Free-living ixodid ticks in an urban Atlantic Forest fragment, state of Rio de Janeiro, Brazil / Carrapatos ixodídeos de vida livre em um fragmento urbano de Mata Atlântica, Estado do Rio de Janeiro, Brasil

As a consequence of the importance of ticks in forests in protected areas, was conducted survey of species of free-living ticks in the Natural Park Municipal Curió, state of Rio de Janeiro, Brazil. Monthly samples were taken by dragging method, dry ice traps and visual search in two transects. Adults and nymphs of Amblyomma cajennense (n= 147), Amblyomma brasiliense (n= 4) and Amblyomma parvum (n= 1) were collected. This is the first occurrence of A. parvum in the state. No correlation was found between the abundance of stages of A. cajennense and rainfall, temperature and relative humidity. The highest abundances of adults were in the months of January and May, and nymphs in September and October. The low diversity of parasites on Curió Park can be attributed to the proximity of households with pets, which would also explain the higher abundance of A. cajennense that is commonly found in areas impacted by anthropogenic pressure.

Como consequência da importância dos carrapatos em áreas florestais como Unidades de Conservação, foi realizado levantamento das espécies de carrapatos de vida livre no Parque Natural Municipal Curió, Estado do Rio de Janeiro, Brasil. Foram realizadas coletas mensais através de arrasto, armadilhas de gelo seco e busca visual, em dois transectos. Foram coletados adultos e ninfas de Amblyomma cajennense (n= 147), Amblyomma brasiliense (n= 4) e Amblyomma parvum (n= 1). Esta é a primeira ocorrência de A. parvum no Estado. Não foi encontrada correlação entre a abundância de estágios de A. cajennense e precipitação, temperatura e umidade relativa do ar. As maiores abundâncias de adultos foram nos meses de janeiro e maio; e ninfas em setembro e outubro. A baixa diversidade de carrapatos no Curió pode ser atribuída à proximidade de residências com animais domésticos, o que também explicaria a maior abundância de A cajennense, que é comumente encontrada em áreas impactadas por pressão antrópica.

Environmental infestation and rickettsial infection in ticks in an area endemic for brazilian spotted fever / Infestação ambiental e infecção por rickéttsias em carrapatos de área endêmica para Febre Maculosa Brasileira

Brazilian spotted fever (BSF), caused by Rickettsia rickettsii, is endemic in the municipality of Americana, southeastern Brazil, where the disease is transmitted by the tick Amblyomma cajennense. This study evaluated the tick fauna and rickettsial infection in free-living ticks that were captured monthly using dry ice traps in areas endemic for BSF in Americana, from July 2009 to June 2010. Two tick species were captured: A. cajennense (6,122 larvae; 4,265 nymphs; 2,355 adults) and Amblyomma dubitatum (7,814 larvae; 3,364 nymphs; 1,193 adults). The immature stages of A. cajennense and A. dubitatum had similar distribution through the 12-month period, with larvae of both species collected in highest numbers between April and July, and nymphs between June and October. The highest numbers of A. cajennense adults were collected between October and December, whereas A. dubitatum adults were collected in relatively similar numbers throughout the 12-month period. Rickettsial infection was evaluated by means of PCR in 1,157 A. cajennense and 1,040 A. dubitatum ticks; only 41 (3.9%) A. dubitatum were found to be infected by Rickettsia bellii. The present study showed that the areas of Americana that are endemic for BSF are characterized by high environmental burdens of A. cajennense and A. dubitatum.

A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma antropozoonose endêmica no município de Americana/SP, causada pela bactéria Rickettsia rickettsii e transmitida pelo carrapato Amblyomma cajennense. Este estudo avaliou a fauna de carrapatos e a infecção por riquétsias em carrapatos de vida livre capturados mensalmente com armadilhas de CO2, em áreas de risco para FMB de Americana, de julho de 2009 a junho de 2010. Duas espécies foram capturadas, A. cajennense (6.122 larvas; 4.265 ninfas; 2.355 adultos) e Amblyomma dubitatum (7.814 larvas; 3.364 ninfas; 1.193 adultos). Os estágios imaturos de A. cajennense e A. dubitatum apresentaram uma distribuição anual semelhante, com larvas de ambas as espécies sendo coletadas em maior número no período de abril a julho e ninfas de junho a outubro. Maior número de adultos de A. cajennense foi coletado de outubro a dezembro, enquanto que os adultos de A. dubitatum foram coletados em número relativamente semelhante durante todo o ano. A infecção por Rickettsia foi avaliada pela PCR em 1157 carrapatos A. cajennense e 1040 A. dubitatum, com apenas 41 (3,9%) A. dubitatum infectados com Rickettsia bellii. Este estudo demonstrou que as áreas de risco para FMB de Americana são caracterizadas por elevadas infestações ambientais de A. cajennense e A. dubitatum.

