Collection and culture of human connective tissue cells from gingival explant technique for oral tissue bioengineering / Colección de células de tejido conectivo humano a partir de la técnica de explante gingival para bioingeniería de tejidos orales

SUMMARY: Cell culture is an important tool in medical, odontological and biological research laboratories, supporting cell therapies and tissue bioengineering strategies. Gingival fibroblasts present structural function, being able to modulate their metabolic capacity, which is reflected in the tissue morphology. The possibility of culturing fibroblasts in vitro, in monolayer or on three-dimensional scaffolds, for subsequent transplants in vivo opens important perspectives for the periodontal surgical clinic. The objective of the present article is to present a method of obtaining and cultivating viable human gingival fibroblasts for in vitro research. Explants derived from periodontal surgical discards were used, grown in 25 cm2 bottles to obtain a primary cell culture. After observing the proliferation and growth of the fibroblasts that interconnected and formed a monolayer network, involving the periphery of the explants, it was possible to remove the explants, to make the passage and the new subcultures were obtained in a ratio of 1:1. After 7 days, the amount of viable cells was analyzed in triplicate, using the Neubauer chamber technique, in cell culture bottles of 25 mm2 (T25) and 75 mm2 (T75). Fibroblasts were described and subclassified morphologically. The results showed a growth pattern in both bottles, but with a larger number in bottles of 75 cm2. Cells with fibroblastic morphology were subclassified into reticular and fusiform, being predominant those with fusiform morphology. In conclusion, culture of explant of human gingival connective tissue is a viable method for obtaining gingival connective tissue cells suitable for laboratory tests in cell culture, aiming at obtaining constructs for gingival tissue engineering.

RESUMEN: El cultivo celular es una herramienta importante en los laboratorios de investigación médica, odontológica y biológica, que apoyan las terapias celulares y las estrategias de bioingeniería de tejidos. Los fibroblastos gingivales presentan una función estructural, pudiendo modular su capacidad metabólica, que se refleja en la morfología tisular. La posibilidad de cultivar fibroblastos in vitro, en monocapa o en andamios tridimensionales, para trasplantes posteriores in vivo abre perspectivas importantes para la clínica de cirugía periodontal. El objetivo del presente artículo es presentar un método para obtener y cultivar fibroblastos gingivales humanos viables para investigación in vitro. Se utilizaron explantes derivados de los descartes quirúrgicos periodontales, crecidos en frascos de 25 cm2 para obtener un cultivo de células primarias. Después de observar la proliferación y el crecimiento de los fibroblastos que se interconectaron y formaron una red de monocapa, que involucraba la periferia de los explantes, fue posible eliminar los explantes, hacer el pasaje y los nuevos subcultivos se obtuvieron en una proporción de 1:1. Después de 7 días, la cantidad de células viables se analizó por triplicado, utilizando la técnica de cámara de Neubauer, en botellas de cultivo celular de 25 mm2 (T25) y 75 mm2 (T75). Los fibroblastos fueron descritos y sub-clasificados morfológicamente. Los resultados mostraron un patrón de crecimiento en ambas botellas, pero con un número mayor en botellas de 75 cm2. Las células con morfología fibroblástica se subclasificaron en reticulares y fusiformes, predominando aquellas con morfología fusiforme. En conclusión, el cultivo de explante de tejido conectivo gingival humano es un método viable para obtener células de tejido conectivo gingival adecuadas para pruebas de laboratorio en cultivos celulares, con el objetivo de obtener construcciones para la ingeniería del tejido gingival.

FIPLIQ: an alternative solution for gynecological and oral cytology / FIPLIQ: uma solução alternativa para exames citológicos ginecológicos e bucais

ABSTRACT Introduction: Liquid-based solution for cytology has been developed to improve Pap test. Some liquid media are commercially available, however, due to the high cost there are difficulties in implementing it in the public health programs of many countries. Objectives: To study the suitability of alternative liquid media for the collection and preservation of samples for cytologic examinations, comparing the results with the conventional Papanicolaou methodology. Material and methods: In this study, 127 different compositions of alternative liquid-based solutions were tested with samples from 10 volunteers for oral cytology and 20 samples from volunteers for cervical cytology. Formaldehyde-isopropanol-phosphate (FIPLIQ) was used to preserve cervical samples prepared and analyzed on the same day and 3, 7, and 15 days after collection, compared with Pap smear. Evaluations on quality and adequacy of cell types, microorganisms or their cytopathic effects, reactive, degenerative and dysplastic cell alterations were performed. Results: Samples processed with FIPLIQ showed results similar to those of conventional Pap smear when analyzing staining cytoplasm with indistinct cytoplasm borders, chromatin structure, presence or absence of different types of cell and microorganisms, reparative process, preneoplastic, and neoplastic cell changes; the samples were stored for up to 15 days after collection. Conclusion: Preliminary results suggest that FIPLIQ is suitable for the preparation and preservation of cytology specimens for up to 15 days.

