Resistencia a los azoles en cepas de Aspergilus fumigatus sensu stricto aislados de muestras clínicas respiratorias

Introducción. La aspergilosis invasiva presenta alta mortalidad en pacientes con enfermedades crónicas e inmunocomprometidos. Aspergillus fumigatus sensu stricto (AFSS) es el principal agente etiológico y su tipificación requiere de métodos moleculares. La incidencia incrementada de AI resistentes a los antifúngicos demanda un diagnóstico certero y oportuno. Métodos. Se estudiaron 20 cepas de la micoteca del Instituto de Medicina Tropical - Universidad Nacional Mayor de San Marcos, aisladas de muestras respiratorias e identificadas como Aspergillus fumigatus sensu lato mediante el estudio macroscópico y microscópico. Las cepas fueron referidas a la Universidad Nacional del Litoral para su tipificación mediante una PCR screening para AFSS basada en secuencias del gen CYP51A y el estudio de sensibilidad antifúngica para voriconazol (VOR), itraconazol (ITC), posaconazol (POS), isavuconazol (ISA), anidulafungina (ANF), caspofungina (CSF) y anfotericina B (AMB) obteniendo la concentración inhibitoria mínima (CIM) mediante el protocolo de CLSI M38M51S-Ed3. Resultados. Las 20 cepas fueron identificadas como AFSS. Ninguna de las cepas tuvo una CIM por encima del punto de corte clínico (VOR), ni epidemiológico (ITC, ISA, AMB y CSF). POS fue la droga más potente frente a la colección de cepas evaluadas (media geométrica (GM) de CIM de 0,042 µg/ml). Conclusiones. Todos los aislamientos fueron tipificados como AFSS sensibles a los azoles según los puntos de corte clínico, posaconazol tuvo la mayor actividad antifúngica. Nuestros hallazgos aportan a incrementar la escasa información sobre la etiología y sensibilidad a los antifúngicos de uso clínico de las aspergilosis invasiva en nuestro país.

Introduction. Invasive Aspergillosis (IA) poses a significant threat to patients with chronic diseases and compromised immune systems, with Aspergillus fumigatus sensu stricto (AFSS) being the primary etiological agent. Accurate and timely diagnosis is crucial, particularly given the rising incidence of IA strains resistant to antifungals, necessitating molecular methods for typing. Methods. Twenty strains from Instituto de Medicina Tropical - Universidad Nacional Mayor de San Marcos, mycological collection, previously identified as Aspergillus fumigatus sensu lato through macroscopic and microscopic analysis, were studied. These strains were forwarded to the Universidad Nacional del Litoral for AFSS typing using a PCR screening based on CYP51A gene sequences. Antifungal susceptibility testing was performed for Voriconazole (VOR), Itraconazole (ITC), Posaconazole (POS), Isavuconazole (ISA), Anidulafungin (ANF), Caspofungin (CSF), and Amphotericin B (AMB), obtaining Minimum Inhibitory Concentrations (MICs) according to CLSI M38M51S-Ed3. Results. All 20 strains were identified as AFSS. None of the strains exhibited MICs above the clinical breakpoint (VOR) or the epidemiological cutoffs (ITC, ISA, AMB, and CSF). POS demonstrated the highest potency against the strain collection, with a geometric mean MIC of 0,042 µg/ml. Conclusions. All isolates were classified as azole-sensitive Aspergillus fumigatus sensu stricto (AFSS) based on clinical cutoff points, particularly posaconazole, which exhibited superior antifungal activity. Our findings contribute to augmenting the limited information on the etiology and clinical antifungal sensitivity of IA in our country.

Caracterización de Candida spp. aisladas a partir de urocultivos en la ciudad de Medellín / Characterization of Candida spp isolated from urine cultures of Medellín

Resumen Candida spp. es un agente etiológico importante en infecciones del tracto urinario, principalmente en población con terapia antimicótica de amplio espectro y con catéteres urinarios. Candida albicans es la especie más frecuente, pero otras especies han surgido como patógenos emergentes. En este trabajo se recolectaron aislamientos de Candida spp. de urocultivos de pacientes que consultaron en Dinamica IPS entre enero 2016 y noviembre 2017. Para estimar la frecuencia de las especies y observar los patrones de sensibilidad, se realizó la identificación fenotípica y su perfil de sensibilidad con el sistema comercial Vitek 2® (BioMérieux, Inc.), adicionalmente se evaluaron mediante análisis de las secuencia y filogenética ITS1-5.8S-ITS2. En el estudio se incluyeron 78 aislamientos de Candida spp. Las frecuencias de especies de Candida identificadas empleando las herramientas moleculares fueron: C. albicans (38,5%), C. tropicalis (23,1%), C. glabrata (21,8%), C. parapsilosis (10,3%), C. metapsilosis y C. krusei (2,5%) y C. guillermondi (1,3%). La identificación por métodos moleculares y por el sistema Vitek 2 fue: C. albicans (93,3%), C. glabrata (94,1%), C. tropicalis (83,3%), C. parapsilosis (75%) C. guilliermondii y C. krusei (100%). La sensibilidad de todos los aislamientos al fluconazol fue 93,6%.

Abstract Candida spp is an important etiologic agent in urinary tract infections, mainly in patients in broad-spectrum antifungal therapy, with urinary catheters. Candida albicans is the most frequent specie; but other species have arised as emerging pathogens. In this study, isolates of Candida spp. of urine cultures from patients who consulted in Dinamica IPS between January 2016 and November 2017 were evaluated. To estimate the frequency of the species and to observe the sensitivity patterns, the phenotypic identification and its sensitivity profile was performed employed the Vitek 2® commercial system. (BioMérieux, Inc) In addition the isolates were evaluated by sequence analysis and phylogenetics ITS1-5.8S-ITS2. This study included 78 isolates of Candida spp. The frequencies of Candida species identified using the molecular tools were: C. albicans (38.5%), C. tropicalis (23.1%), C. glabrata (21.8%), C. parapsilosis (10.3%), C. guillermondi (1.3%) and C. metapsilosis and C. krusei (2.5%). The identification by molecular methods and by Vitek 2 system were: C. albicans (93.3%), for C. glabrata (94.1%), C. tropicalis (83.3%), C. parapsilosis (75%) and 100% for C. guilliermondii and C. krusei.. fluconazole sensitivity of all isolates was 93.6%

Sensibilidad in vitro de cepas chilenas de Cryptococcus neoformans de origen clínico / In vitro susceptibility of Chilean Cryptococcus neoformans strains of clinical source