Ticks on birds caught on the campus of the Federal Rural University of Rio de Janeiro, Brazil / Carrapatos em aves capturadas no campus da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Brasil

The prevalence of parasitic infections, particularly those caused by ectoparasites, may influence the biology and ecology of wild birds. The aim of this study was to investigate occurrences and identify the species of ticks collected from wild birds caught on the campus of the Federal Rural University of Rio de Janeiro. The birds were caught using mist nets between October 2009 and December 2010. In total, 223 birds were caught, represented by 53 species and 19 families in nine orders. Nineteen birds (n = 7 species) were parasitized by immature ticks (prevalence of 8.5%). Forty-four ticks were collected, of which 23 were nymphs and 21 were larvae. There were associations between parasitism by ticks and non-Passeriformes birds, and between parasitism and ground-dwelling birds, which was possibly due to the presence (or inclusion among the captured birds) of Vanellus chilensis (Charadriiformes: Charadriidae). All the nymphs collected were identified as Amblyomma cajennense. In general terms, we must emphasize that wild birds in the study area may play the role of dispersers for the immature stages of A. cajennense, albeit non-preferentially.

A prevalência das infecções parasitárias e em particular, aquelas causadas por ectoparasitos, pode influenciar na biologia e ecologia das aves silvestres. O objetivo do estudo foi investigar a ocorrência e identificar as espécies de carrapatos coletadas em aves silvestres capturadas no campus da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. As aves foram coletadas em rede-de-neblina durante o período de outubro de 2009 a dezembro de 2010. No total foram capturadas 223 aves representadas por 53 espécies, 19 famílias em 9 ordens. Parasitismo por formas imaturas de carrapatos, foram encontradas em 19 aves (n = 7 espécies) correspondendo a uma prevalência de 8,5%. Foram coletados 44 carrapatos onde 23 estavam em estágio de ninfa e 21 em estágio de larva. Houve associação entre o parasitismo por carrapatos e aves não Passeriformes e entre o parasitismo e aves de hábitos terrestres capturadas, que se deu possivelmente pela presença (ou inclusão da captura) de Vanellus chilensis (Charadriiforme: Charadriidae). Todas as ninfas coletadas foram identificadas como Amblyomma cajennense. De modo geral, devemos ressaltar que aves silvestres da área estudada podem exercer papel de dispersoras, ainda que não preferenciais, para estágios imaturos de A. cajennense.

Primary embryonic cells of Rhipicephalus microplus and Amblyomma cajennense ticks as a substrate for the development of Borrelia burgdorferi (strain G39/40) / Células primárias embrionárias do carrapato Rhipicephalus microplus e Amblyomma cajennense como substrato para desenvolvimento de Borrelia burgdorferi (Cepa G39/40)

Borrelia burgdorferi, the agent of Lyme borreliosis, is a spirochetes transmitted by ticks to humans and animals. Its cultivation in vitro in tick cells allows studies of its biology and provides methodology for future research in Brazil, and for the isolation of Borrelia spp. We examined in vitro the characteristics of embryonic cells of Rhipicephalus microplus and Amblyomma cajennense in cell culture and investigated the suitability of embryonic cells as a substrate for cultivation of B. burgdorferi. Subcultures were prepared from primary cultures of embrionary cells of R. microplus and A. cajennense maintained in Leibovitz's (L-15) complete medium at 28 ºC and 31 ºC, respectively. When a monolayer had formed, the L-15 was replaced with Barbour-Stoener-Kelly medium for experiments to infect cell cultures with B. burgdorferi. After 72 hours of cultivation, the spirochetes were counted using an inverted phase contrast microscope and dark-field illumination (400×). Survival, multiplication and the adherence of B. burgdorferi for embryonic cells of R. microplus and A. cajennense were observed. B. burgdorferi cultured with embryonic cells of R. microplus grew on average to a density (final count) of 2.4 × 10(7) spirochetes/mL, whereas in cell-free culture, an average of 2.5 × 10(7) spirochetes/mL were counted. When cultivated with A. cajennense cells, the final count of spirochetes was on average 1.7 × 10(7) spirochetes/mL, while spirochetes cultured under cell-free conditions replicated on average of 2.2 × 10(7) spirochetes/mL. Similar results were observed in the final count of Spirochetes cultivated in cells of R. microplus and A. cajennense, when compared with cell-free control. These results demonstrated that cells of R. microplus and A. cajennense have the potential to be used as growth substrate for B. burgdorferi in the study of its interaction with host cells.

Borrelia burgodorferi, o agente da borreliose de Lyme, é uma espiroqueta transmitida por carrapatos aos seres humanos e animais. Seu cultivo in vitro em células de carrapato permite estudos de sua biologia e propicia metodologia para futuras pesquisas no Brasil, para o isolamento de Borrelia spp. Nós examinamos in vitro as características de células embrionárias de Rhipicephalus microplus e Amblyomma cajennense, e a viabilidade de utilização dessas células embrionárias como um substrato para cultivo de B.burgdorferi. Subculturas foram preparadas a partir de culturas primárias de células embrionárias de R. microplus e A. cajennense mantidas em meio Leibovitz's (L-15) completo, a 28 ºC e 31 ºC, respectivamente. Com a formação da monocamada, o L-15 foi substituído pelo meio Barbour-Stoener-Kelly, para o experimento de infecção com B. burgdorferi nas culturas de células. Após 72 horas de cultivo, realizou-se a contagem das espiroquetas, as quais foram avaliadas sob microscópio invertido de contraste de fase e campo escuro (400×). Verificou-se a sobrevivência, a multiplicação e a aderência de B. burgdorferi em células embrionárias de R. microplus e A. cajennense. No estudo da cultura de B. burgdorferi com células embrionárias de R. microplus, observou-se, na contagem final, média de 2,4 × 10(7) espiroquetas/mL; no cultivo livre de células, verificou-se média de 2,5 × 10(7) espiroquetas/mL. No cultivo de A. cajennense, a contagem final de espiroquetas foi, em média, 1,7 × 10(7) espiroquetas/mL, enquanto que, para as cultivadas livres de células, se verificou média de 2,2 × 10(7) espiroquetas/mL. Resultado semelhante foi observado na contagem final de espiroquetas cultivadas em células de R. microplus e A. cajennense, quando comparado com o controle livre de células. Estes resultados demonstraram que células de R. microplus e A. cajennense têm o potencial para serem utilizadas como substrato para o crescimento de B. burgdorferi no estudo da interação com as células do hospedeiro.

