Actividad citotóxica y antiproliferativa in vitro del extracto acuoso de Phyllanthus comosus

RESUMEN Introducción: Desde los inicios de la medicina antigua, las plantas han sido utilizadas como tratamiento en diversas enfermedades incluyendo las de naturaleza infecto-contagiosa y el cáncer. Son numerosos los informes sobre las propiedades biológicas del género Phyllanthus. Objetivo: Evaluar la actividad citotóxica y antiproliferativa de un extracto acuoso de Phyllanthus comosus en tres líneas celulares, dos de origen tumoral (SiHa y HeLa) y una no tumoral (Vero). Métodos: La actividad citotóxica se evaluó mediante el método del MTT y la capacidad antiproliferativa mediante el ensayo de detección de inhibición de colonias o clonogénico. Se tuvieron en cuenta valores como la concentración citotóxica media (CC50), índice selectivo y porcentaje de disminución de la proliferación celular. Resultados: En el ensayo de citotoxicidad se obtuvieron CC50 similares para ambas líneas tumorales; mientras que el valor para la línea Vero resultó tres veces menos tóxico, con valores de índice de selectividad mayor que tres. El ensayo clonogénico demostró inhibición de la proliferación en las líneas tumorales, mientras que en células Vero no se observó inhibición de la capacidad de formación de colonias. Conclusiones: El extracto de P. comosus es más citotóxico para las líneas tumorales SiHa y HeLa que para las células Vero, no tumorales. Además, la inhibición de la formación de clonos celulares en ambas líneas tumorales evidencia su acción antiproliferativa y selectiva, lo que argumenta su potencialidad antitumoral in vitro

ABSTRACT Introduction: Ever since the onset of ancient medical practice, plants have been used to treat a variety of conditions, including infectious communicable diseases and cancer. A large number of reports are available about the biological properties of the genus Phyllantus. Objective: Evaluate the cytotoxic and antiproliferative activity of an aqueous extract of Phyllanthus comosus on three cell lines: two of tumoral origin (SiHa and HeLa) and one of non-tumoral origin (Vero). Methods: Cytotoxic activity was evaluated by the MTT method, and antiproliferative capacity by colony inhibition detection or clonogenic assay. Mean cytotoxic concentration (CC50), selective index and cell proliferation reduction percentage were some of the values taken into account. Results: The cytotoxicity assay obtained similar CC50 values for both tumor cell lines, whereas the value for the Vero line was three times less toxic, with a selectivity index above three. The clonogenic assay revealed proliferation inhibition in the tumor cell lines, whereas no inhibition of colony forming capacity was observed in Vero cells. Conclusions: The P. comosus extract is more cytotoxic for tumoral cell lines SiHa and HeLa than for non-tumor Vero cells. Additionally, inhibition of the formation of cell clones in both tumor cell lines is evidence of its antiproliferative and selective action, substantiating its in vitro antitumor potential.

Toxicity of Jatropha curcas L. latex in Allium cepa test / Toxicidade do látex de Jatropha curcas L. no modelo de Allium cepa

The latex obtained from Jatropha curcas (physic nut) is used in traditional medicine to treat a variety of disturbs, including burns, hemorrhoids, ringworm and ulcers. Phytochemical analyses have shown that J. curcas latex contains natural compounds with therapeutic potential. In this study, the toxicity, cytotoxicity and genotoxicity effects of J. curcas latex on the root cells of Allium cepa were examined. Onion seeds and bulbs were exposed to seven different concentrations of latex and then the roots were submitted to macro and microscopic analyses. Water and sodium azide were used as negative and positive controls, respectively. The analysis of root growth showed that J. curcas crude latex or 50% diluted is highly toxic. Cytogenetic results showed that the mitotic index of the onion roots submitted to latex treatment decreased significantly compared to the negative control, which suggests that the latex is cytotoxic. High incidence of chromosome aberrations in the cells treated with J. curcas latex was observed too, indicating that the latex also presents genotoxic effect. The analyses presented in this report suggest the toxic, cytotoxic and genotoxic effects of J. curcas latex. Then, the indiscriminate use of J. curcas latex in folk medicine could bring risk to human health.

