Células cebadas en pulmón y nervio periférico en la intoxicación crónica con karwinskia humboldtiana en rata wistar: estudios histológico e histoquímico / Lung and peripheral nerve mast cells in chronic intoxication with karwinskia humboldtiana in wistar rat: histological and histochemical studies

Karwinskia humboldtiana (Kh) es un arbusto venenoso responsable de numerosos casos de intoxicación accidental en humanos. En estudios previos en nuestro laboratorio reportamos un incremento de células cebadas en nervio periférico (NP) durante la intoxicación con Kh, este hallazgo no ha sido reportado previamente en otros órganos durante esta intoxicación por lo que en el presente estudio buscamos la presencia de estas células en otros órganos, además de distinguir subpoblaciones de células cebadas mediante reacciones histoquímicas para la identificación de los gránulos de secreción. El objetivo de este estudio fue evaluar la presencia de células cebadas en órganos distintos al NP y diferenciar histoquímicamente la composición de sus gránulos. Se utilizaron 32 ratas Wistar, se dividieron en cuatro grupos (n= 8) en donde 5 ratas de cada grupo fueron intoxicadas y 3 fueron control no intoxicadas. A las ratas intoxicadas se les administraron por vía oral 3,5 g/kg del fruto seco y molido de Kh fraccionados en 5 dosis de 1,5; 0,5, 0,5; 0,5 y 0,5 g/kg los días 0, 3, 7, 10 y 14 respectivamente. Las ratas control solo recibieron agua. Cada grupo fue sacrificado a diferentes tiempos según la evolución de la parálisis. Se obtuvieron muestras de Hígado, Riñón, Pulmón y SNP, se procesaron hasta obtener bloques de parafina, se obtuvieron cortes y se tiñeron con azul de toluidina, PAS, Azul alciano/PAS y Azul alciano/Safranina. Se identificó la presencia de células cebadas en NP y pulmón con la tinción de azul de toluidina y se realizo un estudio morfométrico observando un incremento progresivo del número de células cebadas por grupo así como variaciones histoquímicas en sus gránulos en cada etapa y órgano analizado, lo que sugiere la participación de las células cebadas y sus secreciones en cada una de las etapas de la intoxicación crónica con el fruto maduro de Kh.

Karwinskia humboldtiana (Kh) is a poisonous shrub causing a number of accidental intoxications in humans. In previous studies in our laboratory, we reported an increased number of mast cells present in peripheral nerve of Kh intoxicated rats. This finding has not been reported in other organs of intoxicated animals. For this reason, in the present study we searched for mast cells in several organs, identifying mast cell subpopulations on the basis of different histochemical reactivity of their secretory granules. Thus the objective of the present study was to evaluate the presence of mast cells in organs other than peripheral nerve and, to distinguish mast cells by their granule content, applying histochemical reactions. 32 Wistar rats were divided into 4 groups (n=8). For each group, 5 rats were intoxicated with Kh and 3 received water only as a control.Intoxicated rats received 3.5 g/ Kg body weight of dry powder of Kh fruits, fractionated in 5 doses as follows 1.5, 0.5, 0.5, 0.5, 05 on days 0, 3,7,10,14 respectively. Control rats received water only. Each group was killed at different times during paralysis evolution. Samples of liver, kidney, lung and brain, were obtained and processed by routine technique until paraffin embedding. Sections were obtained and stained with toluidine blue, PAS, alcian blue/PAS and alcian blue/safranin. Mast cells infiltrates were observed in peripheral nerve and lung. Mast cells were counted. An increasing number of mast cells were recorded as well as variations in the histochemical pattern of their granules for each organ. These findings suggest a role for mast cells and their secretions in the intoxication with mature fruit of Kh.

Células cebadas y sus patrones de expresión del receptor c-kit (CD117) como probables indicadores de metástasis en el adenocarcinoma de mama en humanos / Mast cells and expression patterns of c-kit (CD117) receptor as probable indicators of metastases in human breast adenocarcinoma