Rickettsia species infecting Amblyomma ticks from an area endemic for Brazilian spotted fever in Brazil / Rickettsia infectando carrapatos Amblyomma de uma área endêmica para febre maculosa Brasileira no Brasil

This study reports rickettsial infection in Amblyomma cajennense and Amblyomma dubitatum ticks collected in an area of the state of Minas Gerais, Brazil, where Brazilian spotted fever is considered endemic. For this purpose, 400 adults of A. cajenennse and 200 adults of A. dubitatum, plus 2,000 larvae and 2,000 nymphs of Amblyomma spp. were collected from horses and from the vegetation. The ticks were tested for rickettsial infection through polymerase chain reaction (PCR) protocols targeting portions of three rickettsial genes (gltA, ompA, and ompB). Only two free-living A. cajennense adult ticks, and four pools of free-living Amblyomma spp. nymphs were shown to contain rickettsial DNA. PCR products from the two A. cajennense adult ticks were shown to be identical to corresponding sequences of the Rickettsia rickettsii strain Sheila Smith. DNA sequences of gltA-PCR products of the four nymph pools of Amblyomma spp. revealed a new genotype, which was shown to be closest (99.4 percent) to the corresponding sequence of Rickettsia tamurae. Our findings of two R. rickettsii-infected A. cajennense ticks corroborate the endemic status of the study area, where human cases of BSF were reported recently. In addition, we report for the first time a new Rickettsia genotype in Brazil.

Este trabalho relata infecção por Rickettsia em carrapatos Amblyomma cajennense e Amblyomma dubitatum, colhidos numa área do Estado de Minas Gerais, onde a febre maculosa brasileira (FMB) é considerada endêmica. Para esse estudo, 400 adultos de A. cajennense, 200 adultos de A. dubitatum, 2.000 larvas e 2.000 ninfas de Amblyomma spp. foram colhidas de equinos e da vegetação. Os carrapatos foram testados para infecção por rickettsia através de reação em cadeia pela polimerase (PCR) direcionada a fragmentos de três genes de rickettsia (gltA, ompA, e ompB). Apenas 2 A. cajennense adultos de vida livre, e 4 grupos de ninfas de Amblyomma spp. continham DNA de rickettsia. Os produtos de PCR dos dois adultos de A. cajennense foram idênticos às sequências correspondentes de Rickettsia rickettsii cepa Sheila Smith. Sequências de DNA dos produtos provenientes dos quatro grupos de ninfas de Amblyomma spp. revelaram um novo genótipo, próximo (99,4 por cento) à sequência correspondente de Rickettsia tamurae. Neste trabalho foram achados 2 carrapatos A. cajennense infectados por R. rickettsii que corroboram o caráter endêmico da área de estudo, em que casos de FMB ocorreram recentemente. Em adição, foi reportado, pela primeira vez, um novo genótipo de Rickettsia no Brasil.

Induction of complete courtship ritual in Amblyomma cajennense using 2,6-dichlorophenol at female-equivalent quantities / Indução dos comportamentos de cortejo em Amblyomma cajennense pelo 2,6-diclorofenol em quantidades equivalentes às das fêmeas

In order to clarify the role of 2,6-dichlorophenol (2,6-DCP) in the courtship of Amblyomma cajennense, sexually mature males that had previously fed on rabbits were tested in bioassays. The males were released onto dummies treated with whole female extract or synthetic 2,6-DCP at a concentration of two female equivalents, or with hexane (control), and their responses were observed. In the presence of both the extract and 2,6-DCP, excitation was observed among the males, expressed in the form of touching and probing the dummy, and mounting occurred readily. The percentages of mounting (73 percent) and tipping over (60 percent) were equal in the two treatments and higher than in the control group (27 and 20 percent, respectively). Relatively short durations of mounting were recorded, and these were statistically similar in all treatments. Almost all instances of mounting resulted in tipping-over behavior. A few isolated cases of males that went directly to ventral positioning without mounting were observed. It was confirmed that 2,6-DCP alone is capable of mediation of mounting behavior in A. cajennense.

