Atividade anti-Candida tropicalis dos enantiômeros (R)-(+) ­ & (S)-(-) ­ citronelal em associação com cetoconazol / Anti-Candida tropicalis activity of (R)-(+) ­ & (S)-(-) ­ citronellal enantiomers in combination with ketoconazole

Introdução: aproximadamente 75% das mulheres saudáveis experimentam pelo menos um episódio sintomático de candidíase vulvovaginal (CVV) durante sua vida. Objetivo: avaliar a atividade antifúngica contra cepas de C. tropicalis dos enantiômeros (R)-(+) ­ e (S)-(-)-citronelal [(R)-(+) ­ e (S)-(-)-CT] em associação com cetoconazol. Metodologia: o efeito antifúngico de ambos os enantiômeros foram quantificados e classificados como fungicida ou fungistático a partir dos resultados obtidos da microdiluição em meio líquido RPMI1640 para a obtenção da concentração inibitória mínima (CIM) e da concentração fungicida mínima (CFM). Foram realizados ensaios de associação do antifúngico padrão, cetoconazol com os fitoconstituintes por difusão em Agar e os resultados foram classificados como sinérgicos, antagônicos e indiferentes. Resultados: a CIM50 e a CFM50 dos compostos (R)-(+) ­ e (S)-(-)-citronelal foram respectivamente 16 e 64µg/mL e 2×CIM. Houve sinergismo para todas as cepas testadas com ambos os compostos, porém com maior efeito do enantiômero (S)-(-)-CT sobre as cepas LM 665 e LM 255 em relação ao enantiômero (R)-(+)-CT. Conclusão: os compostos naturais deste estudo mostraram efeito fungicida sobre as cepas testadas, bem como efeito sinérgico significativo quando associado ao cetoconazol

Impacto de la clindamicina in vitro en la combinación clindamicina - ketoconazol sobre el exopolímero de biopelículas de candida spp de origen urogenital / Impact of in vitro clIndamycIn on the combInatIon of clIndamycIn and ketoconazole on exopolymer of candida spp bIofIlms of urogenItal orIgIn

La mucosa vaginal ha sido utilizada largamente para la administración de antimicrobianos destinados al tratamiento de infecciones endógenas del tracto genital inferior (IETGI) en mujeres embarazadas y no embarazadas. Candida spp elabora biopelículas (BP) y su formación es un proceso complejo que requiere que las células fúngicas establezcan múltiples interacciones con el medio. Las BP están rodeadas por un exopolímero (EPM) que puede restringir la actividad de anticuerpos, la difusión de sustancias y unirse a los antimicrobianos (AM), limitando su acción. Los antimicrobianos (AM) en general y los antimicóticos en particular (AMC) pueden tener dificultades para llegar a las células dentro del EPS. Muchas de las fórmulas que se emplean para el tratamiento empírico usan combinaciones inapropiadas con limitada o nula actividad sobre las biopelículas (BP). La presencia de moléculas que provoquen su inhibición anulando los inductores del EPM o por otro mecanismo, permitirá la actividad del AM específico. Objetivo: demostrar que la actividad de la clindamicina (CLI) en fórmula dual con ketoconazol (KET) actúa sobre BP Candida albicans (CA) y especies no albicans de Candida . (NAC). Métodos: estudiamos la actividad de clindamicina-ketoconazol (CK) sobre la adherencia y dispersión de BP de 8 aislamientos vaginales de CA y 7 de CNA. Se inocularon en 3 tubos con caldo Sabouraud y un dispositivo de vidrio para la formación de la BP según técnica ya descrita. Adherencia: Se incubaron durante 6 horas y se agregó una combinación de CK proveniente del material de óvulos, diluido convenientemente (62,5/260,4 ug/ml), a uno de los tubos de cada aislamiento tomándose como hora 0. Dispersión: esa misma dilución se agregó a otro tubo a las 16 horas. El tercer tubo quedó como testigo sin antimicrobianos. La lectura se efectuó con microscopio óptico a las 24 horas de agregada la combinación CK previa tinción con cristal violeta y se evaluaron con programas fotográficos. Por separado analizamos la actividad de CLI (62,5 ug/ml) y KET (260,4 ug/ml) con técnica similar. Seleccionamos las muestras de 7 pacientes que demostraron candidiasis vulvovaginal (CVV) y las estudiamos con la técnica de capas celulares. Se empleó la combinacion CK para el estudio de la adherencia y dispersión. Resultados: Adherencia se demostró poca influencia de CK en la adherencia con respecto a cada testigo. Dispersión: la influencia de CK se demostró en la mayoría de los aislamientos particularmente en los de CNA que mostraron una mayor presencia de EPM. Las hifas solo se observaron en 1/15 de los aislamientos de Candida spp cuando se agregó CK a las 16 horas. En las BP de las muestras clínicas no aparecieron hifas ni otro elemento micótico en 5/7 con respecto a los testigos. Conclusión: Según estos resultados el uso de una combinación de CK en BP de Candida spp, resulta en una adecuada penetración del AMC demostrada por la dispersión de la BP al cabo de 24 horas. Clindamicina no interfiere con la acción del ketoconazol sino que promovería su actividad anti-candida modificando posiblemente estructuras de superficie y la del EP por inhibición de las moléculas que facilitan la expresión del mismo. In vivo promueve la actividad inmunomoduladora que no se puede demostrar con este modelo in vitro. Su uso combinado en fórmulas duales facilitaría la actividad del AMC sobre Candida spp actuando como inhibidora o modificadora de las BP mediante la dispersión del EPM