O látex obtido de Jatropha curcas (pinhão manso) é usado na medicina tradicional para tratamento de diversos distúrbios, como queimaduras, hemorroida, micose e úlcera. Análises fitoquímicas apontaram que o látex de J. curcas contém compostos naturais com potencial terapêutico. Este estudo avaliou a toxicidade, citotoxicidade e genotoxicidade do látex de J. curcas em células da raiz de Allium cepa. Sementes e bulbos de cebola foram expostos á sete diferentes concentrações de látex e, então, as raízes foram submetidas a análises macro e microscópica. Água e azida sódica foram utilizadas como controle negativo e positivo, respectivamente. A análise do comprimento das raízes mostrou que o látex de J. curcas puro e diluído a 50% é altamente tóxico. O índice mitótico das raízes de cebola submetidas ao tratamento com o látex diminuiu significativamente comparado com o controle negativo, o que sugere que o látex é citotóxico. Uma alta incidência de aberrações cromossômicas em células tratadas com o látex de J. curcas também foi observada, indicando que o látex apresenta efeito genotóxico. Essa análise sugere que o látex de J. curcas possui efeitos tóxico, citotóxico e genotóxico, sendo que o uso indiscriminado do látex de J. curcas na medicina popular pode trazer risco à saúde humana.

Homeostatic unbalance via HSPA5 gene expression in HepG2C3A cells exposed to alpha-tomatine / Desequilíbrio homeostático através da expressão do gene HSPA5 em células HepG2C3A exposto a alpha-tomatine

The α-tomatine is a glycoalkaloid found in immature tomatoes (Lycopersicon esculetum). Currently, α-tomatine has shown anticancer effects due to its anti-proliferative property. Stressors are one of the factors contributing to the antiproliferative activity of α-tomatine that can modify cellular homeostasis.Among the cell stressors are the endoplasmic reticulum stress response elements, which can be alteredleading to cell death. In the course of this study, we verified the expression of genes involved in the stress response of the endoplasmic reticulum in HepG2/C3A cells. The α-tomatine reduced the viability of HepG2/C3A cells in a dose-dependent manner. Thus, we selected 2µg/mL of α-tomatine (62% incell viability) to evaluate the gene expressions. After 24 hours of exposure to α-tomatine, the level of HSPA5 transcripts was reduced. The HSPA5 chaperone reduced marker is an indicative of homeostasisunbalance with the consequent lack of cellular resistance and, probably, cell death. Our results indicate the involvement of oxidative stress mechanisms in the death of HepG2/C3A cells exposed to α-tomatine.

A α-tomatina é um glicoalcaloide encontrado no tomate imaturo (Lycopersicon esculetum). Atualmente,a α-tomatina tem mostrado efeito anticancerígeno devido sua propriedade antiproliferativa. O estresse celular é um dos fatores que contribui para a atividade antiproliferative da α-tomatina que pode modificara homeostase celular. Entre os estressores celulares esta os elementos de resposta ao estresse do retículo endoplasmático, que podem ser alterados, levando à morte celular. No decorrer deste estudo, verificamos que a expressão de genes envolvidos na resposta ao estresse do retículo endoplasmático em célulasHepG2/C3A. A α-tomatina reduziu a viabilidade das células HepG2/C3A de forma dose-dependente.Assim, selecionamos a concentração de 2μg/mL de α-tomatina (viabilidade celular de 62%) para avaliara expressão gênica. Após 24 horas de exposição a α-tomatina, o nível de transcrição de HSPA5 foireduzido. A redução de HSPA5 é um indicativo de desequilíbrio da homeostase, com a consequente falta de resistência celular e, provavelmente, a morte celular. Nossos resultados indicam o envolvimento de mecanismos de estresse oxidativo na morte de células HepG2/C3A exposto a α-tomatina e mostram a eficácia do sistema como um futuro candidato para os estudos de terapia de câncer.