Resumen Introducción: Las infecciones por levaduras del género Cryptococcus afectan principalmente a pacientes con déficit de la inmunidad mediada por células. Han sido escasos los estudios de sensibilidad realizados para este género en Chile. Objetivos: Determinar la sensibilidad in vitro de Cryptococcus sp a antifúngicos de uso habitual y evaluar la concordancia esencial entre sensibilidad determinada por microdilución en caldo y por difusión en agar con tiras comerciales. Materiales y Método: Estudio descriptivo de 21 cepas aisladas desde liquido céfalo-raquídeo y sangre. Las CIM50 y CIM90 para fluconazol, voriconazol y anfotericina B se determinaron por microdilución en caldo (Sensititre Yeast One®) y por difusión en agar con tiras comerciales (MIC Test Strips). Resultados: Todas las cepas correspondieron a C. neoformans. Los rangos de CIM50 y CIM90 para cada antifúngico estudiado fueron amplios por ambos métodos. La concordancia esencial entre microdilución y difusión en agar con tiras comerciales fue de 24, 62 y 29% para fluconazol, voriconazol y anfotericina B, respectivamente. Conclusiones: La prueba de Sensititre Yeast One® y la de difusión en agar con tiras comerciales, MIC Test Strips, tienen una pobre concordancia esencial para fluconazol y anfotericina B.

Abstract Background: Cryptococcus yeast infections primarily affect immunocompromised patients. There have been few susceptibility studies conducted for this genus in Chile. Aims: To determine the in vitro susceptibility to commonly used antifungals and evaluate the concordance between susceptibility determined by microdilution in broth and commercially available strips. Methods: Descriptive study of 21 Cryptococcus strains, isolated from cerebrospinal fluid and blood. The MIC50 and MIC90 for fluconazole, voriconazole and amphotericin B was determined by broth microdilution (Sensititre Yeast One®) and by commercial drug sensitivity strips (MIC Test Strips). Results: All strains corresponded to C. neoformans. The ranges of MIC50 and MIC90 for each antifungal studied were wide by both methods. The essential agreement between Sensititre Yeast One test and strips was 24, 62 and 29% for fluconazole, voriconazole and amphotericin B, respectively. Conclusions: The Sensititre Yeast One test and MIC Test Strips exhibited poor essential concordance, especially for fluconazole and amphotericin B.

Candida auris infection in the central catheter of a patient without sepsis symptoms / Infección por Candida auris en el catéter central de un paciente sin síntomas de sepsis

Abstract Background: Candida auris is an emerging yeast frequently reported as resistant to multiple antifungal drugs commonly used to treat Candida infections. This specie can colonize the patient's skin and has great ability for producing outbreaks in hospitals. C. auris is phylogenetically related to other Candida species, can be misidentified using conventional biochemical or commercial methods and requires specific technology for its identification. Case report: We report the first isolate of C. auris in Cali, Colombia, from a central venous catheter in a 37-year-old patient with rheumatoid arthritis and endocarditis who did not have symptoms of sepsis. The yeast was initially misidentified as C. haemulonii using the Phoenix system and subsequently identified as C. auris by matrix-assisted laser desorption/ionization-time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). The broth microdilution method was used to determine the minimum inhibitory concentration; the isolate was susceptible to fluconazole, itraconazole, voriconazole and amphotericin B. Conclusions: This report contributes to knowledge of the epidemiology of C. auris infections in individuals with underlying disease and describes an isolate with a behavior different from what is usually reported.

Resumen Antecedentes: Candida auris es una levadura emergente, informada con frecuencia como resistente a diversos antifúngicos usados comúnmente para tratar infecciones por Candida. Esta especie puede colonizar la piel y tiene gran capacidad de producir brotes en ambientes hospitalarios. Está filogenéticamente relacionada con otras especies de Candida, es mal identificada por los métodos bioquímicos o comerciales, y requiere tecnología específica para su identificación. Reporte de caso: Se informa el primer aislamiento de C. auris en Cali, Colombia en un paciente de 37 años con artritis reumatoide y endocarditis, sin síntomas de sepsis, a partir de la punta de catéter venoso central. La levadura inicialmente se identificó como C. haemulonii por el sistema Phoenix® y posteriormente como C. auris por espectrometría de masas desorción/ionización láser asistida por una matriz con detección de masas por tiempo de vuelo (MALDI-TOF MS). Se determinó la concentración inhibitoria mínima por el método de microdilución en caldo que mostró un aislamiento sensible a fluconazol, itraconazol, voriconazol y anfotericina B. Conclusión: Este informe contribuye al conocimiento de la epidemiología de las infecciones por C. auris en individuos con enfermedad subyacente y describe un aislamiento con un comportamiento diferente a lo indicado en otros estudios.

Actividad in vitro de extractos etanólicos de propóleos del bajo cauca antioqueño sobre dos hongos filamentosos y uno levaduriforme

El propóleos es una resina colectada por las abejas Apis mellifera de especies botánicas, próximas a los apiarios. Este material resinoso es ampliamente reconocido por sus propiedades antimicrobianas. El objetivo de este trabajo fue evaluar la actividad antifúngica in vitro de los extractos etanólicos de propóleos (EEP), obtenidos a partir de muestras provenientes de apiarios experimentales de investigación, ubicados en la región del Bajo Cauca antioqueño, sobre dos hongos filamentosos, Botryodiplodia theobromae y Fusarium oxysporum y un hongo levaduriforme, Candida albicans El propóleos fue recolectado por los métodos de malla y de raspado, durante diferentes periodos del año. Mediante la técnica de macrodilución en caldo, se evaluaron seis dosis de EEP, en un rango de156 a 5000µgmL-1 y se determinó la concentración que inhibió el 80 y el 50% del crecimiento del hongo. Los resultados indican que el método de recolección del propóleos presentó diferencias significativas con respecto al crecimiento de C albicans y no para B theobromae y F oxysporum Las CMI80 estuvieron entre 1211 a 4050µgmL-1, 1567 a 5016µgmL-1 y 1529 a 3568µgmL-1 para B theobromae, F oxysporum y C albicans, respectivamente. En conclusión, los extractos evaluados exhibieron un actividad inhibitoria del crecimiento moderada, en comparación con el control y el hongo levaduriforme, C albicans presentó la mayor sensibilidad frente a los EEP analizados. Adicionalmente, el método de recolección del propóleos solo presentó diferencias significativas respecto a la concentración mínima inhibitoria, encontrada para C albicans.

