Plasmaféresis por método de filtración de membrana para el Síndrome de Guillain-Barre / Plasmapheresis by membrane filtration method for Guillain-Barré syndrome

La plasmaféresis por método de filtración de membrana es un tratamiento eficaz para pacientes con síndrome de Guillain-Barre grave.Objetivo: demostrar las ventajas de la plasmaféresis por filtración de membrana en el tratamiento de las formas graves del síndrome de Guillain-Barre. Método: se realizó un estudio prospectivo descriptivo en la unidad de terapia intensiva del Hospital Universitario Manuel Ascunce Domenech de Camagüey, desde enero de 2007 a enero de 2011. La muestra fue de 23 pacientes con diagnóstico de síndrome de Guillain-Barre con parálisis respiratoria. Se utilizó para la plasmaféresis una máquina de hemodiálisis convencional Fresenius 4008-D, filtros de plasma y líneas sanguíneas para hemodiálisis. Los volúmenes de plasma extraídos fueron de 3000 ml, se utilizaron como soluciones de reemplazo albúmina humana y plasma fresco, la información fue recogida en planillas a partir de las historias clínicas, se procesaron las frecuencias relativas y porcentajes de las variables.Resultados: la recuperación de la fuerza muscular fue significativa y la rápida salida de la ventilación de los pacientes después de las primeras cinco sesiones. Se presentaron pocas complicaciones. El tratamiento fue efectivo para el 95,6 por ciento de los pacientes. Conclusiones: el tratamiento fue efectivo, la mejoría se obtuvo después de los cinco recambios, el tiempo necesario para obtener el volumen plasmático deseado fue de una hora y media a dos horas y media, más rápido que por el método de centrifugación, redujo el tiempo de recuperación de la fuerza muscular y de la ventilación mecánica, resultó ser, además, una técnica segura y rápida para el paciente que padece de esta enfermedad

Plasmapheresis by membrane filtration method is an effective treatment for patients with serious Guillain-Barré syndrome. Objective: to demonstrate the advantages of plasmapheresis by membrane filtration in the treatment of severe Guillain-Barré syndrome. Methods: a prospective and descriptive study was conducted in the intensive care unit at the Provincial Hospital Manuel Ascunce Domenech, Camaguey; from January 2007 to January 2011. The sample was composed of 23 patients with diagnosis of Guillain-Barré syndrome with respiratory paralysis. For plasmapheresis was used a conventional haemodialysis machine Fressenius 4008-D, and plasma filters and blood lines for haemodialysis. Extracted plasma volumes were about 3000 ml, as replacement solutions albumin human and fresh plasma were used. The information was collected in forms from clinical histories, relative frequencies and percentages of variables were processed. Results: the recovery of muscle strength was significant and the quick exit of the ventilation of patients after the first five sessions. Few complications were presented. The treatment was effective for 95, 65 percent of patients. Conclusions: the treatment was effective; improvement was obtained after five exchange transfusions; the needed time to obtain the desired plasma volume was on an hour and a half to two hours and a half, quicker than the centrifugation method. It reduced the time of recovery of muscle strength and mechanical ventilation, turned out to be, in addition, a safe and quick technique for patients who suffer from this disease

Comparison of urine analysis using manual and sedimentation methods / Comparación del análisis de orina usando el método manual y el método de sedimentación