El adenocarcinoma de mama es la segunda neoplasia maligna más común en mujeres, solo después del cáncer de pulmón. Este tumor se clasifica histopatológicamente en bien, moderado y poco diferenciado. Además de esta clasificación, los análisis actuales utilizan inmunohistoquímica para identificar receptores hormonales para estrógenos y progesterona (RH) y HER2/neu, esta información permite hacer un pronóstico de respuesta al tratamiento y tiempo de sobrevida. Las células cebadas se han asociado a un mal pronóstico, ya que participan en la angiogénesis y el crecimiento tumoral favoreciendo la metástasis. Esto disminuye la esperanza de vida. También las células cebadas expresan en la membrana plasmática el receptor c-Kit (CD117) que se ha asociado a proliferación celular. En este estudio, se evaluó si existen variaciones en los patrones de expresión de c-Kit en las células cebadas presentes en muestras de adenocarcinoma de mama; y si los distintos patrones del receptor se asocian a la presencia de metástasis linfática. Se utilizaron muestras de adenocarcinoma moderadamente diferenciado, y se analizaron empleando métodos histológicos, histoquímicos e inmunohistoquímicos. Los grupos se clasificaron de acuerdo a su positividad a RH y HER2/neu, y se subclasificaron de acuerdo a la presencia o no de metástasis. Además se realizó un análisis morfométrico de células cebadas y los patrones de expresión de c-Kit. Los grupos con metástasis mostraron mayor cantidad de células cebadas comparados con el grupo control, y su grupo correspondiente sin metástasis. Las células cebadas con patrones de expresión 1 y 3 fueron más abundantes en los grupos con metástasis. En los grupos sin metástasis predominaron las células cebadas con el patrón 2. Los resultados sugieren que el número de células cebadas y los patrones de expresión de c-Kit, podrían ser empleados como indicadores probables, más no definitivos de la presencia de metástasis linfática.

Breast adenocarcinoma is the second most common neoplasm, just after lung cancer in women. According to histopathological features this tumor is classified into well, moderate and poorly differentiated. In addition to this classification, current analysis also use immunohistochemistry to detect estrogen and progesterone receptors (RH), and HER2/neu, this information is useful to make a prognostic in treatment response and survival time. Mast cells have been associated with bad prognosis, because they participate in angiogenesis and tumor growth promoting metastases. This decreases life expectancy. Also mast cells express in the plasmatic membrane the receptor c-Kit (CD117) that is associated to cell proliferation. In this study, we evaluated if there are variations in the expression patterns of c-Kit receptor in mast cells present in breast adenocarcinoma samples; and if expression patterns are associated with the presence of metastases to ganglion. Samples of moderately differentiated adenocarcinoma were evaluated using histological, histochemistry and immunohistochemistry methods. Groups were classified according to their positivity to RH and HER2/neu, and subclassified if presented or not metastases. Also mast cells and expression patterns of c-Kit receptor were analyzed by a morphometric method. Groups with metastases showed higher amount of mast cells, compared with control group and their corresponding group without metastases. Mast cells with expression patterns 1 and 3 were more abundant in all the groups with metastasis. In groups without metastases mast cells with pattern 2 were predominant. Results suggest that the amount of mast cells and the expression patterns of c-Kit could be use as probable indicators, but not definitive of the presence of nodal metastases.

Diferencia en la población de células cebadas de glándulas apocrinas de sacos anales de perros adultos y seniles / Difference in the population of mast cells of anal sac apocrine glands of adult and senile dogs

Se estudió la población de células cebadas (CC) presentes en sacos anales de perros adultos y seniles mediante su conteo en cortes de tejido procesado con la técnica de inclusión en parafina y teñidos con azul de toluidina. El promedio de CC obtenido para el grupo de perros adultos jóvenes fue de 18,16 +/- 7,58 (n=12 perros) y para el grupos de adultos maduros fue de 73,75 +/- 16,29 (n=12 perros). Al comparar el número de células de ambos grupos con la prueba de U Mann-Withney se encontró que son significativamente diferentes (P< 0,0001), siendo mayor en el grupo de perros seniles. Esta mayor población de CC puede estar relacionada con una mayor susceptibilidad de los perros seniles a reacciones inflamatorias del tejido de los sacos anales causadas por cambios en la dieta, obesidad y diarrea crónica.

We studied the population of mast cells (CC) present in anal sacs of adult and senile dogs by its count in tissue processed with the technique of embedding in paraffin and stained with toluidine blue. The average CC obtained for the group of adult dogs (n=12) was 18.16 +/- 7.58 and for group of senile dogs (n=12) was 73.75 +/- 16.29. When comparing the number of cells in both groups with Mann-Whitney U test were found to be significantly different (P0.0001), being higher in the group of senile dogs. The largest population of CC may be related to an increased susceptibility of senile dogs to inflammatory reactions in the tissue of the anal sacs caused by changes in diet, obesity and chronic diarrhea.