Visando elucidar o papel do 2,6-diclorofenol (2,6-DCF) no cortejo de Amblyomma cajennense, machos sexualmente maduros, previamente alimentados em coelhos, foram avaliados em testes biológicos. Os machos foram liberados sobre manequins tratados com um extrato de fêmeas, ou com 2,6-DCF sintético na concentração equivalente a duas fêmeas, ou com hexano (controle), e suas respostas foram observadas. Na presença do extrato e do 2,6-DCF, a excitação dos machos foi expressa na forma de toques e sondagens, e a monta ocorreu rapidamente. As porcentagens de respostas observadas nos dois tratamentos foram iguais, sendo a monta (73 por cento) e retorno na superfície ventral (60 por cento) mais altos que no controle (27 e 20 por cento, respectivamente). Foram observados períodos de monta relativamente curtos, sendo esses estatisticamente iguais em todos os tratamentos, e quase todos resultando em posicionamento ventral. Alguns casos isolados de posicionamento ventral sem monta foram observados. Foi confirmado que o 2,6-DCP sozinho é capaz de mediar o comportamento de monta de A. cajennense.

Study of infection by Rickettsiae of the spotted fever group in humans and ticks in an urban park located in the City of Londrina, State of Paraná, Brazil / Estudo da infecção por Rickettsias do grupo da febre maculosa em humanos e carrapatos de um parque urbano na Cidade de Londrina, Estado do Paraná

INTRODUCTION: Spotted fevers are emerging zoonoses caused by Rickettsia species in the spotted fever group (SFG). Rickettsia rickettsii is the main etiologic agent of Brazilian spotted fever (BSF) and it is transmitted by Amblyomma spp. ticks. METHODS: The study aimed to investigate SFG rickettsiae in the Arthur Thomas Municipal Park in Londrina, PR, by collecting free-living ticks and ticks from capybaras and blood samples from personnel working in these areas. Samples from A. dubitatum and A. cajennense were submitted for PCR in pools to analyze the Rickettsia spp. gltA (citrate synthase gene). RESULTS: All the pools analyzed were negative. Human sera were tested by indirect immunofluorescence assay with R. rickettsii and R. parkeri as antigens. Among the 34 sera analyzed, seven (20.6 percent) were reactive for R. rickettsii: four of these had endpoint titers equal to 64, 2 titers were 128 and 1 titer was 256. None of the samples were reactive for R. parkeri. An epidemiological questionnaire was applied to the park staff, but no statistically significant associations were identified. CONCLUSIONS: The serological studies suggest the presence of Rickettsiae related to SFG that could be infecting the human population studied; however, analysis of the ticks collected was unable to determine which species may be involved in transmission to humans.

INTRODUÇÃO: A febre maculosa é uma zoonose emergente causada por espécies de Rickettsia do grupo febre maculosa (GFM). Rickettsia rickettsii é o principal agente etiológico da febre maculosa brasileira (FMB) e é transmitida por Amblyomma spp. MÉTODOS: Com o objetivo de obter informações sobre GFM Rickettsiae no Parque Municipal Arthur Thomas em Londrina, PR, carrapatos de vida livre e de capivaras foram coletados, assim como amostras de sangue das pessoas que trabalham no parque. A. dubitatum e A. cajennense foram submetidos à PCR em pools para analises de Rickettsia spp. gltA (citrate synthase gene). RESULTADOS: Todos os pools de carrapatos analizados foram negativos. Soros de humanos foram testados pela imunofluorescência indireta com antigenos de R. rickettsii e R. parkeri. Entre os 34 soros analisados, 7 (20,6 por cento) foram positivos para R. rickettsii. Destes, quatro apresentaram títulos iguais a 64, dois iguais a 128 e um, igual a 256, mas nenhum soro reagiu com R. parkeri. Não houve nenhuma associação, estatisticamente significante, entre as variáveis analisadas no questionário epidemiológico fornecido às pessoas que participaram da pesquisa. CONCLUSÕES: Os estudos sorológicos sugerem a presença de alguma Rickettsiae relacionada ao GFM que poderiam estar infectando a população humana estudada. Entretanto, as análises dos carrapatos foram inconclusivas para determinar qual espécie poderia estar envolvida na transmissão para os humanos.

Ticks (Acari: Ixodidae) from yellow armadillo, Euphractus sexcinctus (Cingulata: Dasypodidae), in Brazil's Pantanal wetlands

Tick species parasitizing yellow armadillo, Euphractus sexcinctus, were recorded from October 2006 to October 2007 in Pantanal. A total of 89 ticks were collected from 23 yellow armadillos. Most ticks (n = 50) were identified as Amblyomma cajennense (Fabricius) (32 males and 18 females). The only other species found was Amblyomma parvum (Aragão) (three females and two males). The remaining ticks were immatures of Amblyomma (29 nymphs and five larvae). The prevalence of A. cajennense was 55 percent, the mean intensity was 2.7 ± 0.5 (SE) (n = 17) and the mean abundance was 1.5 ± 0.4 (n = 31).

Repellent activity of DEET against Amblyomma cajennense (Acari: Ixodidae) nymphs submitted to different laboratory bioassays / Atividade repelente do DEET contra ninfas de Amblyomma cajennense (Acari: Ixodidae) em bioensaio laboratorial

This study was developed to evaluate the repellent activity of N,N-diethyl-3-methylbenzamide (DEET) against Amblyomma cajennense nymphs. Two repellent bioassays were compared and the effective concentration and repellent time were calculated. The fingertip test was accomplished to evaluate in vivo four concentrations of the compound (0.200; 0.100; 0.050 and 0.025 mg.cm-2) and the filter-paper bioassay to evaluate in vitro the two highest concentrations. The compound provided repellence higher than 90 percent in all concentrations and at least 95 percent repellency in the highest concentration over 5 hours. The effective concentration against 50 percent of tested nymphs (EC50) was 0.006 mg.cm-2 and the EC99 was 0.036 mg.cm-2. Those concentrations were lower than the ones obtained against other tick species, denoting the effectiveness of DEET against A. cajennense. The repellency time against 50 percent of the ticks (RT50) was 4.8 hours and the RT90 was 2.7 hours. Both bioassays were adequate to evaluate A. cajennense repellency and provided similar results; however the in vivo test is more appropriate to estimate the effective concentration and repellency time.