The vaginal mucosa has been widely used for administering antimicrobial agents to treat endogenous infections of the lower genital tract in pregnant and non-pregnant women. Candida spp. elaborates biofilms, and its formation is a complex process requiring that fungal cells establish multiple interactions with the medium. Biofilms are surrounded by an exopolymer matrix that can restrict the activity of antibodies, the diffusion of substances, and be associated with antimicrobials, therefore limiting its actions. General antimicrobials and particular anti-mycotic agents can face difficulties to access the cells within the exopolymer matrix. Many formulas used for empirical treatment have improper combinations with limited or null activity on the biofilms. The presence of molecules that cause its inhibition, thus eliminating the exopolymer matrix inducers, or by other mechanism, will allow the specific antimicrobial activity. Objective: To show that the activity of clindamycin used in dual formula with ketoconazole works on Candida albicans biofilm and on non- albicans species of Candida . Methods: We studied the activity of clindamycin and ketoconazole regarding the adherence and dispersion of biofilms from eight vaginal isolates of C. albicans and 7 of non- albicans Candida . The isolates were inoculated in three tubes with Sabouraud agar and a glass device to form the biofilm according to a known technique. Adherence : Each isolate was incubated for a six-hour period and a combination of clindamycin and ketoconazole from the material of ovules was added and conveniently diluted to one of the tubes of each isolate (62.5/260.4 ug/mL), considering 0 hour. Dispersion: The same dilution was added to another tube after 16 hours. The third tube was used as a control without antimicrobials. The reading was carried out with an optical microscope after 24 hours that the clindamycin and ketoconazole combination had been added and colored with crystal violet. They were then evaluated using photographic programs. The activity of clindamycin (62.5 ug/mL) and ketoconazole (260.4 ug/mL) was analyzed alone with a similar technique. We chose vaginal samples from seven patients with vulvovaginal candidiasis and studied them through the cell layer technique. The clindamycin and ketoconazole combination was used for studying the adherence and dispersion. Results: Adherence: Little influence of clindamycin and ketoconazole was seen in adherence regarding each control. Dispersion: The clindamycin and ketoconazole influence was seen in most of the isolates, especially in those of non- albicans Candida that showed higher presence of exopolymer matrix . The hyphae were only seen in 1 of 15 isolates of Candida spp after the clindamycin and ketoconazole were added at the 16th hour. In biofilms of clinical samples, neither hyphae nor mycotic elements were seen in 5 of 7 compared with the controls. Conclusion: According to these results, the use of a clindamycin and ketoconazole combination in biofilms of Candida spp results in proper penetration of the antimicrobial agent, which is seen by the biofilm dispersion during 24 hours. Clindamycin does not interfere with the action of ketoconazole, but it would promote its anti- Candida activity and would possibly modify surface and EP structures through inhibition of the molecules that facilitate its expression. The in vivo model promotes the immunomodulatory activity that in vitro models do not. Its combined use in dual formulas would facilitate the antimicrobial activity on Candida spp, therefore working as an inhibitor or modifier of the biofilms after dispersion of the exopolymer matrix

Candidúria em adultos e crianças: prevalência e suscetibilidade a antifúngicos em pacientes ambulatoriais de Jataí-GO / Candiduria in adults and children: prevalence and antifungal susceptibility in outpatient of Jataí-GO