OBJECTIVE: Microscopic examination of urine sediment is an essential part in the evaluation of renal and urinary tract diseases. Traditionally, urine sediments are assessed by microscopic examination of centrifuged urine. However, the current method used by the Georgetown Public Hospital Corporation Medical Laboratory involves uncentrifuged urine. To encourage high level of care, the results provided to the physician must be accurate and reliable for proper diagnosis. The aim of this study is to determine whether the centrifuge method is more clinically significant than the uncentrifuged method. METHODS: In this study, a comparison between the results obtained from centrifuged and uncentrifuged methods were performed. A total of 167 urine samples were randomly collected and analysed during the period April-May 2010 at the Medical Laboratory, Georgetown Public Hospital Corporation. The urine samples were first analysed microscopically by the uncentrifuged, and then by the centrifuged method. The results obtained from both methods were recorded in a log book. These results were then entered into a database created in Microsoft Excel, and analysed for differences and similarities using this application. Analysis was further done in SPSS software to compare the results using Pearson's correlation. RESULTS: When compared using Pearson's correlation coefficient analysis, both methods showed a good correlation between urinary sediments with the exception ofwhite bloods cells. The centrifuged method had a slightly higher identification rate for all of the parameters. CONCLUSIONS: There is substantial agreement between the centrifuged and uncentrifuged methods. However, the uncentrifuged method provides for a rapid turnaround time.

OBJETIVO: El examen microscópico del sedimento de orina es una parte esencial en la evaluación de enfermedades renales y del tracto urinario. Tradicionalmente, los sedimentos de orina son evaluados mediante examen microscópico de orina centrifugada. Sin embargo, el método actual usado por el Laboratorio Médico de la Corporación del Hospital Público de Georgetown recurre a la orina no centrifugada. Con el propósito de estimular un alto nivel de cuidado, los resultados proporcionados al médico tienen que ser exactos y fiables para un diagnóstico apropiado. El objetivo de este estudio es determinar si el método de la centrifugación es clinicamente más significativo que el método sin centrifugación. MÉTODOS: En este estudio, se hace una comparación entre los resultados obtenidos a partir del método con centrifugado y sin centrifugado. Un total de 167 muestras de orina fueron recogidas aleatoriamente y analizadas durante el periodo de abril a mayo de 2010 en el Laboratorio Médico de la Corporación del Hospital Público de Georgetown. Las muestras de orina se analizaron primero microscópicamente por el método sin centrifugado, y entonces por el método con centrifugación. Los resultados obtenidos mediante ambos métodos fueron registrados en un en un diario de documentación. Estos resultados fueron entonces introducidos en un banco de datos creado en Microsoft Excel, y analizados en cuanto a sus diferencias y similitudes usando esta aplicación. El análisis se realizó también más tarde mediante el software de SPSS para comparar los resultados usando la correlación de Pearson. RESULTADOS: Al ser comparados mediante análisis basado en el coeficiente de correlación de Pearson, ambos métodos mostraron una buena correlación de los sedimentos urinarios, con excepción de los leucocitos. El método de la centrifugación tuvo una tasa de identificación ligeramente más alta para todos los parámetros. CONCLUSIONES: Existe una correspondencia sustancial entre los métodos con centrifugado y sin centrifugado. Sin embargo, el método que no emplea la centrifugación ofrece un tiempo de respuesta más rápido.

Separación de fosfolípidos mediante la aplicación de fuerzas centrífugas / Separation of phospholipids by the application of centrifuge strengths

Introducción: la separación centrífuga es muy utilizada para la obtención de productos farmacéuticos y biotecnológicos. Es la separación o concentración de fosfolípidos o ambas una de estas aplicaciones. Objetivo: seleccionar y evaluar el uso de diferentes separadores centrífugos así como el establecimiento de sus condiciones de operación, para la obtención de un concentrado de una mezcla fosfolipídica típica. Métodos: se realizó la caracterización física de la suspensión a tratar para seleccionar el tipo de centrífuga más adecuada y se determinaron las condiciones de operación de esta. Se evaluó además la composición de las mezclas fosfolípidicas obtenidas en cada caso. Resultados: se obtuvo que tanto una centrifuga de discos como una tubular son competentes para lograr la concentración de fosfolípidos, con una composición que puede ser utilizada para la formulación de liposomas, cosméticos y medicamentos. Conclusiones: Teniendo en cuenta la competencia de ambas centrífugas para rendir una mezcla fosfolipídica específica y los similares rendimientos en la separación, la mejor elección es una centrífuga tubular vertical por ser más económica y sencilla en su operación que la de discos.