Este estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar a atividade repelente do N,N-diethyl-3-methylbenzamide (DEET) sobre ninfas de Amblyomma cajennense. Dois bioensaios para a avaliação de repelência foram comparados e cálculos da concentração eficaz e do tempo de repelência foram realizados. Foram empregados o bioensaio da ponta do dedo, para avaliação in vivo de quatro concentações do químico (0,200; 0,100; 0,050 e 0,025 mg.cm-2) e o bioensaio do papel filtro, para a avaliação in vitro das duas concentrações mais altas. O composto conferiu mais de 90 por cento de repelência em todas as concentrações utilizadas e 95 por cento de repelência por mais de cinco horas na maior concentração. A concentração do composto efetiva contra 50 por cento das ninfas testadas (CE50) foi de 0,006 mg.cm-2 e a CE99 foi de 0,036 mg.cm-2. Estas concentrações são mais baixas do que as observadas em outras espécies de carrapatos, denotando a efetividade do princípio contra A. cajennense. O tempo de repelência de 50 por cento dos carrapatos (TR50) foi de 4,8 horas e o TR90 de 2,7 horas. Os dois bioensaios avaliados permitiram a observação de percentuais de repelência igualmente altos e se mostraram adequados para tal avaliação, sendo que o teste in vivo é mais indicado para cálculo da concentração eficaz e da duração da repelência.

Possible acquired resistance of dogs successively infested by Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (Acari: Ixodidae) nymphs / Possibilidade de ocorrência de resistência adquirida em cães sucessivamente infestados por ninfas de Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (Acari: Ixodidae)

The present study aimed to evaluate the occurrence of immune resistance in dogs successively infested with Amblyomma cajennense nymphs. Five animals were submitted to four consecutive infestations with A. cajennense nymphs, at fourteen-day intervals. For each infestation, 50 nymphs were used per animal and data on the parasitic and non-parasitic periods were recorded. The average recovering rate of engorged nymphs in the successive infestations were 52.0, 29.2, 9.6 and 12.8%, respectively, with a significant reduction (p < 0.05) of this parameter from the second infestation onwards. The modal drop-off day of engorged nymphs was Day 4 of parasitism in all infestations. The average mortality rates of nymphs seen on the first, second, third and fourth infestations were 3.6, 3.2, 2.0 and 2.8%, respectively, with no significant differences among them (p < 0.05). In addition, no significant differences were seen among the ecdysis rates for specimens recovered from successive parasitic challenges. The study results suggest that the acquired resistance of infested dogs had a negative effect on recovery rate of A. cajennense nymphs; however, it did not affect the other biological parameters evaluated.

O presente trabalho teve por objetivo avaliar a ocorrência de resistência imune em cães, frente a infestações sucessivas por ninfas de Amblyomma cajennense. Para tanto, cinco animais foram submetidos a quatro infestações consecutivas por ninfas de A. cajennense em intervalos de quatorze dias. Foram aplicadas 50 ninfas em cada animal por infestação e os dados referentes aos períodos parasitários e não parasitários, foram registrados. As taxas médias de recuperação de ninfas ingurgitadas, verificadas nas sucessivas infestações foram de 52,0, 29,2, 9,6 e 12,8%, sendo observada uma redução significativa (p < 0,05) nesse parâmetro a partir da segunda infestação. O dia modal de queda das ninfas ingurgitadas em todas as infestações foi o 4º dia de parasitimo. As taxas médias de mortalidade de ninfas observadas no primeiro, segundo, terceiro e quarto desafio parasitário foram de, respectivamente, 3,6, 3,2, 2,0 e 2,8%, não havendo diferença significativa entre elas (p < 0,05). Não observou-se diferença significativa (p < 0,05) entre as taxas de ecdise reportadas para os exemplares recuperados nos sucessivos desafios parasitários. Esses resultados sugerem que a resistência adquirida nos cães parasitados afetou negativamente a taxa de recuperação das ninfas de A. cajennense inoculadas nesses animais, contudo não apresentou nenhum efeito sobre os demais parâmetros biológicos avaliados.

Pesquisa de Rickettsia spp em carrapatos Amblyomma cajennense e Amblyomma dubitatum no Estado de São Paulo / Survey of Rickettsia spp in the ticks Amblyomma cajennense and Amblyomma dubitatum in the State of São Paulo

Foi pesquisada a presença de riquétsias em 3.545 carrapatos Amblyomma cajennense e 2.666 Amblyomma dubitatum. Através do teste de hemolinfa, reação em cadeia pela polimerase e isolamento de rickettsia em cultivo celular, todos os Amblyomma cajennense foram negativos, sendo que 634 (23,8 por cento) Amblyomma dubitatum mostraram-se infectados com Rickettsia bellii.