Propolis is a resin collected by the Apis mellifera bees from botanical species surrounding the apiaries. This resinous material is widely renowned by its antimicrobial properties. The aim of this research was to evaluate the in vitro activity of ethanolic extracts from propolis (EEP), obtained from experimental research apiaries located in the Bajo Cauca antioqueño region, against two filamentous fungi, Botryodiplodia theobromae and Fusarium oxysporum, and a yeast, Candida albicans. Propolis were collected in different periods of the year, by methods of scraping and mesh. Using the macrodilution technique, six doses of EEP ranging from 156 to 5000µgmL-1 were evaluated and minimal inhibitory concentration 80 and inhibitory concentration 50 were determined. Results indicated that the harvest method showed a significant effect on C albicans growth, but not for B theobromae and F oxysporum. The MICs80 observed were between 1211 to 4050µgmL-1, 1567 to 5016µgmL-1 and 1529 to 3568µgmL-1 for B theobromae, F oxysporum and C albicans, respectively. In conclusion, the extracts tested showed a moderate inhibitory growth activity, in comparison with the control; the yeast, C albicans, showed the highestsensibility to the EEP evaluated. Additionally, the collection methods only showed significant differences with respect to minimal inhibitory concentration found for C albicans.

Is timely and appropriate antifungal drug enough for survival of adult cases with candidaemia? Five-year experience / ¿Es el uso oportuno y adecuado de antimicóticos suficiente para la supervivencia de casos de adultos con candidemia? Cinco años de experiencia

OBJECTIVE: Candidaemia is the fourth most common cause of nosocomial bloodstream infections. The objective of this paper was to evaluate the risk factors associated with mortality in patients with candidaemia with respect to Candida species and their susceptibilities, retrospectively. METHODS: All consecutive patients who developed candidaemia at an 800-bed training and research hospital were enrolled in this retrospective, observational, single centre study during the period June 2006 to December 2011. RESULTS: A total of 97 candidaemia episodes were identified in 97 patients during the study period with an overall incidence of four episodes/10 000 admissions in adults. Crude 30-day mortality rates among patients with candidaemia were 56% (55 of 97 cases). Urinary catheterization, immunosuppressive therapy, acute physiology and chronic health evaluation (APACHE) II score (>16) and hypoal-buminaemia were found to be independent risk factors for fatal candidaemia. CONCLUSIONS: Adult cases with candidaemia who have risk factors associated with mortality are more likely to have poor prognosis despite appropriate and timely initiated antifungal drug treatment. Empiric antifungal drug should be tailored according to the severity of the patients ' conditions and local antifungal susceptibility.

OBJETIVO: La candidemia es la cuarta causa más común de infecciones nosocomiales del flujo sanguíneo. El objetivo del presente trabajo fue evaluar los factores de riesgo asociados con la mortalidad en pacientes con candidemia con respecto a las especies de Candida y sus susceptibilidades, de manera retrospectiva. MÉTODOS: Todos los pacientes consecutivos que desarrollaron candidemia en un hospital de capacitación e investigación de 800 camas, fueron inscritos en este estudio retrospectivo, observacional, monocéntrico, durante el período de junio de 2006 a diciembre de 2011. RESULTADOS: Se identificaron un total de 97 episodios de candidemia en 97 pacientes durante el período de estudio con una incidencia general de cuatro episodios/10 000 ingresos en adultos. Las tasas brutas de mortalidad de 30 días entre los pacientes con candidemia fueron 56% (55 de 97 casos). Se halló que la cateterización urinaria, la terapia inmunosupresiva, y la puntuación (> 16) de la escala de Evaluación de la fisiología aguda y salud crónica (APACHE II) así como la hipoalbuminemia, constituyen factores de riesgo para una candidemia fatal. CONCLUSIONES: Los casos adultos con candidemia que tienen factores de riesgo asociados con mortalidad son más propensos a tener un pronóstico pobre a pesar del tratamiento apropiado y oportuno con medicamentos antimicóticos. Los antimicóticos empírico se deben adaptar según la severidad de las condiciones de los pacientes y la susceptibilidad antifúngica local.

Antifúngicos em infecções oculares: drogas e vias de administração / Antifungals in eye infections: drugs and routes of administration

O tratamento das infecções oculares por fungos representa um desafio à prática oftalmológica. Para obtermos resposta terapêutica adequada, além do uso da droga correta, é necessária a administração desta de forma eficaz. Este manuscrito reúne informações a respeito das principais drogas antifúngicas utilizadas em infecções oculares, suas concentrações e principais vias de administração.

Treatment of fungal eye infections represents a challenge to the ophthalmology practice. For an adequate therapeutic response, besides correct drug choice, it is necessary an effectively administration. This script gathers information about the major antifungal drugs used in eye infections, their concentrations and main administration routes.

Comparison between two culture media for in vitro evaluation of antifungal susceptibility of the Sporothrix schenckii complex / Comparação entre dois meios de cultura para avaliação in vitro da suscetibilidade a antifúngicos do complexo Sporothrix schenckii

BACKGROUND: The standard methodology for determining the antifungal sensitivity against the Sporothrix schenckii complex recommends the use of the 1640 Roswell Park Memorial Institute culture medium (RPMI) buffered with morpholinepropanolsulfonic acid (MOPS). However, while this is a high-cost medium which requires a laborious implementation and sterilization by filtration, the Sabouraud dextrose broth is a low-cost medium, widely used in mycology, sterilized by autoclave. OBJECTIVE: To evaluate the performance of the Sabouraud dextrose broth culture medium as a substitute for the RPMI 1640-MOPS in determining the antifungal sensitivity of S. schenckii. METHODS: Forty-eight clinical isolates were evaluated against five antifungal agents: itraconazole, ketoconazole, fluconazole, amphotericin B and terbinafine, using the method of broth microdilution advocated by the M38-A2 protocol of the Clinical and Laboratory Standards Institute. RESULTS: There were no significant differences between the Minimum Inhibitory Concentrations obtained in the two culture media for all the antifungals, with the exception of the amphotericin B. Regarding this drug, the Minimum Inhibitory Concentration range obtained were wider for the Sabouraud dextrose broth than for the Roswell Park Memorial Institute morpholinepropanelsulfonic acid. CONCLUSIONS: The Sabouraud dextrose broth showed potential to be used in the in vitro evaluation of the S. schenckii complex antifungal activity.