Introduction: The term candiduria refers to the presence of yeast in urine and Candida albicans is the most common agent. In general, routine laboratories do not perform identification and cultivation of yeast. Objectives: To determine the prevalence of Candida species and to evaluate the antifungal susceptibility of the species isolated in urine of outpatients Jataí-GO, between January-October 2013. Material and method: Urine samples containing fungal structures were plated out on Sabouraud agar with chloramphenicol. Differentiation was taken with the urease test, nitrogen and carbon sources assimilation, germ tube test, morphology on cornmeal agar and chromogenic agar cultivation. Susceptibility was evaluated at antifungal itraconazole, fluconazole, amphotericin B and ketoconazole. Results: 1,215 urine tests were performed, and 64 had fungal structures (5.3%). Two samples were lost, thus here we considered 62 isolates. From this total, 43 were identified as C. albicans (67.2 %), eight C. glabrata (12.5 %), five C. krusei (7.8%), three C. tropicalis (4.7%), and three could not determine the species (4.7%). Amphotericin B and ketoconazole inhibited 94.9% of the isolates. On the other hand, 55.9% and 54.2 % were resistant to itraconazole and fluconazole, respectively. The resistance rates of both fluconazole and itraconazole for C. glabrata and C. albicans, as fluconazole for C. albicans and C. krusei, showed significant differences (p < 0.05). Conclusion: These data demonstrate the importance of conducting a full identification and susceptibility to antifungal agents in samples with yeast infection...

Introdução: O termo candidúria designa a presença de leveduras na urina e Candida albicans é o agente mais comum. Em geral, os laboratórios de rotina não realizam o cultivo e a identificação da levedura. Objetivos: Determinar a prevalência de espécies de Candida e avaliar o perfil de sensibilidade aos antifúngicos das espécies isoladas em urina de pacientes ambulatoriais do município de Jataí-GO, entre janeiro e outubro de 2013. Material e método: Amostras de urina que continham estruturas fúngicas foram semeadas em ágar Sabouraud com cloranfenicol. A diferenciação foi feita com provas da urease, assimilação de fontes de nitrogênio e carbono, tubo germinativo, morfologia em ágar fubá e cultivo em ágar cromogênico. Foi avaliada a sensibilidade aos antifúngicos itraconazol, fluconazol, anfotericina B e cetoconazol. Resultados: Foram realizados 1.215 exames de urina, sendo que 64 apresentaram estruturas fúngicas (5,3%). Houve perda de duas amostras, assim, considerou-se 62 isolados. Desse total, 43 foram identificadas como C. albicans (67,2%); oito, C. glabrata (12,5%); cinco, C. krusei (7,8%); três, C. tropicalis (4,7%); e em três não foi possível determinar a espécie (4,7%). Anfotericina B e cetoconazol inibiram 94,9% dos isolados. Por outro lado, 55,9% e 54,2%, respectivamente, apresentaram resistência a itraconazol e fluconazol. As taxas de resistência a itraconazol e fluconazol de C. glabrata e C. albicans e também do fluconazol entre C. albicans e C. krusei apresentaram diferenças significativas (p < 0,05). Conclusão: Os dados demonstram a importância de se realizar a identificação completa e também o antifungigrama para amostras que apresentam infecção por leveduras...

Efeitos do cetoconazol e seus mecanismos de ação in vitro sobre linhagens hipofisárias tumorais imortalizadas / Effects of ketoconazole and its mechanisms of action in pituitary tumoral immortalizaded cell lines