Metotrexato en condromatosis sinovial: una serendipia / Methotrexate in sinovial chondromatosis: a case of serendipity

La condromatosis sinovial es una metaplasia idiopática benigna de la membrana sinovial que afecta a 1/100.000 habitantes, en una relación hombre/mujer de 3 a 1 entre los 30 y 50 años. Predomina en grandes articulaciones como rodilla (70%), cadera (20%) y hombro (19%), y en menor proporción en codo y tobillo. Puede ser primaria o secundaria. La etiología es desconocida. La resolución es quirúrgica ya sea por artroscopia o por cirugía a cielo abierto, no existiendo otra alternativa terapéutica. Se presenta el caso clínico de un paciente con condromatosis sinovial en hombro derecho, que se comporta como una artropatía erosiva, indicándose metotrexato y resolviendo casi totalmente los nódulos condromatosos.

The synovial chondromatosis is a benign idiopathic metaplasia ofthe synovial membrane which affects one in 100,000 inhabitants. Itis 3 times more common in males, aged between 30 and 50 yearsold. It is commonly found in large joints such as knee (70%), hip(20%) and shoulder (19%) and less frequently in elbow and heel. Itcan be primary or secondary. The etiology is still unknown.The resolution is surgical by means of arthroscopy or open surgery,existing no other therapeutic alternatives.We present a male patient with primary synovial chondromatosis inthe right shoulder, leading to an erosive arthropathy. Treatment withmethotrexate resolved almost entirely the cartilaginous nodules.

Evaluación de la acción antiproliferativa del extracto acuoso de Physalis peruviana L. (Aguaymanto) en cultivos celulares de linfocitos humanos y leucemia mieloide crónica (K562) / Evaluation of the antiproliferative action of the aqueous extract of Physalis peruviana L. (Aguaymanto) in cell cultures of human lymphocytes and chronic myeloid leukemia (K562)

Physalis peruviana L. "Aguaymanto" es una especie peruana usada tradicionalmente en el tratamiento del cáncer y otras enfermedades por sus presuntas propiedades quimioprofilácticas, quimioterapéuticas, antibióticas, antipiréticas, antivirales y antimicóticas. Es así que se postula como una valiosa fuente natural para la obtención de nuevos agentes farmacológicos. En el presente estudio se evaluó el efecto antiproliferativo del extracto acuoso de Physalis peruviana L. en linfocitos humanos y en la línea celular K562 (leucemia mieloide crónica), para lo cual se colectaron frutos frescos de la provincia de Carhuaz (Ancash) que fueron procesados para obtener un extracto sólido puro para adicionarlo a un cultivo celular in vitro linfocitario aislado de 10 individuos sanos y de la línea celular K562. Los cultivos fueron mantenidos en condiciones adecuadas y se les añadió cuatro dosis del extracto acuoso (50, 100, 200 y 400 µg/ml), de cisplatino (0.3, 0.6, 1.25 y 2.5 µg/ml) y como control negativo el medio de cultivo. Se determinó la viabilidad celular mediante el conteo celular con el colorante azul de tripano en la cámara de Neubauer y con el ensayo colorimétrico MTT en el lector de ELISA. Los resultados mostraron que las concentraciones de aguaymanto con mayor efecto antiproliferativo fueron 200 y 400 µg/ml, que alcanzaron porcentajes de inhibición mayores de 50 % tanto para los linfocitos y la línea celular K562. Paralelamente, el cisplatino mostró claramente mayor efecto antiproliferativo en los linfocitos en comparación con el aguaymanto, mientras que el aguaymanto mostró mayor efecto antiproliferativo en la línea K562, lo que podría sugerir que el fruto es menos dañino en linfocitos que el cisplatino. El análisis estadístico se realizó con el software STATA a un nivel del 5% (Kruskall-Wallis, p<0.05), encontrándose diferencias significativas en la viabilidad celular de los linfocitos y de K562 con extracto acuoso de aguaymanto y cisplatino. Con el aguaymanto, la viabilidad celular fue mayor en linfocitos que en K562; y con el cisplatino, la viabilidad celular fue mayor en K562 que en linfocitos. La concentración inhibitoria media del aguaymanto fue de ßγ5.7γ µg/ml para linfocitos y para la línea celular K56ß fue de 146.ß5 µg/ml, lo que dio un índice de selectividad mayor a 1 (Microsoft Excel 2010). Esto indica que el aguaymanto tiene mayor efecto antiproliferativo sobre las células cancerígenas de leucemia que sobre las células no malignas (linfocitos). Los resultados son satisfactorios y sugieren continuar estudios sobre las diversas bondades medicinales del aguaymanto como fuente potencial de compuestos bioactivos con aplicación terapéutica.