FUNDAMENTOS: A metodologia padronizada para a determinação da sensibilidade aos antifúngicos frente ao complexo Sporothrix schenckii preconiza a utilização do meio de cultura Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 tamponado com ácido morfolinopropanosulfônico (MOPS). No entanto, este meio possui custo elevado, execução trabalhosa e esterilização por filtração. Já o caldo Sabouraud-dextrose é amplamente utilizado em micologia, de baixo custo e pode ser esterilizado por autoclavagem. OBJETIVO: Avaliar o desempenho do meio de cultura caldo Sabouraud-dextrose em substituição ao RPMI 1640-MOPS na determinação da sensibilidade de S. schenckii a antifúngicos. MÉTODO: Foram avaliados 48 isolados clínicos frente a cinco antifúngicos: itraconazol, cetoconazol, fluconazol, anfotericina B e terbinafina, utilizando a metodologia da microdiluição em caldo preconizada pelo protocolo M38-A2 do Clinical and Laboratory Standards Institute. RESULTADOS: Não houve diferenças significativas nas Concentrações Inibitórias Mínimas obtidas nos dois meios de cultura para todos os antifúngicos, com exceção da anfotericina B. Para este fármaco, foram obtidas faixas mais amplas de Concentrações Inibitórias Mínimas para caldo Sabouraud-dextrose do que para Roswell Park Memorial Institute-morfolinopropanosulfônico. CONCLUSÕES: O caldo Sabouraud-dextrose mostrou potencial para ser utilizado na avaliação in vitro da atividade antifúngica do complexo S. schenckii.

Lo que debemos saber sobre losmétodos de sensibilidad a losantifúngicos / What we must know about antifungal suceptibility testing

El aumento creciente de infecciones fúngicas y la aparición de resistencia a los antimicóticos,han hecho necesario el desarrollo de métodos estandarizados para la determinación dela susceptibilidad antifúngica. Tales métodos deben ser reproducibles y adaptables a un laboratorioasistencial, de manera que permitan la detección de resistencia in vitro, la cual, en la mayoría delos casos, suele correlacionarse con una evolución clínica desfavorable. Tanto el Clinical LaboratoryStandards Institute, como el European Committee for Antimicrobial Susceptibility Testing han desarrolladoguías para la medición estandarizada de la sensibilidad de varias especies de hongos a losantimicóticos actuales. En la literatura científica colombiana son pocos los datos disponibles sobrela sensibilidad antifúngica, por lo que frente al creciente aumento de la resistencia a los antifúngicos,se hace necesario comenzar a recopilar datos propios. En este artículo se hace una revisión de lasúltimas publicaciones indexadas en Pubmed con relación a los distintos métodos disponibles paramedir la sensibilidad antifúngica y, adicionalmente, se destaca su utilidad en la práctica clínica.

The increasing number of fungal infections andthe emergence of antifungal resistance, have prompted the development of standardized methods for determining antifungal sensitivityprofiles, aiming at obtaining reproducible andadaptable tests that could be done in hospital laboratories for the in vitro determination of resistanceas, in most cases, data correlate withan unsatisfactory clinical outcome. Both the Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI)and the European Committee for AntimicrobialSusceptibility Testing (EUCAST), have developed guidelines for the interpretation of standardized sensitivity measurements of the various fungalspecies to current antifungal compounds.In the Colombian scientific literature, few data are available on antifungal sensitivity; however,with the increasing number of antifungal resistant isolates, it is necessary to begin collecting our own data. This paper reviews recent publicationsin PubMed regarding the various methods of antifungal susceptibility testing and highlights their usefulness in clinical practice.

Eficácia de antifúngicos tópicos em diferentes dermatomicoses: uma revisão sistemática com metanálise / Efficacy of topical antifungal drugs in different dermatomycoses: a systematic review with meta-analysis

OBJETIVO: Avaliar e comparar a eficácia dos antifúngicos tópicos empregados no tratamento de cada dermatomicose. MÉTODOS: Foi desenvolvida uma revisão sistemática de ensaios clínicos randomizados, publicados em português, espanhol ou inglês até julho de 2010, que comparassem o uso de antifúngicos azólicos e alilamínicos entre si ou com placebo, no tratamento de candidíase cutânea, e das tineas versicolor, pedis, cruris e corporis. Os desfechos de eficácia avaliados foram cura micológica ao final do tratamento e cura sustentada. RESULTADOS: Dos 4.424 estudos inicialmente identificados, 49 alcançaram os critérios de seleção, sendo incluídos nas metanálises. Os dados agrupados de eficácia demonstraram superioridade dos antifúngicos frente a placebo, independente da dermatomicose avaliada, com valores de odds ratio (OR) variando de 2,05 (IC 95% 1,18-3,54) a 67,53 (IC 95% 11,43-398,86). Alilaminas foram superiores aos azólicos apenas para o desfecho cura sustentada (OR 0,52 [IC 95% 0,31-0,89]). CONCLUSÃO: Há evidência consistente da superioridade dos antifúngicos com relação ao uso de placebo, não sendo mais justificável a realização de estudos controlados por placebo. Alilaminas mantêm a cura micológica por períodos mais extensos que fármacos azólicos. Dada a significativa diferença de custo entre as classes, recomenda-se a realização de análises farmacoeconômicas.

OBJECTIVE: To evaluate and compare the efficacy of topical antifungal drugs applied to the treatment of each dermatomycosis. METHODS: A systematic review of randomized clinical trials, published in Portuguese, Spanish and English until July 2010, which compared the use of azole and allylamine antifungal drugs among themselves and with placebo in the treatment of cutaneous candidiasis and T. versicolor, T. pedis, T. cruris and T. corporis was performed. The efficacy outcomes evaluated were mycological cure at the end of treatment and sustained cure. RESULTS: Of the 4,424 studies initially identified, 49 met the selection criteria and were included in the meta-analyses. The grouped efficacy data evidenced the superiority of antifungal drugs compared to placebo, regardless of the dermatomycosis under evaluation, with odds ratio values ranging from 2.05 (95% CI 1.18-3.54) to 67.53 (95% CI 11.43-398.86). Allylamines were better than azoles only for the outcome sustained cure (OR 0.52 [95% CI 0.31-0.89]). CONCLUSION: There is consistent evidence of the superiority of antifungal drugs over the use of placebo, and placebo-controlled studies are no longer justifiable. Allylamines maintain the mycological cure for longer periods compared to azole drugs. Given the significant cost difference among the classes, pharmacoeconomic analyses should be performed.

