ABSTRACT
Las especies del género Acanthamoeba tiene una amplia distribución, lo cual junto a sus estrecha relación con el humano aumenta la probabilidad de actuar como agente etiológico de enfermedades de gravedad variable según el estado inmunológico del individuo . La presencia de estos microorganismos en pacientes con queratitis, dermatitis y encefalitis, es subestimada como agente causal. Debido a la subjetividad limitada sensibilidad y especificidad en la identificación de estos microorganismos solo por morfología, es importante el empleo de herramientas moleculares. El objetivo de esta investigación se centró en la caracterización molecular de 14 aislados mantenidos en medio Pagé modificado en el Laboratorio de Amibiasis de la Escuela de Bioanálisis de la UCV, procedentes de muestras biológicas, mediante el empleo de PCR-RFLP (HinfI, HhaI, HaeIII), previamente identificados morfológicamente como el género Acanthamoeba, según los parámetros propuestos por Pussard y Pons, 1997. Todos los aislados se excluyeron del Grupo I por tener quistes de menos de 18 µm. De los 14 aislados seleccionados , 50% presentó características morfológicas compatibles con el Grupo II mientras que el otro 50% fue compatible con el grupo III. Desde el punto de vista molecular, 86% de los aislados clasificados como Grupo II amplificaron productos de PCR de 900 pb, y el 100% de los aislados del Grupo III de 700 pb, así como el 14% restante del Grupo II. Se Observó una tendenciaque sugiere, que a mayor tiempo (años) de mantenimiento en medios de cultivo, se espera un producto de PCR de 700 pb y variaciones fenotípicas en estos microorgnismos. Los aislados del Grupo III no se pudieron caracterizar molecularmente por PCR-RFLP, debido a que el patrón de digestión con las enzimas de restricción no coincidió con patrones publicados por Kong y Chung, 1996. Respecto al Grupo II, 71% (5/6) de los aislados se identificó a nivel de especie por medio del RFLP. Se identificó a A13 y A14 como A...
Members of the genus Acanthamoeba, have a wide distribution of pathogenic species, it`s close relationship with humans increases the probality of life threatening or critical health conditions depending on the immne status of the patient. Usually these protozoans are not considered as the main cause of keratitis, dermatitis, and encephalitis in patients. As a consequence of the low sensibility, specificity, and high subjectivity that involves the morphologic identification of this microorganisms, has been considered the importance of the use of molecular analyses for its identification. By PCR-RFLP analyses, where characterized 14 isolates of Acanthamoeba spp. maintained in Page (modified) culture media in El Laboratorio de Amibiasis de la Escuela de Bioanálisis de la UCV, from clinical samples. These isolates where previously identified as Acanthamoeba using morphological methods as established for Pussard and Pons, 1997. 100% of the isolates where excluded from morphological Group I for showing sizes under 18 µm. However 50% of the isolates where classified as members of morphological Group II and the other 50% as members of morphological Group III. Furthermore, 86% of the isolates classified as Group II exhited PCR products of 900 pb as expected, while 100% of the isolated classified as Group III and 14% of the remaining isolates from Group II showed PCR products of 700 pb. In addition, it`s been observed a tendency suggesting that the longer (time in years) the microorganism are maintained in culture conditions, it is expected to obtain a PCR product of 700 pb and major phenotypic alteracions. Moreover, species of isolates from Group III were not identified, because they showed patterns of digestion with restriction enzymes HinfI, HhaI y HaeIII that differed from the reference ones published in 1996 by Kong y Chung. On the other hand, 71% of the isolates belonging to Group II showed patterns of identificatiob compatibles with the reference Kong & Chung...
Subject(s)
Humans , Acanthamoeba/isolation & purification , Models, Molecular , Molecular Structure , Blood Chemical Analysis , HematologyABSTRACT
Las amibas de vida libre (AVL) del género Acanthamoeba son parásitos facultativos ampliamente distribuidos en el ambiente, por lo cual el contacto del humano con ellos es frecuente, sin embargo, los reportes de enfermedades producidas por AVL son escasos. La gravedad de éstas justifica su búsqueda, sobre todo cuando la infección es del sistema nervioso central (SNC) y cuando hay compromiso in munológico. En este trabajo se reporta el hallazgo de Acanthamoeba spp en una biopsia cerebral, tomada a un paciente de 44 años de edad con adenocarcinoma. Se exa minó la muestra bajo el protocolo del Laboratorio de Amibiasis, de la Cátedra de Parasitología, Escuela de Bioanálisis, Facultad de Medicina, Universidad Central de Venezuela, para la investigación de AVL y Entamoeba histolytica. Se realizó examen directo y coloraciones especiales, inducción de la flagelación y cultivos a diferentes temperaturas. Se observó crecimiento de Acanthamoeba spp en el medio de Page modificado por Chinchilla y col. (1979), incubado a 37 °C a las 96 horas. La descripción morfológica coincide con la morfología del grupo 3 de Acanthamoeba, según Visvesvara (1991). Se destaca la importancia de la realización del cultivo para el crecimiento e identificación de estos organismos en aquellos laboratorios donde los métodos basados en biología molecular aun no se hayan implementado como parte del diagnóstico y así aplicar el tratamiento oportuno y específico al paciente.