Introduction: centrifuge separation is very useful for obtaining pharmaceutical and biotechnological products. One of these applications is the separation and/or concentration of phospholipids. Objective: to evaluate the use of different centrifuge separators, as well as the establishment of their operation conditions in order to obtain a typical phospholipidic mixture concentrate. Methods: a physical characterization of the suspension to be treated was made for selecting the most adequate kind of centrifuge and its operational conditions were determined. The composition of the phospholipidic mixtures in every case was also evaluated Results: both the disk and the tubular centrifuges turned to be fit for reaching the phospholipids concentration; hence the composition can be used for the formulation of liposomes, cosmetics and drugs. Conclusions: Given the adequacy of both centrifuges for reaching a specific phospholipidic mixture and their similar performances in the separation process, the best choice will be the vertical tubular centrifuge since it is less expensive and simpler in operation than the disk centrifuge.

Estandarización del método de centrifugación en placa para el aislamiento del virus dengue / Rapid centrifugation assay standarization for dengue virus isolation

Se estandarizó el método de centrifugación en placa, para el aislamiento del virus dengue a partir de muestras de suero humano. Se utilizó la línea celular C6/36-HT determinándose los valores óptimos de velocidad de centrifugación, volumen de inóculo, dilución de suero y tiempo de incubación. Posteriormente, 22 muestras de suero con aislamiento viral positivo y cepas referenciales de los cuatro serotipos del virus dengue, fueron procesadas simultáneamente por el método de centrifugación en placa y el método convencional de cultivo en tubo, los aislamientos fueron tipificados mediante inmunofluorescencia indirecta empleando anticuerpos monoclonales. Se optimizó el método de centrifugación en placa inoculando 200 ul de dilución de suero 1/20, centrifugación a 1600 rpm/30 min, presentando sensibilidad de 95,5 por ciento a cinco días postinoculación. Se concluye que el método de centrifugación en placa mejora el porcentaje de aislamiento, con significativa reducción en tiempo de aislamiento del virus dengue.

The plate centrifugation assay was standardized for dengue virus isolation from serum samples. C6/36-HT cells were used determining the optimal values for centrifugation spin speed, inoculum, sera dilution, and incubation time. Then, 22 positive serum samples with viral isolation and viral strains of the four reference dengue virus serotypes were tested simultaneously by the standardized plate centrifugation method and the conventional tube culture. The isolations were typified by indirect immunofluorescent test using monoclonal antibodies. The plate centrifugation method was optimizedto 200 uL of inoculum, dilution of sera 1/20, centrifugation speed at 1600 rpm/30 min, and sensitivity of 95,5 per cent after 5 days post-inoculation. We concluded that the plate centrifugation method increased dengue virus isolation, with a significant reduction of the time of isolation for dengue virus.

Simplificación de la fertilización de ovocitos durante la producción in vitro de embriones bovinos / Simplificação da fecundação de oócitos durante produção in vitro de embriões de bovinos / Simplification of oocytes fertilization during in vitro production of bovine embryos