Phototoxic action of light emitting diode in the in vitro viability of Trichophyton rubrum / Ação fototóxica do diodo emissor de luz na viabilidade de Trichophyton rubrum in vitro

BACKGROUND: Trichophyton rubrum is the most common agent of superficial mycosis of the skin and nails causing long lasting infections and high recurrence rates. Current treatment drawbacks involve topical medications not being able to reach the nail bed at therapeutic concentrations, systemic antifungal drugs failing to eradicate the fungus before the nails are renewed, severe side effects and selection of resistant fungal isolates. Photodynamic therapy (PDT) has been a promising alternative to conventional treatments. OBJECTIVES: This study evaluated the in vitro effectiveness of toluidine blue O (TBO) irradiated by Light emitting diode (LED) in the reduction of T. rubrum viability. METHODS: The fungal inoculums' was prepared and exposed to different TBO concentrations and energy densities of Light emitting diode for evaluate the T. rubrum sensibility to PDT and production effect fungicidal after photodynamic treatment. In addition, the profiles of the area and volume of the irradiated fungal suspensions were also investigated. RESULTS: A small reduction, in vitro, of fungal cells was observed after exposition to 100 µM toluidine blue O irradiated by 18 J/cm² Light emitting diode. Fungicidal effect occurred after 25 µM toluidine blue O irradiation by Light emitting diode with energy density of 72 J/cm². The analysis showed that the area and volume irradiated by the Light emitting diode were 52.2 mm² and 413.70 mm³, respectively. CONCLUSION: The results allowed to conclude that Photodynamic therapy using Light emitting diode under these experimental conditions is a possible alternative approach to inhibit in vitro T. rubrum and may be a promising new treatment for dermatophytosis caused by this fungus.

FUNDAMENTOS: Trichophyton rubrum é o agente mais comum das micoses superficiais de pele e unhas causando infecções de longa duração e altas taxas de recidiva. As desvantagens do tratamento atual envolvem medicações tópicas as quais não são capazes de alcançar o leito ungueal em concentrações terapêuticas, antifúngicos sistêmicos que não erradicam o fungo antes das unhas serem renovadas, efeitos colaterais graves e seleção de isolados fúngicos resistentes. A terapia fotodinâmica tem sido uma alternativa promissora aos tratamentos convencionais. OBJETIVOS: Este estudo avaliou a eficácia, in vitro, de azul de orto-toluidina irradiado por diodo emissor de luz na redução da viabilidade de T. rubrum. MÉTODOS: O inóculo fúngico foi preparado e exposto a diferentes concentrações de azul de orto-toluidina e densidades de energia do diodo emissor de luz, para avaliar a sensibilidade de T. rubrum e o efeito fungicida, após terapia fotodinâmica. Além disso, os perfis da área e volume das suspensões fúngicas irradiados também foram investigados. RESULTADOS: Uma pequena redução, in vitro, de células fúngicas foi observada após a exposição a 100 mM azul de orto-toluidina irradiados por diodo emissor de luz a 18 J/cm². Efeito fungicida ocorreu após irradiação 25 µM orto-toluidina por diodo emissor de luz com densidade de energia de 72 J/cm². A análise mostrou que a área e o volume irradiados pelo diodo emissor de luz foram 52,2 mm² e 413,70 mm³, respectivamente. CONCLUSÕES: Os resultados permitiram concluir que a terapia fotodinâmica com diodo emissor de luz, nas condições experimentais é uma abordagem alternativa para inibir, in vitro, T. rubrum e pode ser um tratamento promissor para as dermatofitoses causadas por este fungo.

Perfil de suscetibilidade a antifúngicos de dermatófitos isolados de pacientes com insuficiência renal crônica / Antifungal susceptibility of dermatophytes isolated from patients with chronic renal failure

FUNDAMENTOS: As dermatofitoses apresentam alta prevalência na população em geral e, principalmente, em pacientes com insuficiência renal crônica, necessitando tratamento com antifúngicos tópicos e/ou sistêmicos, cuja eficácia precisa ser avaliada. Estudos in vitro para avaliar a ação de antifúngicos são raros, especialmente, em fungos filamentosos. OBJETIVO: Avaliar o perfil de suscetibilidade de diferentes espécies de dermatófitos, isolados de pacientes com insuficiência renal crônica, em relação a nove antifúngicos disponíveis comercialmente para o tratamento de dermatofitoses. MÉTODO: Analisaram-se 26 isolados de dermatófitos de pacientes com insuficiência renal crônica em relação a nove antifúngicos (cetoconazol, ciclopirox olamina, fluconazol, griseofulvina, itraconazol, miconazol, piroctona olamina, terbinafina e tioconazol) pelo método de microdiluição em caldo proposto pelo Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), com modificações para dermatófitos. RESULTADOS: Entre os antifúngicos testados, a terbinafina e o tioconazol obtiveram os melhores resultados de sensibilidade e o fluconazol apresentou baixa atividade, especialmente para as amostras da espécie M. gypseum. O ciclopirox olamina, apesar de menos eficaz que a terbinafina, também mostrou resultados satisfatórios. CONCLUSÕES: De modo geral, o perfil de sensibilidade dos antimicóticos testados seguiu o padrão de resultados mostrados por estudos anteriores, ratificando a necessidade de conhecimento da espécie causadora de dermatofitose, devido à variação do perfil de suscetibilidade entre as espécies. Além disso, nossos resultados demonstram a importância da realização de ensaios de sensibilidade in vitro, pois alguns isolados da mesma espécie apresentaram diferente perfil de sensibilidade.

BACKGROUND: The prevalence of dermatophytosis in the general population is high, particularly in patients with chronic renal failure. Treatment requires the use of topical and/or systemic antifungal drugs. The efficacy of antifungal agents for the treatment of dermatophytosis has yet to be evaluated. Studies evaluating the in vitro activity of antifungal agents are rare, particularly in filamentous fungi. OBJECTIVE: To evaluate the susceptibility profile of different species of dermatophytes isolated from patients with chronic renal failure to nine antifungal drugs available on the market for the treatment of dermatophytosis. METHODS: Twenty-six isolates of dermatophytes obtained from patients with chronic renal failure were analyzed with respect to their susceptibility to nine antifungal agents (ketoconazole, ciclopirox olamine, fluconazole, griseofulvin, itraconazole, miconazole, piroctone olamine, terbinafine and tioconazole), using the broth microdilution method proposed by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) and adapted for dermatophytes. RESULTS: Of the antifungal agents tested, the best results in terms of sensitivity were found with terbinafine and tioconazole, while the antifungal activity of fluconazole was found to be weak, particularly against strains of M. gypseum. Ciclopirox olamine, although less effective than terbinafine, also yielded satisfactory results. CONCLUSIONS: In general, the sensitivity profile of the antifungal agents tested in this study was similar to results obtained in previous studies, confirming the need to determine which species is causing the dermatophytosis given that antifungal susceptibility varies from one species to another. Furthermore, the present findings show the importance of conducting in vitro sensitivity tests, since the sensitivity profile may differ among isolates of the same species.