RESUMEN Introducción: La citología en medio líquido fue desarrollada para mejorar la prueba de Papanicolaou. Algunos medios líquidos son comercialmente disponibles; no obstante, debido al costo elevado, hay dificultades para su implementación en programas de salud pública en muchos países. Objetivos: Estudiar la adecuación de medios líquidos alternativos para recolecta y la preservación de muestras para exámenes citológicos, comparando los resultados con la metodología convencional de Papanicolaou. Material y métodos: En este estudio, 127 diferentes composiciones de soluciones alternativas de medios líquidos fueron testadas con muestras de 10 voluntarios para citología oral y 20 muestras de voluntarias para citología cervical. El fosfato de formaldehído- isopropanol (FIPLIQ) fue usado para preservación de muestras cervicales preparadas y analizadas en el mismo día, y tres, siete y 15 días después de la recolecta, en comparación con la citología convencional. Se hicieron evaluaciones de calidad y adecuación de los tipos celulares, microorganismos o sus efectos citopáticos, cambios celulares reactivos, degenerativos y displásicos. Resultados: Las muestras procesadas con FIPLIQ presentaron resultados similares a los de la prueba convencional de Papanicolaou cuando analizados color y bordes citoplasmáticos mal definidos, estructura de cromatina, presencia o ausencia de diferentes tipos de células y microorganismos, proceso reparativo, pre-neoplásico y alteraciones celulares neoplásicas; las muestras se conservaron hasta 15 días después de la recolección. Conclusión: Los resultados preliminares sugieren que el FIPLIQ es adecuado para preparación y preservación de especímenes citológicos hasta 15 días.

RESUMO Introdução: A citologia em meio líquido foi desenvolvida para melhorar o teste de Papanicolaou. Alguns meios líquidos são comercialmente disponíveis, no entanto, devido ao alto custo, há dificuldades para sua implementação em programas de saúde pública em muitos países. Objetivos: Estudar a adequabilidade de meios líquidos alternativos para a coleta e a preservação de amostras para exames citológicos, comparando os resultados com a metodologia convencional de Papanicolaou. Material e métodos: Neste estudo, 127 diferentes composições de soluções alternativas de meios líquidos foram testadas com amostras de 10 voluntários para citologia oral e 20 amostras de voluntárias para citologia cervical. O fosfato de formaldeído-isopropanol (FIPLIQ) foi utilizado para preservar amostras cervicais preparadas e analisadas no mesmo dia e três, sete e 15 dias após coleta, em comparação com a citologia convencional. Avaliações de qualidade e adequação dos tipos celulares, de microrganismos ou seus efeitos citopáticos, de alterações celulares reativas, degenerativas e displásicas foram realizadas. Resultados: As amostras processadas com FIPLIQ apresentaram resultados semelhantes aos do teste convencional de Papanicolaou quando analisados coloração e apagamento de bordas citoplasmáticas, estrutura de cromatina, presença ou ausência de diferentes tipos de células e microrganismos, processo reparativo, pré-neoplásico e alterações celulares neoplásicas; as amostras foram conservadas por até 15 dias após a coleta. TOPICO Conclusão: Os resultados preliminares sugerem que o FIPLIQ é adequado para a preparação e a preservação de espécimes citológicos por até 15 dias.

Multimedia educativa para el perfeccionamiento del proceso enseñanza-aprendizaje de la asignatura Biología Celular / Educative multimedia to improve the teaching-learning process of the Cellular Biology subject

El presente trabajo propone una Multimedia educativa para perfeccionar el proceso enseñanza-aprendizaje de la asignatura Biología Celular en la carrera de Licenciatura en Tecnología de la Salud, la cual propicia la aplicación de la informática para facilitar la comprensión de los contenidos, debido a la necesidad de incrementar sus niveles de eficiencia. El medio de enseñanza propuesto se sustenta en una concepción didáctica que instruye, educa y desarrolla. La investigación asume el método dialéctico-materialista y emplea el muestreo intencional que aportó riqueza a la información, se apoyó en una gama de métodos y técnicas que, mediante el diagnóstico de necesidades, demostró la falta de motivación e interés por el estudio de la asignatura. El tema, según los criterios de especialistas, resultó adecuado y pertinente en las condiciones actuales en correspondencia con las transformaciones propias de la nueva universidad cubana en los estilos de aprendizaje.

The work proposes an educative multimedia to improve the teaching-learning process of the Cellular Biology subject in the career Bachelor in Health technology, in which informatics can be applied to facilitate the comprehension of contents ,due to the necessity to increase efficiency. The teaching aid is based on a dialectical conception which teaches, educate and develop. The dialectic-materialistic method is used in the research work, and an intentional sample was taken which gave a very rich information. Different methods and techniques were used and the diagnose of necessities showed the lack of motivation and interest towards the subject. According to the criteria of specialists the topic is adequate and pertinent according to the current conditions and transformations of the new Cuban University and the learning styles.

Neuronal and Glial Dysfunction before Diabetic Retinopathy (review) / 中国康复理论与实践

@#Diabetic retinopathy is the leading cause of blindness in those of working age.It is well known that the retinal vasculature is altered during diabetes.More recently,it has emerged that neuronal,glial dysfunction and electroretinogram changes occur in those with diabetes.Current research is directed at understanding these neuronal and glial changes because they may be an early manifestation of disease processes that ultimately lead to vascular abnormality.This review will highlight the recent advances in our understanding of the neuronal,glial dysfunction,electroretiongram changes that occur during diabetes.