ABSTRACT
ABSTRACT Lutzomyia intermedia (Diptera: Psychodidae) features as one of the main vectors that are involved in the transmission of American cutaneous leishmaniasis (ACL) in the Neotropical region. However, genetic studies involving this taxon are still incipient and important for understanding the level of variability of different populations, their role, and implications as vectors. The aim of this study was to determine the level of genetic diversity of L. intermedia present in the Ribeira River Valley, an area of ACL transmission in the state of Paraná, Brazil, through the Random amplified polymorphic DNA (RAPD). Two municipalities were chosen to collect sand flies: Cerro Azul (new transmission area of the ACL) and Adrianópolis (endemic area of the ACL). The insects were captured in the house, in the peridomicile and in the wild (forest). Two of the used markers made it possible to estimate the polymorphism of the studied populations, resulting in 40 genotypes, most of them from peridomicile. The dendrogram generated by the analysis with the primer A10 showed different degrees of similarity, suggesting that there may be gene flow in the studied populations. The Principal Coordinate Analysis (PCO) with the A2 primer, was useful in grouping L. intermedia according to its ecological and geographical origin. There was no distinction between the lineages composing the L. intermedia complex. The results of this study, with the record of great genotypic diversity in L. intermedia, may contribute to explain the maintenance of the life cycle of Leishmania braziliensis (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) in the region.
RESUMEN Lutzomyia intermedia (Diptera: Psychodidae) es uno de los principales vectores que participan en la transmisión de leishmaniasis cutánea americana (LCA) en la región Neotropical. A pesar de que aún los estudios genéticos que involucran a este taxón son incipientes, tienen una gran importancia para comprender el nivel de variabilidad de las diferentes poblaciones y sus implicaciones en su papel vectorial. El objetivo de este estudio fue determinar el nivel de diversidad genética de L. intermedia presente en el Valle del Río Ribeira, área de transmisión de LCA en el estado de Paraná, Brasil, mediante RAPD (ADN polimórfico amplificado aleatoriamente). Los flebótomos fueron recolectados en los municipios Cerro Azul (nueva área de transmisión de LCA) y Adrianópolis (área endémica de LCA), donde fueron capturados en ambientes residenciales, en el peridomicilio y en el bosque. Dos de los marcadores utilizados permitieron estimar el polimorfismo en las poblaciones estudiadas con la obtención de 40 genotipos, la mayoría de ellos en el peridomicilio. El dendrograma generado por el análisis con el cebador A10 mostró diferentes grados de similitud, lo que sugiere que puede haber flujo gènico en las poblaciones. El Análisis de Coordenadas Principales (PCO) con el cebador A2 fue útil para agrupar L. intermedia según su origen ecológico y geográfico. No hubo distinción entre los linajes que componen el complejo L. intermedia. Los resultados de este estudio, con el registro de gran diversidad genotipica en L. intermedia, pueden contribuir a explicar el mantenimiento del ciclo biológico de Leishmania braziliensis (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) en la región.
ABSTRACT
La presente investigación se planteó con el objetivo de caracterizar la farmacobotánica y evaluar de manera preliminar la genotoxicidad de Baccharis genistelloides "Quimsa Qüchu" y Baccharis buxifolia "Tayanka". Baccharis genistelloides "Quimsa Qüchu" fue recolectada en los valles de Limatambo y Baccharis buxifolia "Tayanka" en Kachona del distrito de Santiago. Para la caracterización farmacobotánica, se estudió la morfología externa y morfometría, descripción de la anatomía interna, la densidad e índice estomático y la histolocalización mediante pruebas histoquímicas de algunos metabolitos, de las partes aéreas vegetativas de Baccharis genistelloides y Baccharis buxifolia. Con dichos datos se realizó la comparación fenética con relación a otras especies del genero Baccharis y se evaluó de manera preliminar la genotoxicidad de los extractos acuosos al 1% de Baccharis genistelloides "Quimsa Qüchu"y Baccharis buxifolia "Tayanka". Para el estudio de la morfología externa y la morfometría se describe los parámetros (tamaño, número, disposición de hojas, flores, inflorescencias, etc) para lo cual se usa un instrumento de medida (vernier) y un esteroscopio. Para la anatomía interna se realizó cortes anatómicos mediante el uso de un micrótomo manual para luego ser fijados, coloreados y montados al microscopio, la densidad e índice estomático se obtienen de la relación porcentual directamente proporcional de la cantidad total de células y el número total de estomas en la cara abaxial y adaxial, Todos estos datos fueron procesados mediante el análisis fenética, utilizando el paquete estadístico Past 3 complementando la caracterización farmacobotánica con la histoquímica para tres reacciones de coloración utilizando dragendorff, SUDAN III y lugol. La evaluación genotóxica se realizo usando Allium cepa como bioensayo, sometiendo los meristemos apicales al extracto acuoso 1% (como forma de uso tradicional) de Baccharis genístelloides "Quimsa Qüchu" y Baccharís buxífolía "Tayanka", evaluando el índice mitótico y aberración cromosómicas que generan. Los resultados encontrados en la caracterización farmacobotánica indican como característica principal la disposición de las inflorescencias en capitulo en ambas especies, en Baccharis genistelloides la característica principal es la presencia de tres cladodios a lo largo de la planta, así como la presencia de flores femeninas exclusivamente, en cambio Baccharis buxifolia presenta ramas alternas con hojas lanceoladas y flores dioicas. El resultado del análisis fenético muestra una relación estrecha entre Baccharis genistelloides "Quimsa Qüchu" y Baccharis Crispa mientras que Baccharis buxifalia "Tayanka" no está emparentado con las especies en comparación. La reacción histoquímica ratifica antecedentes teóricas de la presencia de alcaloides, almidón y lipidos para ambas especies. La evaluación preliminar de genotoxicidad muestra una reducción del índice mitótico normal de 13.03 % hasta 6.1% para Baccharis genistelloides "Quimsa Qüchu" y 7.4% para Baccharis buxifolia "Tayanka", considerándose como no genotóxico . Este tipo de estudios mejorara la correcta identificación y distinción de especies próximas y morfológicamente similares. Además que brindara luces sobre la ausencia de genotoxicidad.