Sucesso terapêutico da terbinafina em um caso de esporotricose / Successful treatment of terbinafine in a case of sporotrichosis

A esporotricose é uma infecção subaguda ou crônica, causada por fungos pertencentes ao Complexo Sporothrix. Relato do caso: esporotricose de localização nasal foi tratada com iodeto de potássio e como não se obteve sucesso, reiniciou-se o tratamento com associação de iodeto de potássio e itraconazol. Porém, ocorreu nova recidiva. As culturas dos exames micológicos foram submetidas a ensaios de atividade antifúngica in vitro para auxiliar no tratamento. A terbinafina foi o antifúngico que apresentou melhores resultados, por isso, o tratamento foi reiniciado com este antifúngico e, após dois anos do término do mesmo, não recidivou. Adicionalmente, ambas as culturas foram comparadas por RAPD, obtendo padrões de fragmentos distintos, indicando que os isolados são diferentes ou demonstrando um processo microevolutivo do microrganismo.

Sporotrichosis is a chronic subacute infection caused by fungi belonging to the Sporothrix Complex. In the present clinical case, nasal sporotrichosis was treated with potassium iodide. This was unsuccessful, and the treatment was restarted with a combination of potassium iodide and itraconazole. This however resulted in a further recurrence of the infection. The mycological cultures were tested in vitro for antifungal activity to assist in treatment. Terbinafine, an antifungal drug, produced the best results and was therefore used for the rest of the treatment course, with no recurrence after two years of its completion. In addition, both cultures were compared using RAPD and different fragment patterns were observed. This indicated that the isolates were either different or indicated a microevolutionary process of this microorganism.

Candida y candidiasis invasora: un reto continuo para su diagnóstico temprano / Candida and candidiasis: the challenge continues for an early diagnosis

La candidiasis invasora representa el 75% de las infecciones por hongos en pacientes hospitalizados, con una mortalidad que alcanza cifras hasta del 78%. La frecuencia de estas infecciones varía de acuerdo con el servicio de hospitalización y los factores de riesgo de los pacientes. Paralelamente, se han venido observando cambios en la epidemiología de las especies de Candida, variaciones en su prevalencia y en la resistencia a los antimicóticos según su localización geográfica. Por todo lo anterior, es imperativo establecer un diagnóstico temprano que lleve a la identificación correcta de la especie implicada de manera que se instaure un pronto y adecuado tratamiento antimicótico. El diagnóstico de la candidiasis invasora continúa siendo un reto, en el cual combinar los diferentes métodos diagnósticos, los microbiológicos, los inmunológicos y los nuevos moleculares, aún en desarrollo y validación, es la mejor estrategia para lograr un dictamen oportuno. En esta revisión se describen los métodos disponibles, sus limitaciones y las perspectivas de los que están en etapa de desarrollo y validación. En la última década se cuenta con métodos de referencia para la medición de susceptibilidad in vitro a los antimicóticos, lo cual ha permitido conocer los perfiles de sensibilidad de las diferentes especies de Candida a escala mundial y local.

Invasive candidiasis represents 75% of fungal infections in hospitalized patients, with reported mortalities up to 78%. The frequency of these infections varies according to the hospital services and the risk factors of the patients. In parallel, changes in the epidemiology of the Candida species have been observed, in particular variations in their prevalence and in their resistance to antifungals according to geographic location. For these reasons it is crucial to establish an early diagnosis that identifies the pathogen to the species level in order to allow an appropriate therapeutic decision. The diagnosis of invasive candidiasis continues to be a challenge, where combining the different available methods (microbiologic, immunologic and new molecular approaches) is the best strategy to achieve a prompt and accurate diagnosis. We review the currently available assays for conventional and molecular diagnosis, their limitations, and the perspectives for assays that are now in development and validation. In the last decade, well established reference methods have become available for testing antifungal susceptibility and this has allowed worldwide and regional sensitivity profiles to be established for the different Candida species.

Dermatófitos: interação patógeno-hospedeiro e resistência a antifúngicos / Dermatophytes: host-pathogen interaction and antifungal resistance

As micoses cutâneas estão entre as infecções mais comuns em humanos e se tornaram um importante problema de saúde pública, principalmente por causarem infecções invasivas em pacientes imunodeprimidos. Durante a infecção, a interação dermatófito-hospedeiro desencadeia adaptações metabólicas específicas que permitem aos patógenos aderirem e penetrarem no tecido, remodelando seu metabolismo para captar nutrientes e superar os mecanismos de defesa do hospedeiro. Esse remodelamento metabólico e a inter-relação entre metabolismo, morfogênese e resposta ao estresse são importantes fatores que estão sendo intensamente avaliados em diversos patógenos. As células do hospedeiro também respondem aos estímulos do patógeno, ativando vias de sinalização intracelular que culminam no desencadeamento de uma resposta imune contra o agente infeccioso. O entendimento molecular dessas respostas metabólicas pode ajudar no estabelecimento de novas estratégias terapêuticas. Nesta revisão, são abordados diferentes aspectos da biologia dos dermatófitos, com ênfase na interação dermatófito-hospedeiro e nos mecanismos de resistência a antifúngicos.

Cutaneous mycoses are among the most common infections in humans and have become an important public health issue because they cause invasive infections in immunocompromised patients. During the infectious process, dermatophyte-host interactions trigger specific metabolic adaptations that allow the pathogen to adhere to and penetrate the host tissue, scavenge nutrients, and overcome the host defense mechanisms. This metabolic shift and the interplay between metabolism, morphogenesis and stress response are important factors that have been extensively studied in several pathogens. Host cells also respond to the pathogen stimuli by activating intracellular signaling pathways that trigger the immune response against the infectious agent. The comprehension of the molecular aspects of these responses may help to establish new therapeutical strategies. In this review, different aspects of the biology of dermatophytes are addressed, with emphasis on the dermatophyte-host interaction and the mechanisms of antifungal resistance.