The presence of rickettsial infection was surveyed in 3,545 Amblyomma cajennense ticks and 2,666 Amblyomma dubitatum ticks. Using the hemolymph test, polymerase chain reaction and isolation of Rickettsia in cell cultures, all of the Amblyomma cajennense were negative, whereas 634 (23.8 percent) of the Amblyomma dubitatum ticks were shown to be infected with Rickettsia bellii.

Possible acquired resistance of dogs successively infested by Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (Acari: Ixodidae) nymphs

The present study aimed to evaluate the occurrence of immune resistance in dogs successively infested with Amblyomma cajennense nymphs. Five animals were submitted to four consecutive infestations with A. cajennense nymphs, at fourteen-day intervals. For each infestation, 50 nymphs were used per animal and data on the parasitic and non-parasitic periods were recorded. The average recovering rate of engorged nymphs in the successive infestations were 52.0, 29.2, 9.6 and 12.8%, respectively, with a significant reduction (p 0.05) of this parameter from the second infestation onwards. The modal drop-off day of engorged nymphs was Day 4 of parasitism in all infestations. The average mortality rates of nymphs seen on the first, second, third and fourth infestations were 3.6, 3.2, 2.0 and 2.8%, respectively, with no significant differences among them (p 0.05). In addition, no significant differences were seen among the ecdysis rates for specimens recovered from successive parasitic challenges. The study results suggest that the acquired resistance of infested dogs had a negative effect on recovery rate of A. cajennense nymphs; however, it did not affect the other biological parameters evaluated.

O presente trabalho teve por objetivo avaliar a ocorrência de resistência imune em cães, frente a infestações sucessivas por ninfas de Amblyomma cajennense. Para tanto, cinco animais foram submetidos a quatro infestações consecutivas por ninfas de A. cajennense em intervalos de quatorze dias. Foram aplicadas 50 ninfas em cada animal por infestação e os dados referentes aos períodos parasitários e não parasitários, foram registrados. As taxas médias de recuperação de ninfas ingurgitadas, verificadas nas sucessivas infestações foram de 52,0, 29,2, 9,6 e 12,8%, sendo observada uma redução significativa (p 0,05) nesse parâmetro a partir da segunda infestação. O dia modal de queda das ninfas ingurgitadas em todas as infestações foi o 4º dia de parasitimo. As taxas médias de mortalidade de ninfas observadas no primeiro, segundo, terceiro e quarto desafio parasitário foram de, respectivamente, 3,6, 3,2, 2,0 e 2,8%, não havendo diferença significativa entre elas (p 0,05). Não observou-se diferença significativa (p 0,05) entre as taxas de ecdise reportadas para os exemplares recuperados nos sucessivos desafios parasitários. Esses resultados sugerem que a resistência adquirida nos cães parasitados afetou negativamente a taxa de recuperação das ninfas de A. cajennense inoculadas nesses animais, contudo não apresentou nenhum efeito sobre os demais parâmetros biológicos avaliados.

Parâmetros biológicos de fêmeas adultas Amblyomma cajennense alimentadas em coelhos tratados com bioterápico ultradiluído / Biological parameters of Amblyomma cajennense adult females fed on rabbits treated with ultradiluted biotherapic

Os bioterápicos são considerados medicamentos homeopáticos por serem preparados de acordo com a farmacotécnica homeopática, submetidos à diluição e dinamização. Com o objetivo de avaliar os efeitos da administração de bioterápico ultradiluído sobre parâmetros biológicos de carrapatos Amblyomma cajennense, oito coelhos de três meses de idade, separados em dois grupos de quatro animais, constituindo os grupos tratado e controle, receberam o bioterápico na potência 30 DH (Decimal Hering) e soro fisiológico 30DH, respectivamente. Em seguida, os animais foram infestados experimentalmente com 10 casais de carrapatos A. cajennense e submetidos novamente aos referidos tratamentos. O bioterápico ultradiluído foi preparado a partir de carrapatos adultos machos e fêmeas de A. cajennense. Foram avaliados parâmetros biológicos relativos à postura e à eclosão larval de A. cajennense. De acordo com os resultados obtidos, não foram detectados efeitos significativos sobre os parâmetros biológicos de fêmeas A. cajennense alimentadas em coelhos tratados com o bioterápico, quando comparados ao grupo controle. Novos testes, envolvendo outras espécies hospedeiras e o acompanhamento de infestações subseqüentes, devem ser dedicados à avaliação do potencial terapêutico profilático dos bioterápicos ultradiluídos nas ectoparasitoses dos animais domésticos.

The biotherapics are considered homeopathic medicine because are produced in agreement to the homeopathic pharmacotechnic being diluted and dinamizated. To evaluate the effects of ultradiluted biotherapic on biologic parameters of Amblyomma cajennense ticks, 8 rabbits, about 3 months old, were divided into 2 groups of 4 animals each: treated and control groups which received biotherapic 30 DH potency (Hering’s decimal) and 30DH physiologic serum, respectively. Following, the animals were infested with 10 couples A. cajennense and treated again. The ultradiluted biotherapic was made with A. cajennense male and female adult ticks. Significant alterations were not observed on biological parameters of females A. cajennense fed on rabbits treated with the biotherapic, when compared to the control group. New tests, involving other host species and the attendance of subsequent infestations should be developed to evaluate the therapeutic / profilatic potential of the ultra-diluted biotherapics on infestation of the domestic animals.

