Keratinocyte growth factor protected cultured human keratinocytes exposed to oxidative stress / Fator de crescimento de queratinócitos protegeu queratinócitos humanos cultivados expostos ao estresse oxidativo

PURPOSE: To evaluate effects of oxidative stress and supplementation of keratinocyte growth factor (KGF) on cultivated human keratinocytes. METHODS: Oxidative stress was produced through addition of hydrogen peroxide (H2O2) to the culture medium. Cultivated human keratinocytes were divided in 4 groups: Group control (G C), Group KGF (G KGF), Group H2O2 (G H2O2), Group H2O2 and KGF (G H2O2-KGF). Each experiment was accomplished with the same lineage cultivated keratinocytes, in triplicate. Cell viability was evaluated by trypan blue exclusion assay. RESULTS: The results showed that the culture medium supplemented with KGF presented a small rate of cell viability when compared to cells only in culture medium (p<0,001). It demonstrated that only the growth factor does not have protector effects for cells in vitro. However, in front of the oxidative stress produced by addition of hydrogen peroxide to the medium, KGF showed a beneficial effect, protecting cells when compared to the group that suffered hydrogen peroxide action but had not been exposed to KGF (p<0,001). CONCLUSION: KGF determined protection to the primary human keratinocytes exposed to oxidative stress.

OBJETIVO: Avaliar os efeitos do estresse oxidativo e da suplementação do fator de crescimento de queratinócitos (KGF) em queratinócitos humanos cultivados. MÉTODOS: O estresse oxidativo foi produzido através da adição de peróxido de hidrogênio (H2O2) ao meio de cultura. Os queratinócitos humanos cultivados foram divididos em quatro grupos: grupo controle (G C), grupo KGF (G KGF), grupo H2O2 (G H2O2), grupo H2O2 e KGF (G H2O2-KGF). Cada experimento foi realizado com a mesma linhagem celular, em triplicata. A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio da exclusão do azul de tripan. RESULTADOS: Os resultados mostraram que o meio de cultura suplementado com o KGF apresentou menor taxa de viabilidade celular quando comparado às células do grupo controle (p<0,001). Isso mostra que somente o fator de crescimento de queratinócitos não apresentou efeito protetor às células em cultura. Entretanto, frente ao estresse oxidativo produzido pela adição do peróxido de hidrogênio ao meio de cultura, o KGF mostrou efeito benéfico, protegendo as células quando comparado ao grupo que sofreu a ação do estresse oxidativo, mas que não foi exposta ao KGF (p<0,001). CONCLUSÃO: O KGF determinou a proteção aos queratinócitos humanos primários cultivados expostos ao estresse oxidativo.

Clinical correlations of recent developments in the pathogenesis of atopic dermatitis: [review]

A dermatite atópica é uma doença cutânea inflamatória crônica cuja prevalência tem aumentado de forma constante, afetando 10-20 por cento dos lactentes e 1-3 por cento dos adultos em todo o mundo. Ela é freqüentemente a primeira manifestação clínica de doença atópica, precedendo a asma e a rinite alérgica. Provavelmente metade das crianças com dermatite atópica desenvolvem alguma outra forma de doença atópica em outras fases da vida. A patogenia envolve uma interação complexa entre fatores que incluem predisposição genética devido a uma função alterada da barreira cutânea ou imunológica, interações com o ambiente, tais como exposição a alimentos e alergenos, e desencadeadores infecciosos de inflamação. Nesta revisão, resumimos os avanços recentes na compreensão da contribuição de diferentes fatores à fisiopatologia da dermatite atópica e como os novos conhecimentos proporcionam novo potencial terapêutico.

Atopic dermatitis is a chronic inflammatory skin disease with a steadily increasing prevalence affecting 10-20 of infants and 1-3 of adults globally. It is often the first clinical manifestation of atopic disease preceding asthma and allergic rhinitis. Probably half of the children with atopic dermatitis develop some other form of atopic disease later in life. The pathogenesis involves a complex interplay of factors including genetic predisposition due to altered immune or skin barrier function, interactions with the environment such as food and allergen exposures, and infectious triggers of inflammation. In this review, we summarize the recent advances in understanding the contribution of different factors in the pathophysiology of atopic dermatitis and how insights provide new therapeutic potential for its treatment.

Uso da cultura de mucosa escamosa humana no tratamento de lesões jugais pré-cancerosas extensas / The use of human squamous mucosa culture in the treatment of extensive buccal premalignant lesions

OBJETIVO: Os autores propõem uma nova abordagem no tratamento de lesões extensas de natureza pré-cancerosa da mucosa jugal, utilizando enxerto de mucosa escamosa autógena cultivada em laboratório. MÉTODO: O enxerto é aplicado no mesmo tempo cirúrgico da ressecção da lesão original. Foram operados cinco pacientes, os quais receberam acompanhamento pós-operatório, sendo submetidos à biopsia de controle no 90º dia. A avaliação da integração do enxerto com o leito receptor foi realizada utilizando-se critérios clínicos e morfológicos, incluindo microscopia óptica e eletrônica. RESULTADOS: O estudo anatomopatológico com microscopia óptica e eletrônica dos cinco pacientes mostrou haver integração do enxerto da mucosa cultivada com o leito receptor. As células da mucosa cultivada formam camadas que se organizam e se diferenciam à semelhança da zona doadora. À microscopia eletrônica a mucosa enxertada apresentava lâmina basal com descontinuidades focais, presença de hemidesmosomas e fibrilas de ancoragem. CONCLUSÕES: Os resultados demonstraram que a técnica é oportuna e viável para o tratamento de lesões pré-cancerosas, outrora consideradas irressecáveis pela extensão e pode ser considerada uma possibilidade real para o tratamento cirúrgico definitivo das mesmas.

OBJECTIVE: The authors propose a new approach to the treatment of extensive pre-malignant lesions of the jugal mucosa, using laboratory grown autogenous squamous mucosa as graft. METHOD: The graft was implanted at the same time the original lesion was excised. Five patients underwent surgery and were followed up until a control biopsy was obtained after 90 days. Both clinical and morphological criteria, including light and electronic microscopy, were used to assess integration of the graft to the receptor bed. RESULTS: The anatomopathological study under light and electronic microscopy of the five patients showed integration of the cultivated mucosa to the receptor bed. Cells from the cultivated mucosa make up layers which organize and differentiate according to the pattern of the donor zone. The ultrastructure of the grafted mucosa showed a basal layer with discrete areas of loss of continuity, hemidesmosomes and anchorage fibrillae. CONCLUSIONS: Our results demonstrated that being a timely and feasible technique for the treatment of pre-malignant lesions, so far deemed not amenable to resection owing to their extension, the technique may be considered a real possibility for the definitive treatment.