Avaliação do método de disco-difusão para determinação da eficácia da terbinafina in vitro em agentes de micoses superficiais e subcutâneas / Evaluation of the disk-diffusion method to determine the in vitro efficacy of terbinafine against subcutaneous and superficial mycoses agents

FUNDAMENTOS: As micoses superficiais e subcutâneas têm alta prevalência e, muitas vezes, caráter crônico, necessitando tratamentos tópicos e/ou sistêmicos com antifúngicos. As drogas de escolha são azóis e alilaminas (terbinafina). É necessário avaliar a eficácia das drogas para tratamento em humanos e em animais. Estudos para avaliar in vitro a ação dos antimicóticos são raros, especialmente, contra fungos filamentosos. OBJETIVO: Avaliar a eficácia in vitro da terbinafina pelo método de disco-difusão contra fungos filamentosos e leveduras agentes de micoses. MÉTODOS: Avaliou-se a ação da terbinafina (0,125µg-100µg) contra dez espécies fúngicas pelos métodos discodifusão e microdiluição/referência, para determinar a concentração inibitória mínima (MIC). RESULTADOS: Observou-se alta sensibilidade à terbinafina em: T. rubrum, M. gypseum, T. mentagrophytes, T. tonsurans, M. canis, C. carrionii e E. floccosum (halo ≥ 40mm com disco de 0,125µg). S. hyalinum e C. parapsilosis foram considerados sensíveis, mas com halos menores. Fusarium spp. apresentou menor sensibilidade (halo=12mm com disco de 2µg; MIC 8µg/mL). CONCLUSÕES: Os resultados reiteram estudos anteriores quanto à alta eficácia da terbinafina em relação a dermatófitos. A técnica de disco-difusão foi de fácil aplicação e adequada na rotina de laboratórios clínicos.

BACKGROUND: Superficial and subcutaneous mycoses have a high prevalence and, often, chronic evolution. Therefore, they need extensive treatment with topic and/or systemic antifungal agents. Azoles and alilamines (terbinafine) are first-choice drugs to treat human and animal infections. Thus, evaluation of the efficacy of these drugs is important for a successful treatment. However, there are few studies that evaluate the in vitro activity of antifungal agents. OBJECTIVE: To evaluate the in vitro efficacy of terbinafine activity against filamentous fungi and yeasts that cause mycoses. METHOD: The in vitro activity of terbinafine (0.125-100µg) against 10 fungi species was evaluated by the diskdiffusion and microdilution/reference methods to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC). RESULTS: We found a high susceptibility to terbinafine in: T. rubrum, M. gypseum, T. mentagrophytes, T. tonsurans, M. canis, C. carrionii and E. floccosum (halo ≥ 40mm with 0.125µg disk). S. hyalinum and C. parapsilosis were considered susceptible, but less than the others. Fusarium spp. showed the lowest susceptibility (halo=12mm with 2µg disk; MIC 8µg/mL). CONCLUSIONS: The results of this research confirm previous findings about the efficacy of terbinafine. The drug was shown to be highly effective to treat dermatophyte infections. The disk-diffusion method was easy to use and is a suitable technique for routine use in clinical laboratories.

Atividade antimicrobiana de enxaguatórios bucais sem álcool à base de clorexidina sobre Candida albicans / Antimicrobial activity of alcohol-free chlorhexidine mouthwashes on Candida albicans

A proposta deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana de enxaguatórios bucais, à base de clorexidina, sem álcool na sua composição, sobre Candida albicans. Foram avaliados vinte isolados clínicos de C. albicans e uma cepa de referência (ATCC 18804) frente a dois enxaguatórios à base de digluconato de clorexidina 0,12% e sem etanol ("Ca" e "Or"), em comparação ao enxaguatório de gluconato de clorexidina com etanol (controle positivo). A máxima diluição inibitória (MDI) e a máxima diluição fungicida (MDF) foram determinadas pelo método de microdiluição. Foram realizadas 12 diluições seriadas dos produtos (de 50 a 0,02%) em duplicata. Em seguida, foram acrescentados 100 µL da suspensão de C. albicans (106 células.mL-1) nos poços das placas. Após incubação (37 °C/24 horas), a MDI foi determinada por meio da leitura das densidades ópticas. Para determinar a MDF, foram realizadas semeaduras do conteúdo dos poços em ágar Sabouraud. Não houve diferenças estatísticas entre os grupos Or e controle para a MDI, mas o grupo Ca mostrou uma MDI estatisticamente maior (Kruskal-Wallis, p = 0,0012). Já para MDF, não houve diferenças estatísticas entre os grupos Ca e controle (Teste de Mann-Whitney, p = 0,1631). Pode-se concluir que o grupo Ca apresentou atividade fungicida sobre C. albicans semelhante ao controle, mas menor ação fungistática em comparação ao controle, enquanto que o Or apresentou apenas ação fungistática semelhante ao controle sobre os isolados avaliados.

The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of alcohol-free mouthwashes on Candida albicans. Twenty clinical isolates of C. albicans and one reference strain (ATCC 18804) were evaluated after exposure to two 0.12% chlorhexidine-based and alcohol-free ("Ca" and "Or") in comparison to gluconate chlorhexidine with ethanol (positive control). The maximum inhibitory dilution (MID) and maximum fugal dilution (MFD) were determined by the microdilution method. Twelve serial dilutions (from 50 to 0.02%) were prepared in duplicate. Then, 100 µL of C. albicans suspension (106 cells.mL-1) were added to the wells. After incubation (37 °C/24 hours), MID was determined by reading the optical density. For MFD determination, the content of the wells were plated on Saouraud agar. For MID, there were no differences between groups Or and control, but Ca group showed a MID statistically higher (Kruskal-Wallis, p = 0.0012). For MFD, there were no differences between Ca and control (Mann-Whitney test, p = 0.1631). It can be concluded that Ca group showed a fungicid activity against C. albicans similar to the control, but lower fungistatic activity when compared to the control. Group Or showed only a fungistatic action similar to control.

