Two intrathecal transplants of bone marrow mononuclear cells produce motor improvement in an acute and severe model of spinal cord injury / Recuperação motora após dois transplantes de células mononucleares da medula óssea administrados no espaço subaracnóideo utilizando modelo de lesão traumática grave da medula espinal / Recuperación motora después de dos trasplantes de células mononucleares de la médula ósea, administrados en el espacio subaracnoideo, utilizando modelo de lesión aguda y grave de la médula espinal

OBJECTIVE: We studied transplants of bone marrow mononuclear cells (BMMC) by lumbar puncture (LP) in a severe model of spinal cord injury (SCI) using clip compression. METHODS: BMMCs or saline solution were transplanted by LP 48 hours and 9 days post injury. Motor function was evaluated by BBB scale, histological analysis by Nissl technique and the verification of cell migration by PCR analysis. RESULTS: The BBB had significantly improved in rats treated with BMMCs by LP compared with controls (p<0.001). The histological analysis did not showed difference in the lesional area between the groups. The PCR analysis was able to found BMMCs in the injury site. CONCLUSIONS: two BMMC transplants by LP improved motor function in a severe model of SCI and BMMC was found in the injury site.

OBJETIVO: Estudamos transplantes de células mononucleares da medula óssea (CMMO) por punção lombar (PL) em um modelo de lesão da medula espinal (LME) grave usando compressão por clipe. MÉTODOS: CMMOs ou solução salina foram transplantadas por PL 48 horas e 9 dias após a LME. A função motora foi avaliada pela escala de BBB, a análise histológica pela técnica de Nissl e a migração celular pela análise de reação em cadeia da polimerase (PCR). RESULTADOS: A BBB demonstrou melhora significativa nos animais tratados com CMMOs por PL, em comparação com os controles (p < 0,001). A análise histológica não apresentou diferença entre as áreas de lesão dos grupos. CMMOs foram encontradas no local da lesão na análise de PCR. CONCLUSÃO: Dois transplantes de CMMOs por PL melhoraram a função motora em um modelo de LME grave. CMMOs foram encontradas no local da lesão.

OBJETIVO: Estudiamos trasplantes de células mononucleares de la médula ósea (CMMO) por punción lumbar (PL) en un modelo de lesión de la médula espinal (LME) grave, usando compresión por clip. MÉTODOS: CMMOs o solución salina fueron trasplantadas por PL, 48 horas y 9 días después de la LME. La función motora fue evaluada por la escala de BBB, el análisis histológico por la técnica de Nissl y la migración celular por el análisis de reacción en cadena de la polimerasa (PCR). RESULTADOS: La BBB demostró mejoría significativa en los animales tratados con CMMOs por PL, en comparación con los controles (p < 0,001). El análisis histológico no presentó diferencia entre las áreas de lesión de los grupos. CMMOs fueron encontradas en el lugar de la lesión en el análisis de PCR. CONCLUSIÓN: Dos trasplantes de CMMOs por PL mejoraron la función motora en un modelo de LME grave. CMMOs fueron encontradas en el área de la lesión.

Estudio del polimorfismo genético de las células de la médula ósea y del sistema nervioso central de ratas mediante la técnica de RAPD / Study of genetic polymorphism of the bone marrow and the central nervous system of rats cells by RAPD technique

Los modelos experimentales en rata han sido de gran utilidad en las evaluaciones terapéuticas o de reemplazo de células en enfermedades neurodegenerativas. Se ha comprobado que las células de la médula ósea (CMO) de ratas pueden diferenciarse en células que no forman parte de sus linajes normales. Hay evidencias de estos procesos de trans-diferenciación, pero aún no se conocen los mecanismos moleculares que activan estos procesos. El propósito de nuestro trabajo fue estudiar el polimorfismo genético del ADN de los tipos celulares que conforman las CMO y las células del sistema nervioso central (SNC), estríatales y de la corteza de ratas mediante la técnica de RAPD. Las CMO, las células mononucleares (CMMO), las células estromales (CEMO) y las del SNC fueron obtenidas de ratas, y su ADN genómico fue purificado y amplificado mediante la técnica de RAPD, utilizando 15 cebadores al azar. Se construyó un dendograma de las bandas de amplificación generadas utilizando el método de UPGMA. Las células estudiadas según el análisis del RAPD quedaron en 2 grupos bien definidos, pudiéndose diferenciar las CEMO del resto de las células estudiadas. Los cebadores OPA-6, 7 y 12, mostraron el polimorfismo genético de los linajes de células estudiadas. Mediante la técnica de RAPD se demostró la variabilidad genética entre las CEMO y las CMMO, células estriadas y de corteza que mostraron una homogeneidad genética, proponiéndose marcadores específicos de RAPD para cada grupo de células. Este es el primer estudio del polimorfismo genético de las CMO y del SNC de ratas.

Experimental models have been of grate usefulness in the therapeutic or replacement cells in neurodegenerative diseases. It has been demonstrated that bone marrow cells (BMC), can be difefferentiated in cells that do not form part of their normal lineage. There is evidence of these trans-differentiation processes in these cells, but nevertheless, molecular mechanisms that activate these differentiation process still not known. The purpose of our work was to study the genetic polymorphism of those cellular types; that conform the rat bone marrow cells (BMC) as well as those of the central nervous system (CNS), striatum cells and cortex ones, trough RAPD technique. BM, mononuclear cells (BMMC), estromal cells (BMSC) and the CNS cells were obtained from rats and genomic ADN was purified and amplified through RAPD technique, using 15 random primers. A dendogram was constructed according to UPGMA method of the amplifying RAPD bands. Studied cells as- according to the RAPD analysis- were grouped into 2 well- defined groups, as CEMO coud be differentiated from the rest of studied cells. OPA-6, 7 and 12 primers showed the genetic polymorphism of the studied lineages cells. Also will be proposed specific RAPD genetic markers. Through RAPD technique permitted the genetic variability was demonstrated betwen BMEC and BMMC of striated cells and of cortex, which demonstratd a genetic homogeneity through RAPD technique so specific genetic markers of RAPD were thus propose for each group of cells. These constitute the first study on genetic polymorphism of BMC and CNS.