El objetivo de este estudio fue evaluar un nuevo procedimiento de fertilización in vitro (FIV) de ovocitos bovinos, en el cual se omitió la centrifugación de los espermatozoides para los procesos de lavado y selección espermática. Dentro de cada uno de los pozos de los platos convencionales de cuatro pozos (pozos externos) se introdujo un nuevo pozo más pequeño (pozos internos) de aproximadamente 50 μl hecho en material de vidrio (0.3 mm de alto por 0.8 mm de diámetro). El procedimiento consistió en llenar los pozos interno y externo con 700 μl de medio de fertilización, hasta que el pozo interno quedara cubierto de medio, luego se depositaron 10 CCOs por pozo interno; luego 30 μl de semen previamente descongelado se depositaron en el fondo del pozo externo. Después de una hora se removió todo el contenido del pozo externo y se dejó el contenido del pozo interno con el medio y las células germinales por un periodo de incubación de 16 h. Los presuntos cigotos fueron cultivados en medio CR1aa por un periodo de siete días con un cambio de medio a las 72h. Como control, se utilizó un gradiente de Percoll 45-90% para la selección espermática. La tasa de de ovocitos divididos fue de (70.8 vs. 73.1) y la proporción de ovocitos que llegaron al estadio de morúla y blastocisto fue de (18.8 vs. 20.3), respectivamente. Los resultados obtenidos con la nueva propuesta metodológica son similares a los obtenidos con la metodología convencional (p<0.05). Estos resultados indican que ambos métodos producen resultados similares pero la nueva propuesta metodológica permite ahorrar tiempo, es menos laboriosa, consume menos reactivos y permite reducir la manipulación de las células espermáticas con buenos efectos eventuales en el mejoramiento de los procedimientos de reproducción in vitro.

This study was conducted to evaluate an in vitro fertilization (IVF) procedure that avoids the washing-selection-centrifugation of spermatozoa prior to coincubation with oocytes. A special dish was constructed as follows: in the middle of each of the 4-wells of a conventional plastic dish (larger wells), another little (≈50 μl) glass dish (inner well) was placed (0.3 mm-tall x 0.8 mm in diameter), in such a way that when the larger plate was filled with 700 μl of IVF media (Fert–TALP), the inner well was also filled up to overflowing. Ten in vitro matured oocytes were set into the inner well, and 30 μl of thawed semen were placed on the bottom of the outer well. After one hour of incubation, the media from the outer well was removed, and the well with the remaining media and the germ cells, were incubated for 16 hours. Presumptive zygotes were cultured in a CR1aa media for seven days with a culture media replace at 72 h. As a control, a conventional IVF, using the classical 45%-90% Percoll gradient selection, was carried out. The cleavage rates (70.8 vs. 73.1) and the proportion of oocytes reaching morula and blastocyst stages (18.8 vs. 20.3) by the “easy-IVF” were similar to the results obtained by the classical method (p<0.05). These results indicate that the two methods yield similar results but the “easy-IVF” definitely saves time, human effort, reagents, and after all reduces the manipulation of the sperm with eventual good effects in the long run toward improving in vitro reproduction procedures.

O objetivo deste estudo foi avaliar um novo procedimento de fertilização in vitro (FIV) de oócitos bovinos, que foi omitida na centrífuga esperma lavar os processos de seleção e de esperma. Dentro de cada um dos poços pratos convencionais quatro poços (poços externa) um novo bem menor (poços internos) cerca de 50 μl fato em vidro (0,3 mm de altura por 0,8 mm de diâmetro) foram introduziu. O procedimento foi de encher poços interna e externamente com 700 μ l meio de fertilização, até que a fossa foi coberto por meios internos e, em seguida, depositadas 10 CCOs em poços internos; então 30 μl previamente descongelados sêmen foi depositado no fundo da cova fora. Depois de uma hora é retirada a todo o conteúdo da cova, e foi deixada fora da doméstica no conteúdo do bem com o ambiente e células germinativas por um período de incubação de 16 h. A alegada zygotes foram cultivados em meio CR1aa por um período de 7 dias com uma mudança no meio-72h. Como um controle, utilizado uma gradiente de Percoll 45-90% de selecção de espermatozóides. A taxa de oócitos foi dividida (70.8 vs 73.1) e da proporção de oócitos que atingiu o estádio e foi Mórula blastocisto (18.8 vs 20.3), respectivamente. Os resultados obtidos com a nova metodologia proposta são semelhantes aos obtidos com a metodologia convencional (p<0.05). Estes resultados indicam que ambos os métodos produzem resultados semelhantes, mas a nova proposta metodológica economiza tempo, é menos trabalhoso, consome menos reativo e reduzem a manipulação de células espermáticas com bons potenciais efeitos na melhoria dos procedimentos reprodução in vitro.