Performance of rapid tests compared to conventional tests used for HIV diagnosis / Desempenho dos testes rápidos em relação aos testes convencionais utilizados no diagnóstico de HIV

ABSTRACT Introduction: Early diagnosis is an important tool for strategies to fight human immunodeficiency virus (HIV) infection. Objective: The main objective of this study is to evaluate the comparability of the results of rapid tests (RT) used for the HIV diagnosis in relation to conventional molecular and serological tests in blood samples from a population of men who have sex with men (MSM), from 12 Brazilian capitals. Material and methods: 591 HIV-1 reactive test samples from 4176 MSM participants were submitted to Instituto Adolfo Lutz (IAL) for evaluation by conventional laboratory tests. From these samples with at least one RT reagent, 522 samples were analyzed, and in 493 (94.4%) the HIV positivity was confirmed, with 33% HIV-1 viral load above 5,000 copies/mL and 67% by the serological tests. A total of 336 (10%) samples with a non-reactive RT result were evaluated by standard serology, four (1.2%) tested positive for HIV. Results and conclusion: The results showed a high percentage of samples with confirmed HIV positivity in the conventional laboratory tests, as well as some non-reactive results that were confirmed positive, indicating some limitations of the RT single-step method. Therefore, the serological tests had a fundamental role in clarifying the diagnosis.

RESUMO Introdução: O diagnóstico precoce é um importante instrumento para estratégias de combate à infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). Objetivo: O objetivo principal deste trabalho foi avaliar a comparabilidade do resultado de testes rápidos (TR) utilizados para o diagnóstico de HIV em relação a testes moleculares e sorológicos convencionais em amostras de sangue de população de homens que fazem sexo com homens (HSH) de 12 capitais brasileiras. Material e métodos: Foram encaminhadas ao Instituto Adolfo Lutz (IAL), 591 amostras com resultado reagente no TR HIV dos 4176 HSH participantes para serem avaliadas pelos testes laboratoriais convencionais. Dessas amostras com pelo menos um TR reagente, 522 amostras foram analisadas e em 493 (94,4%) confirmou-se a positividade para HIV, sendo 33% pela carga viral HIV-1 acima de 5.000 cópias/ml e 67% pelos testes sorológicos. Foram avaliadas pela sorologia convencional, 336 (10%) amostras com resultado de TR não reagente; quatro (1,2%) apresentaram-se reagentes para HIV. Resultados e conclusão: Os resultados mostraram elevado percentual de amostras com a positividade confirmada para HIV nos testes laboratoriais convencionais, bem como alguns resultados negativos que se confirmaram positivos, mostrando algumas limitações do método único do TR, destacando-se aos exames sorológicos papel fundamental à elucidação do diagnóstico.

Estabilidade dos anticorpos anti-HIV em amostras de soro armazenadas por períodos de dois a dezoito anos / Stability of anti-HIV antibodies in serum samples stored for two to eighteen years periods

Introduction: The antibodies have an important role in the serodiagnosis, constituting the most widely used biomarkers to detect and confirm various diseases. Objective: To investigate the reproducibility of anti-human immunodeficiency virus (HIV) antibodies reactivity, to assess the stability of the sera samples stored at -20ºC for two to eighteen years. Method: Sera were collected in the period 1988-2004 for routine anti-HIV antibodies diagnostic testing. The remaining samples stored at -20ºC, were analyzed in this study. Serum sample stability was assessed by enzyme-linked immunosorbent assay/enzyme immunoassay (ELISA/EIA), indirect immunofluorescence assay (IFA), and Western blot (WB) for detecting anti-HIV antibodies. The previously found results (1988-2004) and those obtained in 2006 were subjected to Kappa index analysis. Result: In the period 1988-to 2004, the degree of concordance of the ELISA/EIA, IFA and WB results were considered, good (k = 0.80), regular (k = 0.35), and good (k = 0.63), respectively. Conclusion: Regarding HIV serologic test, the serum samples were stable for 18 years in ELISA/EIA and for 4 years in IFA technique, however, for the WB methodology it was not possible to determine the time of stability of the anti-HIV antibodies...