Free-living amoebas (FLA) of genus Acanthamoeba are parasitic facultative organisms whose are widely distributed in the environment, thus the human contact with them is frequent; nevertheless, there are few reports of diseases produced by FLA. The severity of these diseases justifies its re search, mainly when the infection is at central nervous system (CNS) and when there is an immunocompromised host. This work reports the finding of Acanthamoeba spp in a cerebral biopsy from a 44 year-old patient with adenocarcinoma. We followed the protocol established by the Amibiasis Laboratory, Parasitology Chair, School of Bioanalisis, Medicine Faculty, Central University of Venezuela, for the investigation of FLA and Entamoeba histolytica. It wasmade by direct examination of the sample and special stains, flagellation induction and cultures incubated at different temperatures. We observed Acanthamoeba spp growth in biphasic Page media modified by Chinchilla and col. (1979), incubated for 96 hours at 37 °C. The morphologic des cription agrees with the morphology of group 3 of Acanthamoeba, according to Visvesvara (1991). We emphasize the importance of using growth culture for isolation and identification of these organisms in those laboratories where molecular methods has not been implemented yet as part of the diagnosis scheme and thus for applying the opportune and specific treatment to the patient.
Subject(s)
Humans , Male , Female , Acanthamoeba/pathogenicity , Adenocarcinoma/diagnosis , Central Nervous System Protozoal Infections/complications , Amebiasis/prevention & control , Public HealthABSTRACT
Se han reportado como agentes causales de enfermedad en humanos: Naegleria fowleri, agente causal de meningoencefalitis amibiana primaria en individuos inmunocompetentes: varias especies de género Acanthamoeba que pueden producir encefalitis granulomatosa amibiana en individuos inmunosuprimidos, úlceras corneales, lesiones en piel y otros órganos en personas inmunocompetentes; Ballamuthia mandrillares agente causal de encefalitis y lesiones en piel en personas inmunocompetentes, Sappinia pedata responsable de un caso de encefalitis en un individuo inmunocompetente y Paravahlkamphfia sp en un caso de queratitis y Paravahlkamphfia francinae en un caso de meningoencefalitis aminiana primera, en paciente en paciente inmunocompetente. No se conoce totalmente los factores de los que depende que las enfermedades producidas por amibas de vida libre se presenten, influyen la presencia de algunas enfermedades, contacto con aguas en las cuales se encuentran estas amibas, y la presencia de enzimas capaces de ejercer efecto citopático. Además el uso de lentes de contacto, algunas costumbres y necesidades humanos rompen el equilibrio ecológico, aumentando así la probabilidad de contacto del hombre con estas amibas. Se han evidenciado en ellas microorganismo en un proceso de endosimbiosis lo que por lo que amibas de vida libre intervienen en la transmisión de ciertos microorganismos patógenos y las amibas se transforman en un incubador potencial y transmisorasde agentes infecciosos. Debe investigarse sobre aspectos biológicos y la relación con el humano.
Have been reported as causative agents of disease in humans: Naegleria fowleri, the causative agent of primary amoebic meningoencephalitis in immunocompetent individuals, several species of Acanthamoeba that con cause granulomatous amoebic encephalitis in immunosuppressed individuals, corneal ulcers, skin lesions and other organs in people immunocompetent; Ballamuthia madrillares causative agent of encephalitis and skin lesions in immunocompetent persons, Sappinia pedata, responsible for a case of encephalitis in an immunocompetent individual Paravahlkamphfia sp in a case of keratitis and Paravanhlkamphfia francinae in a case of primary amoebic meningoencephalitis in an immunocompetent patient. Not fully understood the factors that it depends on diseases caused by free-living amoebae are present, influencing the presence of some diseases, contact with water where are these amoebae, and the presence of enzymes capable of the cytopathic effect. Furthermore, the use of contact lenses, some customs and human needs break the ecological balance, thereby increasing the likelihood of human contact with these amoebae. Have been evidenced in these microorganisms in the process of endosymbiosis that so the free-living amoebae in the transmission of certain pathogenic microorganisms and amoebas and become a potential incubator and transmission of infectious agents. Biological aspects should be investigated and the relationship with the human.