Genotoxic and chromatographic analyses of aqueous extracts of Peltodon longipes Kunth ex Benth. (hortelã-do-campo)

Peltodon longipes is used as a stimulant and emmenagogue. The objective of this study was to perform genotoxic and chromatographic analyses of the extracts of two samples of P. longipes, collected from the cities of Santa Maria and Tupanciretã, RS, Brazil. The Allium cepa assay was used to analyze genotoxicity while high-performance liquid chromatography was employed to determine phenolic compounds. The genotoxicity experiment consisted of nine groups each comprising four A. cepa bulbs. Bulb roots were developed in distilled water and then transferred for the treatments, for 24 hours, and the negative control remained in water. The treatments were: aqueous extracts at concentrations of 5 and 15 g L-1 for each sample, plus four groups treated with 1% glyphosate, one of which was used as a positive control and the other three for testing DNA damage recovery using water and the extracts of P. longipes from Santa Maria. All extracts of P. longipes exhibited anti-proliferative potential, although the effect was significantly greater for the extracts from the Tupanciretã sample. This sample also contained the highest amount of rosmarinic acid and kaempferol, which may confer the effects found in these extracts. Only extracts from the Santa Maria sample exhibited genotoxic potential.

Peltodon longipes é utilizada como estimulante e emenagoga. Objetivou-se realizar análises genotóxica e cromatográfica dos extratos de duas amostras de P. longipes, coletadas nos municípios de Santa Maria e Tupanciretã, RS, Brasil. O teste de Allium cepa foi utilizado para análise da genotoxicidade e a cromatografia líquida de alta eficiência, para determinação dos compostos fenólicos. O experimento de genotoxicidade constou de nove grupos de quatro bulbos de A. cepa. Os bulbos foram enraizados em água destilada e após transferidos para os tratamentos, por 24 horas, permanecendo o controle negativo em água. Os tratamentos foram: extratos aquosos nas concentrações de 5 e 15 g L-1 de cada amostra, além de quatro grupos tratados com glifosato 1%, um deles usado como controle positivo e outros três para testar a recuperação de danos ao DNA, utilizando água e os extratos de P. longipes da amostra de Santa Maria. Todos os extratos de P. longipes demonstraram potencial antiproliferativo, porém o efeito foi significativamente maior para os extratos da amostra de Tupanciretã. Essa amostra também apresentou maior quantidade de ácido rosmarínico e canferol, o que pode estar relacionado com os efeitos encontrados nesses extratos. Somente extratos da amostra de Santa Maria demonstraram potencial genotóxico.

Cytotoxicity of aqueous extracts of Rosmarinus officinalis L. (Labiatae) in plant test system / Citotoxicidade de extratos aquosos de Rosmarinus officinalis L. (Labiatae) em sistema-teste vegetal

This study investigated the cytotoxic activity of Rosmarinus officinalis L. (rosemary) aqueous extract on the cell cycle of Allium cepa. To this end, crude aqueous leaf extracts at four concentrations, 0.02, 0.04, 0.06 and 0.08 mg/mL, were tested on A. cepa meristematic root cells, at exposure times of 24 and 48h. Slides were prepared by the crushing technique, and cells analyzed throughout the cell cycle, totaling 5,000 for each control group and concentration. The four concentrations tested, including the lowest and considered ideal for use, at all exposure times, showed a significant antiproliferative effect on the cell cycle of this test system and presented a high number of cells in prophase. Our results evidenced the cytotoxicity of rosemary extracts, under the studied conditions.