Avaliação de parâmetros clínicos e hematológicos de eqüinos submetidos a um programa de controle estratégico de Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (Acari: Ixodidae) / Evaluation of clinical and hematological parameters of equines submitted to a strategic control program of Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (Acari: Ixodidae)

Estudaram-se aspectos clínicos e hematológicos em eqüinos submetidos a um programa de controle estratégico de A. cajennense. Os tratamentos carrapaticidas foram realizados a cada sete dias e divididos em dois módulos, o primeiro com início em abril de 2004, e o segundo com início em julho do mesmo ano, utilizando-se a base química piretróide - cipermetrina na concentração de 0,015 por cento. Além do acompanhamento clínico dos animais, foram realizados hemogramas completos antes e após o programa. As dosagens bioquímicas de bilirrubinas, gama-glutamiltransferase (GGT), aspartato aminotransferase (AST), creatina kinase (CK), proteína total, albumina e globulinas, foram realizadas antes, durante e ao final do programa. Os resultados demonstraram que houve uma melhora no quadro hematológico dos animais após o programa de controle. Os tratamentos carrapaticidas, na forma em foram aplicados, não provocaram alterações desfavoráveis nos parâmetros clínicos e hematológicos dos eqüinos. Tais informações podem ser consideradas na busca de alternativas viáveis e seguras para o controle dessa espécie de carrapato.

Clinical and hematological parameters were studied in equines submitted to a strategic control program of Amblyomma cajennense. The acaricide treatments were carried to each seven days and divided in two batteries, the first one began in April 2004 and the second in July 2004. A pyrethroid chemical base - 0.015 percent cypermethrin was used. Clinical examinations of the animals and complete hemograms were carried before and after the control program of the tick. Seric dosages of bilirrubins, gamma-glutamiltransferase (GGT), aspartate aminotransferase (AST), creatin kinase (CK), total protein, albumin, and globulins, were carried before and throughout the experiment. The results showed an improvement in the hematological parameters of the animals after the end of control program. The acaricide treatments did not cause undesirable alterations of the clinical and hematological parameters studied. Such information can be considered as viable and safe alternatives for the control of this tick.

Brazilian spotted fever: a reemergent zoonosis

Brazilian spotted fever is caused by the bacterium Rickettsia rickettsii, which is the most pathogenic species of the spotted-fever rickettsiae group and is transmitted by the bite of infected ticks. Amblyomma cajennense is the most important tick species involved in the cycle of this zoonosis in Brazil as it presents low host specificity, great number of natural reservoirs and wide geographic distribution. It was first described in the state of São Paulo in 1929 and later in Rio de Janeiro, Minas Gerais and Bahia. The number of cases decreased in the 1940's with the development of new plague control techniques and antibiotics. In the last decades, the number of new cases has increased. The current review aimed at reporting some of the epidemiological and public health aspects of this reemergent disease with new foci, mainly in the southeastern region of Brazil.

Brazilian spotted fever: a reemergent zoonosis: [review]

Brazilian spotted fever is caused by the bacterium Rickettsia rickettsii, which is the most pathogenic species of the spotted-fever rickettsiae group and is transmitted by the bite of infected ticks. Amblyomma cajennense is the most important tick species involved in the cycle of this zoonosis in Brazil as it presents low host specificity, great number of natural reservoirs and wide geographic distribution. It was first described in the state of São Paulo in 1929 and later in Rio de Janeiro, Minas Gerais and Bahia. The number of cases decreased in the 1940's with the development of new plague control techniques and antibiotics. In the last decades, the number of new cases has increased. The current review aimed at reporting some of the epidemiological and public health aspects of this reemergent disease with new foci, mainly in the southeastern region of Brazil.

Controle estratégico de Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (acari: xodidae) em eqüinos, Minas Gerais, Brasil - Parte I / Strategic control of Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (acari: ixodidae) on horses, Minas Gerais, Brazil - Part I

Objetivou-se verificar a eficiência de um programa de controle estratégico de Amblyomma cajennense em eqüinos sob condições de campo. Os tratamentos carrapaticidas foram realizados a cada sete dias e divididos em dois módulos: o primeiro com início em abril e término em maio de 2004 (oito banhos) e o segundo com início e término em julho de 2004 (cinco banhos), visando atingir as larvas e ninfas do carrapato. Empregou-se a base química piretróide - cipermetrina 0,015 por cento, para banhar os eqüinos. Após o programa de controle houve uma redução de 44,85 por cento da carga parasitária de adultos do carrapato no período de outubro de 2004 a março 2005, e de 59,74 por cento, em fevereiro e março de 2005. Os resultados demonstraram a efetividade do controle estratégico. No entanto, consideram-se importantes fatores operacionais e de gerenciamento que podem interferir na aplicação prática desta tecnologia.

The aim of this study was to verify the efficiency of a strategic control program of Amblyomma cajennense in horses under field conditions. Acaricide treatments were applied at seven days intervals and divided in two series, the first one beginning in April 2004 (eight treatments), and the second one beginning in July 2004 (five treatments), aiming to control larvae and nymphs of the tick. A pyrethroid chemical base cypermethrin 0.015 percent was used for spraying the horses. There was a reduction of 44.85 percent in the adults infestetion of the tick in the period of October 2004 to March 2005, and 59.74 percent, in February and March 2005. Results showed the effectiveness of the strategic control. Important administrative and operational procedures can interfere with the practical application of this technology, and should be considered.