O cetoconazol, inicialmente descrito como um agente antifúngico, revelou-se um potente inibidor da esteroidogênese adrenal, podendo, assim, ser utilizado no manejo da doença de Cushing, como terapia primária ou após insucesso cirúrgico, enquanto aguarda o efeito da radioterapia. Durante o tratamento com cetoconazol, uma redução dos níveis de cortisol é observada, usualmente não acompanhada por uma elevação do ACTH plasmático, como poderia ser esperada. Este fenômeno paradoxal, caracterizado pela redução do cortisol com níveis de ACTH inadequadamente normais ou não elevados, pode estar relacionado a uma ação adicional do cetoconazol nas células hipofisárias produtoras de ACTH. Para se testar essa hipótese, alguns estudos in vitro realizados na década de 80, avaliando a secreção de ACTH na vigência do cetoconazol, sugeriram a sua ação em células adenohipofisárias. Em adição, foi evidenciado que o cetoconazol ativou vias de apoptose em linhagens tumorais não hipofisárias. O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito in vitro do cetoconazol na viabilidade celular e na expressão de genes envolvidos na apoptose e replicação do DNA em linhagens tumorais hipofisárias imortalizadas corticotróficas (AtT-20), gonadotróficas (alfaT3.1), mamossomatotróficas (GH3) e mamotróficas (MMQ), utilizando-se a técnica de RT-qPCR. Os resultados mostraram que, na presença do cetoconazol, ocorreu uma redução da viabilidade celular nas linhagens hipofisárias, de forma concentração-dependente, às custas do estímulo da via extrínseca e intrínseca da apoptose, com aumento da expressão dos receptores de morte celular (ex.: Fas, TNFR) e/ou caspases (ex.: -2, -3, -6 ,-7 ,-9). Estes resultados foram associados a um aumento da expressão gênica dos inibidores do ciclo celular p21 (nas linhagens GH3 e alfaT3.1) e p27 (nas linhagens GH3 e MMQ), com uma redução acentuada da expressão destes genes após retirada do cetoconazol do meio de cultura...

Ketoconazole, initially described as an antifungal agent, proved to be a potent inhibitor of steroidogenesis, allowing its use in the management of Cushing's disease as primary or after unsuccessfully surgery and waiting the effect of radiotherapy. During treatment with ketoconazole, there a reduction in the cortisol levels is observed, usually not accompanied by an elevation of plasmatic ACTH, as could be expected. This paradoxical phenomenon, characterized by reduced cortisol with ACTH levels inappropriately normal or not elevated, could be related to an additional action of ketoconazole on ACTH-producing pituitary cells. In agreement with this hypothesis, some in vitro studies in the 80's, evaluating ACTH secretion in the presence of ketoconazole, suggested its action in pituitary cells. In addition, ketoconazole activated apoptosis pathways in non-pituitary tumor cell lines. Therefore, the present study aims to revisit this topic and evaluate the in vitro effect of ketoconazole on cell viability and expression of genes involved in apoptosis and DNA replication by RT-qPCR in immortalized pituitary tumoral corticotroph (AtT-20), gonadotroph (alphaT3.1), mammosomatotroph (GH3), mammotroph (MMQ) cell line. As a result, there was a reduction in pituitary cell viability with ketoconazole, in a concentration-dependent manner, due to stimulation of the extrinsic and intrinsic pathway of apoptosis, with increased expression of cell death receptors (eg. Fas, TNFR) and/or caspases (eg. -2, -3, -6, -7, -9). These results were associated with an increased gene expression of the cell cycle inhibitors p21 (in GH3 and alphaT3.1 cell line), and also p27 (in GH3 and MMQ cell line), with a significant reduction in the expression of these genes after removal of ketoconazole in the media. In conclusion, the ketoconazole have the potential of reduce cell viability in pituitary tumoral lineages possibly due to a cytotoxic effect (by increasing...

Avaliação das propriedades físico-químicas de preparações farmacêuticas contendo cetoconazol para uso tópico / Evaluation of physical-chemical stability of Ketoconazole pharmaceutical dosage forms for topical use

O cetoconazol possui atividade fungistática e fungicida frente a diversos microrganismos que causam micoses superficiais e sistêmicas. As preparações para uso externo sofrem oxidação, que pode ser observada pela alteração da coloração de branco para rosa. Foram preparadas quatro formulações de cremes e cinco de xampus, variando-se a concentração de antioxidantes empregados e o pH das mesmas. As preparações foram submetidas à temperatura ambiente (25 ºC) e a condições de refrigeração (8 ºC) durante 90 dias. Os xampus e cremes com valores de pH entre 7,0 e 8,0 e com 0,4 % de butilhidroxitolueno (BHT), independente de refrigeração permaneceram com coloração branca.