Subject(s)
Humans , Acanthamoeba , Germ-Free Life , Meningoencephalitis/pathology , NaegleriaABSTRACT
Entre las enfermedades graves, peligrosas y de gran importancia epidemiológica se encuentran la meningitis y la encefalitis, que pueden llevar a invalidez o muerte. Los agentes etiológicos que las producen generalmente son bacterias, virus y hongos. En cuanto a los protozoos causantes de meningitis y encefalitis, se encuentran las amibas de vida libre. Los individuos infectados con estas amibas tienen como antecedente el haber tenido contacto con aguas contaminadas en días recientes, especialmente de piscinas o aguas termales. Naegleria fowleri parasita a individuos aparentemente saludables, niños o jóvenes y es la causante de meningoencefalitis amebiana primaria, que se caracteriza por su rápida evolución y luego la muerte. Algunas especies del género Acanthamoeba, Balamuthia mandrillaris, y recientemente Sappinia pedata, producen encefalitis amebiana granulomatosa, que se presenta de forma subaguda o crónica; generalmente parasitan a individuos inmunosuprimidos. Además, ciertas especies de Acanthamoeba producen queratitis, que se confunden con las producidas por Herpes simplex u hongos. Estas amibas también causan infecciones severas en pulmones, oídos, piel y nariz. El diagnóstico de estas amibas en la mayoría de los casos se hace después de la muerte de los individuos infectados. En cuanto a su tratamiento, se han empleado combinaciones de varios antimicrobianos con resultados poco alentadores. Estas amibas no son lo suficientemente conocidas por el personal de salud, por lo tanto, en esta revisión se pretende evidenciar los aspectos más relevantes de éstas, ya que puede haber subdiagnóstico o confusión con otros agentes etiológicos y no sospechar de la presencia de amibas de vida libre...
Meningitis and Encephalitis are amongst the most dangerous disabling or death causing diseases. The etiological causes of these diseases include bacterium, virus and fungi. Protozoan which causes Meningitis and Encephalitis tend to be free-living amoebae. Patients identified with these amoebae infections had recently been exposed to contaminated water in swimming pools or steam baths. Healthy children and youth are vulnerable to Naegleria fowleri which causes Primary Amoebic Meningoencephalitis which evolution rapidly, causing death. Some species of Acanthamoeba, Balamuthia mandrillaris and recently Sappinia cause Granulomatous Amoebic Encephalitis in both acute and sub-acute forms, primarily affecting case with immunosuppression. Furthermore, some species produce Keratitis, which is confounded with diseases caused by Herpes Simplex or fungi. These amoebae are also infection causing agents in the lungs, ears, skin and nose. In most cases, diagnosis of these amoebae is posthumous. Combinations of antimicrobial treatment have had little effect, combating infections. This study seeks to enhance approaches towards diagnosing diseases caused by these agents and overcoming confounding them with other etiological agents without doubting the presence of free living amoebae...
Subject(s)
Encephalitis , Disease , MeningitisABSTRACT
Se determinó la presencia de amibas de vida libre, y la calidad microbiológica de las aguas para la recreación del parque “Las Cocuizas” en Maracay, Venezuela, en 30 muestras de agua captadas en diferentes lugares dentro del parque. Se investigó la presencia de amibas de vida libre y otros parásitos mediante exámenes directo y por coloración. También se determinaron los recuentos de aerobios mesófilos, coliformes totales y fecales. Se observó la presencia de formas parasitarias en 15 del total de las 30 muestras; en 8 se visualizaron formas compatibles con Naegleria fowleri y en las 7 restantes otros parásitos. Del total de las muestras 37,0 % reveló un número más probable de coliformes fecales superior a 200/100 mL-1 y 33,3 % mostró contaminación fecal activa con Escherichia coli. Se evidenció que existe riesgo de contaminación por diversos microorganismos patógenos transmitidos por el agua y esto puede ser peligroso para los usuarios del parque.
The objective of this study was to determine the presence of free-living amoebae and the microbiological quality of the recreational waters of Cocuizas Park in Maracay, Venezuela. Thirty samples taken from different park sites were analyzed. The presence of free-living amoebae and other parasitic was detected by fresh mounts and specific parasitic stain slides. Mesophilic aerobic bacteria and total faecal Coliforms were also determined. Parasitic forms were observed in 15 of the 30 samples that were analyzed. Forms compatible with Naegleria fowleri were seen in eight of the samples; other parasites were observed in the remaining seven samples. 37% of the samples revealed faecal coliforms above 200/100 mL-1 and 33,3% showed an active Escherichia coli faecal contamination. These results show risk of human infection by several water-borne pathogenic microorganisms, which could be dangerous for users of the park.