Neste estudo investigou-se a ação citotóxica do extrato aquoso de Rosmarinus officinalis L. (alecrim) sobre o ciclo celular de Allium cepa. Para isso obteve-se extratos aquosos brutos de folhas secas desta planta em quatro concentrações, 0,02; 0,04; 0,06 e 0,08mg/mL, que foram testadas em células meristemáticas de raízes de A. cepa, nos tempos de exposição 24 e 48h. As lâminas foram feitas pela técnica de esmagamento, e analisaram-se células em todo ciclo celular, totalizando 5.000 para cada grupo controle e concentração. A partir dos resultados verificou-se que as quatro concentrações testadas, inclusive a menor e considerada ideal para consumo, em todos os tempos de exposição tiveram ação antiproliferativa significativa sobre o ciclo celular deste sistema teste, e apresentaram um grande número de células em prófase. Dessa forma, o alecrim, nas condições analisadas, mostrou-se citotóxico.

Free radical scavenging capacity and cytotoxic and antiproliferative effects of Vaccinium meridionale Sw. agains colon cancer cell lines / Capacidad atrapadora de radicales libres, efectos citotóxicos y antiproliferativos de Vaccinium meridionale Sw. en líneas celulares de cáncer de colon

Introduction: Vaccinium meridionale Swartz, of the family Ericaceae, is commonly known as mortiño or agraz. The plant is considered a functional food, with a content of anthocyanins and antioxidants similar to or greater than that reported for other Vaccinium species. However, little is known about its nutraceutical and medicinal properties. Objectives: determine the antioxidant activity and cytotoxic and antiproliferative effect of mortiño fruit aqueous extract against colon adenocarcinoma cells (SW480) and their derived metastatic cells (SW620). Methods: total phenols and anthocyanins were determined by the Folin-Ciocalteu method. Caffeoyl derivatives were determined by HPLC-DAD. Antioxidant activity was analyzed as the ability to scavenge reactive oxygen species (ROS), reactive nitrogen species (RNI), peroxyl radicals and hydroxyl radicals. Cytotoxic and antiproliferative activities were studied by MTT and sulforhodamine B. Results: the following substances were found in 100 g of lyophilized extract: total phenols (2 546 mg GAE), anthocyanins (150.7 mg C3G), chlorogenic acid (126 mg), ferulic acid (108 mg) and coumaric acid (63 mg). Hydroxyl radical scavenging capacity was 36 147.5 ?mol DMSO, whereas ROS and RNS scavenging capacity was 29 255.9 y 41 775.2 ?molTrolox, respectively. ORAC value was 41 775.2 ?molTrolox. A dose-dependent cytotoxic and antiproliferative effect was observed. IC50 value was 59.12 µg/ml for SW480 and 56.10 µg/mL for SW620. Conclusions: mortiño fruit aqueous extract exhibited antioxidant, cytotoxic and antiproliferative activities comparable to those of other berries of the genus Vaccinium, which could be partly explained by the presence of a high content of anthocyanins and phenolic acids.

