Serological, parasitological and molecular tests for canine visceral leishmaniosis diagnosis in a longitudinal study / Testes sorológicos, parasitológicos e moleculares para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina em estudo longitudinal

Abstract One of the measures to control visceral leishmaniosis (VL) in Brazil is the identification and culling of the canine reservoir. There is much controversy concerning this strategy, including the proper identification of positive dogs and the fact that the host-parasite relationship changes over time make it more challenging. A dynamic cohort of 62 dogs was followed every three months using serological and parasitological examinations and PCR. Positivity by PCR was higher than by serology and by parasitological examinations and showed a tendency to decrease over time, while serology tended to increase after six months. Concomitant positivity in all tests was observed in 10.4% of the samples, and negativity in 29.1%. Overall sensitivity ranged from 43.6 to 64.1%, and was not uniform over time. The proportion of dogs with or without clinical signs was not different by cytology or PCR but PCR was able to identify a larger number of asymptomatic dogs compared to ELISA and immunochromatography. PCR can be useful for surveillance of areas where cases of canine VL have not yet been detected and in which control strategies can be implemented to limit the spread of the disease. Despite the advance in diagnostic tools CVL diagnosis remains a challenge.

Resumo Uma das medidas de controle da leishmaniose visceral (LV) no Brasil se baseia na identificação e eliminação do reservatório canino. Existe considerável controvérsia relativa a esta estratégia incluindo a correta identificação dos cães positivos e a variação temporal da relação hospedeiro-parasita, o que torna esta medida ainda mais desafiadora. Uma coorte dinâmica de 62 cães foi acompanhada trimestralmente utilizando-se métodos sorológicos, parasitológicos e a PCR. A taxa de positividade por PCR foi maior em comparação à dos métodos sorológicos e parasitológicos, e mostrou tendência à diminuição com o passar do tempo, enquanto que a positividade sorológica apresentou tendência a aumento, após seis meses. Observou-se positividade concomitante em todos os testes em 10,4% das amostras e, negatividade concomitante, em 29,1%. A sensibilidade geral variou de 43,6% a 64,1%, não sendo uniforme ao longo do estudo. A proporção de cães com e sem sinais clínicos que foram positivos ao exame parasitológico ou à PCR não foi estatisticamente diferente. Contudo, foi possível identificar como positivos um maior número de animais assintomáticos por meio da técnica de PCR, em comparação aos testes ELISA e imunocromatográfico. A PCR pode ser bastante útil para a vigilância epidemiológica de áreas onde casos de LV canina ainda não tenham sido descritos e onde estratégias de controle podem ser implantadas para limitar a disseminação da doença. Não obstante o avanço nas ferramentas diagnósticas, diagnosticar a LVC continua um desafio.

Influência do parasitismo intestinal sobre os parâmetros hematológicos e de líquido peritoneal em equinos de tração / Influence of intestinal parasitism on peritoneal fluid and hematological parameters in horses used for traction

O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do parasitismo intestinal crônico sobre parâmetros hematológicos e de líquido peritoneal por meio da comparação dessas características em equinos naturalmente parasitados e após administração de anti-helmíntico. Utilizaram-se 21 cavalos de tração urbana, entre dois e 19 anos, sem raça definida e com resultado de exame parasitológico superior a 300 ovos por grama de fezes. Foi realizada avaliação física e coleta de fezes, de líquido peritoneal e de sangue em dois momentos do experimento (D0 e D15), sendo efetuado tratamento antiparasitário no D0. No fluido peritoneal foram avaliadas características físicas, bioquímicas, bem como contagem de células nucleadas (CTCN) e diferenciação celular. No sangue foram determinados valores eritrocitários, leucocitários, proteínas plasmáticas totais, glicose e fibrinogênio plasmáticos, além de fosfatase alcalina (FA) sérica. A análise dos parâmetros avaliados não demonstrou diferença significativa entre animais parasitados e após administração de anti-helmíntico, exceto para valores de CTCN, contagem de neutrófilos segmentados e grau de turbidez do líquido peritoneal. As médias se mantiveram dentro dos intervalos de referência, com exceção da CTCN do líquido peritoneal no D0. No líquido peritoneal, houve predomínio de neutrófilos segmentados, seguidos por macrófagos, linfócitos e eosinófilos em ambos os momentos de avaliação. Observaram-se tendência do quadro eritrocitário em manter-se próximo aos limites inferiores e leve leucocitose no D0. A infecção parasitária nos animais estudados foi predominantemente moderada, o que oferece poucos riscos clínicos. Nessas condições, pode-se afirmar que a CTCN, a contagem absoluta de neutrófilos segmentados e o grau de turbidez do líquido peritoneal são influenciados e podem ser considerados ferramentas diagnósticas e prognósticas úteis nas parasitoses intestinais crônicas.(AU)

The aim of this study was to evaluate the influence of chronic intestinal parasitism on hematological parameters and peritoneal fluid. It was done by comparing these features in horses used for traction naturally parasitized and after the administration of anthelmintic. Twenty-one horses, between two and nineteen years of age, of mixed breed and with results of parasitological examination of more than 300 eggs per gram of feces were studied. Physical assessment and samples of feces were conducted, as well as blood and peritoneal fluid in the two phases of the experiment (D0 and D15). Antiparasitic treatment in D0 has also been done. The peritoneal fluid was evaluated for physical and biochemical features, and also total count of nucleated cells (TCNC) and cell differentiation. The blood was determined for erythrocyte, leukocyte, plasma total protein, glucose and plasma fibrinogen, and alkaline phosphatase (ALP) levels. The analysis of these parameters showed no significant difference between parasitized animals and after administration of anthelmintic except for TCNC values, segmented neutrophil count and degree of turbidity in peritoneal fluid. The averages remained within the reference ranges, except the TCNC in the peritoneal fluid in D0. In the peritoneal fluid there was a predominance of segmented neutrophils, followed by macrophages, lymphocytes and eosinophils in both time points. A trend was observed in erythrocyte frame to keep close to the lower limits and mild leukocytosis in D0. Parasitic infection of the animals studied was predominantly moderate, which offered minimal clinical risks. After that, it can be affirmed that the TCNC, absolute segmented neutrophil count and targeted degree of turbidity in peritoneal fluid are influenced and can be considered useful diagnostic and prognostic tools in chronic intestinal parasitism.(AU)