Resposta in vitro de fungos agentes de micoses cutâneas frente aos antifúngicos sistêmicos mais utilizados na dermatologia / In vitro response of cutaneous mycosis fungal agents to the most widely used systemic antifungals in dermatology

FUNDAMENTOS - A alta frequência das micoses cutâneas justifica a necessidade de avaliar a possível contribuição da determinação do perfil de susceptibilidade aos antifúngicos in vitro. OBJETIVO - Avaliar se existe variabilidade nos isolados fúngicos quanto à susceptibilidade in vitro de fungos filamentosos, previamente isolados de micoses cutâneas, frente aos antifúngicos fluconazol, cetoconazol, itraconazol e terbinafina. MÉTODOS - Os fungos foram isolados e identificados por meio da metodologia clássica e o teste de susceptibilidade aos antifúngicos foi realizado segundo o método de microdiluição em caldo, de acordo com protocolo preconizado pelo Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI), documento M38-A. RESULTADOS - Das 80 amostras de fungos filamentosos identificadas, o gênero Trichophyton representou 81 por cento. As quatro drogas analisadas apresentaram grande variação nos gêneros Trichophyton e Microsporum. O gênero Fusarium foi resistente a todas as drogas testadas. A terbinafina foi o antimicótico mais eficaz contra a maioria dos isolados fúngicos. CONCLUSÃO - Houve uma grande variabilidade nos perfis de resposta aos antifúngicos testados. O estabelecimento de um método-teste de referência permitirá ao clínico maior objetividade na escolha de uma terapia adequada.

BACKGROUND - The high frequency of cutaneous mycosis justify the need to evaluate the possible contribution of in vitro profile of susceptibility to antifungal agents. OBJECTIVE - To evaluate whether there is variability in in vitro susceptibility by filamentous fungi, previously isolated from cutaneous mycosis, to fluconazole, ketoconazole, itraconazole and terbinafine. METHODS - Fungi were isolated and identified by classical methods and the antifungal susceptibility test was performed using the method of broth microdilution, according to a protocol recommended by the Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI), through M38-A document. RESULTS - Amongst the 80 filamentous fungi identified, Trichophyton genus represented 81 percent. The four examined drugs showed great variation for Trichophyton spp and Microsporum spp. Fusarium spp was resistant to all tested drugs. Terbinafine was the most effective drug against the majority of the isolated fungi. CONCLUSION - There was great variability in response profiles to the tested antifungals. The definition of a reference test method will offer higher objectivity for physicians to choose the appropriate therapy.

Evaluación mediante tres técnicas de susceptibilidad a fluconazol en especies de Candida aisladas en pacientes con infecciones invasoras: Bogotá - Colombia / Fluconazole susceptibility of invasive Candida sp isolates as determined by three methods: Bogotá - Colombia

The frequency of invasive mycosis caused by Candida sp has increased significantly in immuno-compromised patients and in those under medical/surgical treatment; along with it, the use of azoles has fostered resistance. Objective: To compare in vitro susceptibility techniques, susceptibility to fluconazol was determined by the M27-A2 method of CLSI (Clinical Laboratory Standard Institute), the disk diffusion technique in 90 invasive Candida sp isolated species (49 C albicans, 30 C. tropicalis, 5 C parapsilosis, 4 C . guilliermondii and 2 C. lusitaniae) and the E-test in 16 isolated. Results: Over 90 percent of strains were susceptible to fluconazol. A straight correlation between disk-diffusion technique and the E-test was observed regarding the reference method (0.944 and 0.938, respectively). Conclusión: In our institution the use of fluconazol for invasive candidiasis is recommended, as well as the routine use of the disk-diffusion or E-test techniques in high complex hospitals in Colombia.

La frecuencia de micosis invasoras causadas por Candida sp en pacientes inmunocomprometidos o con tratamientos médico-quirúrgicos ha aumentado y con ello, el uso de azoles, facilitando la aparición de resistencia. Objetivo: Comparar tres métodos de detección de susceptibilidad in vitro a fluconazol: el método de referencia M27-A2 del CLSI (Clinical Laboratory Standard Institute), técnica de difusión en disco a 90 aislados obtenidos en procesos infecciosos invasores (49 C. albicans; 30 C. tropicalis; 5 C. parapsilosis; 4 C. guilliermondii y 2 C. lusitaniaé) y la epsilometría (E-test®) en 16 aislados. Resultados: La susceptibilidad fue mayor a 90 por ciento. Se encontró un buen porcentaje de concordancia entre las técnicas de difusión de disco y E-test® con respecto al método de referencia (0,944 y 0,938, respectivamente). Conclusión: En nuestra institución se considera de elección fluconazol para tratar infecciones micóticas invasoras y recomendamos las técnica de difusión en disco o E-test® para determinar la susceptibilidad en la rutina en hospitales de alta complejidad en Colombia.

Evaluación del efecto antifúngico in vitro de una crema de Plantago major en cepas de Candida albicans / Evaluation of the in vitro antifungal effect of a Plantago major cream on strains of Candida albicans

La Candida es un hongo dimorfo de distribución universal que forma parte de la flora residente de la boca, tracto digestivo y genital femenino de sujetos sanos. Bajo algunas condiciones, por razones a veces bien establecidas y en otros casos no bien conocidos, pudieran ser responsables de patologías de alto riesgo y en ocasiones fatales. Pueden producir lesiones en piel, uñas, cavidad oral, bronquios, pulmones y alcanzar todos los órganos y sistemas mediante la diseminación sanguínea de la levadura, lo que se denomina fungemia o candidemia. El aumento de las infecciones causadas por levaduras es un fenómeno creciente a nivel mundial y Perú no escapa a esta problemática. El tratamiento antifúngico se ha enriquecido, recientemente, con nuevos preparados que están mejorando las opciones terapéuticas de muchos de estos pacientes. Las determinaciones de este estudio experimental nos dan ciertas esperanzas en una posible alternativa para tratamiento antimicótico para Cándida albicans. Se demostró mediante un estudio in vitro, según el método de difusión con discos en agar Sabouraud, el efecto antifúngico de una crema elaborada con las hojas de Plantago major en una concentración de 18.5 g de sólidos por cada gramo de crema; ésta resultó muy efectiva frente a la Candida albicans los halos de inhibición producidos por las cremas de Plantago major L., nistatina y ketoconazol 2% en cepas de Candida albicans, se observo una diferencia minina entre sus diámetros, las cuales corresponden 0.15 ± 0.05 mm. y 0.32 ± 0.05 para crema de Plantago major - Crema de Ketoconazol 2% y Crema de Plantago de major L.- Nistatina. El porcentaje de inhibición de la crema de Plantago Major L. frene a los fármacos ( ketoconazol 2% y Nistatina), es 95.63 % y de 99.06 %, lo cual indica que existe un buen efecto antifúngico; el análisis estadísticos de los datos obtenidos en el experimento, con un valor de significancia del 0.95 y con un valor de P< 0.05; se obtuvo un valor de P > 0.05, lo cual indica que no existe significancia entre las cremas antifúngicas utilizadas con respecto a la puesta en evaluación