grande inovação nos ensaios imunoematológicos. Os testes são realizados manualmente na estação detrabalho Freelys®Nano ou no equipamento automatizado Qwalys® (Diagast, Loos, France). O método utiliza hemácias magnetizadas e uma placa magnética substitui a centrifugação. As microplacas para a classificação sangüínea e fenotipagem Rh e K contêm anti-soros monoclonais IgM. As microplacas destinadas a pesquisa de anticorpos irregulares (PAI) e prova cruzada (PC) contêm antiglobulina humana (AGH) monoclonalmurina: anti-IgG na PAI e na PC anti-IgG + anti-IgM de baixo título para detectar anticorpos ABO. Na PAI e na PC, as reações acontecem na camada contendo AGH (imunocaptura) e visa detectar anticorpos IgG. A utilização de um meio de alta densidade possibilita a utilização da AGH sem lavagens prévias. Na avaliação da E.M.®Technology na classificação sangüínea, Fenotipagem, PAI e PC, na estação Freelys®Nano, foram utilizadas amostras de pacientes, doadores, sangue de cordão, hemácias de pacientes com teste de Coombs direto positivo e concentrados de hemácias. Todas as amostras foram paralelamente testadas em gel-teste (Diamed e Grifols). A concordância entre a E.M.®Technology e o gel-teste foi: 100% na classificação ABO e RhD e na fenotipagem Rh/ K, 94,6% na PAI e 92,3% na PC. A sensibilidade da E.M.®Technology na detecção de anticorpos IgG foi 95,5% em ambos os métodos. A E.M.®Technology mostrou um bom desempenho nos testes efetuados.

The erythrocytes magnetized technology (E.M.® Technology) is a great innovation in the field of blood banking. The tests can be performed manually on a Freelys® Nano workstation or on thefully-automated system QWALYS® (Diagast, Loos, France). This method does not require centrifugation steps thanks to the use of magnetic red blood cells and a magnetic plate. For blood grouping and Rh/K phenotyping, the microplate contains monoclonal IgMantibodies. The wells of the microplate to perform antibody screening and cross-matching are coated with murine monoclonal anti-human globulin: anti-IgG for antibody screening and anti-IgG + anti-IgM for cross-matching. The E.M.® Technology is only able to detectIgG antibodies. A high-density medium layer avoids the necessity of rinsing before the antiglobulin reagent. To evaluate the performance of E.M.® Technology on a Freelys® Nano work station for blood grouping, Rh/K phenotyping, antibody screening and crossmatching, we selected samples from patients, blood donors, blood cords, red blood cells from patients with positive direct antiglobulin test (DAT) and red blood cells from storage blood bags. In parallel, the tests were performed using the gel-technique (Diamed and Grifols). The concordance between E.M.® Technology and gel-testwas 100% for blood grouping and Rh/K phenotyping, 94.6% for antibody screening and 92.3% for cross-matching. The sensitivity to detect IgG antibodies was 95.5% in both methods. The E.M.® Technology on a Freelys® Nano workstation provided good resultsin all the tests performed.

Avaliação de quatro kits comerciais para detecção rápida de antígenos de Rotavírus em amostras de fezes / Four kits evaluation for Rotavirus rapid antigen detection in stool samples

O Rotavírus é um dos principais agentes causadores de diarréia, sendo desejável o diagnóstico laboratorial de maior rapidez e acurácia para evitar a complicação por essa infecção. Nesse estudo, foram comparados os resultados obtidos por 4 diferentes kits comerciais para pesquisa de antígenos de rotavírus em 42 amostras de fezes: dois kits com metodologia de aglutinação em látexe dois kits de detecção combinada de Rotavírus e Adenovírus por imunocromatografia. A concordância entre os kits testados foi de 88%, sendo 16 amostras positivas e 21 negativas em todos os testes. Nas cinco amostras com resultados discordantes apenas um kit obteve resultado diferente dos demais, sendo estes, repetidos por outro executor. Essa repetição demonstrou interpretação diferenteem duas amostras por um dos testes de aglutinação de látex. As taxas de detecção pelos kits imunocormatográficos foi de 66% (18/42) e para os kits de aglutinação de látex foi de 38-40% (16 e 17/42). Os kits imunocromatográficos demonstraram total concordância coma maioria dos demais kits testados. Conclui-se que, apesar da boa concordância entre os kits avaliados, algumas metodologias podem apresentar problemas na aplicação prática, principalmente com a interpretação da aglutinação de látex.

A total of 42 stool specimens were tested for the presence of antigen rotavirus by two distinct enzyme immunoassays (EIA) and two latex agglutination tests (LAT). Overall concordance was 88%, with 16 positive and 21 negative results by all tests. Discordant results occurred when one test differed from the others and was repeated by other technician. These procedures change the interpretation of latex agglutination. Detection rate for two immunocromatographic tests were 66% (18/42) and two latex agglutination tests were 40% and 38% (17 and 16/42). The results show that each of the commercial assays evaluated could accurately detect rotavirus in the stools specimens. Comparative results demonstrate that sensitivity of latex agglutination tests was lower than immunocromatographic tests. In conclusion, those rapid tests could be detect differently antigen rotavirus, the latex agglutination methodology could be difficult interpretation and immunochromatographic technique do not require specialized equipment, showed higher sensitivity and was rapid and easy to perform in the routine clinical laboratory.

Contribuiçäo de amostras de sangue no diagnóstico laboratorial da doença meningocócica / Contribution of blood samples in laboratorial diagnosis of meningococcal disease

Foram estudados retrospectivamente 73 casos de doença meningocócica (DM), dos quais, analisou-se amostras de líquido céfalorraquidiano (LCR) e de sangue, empregando-se as técnicas de cultura e pesquisa de antígenos polissacarídicos, através da contraimunoeletroforese (CIE) e pela reaçäo de aglutinaçäo de partículas de látex sensibilizadas por antissoros específicos (LA). Os resultados laboratoriais revelaram que 45,2 por cento das amostras foram positivas através da análise do LCR; 41,0 por cento foram positivas pela análise do LCR, hemocultura e/ou soro e 13,6 por cento foram positivas através da análise de hemocultura e/ou soro. Quanto ao tipo de exame realizado com o sangue, notou-se que 35,2 por cento dos casos foram positivos pela hemocultura, e quando se pesquisou o antígeno no soro dos pacientes, obteve-se 24,6 por cento de positividade pela CIE e 46,7 por cento pelo LA. Constatou-se que 13,6 por cento dos casos, só tiveram a confirmaçäo laboratorial, através dos exames realizados em amostras de sangue, destacando-se assim, a importante contribuiçäo desse tipo de material na identificação do agente etiológico e no aumento da positividade do diagnóstico laboratorial da DM. (AU)

73 cases of meningococcal disease (MD) have been studied retrospectively in whichsamples of cerebrospinal fluid (CSF) and blood were analysed using culture and meningococcal antigendetection through counterimmunoelectrophoresis (CIE) and reaction of latex agglutination (LA). Thelaboratory results showed that 45,2% of the samples were found positive in the CSF alone; 41,0% in theCSF, blood culture and/or serum, and only 13,6% in the blood culture and/or serum. As for the type of testcarried out in the blood, it was observed that 35,2% of the cases were positive in the blood culture, whilethe tests of antigen detection in the serum, showed that 24,6% were positive by CIE and 46,7% by LA. Itwas noticed that 13,6% of the cases only had the laboratorial confirmation through blood samples, thusshowing the important contribution of the blood in the identification of the ethiological agent and theincrease of the positivity of MD laboratorial diagnosis. (AU)