Introducción: Vaccinium meridionale Swartz, pertenece a la familia Ericaceae, conocida comúnmente como mortiño agraz. Considerado un alimento funcional por su contenido de antocianinas y antioxidantes similares o mayor al reportado para otras especies de Vaccinium. Sin embargo, poco se conoce sobre sus propiedades nutracéuticas y en la salud. Objetivos: determinar en extracto acuoso del fruto mortiño, la actividad antioxidante y su efecto citotóxico y antiproliferativo en células de adenocarcinoma de colon (SW480) y sus derivadas metastásicas (SW620). Métodos: contenido de fenoles y antocianinas totales se determinó por el método Folin-Ciocalteu, los derivados caffeoil por HPLC-DAD. La actividad antioxidante se analizó como habilidad para atrapar especies reactivas del oxígeno (ROS) y del nitrógeno (RNI), radicales peróxilo e hidróxilo. La actividad citotóxica y antiproliferativa se estudiaron por MTT y sulforodamina B. Resultados : en 100 g de liofilizado se encontrófenoles totales (2546 mg GAE), antocianinas (150,7 mg C3G), ácido clorogénico (126 mg), ácido ferúlico (108 mg) y cumárico (63 mg), capacidad atrapadora de radical hidroxilo fue 36147,5 ?mol DMSO, capacidad atrapadorade ROS y RNS fue 29255,9 y 41775,2 ?mol Trolox, respectivamente, valor ORAC 41775,2 ?mol Trolox. Se observó un efecto citotóxico y antiproliferativo dosis-dependiente. El valor IC50 para SW480: 59,12 µg/mL y SW620: 56,10 µg/mL. Conclusiones: el extracto acuoso del fruto del mortiño exhibió actividades antioxidantes, citotóxicas y antiproliferativas comparables a las de otras bayas del género Vaccinium, lo que podría ser explicado parcialmente por la presencia del alto contenido de antocianinas y ácidos fenólicos.

El extracto acuoso de ruta graveolens del norte de méxico causa apoptosis y muestra efecto antiproliferativo sobre el hígado de rata wistar: evidencia morfológica / Aqueous extract of ruta graveolens from the north of mexico causes apoptosis and shows antiproliferative effect on the liver of wistar rat: morphological evidence

Ruta graveolens es una planta nativa del Mediterráneo Oriental y del área Sur Occidental de Asia, de esta planta se han aislado más de 120 compuestos químicos. En un estudio previo en nuestro laboratorio se observó que un extracto acuoso de R. graveolens causó necrosis y alteraciones morfológicas sugestivas de apoptosis sobre el hígado de rata Wistar. El objetivo del presente estudio, fue evaluar la inducción de apoptosis y el posible efecto antiproliferativo in vivo de un extracto acuso de R. graveolens del norte de México, mediante métodos inmunohistoquímicos. Se utilizaron 25 ratas Wistar y se dividieron en 5 grupos (n=5). El grupo 1 correspondió al grupo control negativo, el grupo 2 o control positivo se trató con 100 mg de dexametasona/kg/día. Los grupos 3 y 4 se trataron con 30 y 100 mg de extracto de R. graveolens/kg/día respectivamente. Al grupo 5 se le administraron 100 mg de dexametasona/kg/día combinados con 100 mg de extracto de R. graveolens/kg/día. Las administraciones se realizaron vía intraperitoneal por tres días. Los animales se sacrificaron por dislocación cervical, y se tomaron muestras de hígado que se fijaron en formalina, posteriormente se incluyeron en bloques de parafina. Se obtuvieron cortes histológicos que se tiñeron con el método tricrómico de Masson. También se realizaron pruebas inmunohistoquímicas de TUNEL, anti-bcl-2 y anti-PCNA; además de un estudio morfométrico. Los resultados demuestran por primera vez el potencial apoptósico y antiproliferativo del extracto acuoso de R. graveolens del norte de México, sobre el hígado de rata Wistar. Se sugiere la posibilidad de emplear dosis menores a las administradas en este estudio del extracto acuoso de R. graveolens, para investigar su potencial uso como agente antineoplásico en estudios in vitro con líneas celulares tumorales e/o implantadas en modelos murinos de cáncer.