Parâmetros biológicos do estágio larval de Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (Acari: lxodidae) em coelhos / Biological parameters of the larval stage of Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (Acari: lxodidae) in rabbits

Objetivando maiores informações sobre as fases parasitária e não parasitária do Amblyomma cajennense; foram coletadas 473 fêmeas ingurgitadas provenientes de eqüinos. As fêmeas ingurgitadas pesavam, em média, 601,96 ± 161 ,01 mg e realizaram posturas entre 100 e 444 mg, com média de 286,36 ± 91 ,85 mg. A fase não parasitária foi avaliada sob condições controladas de laboratório (temperatura de 27°C, umidade relativa do ar superior a 70% e 12 h de fotofase). Para cada 1g de fêmeas ingurgitadas correponderam 507,88 ± 88,61 mg de postura. O período de pré-oviposição oscilou entre 4 e 7 dias, com média de 5,30 ± 1,02 dias; a incubação dos ovos foi realizada em média em 33,04 ± 1,69 dias e o período de pré-eclosão foi de 37,94 ± 1,48 dias. A fase parasitária foi acompanhada a partir de infestações experimentais em coelhos, utilizando-se larvas de 3 a 18 dias de idade, provenientes das posturas das fêmeas coletadas. O ingurgitamento larval foi realizado entre 4 e 6 dias, com média de 5 dias. O período compreendido entre o desprendimento da metalarva e o término da ecdise larva/ninfa foi de 11 ,29 ± 1,19 dias e não foi afetado nem pelo sexo nem pela cor da pelagem do coelho utilizado para ingurgitamento larval. Do total de metalarvas obtidas, 95% completaram a ecdise.

In an attempt to obtain further information on both parasitic and non-parasitic phases of Amblyomma cajennense, 473 engorged te males from horses were collected. Females weighed 601.96 ± 161.01 mg on the average and made oviposition between 100 and 444 mg, with an average of 286.36 ± 91.85 mg. Non-parasitic phase was assessed under laboratory conditions (27°C temperatura, relativa air humidity above 70% and 12 hr photophase exposition). For 1g females there was a correspondence of 507.88 ± 88.61 mg oviposition. Preoviposition period ranged from 4 to 7 days, with an average of 5.30 ± 1.02 days; egg incubation was made in 33.04 ± 1.69 days on the average, and the pre-eclosion period was 37.94 ± 1.48 days. Parasitic phase was followed on the basis of experimental infestations in rabbits, using 3 to 18 day larvae from the oviposition of collected females. Larval ingurgitation was observed between 4 and 6 days with an average of 5 days. The period extending between loosening of metalarva and completion of larva/nymph ecdisis was 11.29 ± 1.19. This period was not affected by sex or hair colar of rabbit used for larvae ingurgitation. Out of the total of metalarvae obtained, 95% completed ecdisis.

Parâmetros biológicos do estágio ninfal de Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (Acari: lxodidae) em coelhos / Biological parameters of the nymphal stage of Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (Acari: lxodidae) in rabbits

Com o objetivo de se obterem maiores informações sobre parâmetros relativos à fase ninfal do Amblyomma cajennense, foram realizadas 28 infestações com ninfas de 1 a 12 dias de idade em 20 coelhos de ambos os sexos e com pelagem uniforme nas cores branca ou preta. A fase não parasitária foi acompanhada sob condições controladas de laboratório (temperatura de 27°, umidade relativa do ar superior a 70% e 12 h de fotofase). Foram utilizadas 21.182 neoninfas, recolhendo-se 11.319 metaninfas, resultando em uma eficiência de infestação de 53,44%. O período de ingurgitamento ninfal oscilou entre 3 e 5 dias com uma maior quantidade de ninfas levando 5 dias para completar o ingurgitamento. O tempo transcorrido entre o desprendimento da metaninfa e o término da ecdise ninfa/adulto oscilou entre 13 e 14 dias, com média de 13,43 ± 0,50 dias. Esse período não sofreu influência do sexo nem da cor da pelagem do coelho utilizado para ingurgitamento ninfal. Do total de metaninfas recolhidas, 95% realizaram ecdise completa, obtendo-se cerca de 10.700 adultos jovens, machos e fêmeas na proporção de 1:1.

In an attempt to obtain more information on the parameters of the nymphal phase of Amblyomma cajennense, 28 infestations were conducted with 1 to 12 day nymphs in 20 rabbits of both sexes and uniform white or black calor. Non-parasitic phase was followed under controlled laboratory conditions (27°C temperatura, 70% relative air humidity, and 12 hr photophase exposition). 21,182 neonymphs were used, out of which 11,319 metanymphs were collected, which accounted for and infestation efficiency of 53.44%. The period of nymphal ingurgitation ranged from 3 to 5 days, with a higher number of nymphs taking 5 days to complete ingurgitation. The time lapsed between metanymph loosening and completion of the ecdisis nymph/adult ranged from 13 to 14 days, with an average of 13.43 ± 0.50 days. This period was not influenced neither by sex nor by hair colar of rabbit used for nymphal ingurgitation. Out of the total of collected metanymphs, 95% had complete ecdisis, being obtained approximately 10,700 young adults, male and female, on a 1:1 rate.