Introdução: Os anticorpos possuem papel fundamental no sorodiagnóstico e constituem os mais difundidos biomarcadores empregados na detecção e na confirmação de diversas doenças. Objetivo: Verificar a reprodutibilidade dos resultados de anticorpos contra o vírus da imunodeficiência humana (HIV) para avaliar a estabilidade dos soros armazenados a -20ºC durante período de dois a dezoito anos. Método: Os soros utilizados foram provenientes de amostras remanescentes da rotina diagnóstica para detecção de anticorpos anti-HIV, no período de 1988 a 2004, os quais estavam armazenados em freezer a -20ºC. A estabilidade das amostras de soro foi avaliada por meio de enzyme-linked immunosorbent assay/enzyme immunoassay (ELISA/EIA), imunofluorescência indireta (IFI) e Western blot (WB) para detecção de anticorpos anti-HIV, e os resultados dos testes realizados anteriormente (1988-2004) e os obtidos em 2006 foram submetidos à análise do índice Kappa. Resultado: No período de 1988-2004, os graus de concordância dos resultados do ELISA/EIA, IFI e WB foram considerados, respectivamente, bom (k = 0,80), regular (k = 0,35) e bom (k = 0,63). Conclusão: No que diz respeito à sorologia para HIV, as amostras de soro foram estáveis por 18 anos no ELISA/EIA e por quatro anos na técnica de IFI, no entanto, para a metodologia de WB, não foi possível determinar o tempo de estabilidade dos anticorpos anti-HIV...

Implementation of a strategy for improving the serological diagnosis of HIV/AIDS by introducing the internal quality control / Implantação de estratégia para a melhoria do diagnóstico sorológico de infecção por HIV/AIDS pela introdução de controle de qualidade interno

The present study reports the data resulted from the first evaluation on the performance of the laboratory units of the HIV/AIDS Diagnosis Laboratory Network of the State of São Paulo, which have agreed to participate in the Internal Quality Control scheme for HIV antibody testing (HIV-IQC) at the respective routine diagnostic services. From April 2009 to February 2010, the HIV-IQC serum panels were distributed to 37 laboratories of the Sub-Network of São Paulo State. Of these, 27 (73.0%) sent the forms back to the IAL-Central Lab with the achieved results from the IQC in HIV EIA/ELISA kits. Among 22 (59.5%) laboratories, which perform additional HIV antibody testing by indirect immunofluorescence-based assay (HIV-IFA), 11 (50.0%) carried out the HIV-IFA IQC. As identical data were reported from procedures by employing the IQC samples in different batches of EIA/ELISA kits from the same manufacturers, it may inferred that the laboratories have complied with the recommended procedures, and that the standardized conduct has been followed. Furthermore, the analyses on reported results indicated that the majority of commercial diagnostic kits used for routine HIV antibody testing at the Network laboratories show good quality and reproducibility.

No presente estudo estão descritos os resultados das primeiras análises feitas quanto ao desempenho das unidades componentes da Rede de Laboratórios de Diagnóstico de HIV/AIDS do Estado de São Paulo, que concordaram em participar da implantação do controle de qualidade interno para o diagnóstico sorológico da infecção pelo HIV (CQI-HIV) nos respectivos serviços referentes à detecção de anticorpos anti-HIV. De abril de 2009 a fevereiro de 2010 foram distribuídos os painéis de soro CQI-HIV para 37 laboratóriosda sub-rede do Estado de São Paulo. Desses, 27 (73,0%) enviaram ao IAL Central os formulários com os resultados obtidos no CQI-HIV para EIA/ELISA. Entre os 22 (59,5%) laboratórios que realizam também oensaio de IFI HIV-1 na rotina diagnóstica, 11 (50,0%) executaram o sistema CQI para esse teste. Em vistados laboratórios participantes terem apresentado idênticos dados na determinação de reatividade ideal dasamostras do painel para os conjuntos diagnósticos procedentes de mesmas firmas produtoras e de diferenteslotes, pode-se inferir que os laboratórios seguiram os procedimentos preconizados, o que demonstra aadequada execução da conduta padronizada. Ademais, a análise dos resultados obtidos indica que osconjuntos diagnósticos utilizados pela rede de laboratórios são de boa qualidade e de boa reprodutibilidade.