Ruta graveolens, is a native plant of the Eastern Mediterranean and the South Western area of Asia. From this plant, more than 120 chemical compounds have been isolated. In a previous study in our laboratory, we observed that an aqueous extract of R. graveolens, caused necrosis and morphological alterations suggestive of apoptosis on the liver of Wistar rats. The objective of this study, was to evaluate the induction of apoptosis and a possible antiproliferative effect in vivo of an aqueous extract of R. graveolens from the north of Mexico, by immunohistochemical methods. 25 Wistar rats were used and divided into 5 groups (n= 5). Group 1 corresponded to negative control group, group 2 or positive control was treated with 100 mg of dexamethasone/kg/day. Groups 3 and 4 were treated with 30 and 100 mg of extract of R. graveolens/kg/day respectively. Group 5 received the administration of 100 mg of dexamethasone/kg/day combined with 100 mg of extract of R. graveolens/kg/day. The administrations were by intraperitoneal via for three days. The animals were sacrificed by cervical dislocation, liver samples were taken, fixed in formalin and then samples were embedded in paraffin blocks. Histological sections were obtained and stained with Masson trichrome method. Immunohistochemical assays of TUNEL, anti-bcl-2, and anti-PCNA were performed. Also a morphometric study was carried out. Results show for the first time the potential apoptotic and antiproliferative effect of an aqueous extract of R. graveolens from the north of Mexico on the liver of Wistar rats. This suggests the use of lower doses of the extract of R. graveolens, to investigate its potential use as an antineoplastic agent, in studies in vitro with tumor cell lines and/or implanted in murine models of cancer.

Antioxidant and antiproliferative activity of ethanolic and aqueous extracts from leaves and fruits juice Passiflora edulis / Actividad antioxidante y antiproliferativa de extractos etanólico y acuoso de las hojas y el jugo del fruto de Passiflora edulis

Background: Extracts from a variety of fruit trees have been used for therapeutic applications for preventing oxidative stress associated to chronic diseases. Objective: To investigate the antioxidant and antiproliferative activity of ethanolic and aqueous extracts from leaves and fruits of Passiflora edulis. Materials and methods: A preliminary phytochemical screening was performed; antioxidant activity was evaluated through DPPH assay, the scavenging activity for hydroxyl radical, antihemolytic activity and total phenolic content; cytotoxic and antiproliferative activities were evaluated by MTT and sulforhodamine B assays respectively in colon adenocarcinoma SW480 cells and their metastatic-derived SW620 cells. Results: Phytochemical analyses revealed presence of tannins, flavonoids and cardiotonic glycosides. Ethanolic extract from leaves showed the best antioxidant activity (EC50 = 0.096 mg/ml) in the DPPH assay and the juice (EC50 = 0.022 mg/ml) for the Hydroxyl free radical-scavenging activity. All extracts inhibited more than 98% the hemolysis induced by H2O2. The aqueous extract from leaves showed the highest cytotoxic activity against SW480 and SW620 cells. Conclusions: Findings from this study suggest that P. edulis is a potential source of phytochemical compounds with antioxidant and antiproliferative properties.

Antecedentes: extractos de varios árboles frutales se han utilizado en diferentes aplicaciones terapéuticas para prevenir el estrés oxidativo asociado a enfermedades crónicas. Objetivo: investigar la actividad antioxidante y antiproliferativa de extractos etanólico y acuosos de las hojas y del fruto de Passiflora edulis. Materiales y métodos: se realizó marcha fitoquímica preliminar, la actividad antioxidante se evaluó por DPPH, actividad de remoción de radicales hidroxilo, actividad antihemolítica y contenido fenólico total. En células de adenocarcinoma de colon SW480 y sus derivadas metastásicas SW620 se evaluó la actividad citotóxica y antiproliferativa por el método de MTT y sulforodamina B respectivamente. Resultados: el análisis fitoquímico reveló la presencia de taninos, flavonoides y glicósidos cardiotónicos. El extracto etanólico de las hojas mostró la mayor actividad antioxidante (EC50 = 0,096 mg/ml) por DPPH y el jugo (EC50 = 0,022 mg/ml) para remover el radical hidroxilo. Todos los extractos inhibieron más del 98% la hemólisis inducida por H2O2. El extracto acuoso de las hojas mostró la mayor actividad citotóxica y antiproliferativa contra células SW480 y SW620. Conclusiones: los hallazgos de este estudio sugieren que P. edulis es una fuente potencial de compuestos fitoquímicos con propiedades antioxidante y antiproliferativa.

Study of the antiproliferative potential of seed extracts from Northeastern Brazilian plants

This study assessed the antiproliferative and cytotoxic potential against tumor lines of ethanolic seed extracts of 21 plant species belonging to different families from Northeastern Brazil. In addition, some underlying mechanisms involved in this cytotoxicity were also investigated. Among the 21 extracts tested, the MTT assay after 72 h of incubation demonstrated that only the ethanolic extract obtained from Myracrodruon urundeuva seeds (EEMUS), which has steroids, alkaloids and phenols, showed in vitro cytotoxic activity against human cancer cells, being 2-fold more active on leukemia HL-60 line [IC50 value of 12.5 (9.5-16.7) μg/mL] than on glioblastoma SF-295 [IC50 of 25.1 (17.3-36.3) μg/mL] and Sarcoma 180 cells [IC50 of 38.1 (33.5-43.4) μg/mL]. After 72h exposure, flow cytometric and morphological analyses of HL-60-treated cells showed that EEMUS caused decrease in cell number, volume and viability as well as internucleosomal DNA fragmentation in a dose-dependent way, suggesting that the EEMUS triggers apoptotic pathways of cell death.

Este estudo avaliou o potencial antiproliferativo e citotóxico contra linhagens de células tumorais de extratos etanólicos de sementes de vinte e uma espécies vegetais pertencentes a diferentes famílias do Nordeste brasileiro. Além disso, alguns mecanismos subjacentes envolvidos nesta citotoxidade também foram investigados. Dentre os 21 extratos testados pelo ensaio do MTT após 72 h de incubação, apenas o extrato etanólico obtido a partir de sementes de Myracrodruon urundeuva (EEMUS), o qual apresentou traços de esteróides, alcalóides e fenóis em sua composição, demonstrou atividade citotóxica in vitro contra células tumorais humanas, sendo 2 vezes mais ativo sobre a linhagem leucêmica HL-60 [IC50 valor de 12,5 (9,5-16,7) μg/mL] do que sobre células de glioblastoma SF-295 [IC50 de 25,1 (17,3-36,3) μg/mL] e de sarcoma 180 [IC50 de 38,1 (33,5-43,4) μg/mL]. Após 72 h de exposição, as análises morfológicas e por citometria de fluxo de células HL-60 tratadas com EEMUS mostraram diminuição no número de células, seu volume e viabilidade, assim como fragmentação internucleosomal do DNA de forma dose-dependente, sugerindo que a ação antiproliferativa de EEMUS pode ser ativada por vias apoptóticas.

Alterations in the mitotic index of Allium cepa induced by infusions of Pluchea sagittalis submitted to three different cultivation systems

We evaluated the antiproliferative effect of infusions from Pluchea sagittalis using the Allium cepa test. Infusions in three concentrations (2.5, 5, and 25 g dm-3) of leaves cultivated in three environments (in vitro, acclimatized growth chamber, and field) were used. Six onion bulbs were used for each of the eight treatments, and the mitotic index was obtained from 6000 cells per treatment. In conclusion, leaf infusions of P. sagittalis cultivated in the field have a high antiproliferative activity, as well as the cultivation system influences the antiproliferative potential.

Avaliou-se o efeito antiproliferativo de infusões de Pluchea sagittalis usando o teste de Allium cepa. Foram usadas infusões em três concentrações (2,5, 5 e 25g dm-3) de folhas cultivadas em três ambientes (in vitro, sala de crescimento climatizada e em campo). Foram usados seis grupos de bulbos para cada um dos 8 tratamentos e o os índices mitóticos foram obtidos a partir de 6000 células por tratamento. Concluiu-se que a infusão de folhas de P. sagittalis cultivadas em campo possui grande atividade antiproliferativa, bem como o sistema de cultivo de plantas influencia o potencial antiproliferativo.