Avaliação da associação do quimioterápico benzonidazol a outros fármacos com ação anti-T. cruzi no tratamento da doença de Chagas experimental / Evaluation of the association of benznidazole to other chemotherapeutic drugs with action anti-T cruzi in the treatment of experimental Chagas disease

A doença de Chagas (DC) é causada pelo protozoário hemoflagelado Trypanosoma cruzi. Estima-se que ainda existam 10 milhões de pessoas infectadas na América Latina. Para a quimioterapia específica da DC o benzonidazol (BZ) é o medicamento de escolha. A eficácia terapêutica dos compostos atualmente em uso clínico tem sido questionada, tendo em conta os diferentes índices de cura já registrados na literatura. A associação do BZ, com medicamentos que apresentem um efeito anti-T. cruzi poderá potencializar a ação antiparasitária do mesmo e possivelmente permitirá o uso de doses menores e consequentemente diminuição dos efeitos tóxicos. O objetivo da presente investigação é avaliar o efeito do tratamento com o BZ associado aos medicamentos nifurtimox (NF) e cetoconazol (CETO)...

Chagas’disease (CD) is caused by the hemoflagelate protozoa Trypanosoma cruzi. It is estimated that 10 million infected people are still living in Latin America. For the specific chemotherapy of CD, the Benznidazole (BZ) is the drug of choice. However, the therapeutic efficacy of the compounds now in clinical use is not confirmed, taking into account that different cure rates have been registered. It is possible that the association of BZ with other drugs with an anti-T. cruzi action could improve its anti-parasitic effect, with the use of lower dose and consequent decrease of the toxic effects. The objective of the present investigation is to evaluate the effect of the treatment with BZ in association with the drugs Nifurtimox (NF) and Ketoconazole (CETO)...

Rational use of antioxidants in solid oral pharmaceutical preparations

Antioxidants are currently used as efficient excipients that delay or inhibit the oxidation process of molecules. Excipients are often associated with adverse reactions. Stability studies can guide the search for solutions that minimize or delay the processes of degradation. The ability to predict oxidation reactions in different drugs is important. Methods: This study was conducted to assess the rational use of butylated hydroxyanisole (BHA), butylated hydroxytoluene (BHT), sodium metabisulfite (SMB), propyl gallate (PG) and cysteine (CYS) in tablet formulations of simvastatin and ketoconazole. These antioxidants were evaluated according to stability parameters and the relationship between efficiency of the antioxidant and chemical structure of the drugs. Results were compared with DPPH tests and computational simulations. BHT was most efficient regarding simvastatin stability, and the most effective BHT concentrations for maintaining stability were 0.5 and 0.1%. In relation to ketoconazole, SMB was most efficient for maintaining content and dissolution profile. The evaluation by DPPH showed that the largest percentage of absorbance reduction was observed for PG, while SMB proved most efficient and had lower consumption of DPPH. The same pattern was observed, albeit with lower efficiency, for the other lipophilic antioxidants such as BHT and BHA. The results of the molecular modeling study demonstrated that electronic properties obtained were correlated with antioxidant activity in solution, being useful for the rational development of liquid pharmaceutical formulations but not for solid oral formulations. This study demonstrated the importance of considering stability parameters and molecular modeling to elucidate the chemical phenomena involved in antioxidant activity, being useful for the rational use of antioxidants in the development of pharmaceutical formulations.

Atualmente, antioxidantes são usados como excipientes eficientes, que retardam ou inibem o processo de oxidação de moléculas. Excipientes são frequentemente associados a efeitos adversos. Estudos de estabilidade podem ajudar na busca por possíveis soluções para minimizar ou retardar os processos de degradação. A habilidade de prever as reações de oxidação em diferentes fármacos é importante. O estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar o uso racional de hidroxianisol butilado (BHA), hidroxitolueno butilado (BHT), metabissulfito sódico (SMB), galato de propila (PG) e cisteína (CYS) em formulações de comprimidos de sinvastatina e cetoconazol. Eles foram avaliados por parâmetros de estabilidade e pela relação entre a eficiência dos antioxidantes e a estrutura química do fármaco. Os resultados foram comparados com testes de DPPH e simulações em computador. BHT foi mais eficiente com relação a estabilidade da sinvastatina e às concentrações mais eficientes para manutenção de estabilidade foram 0,5 e 0,1%. Com relação ao cetoconazol, SMB foi mais eficiente em manter o conteúdo e o perfil de dissolução. A avaliação por DPPH mostrou que o maior percentual de redução de absorção foi observado para PG, enquanto que SMB mostrou ser mais eficiente e consumir menos DPPH. A mesma tendência foi observada com menos eficiência em todos os outros antioxidantes lipofílicos como o BHT e BHA. Os resultados do estudo de modelagem molecular demonstraram que as propriedades eletrônicas obtidas podem ser correlacionadas com a atividade antioxidante em solução, sendo útil para o desenvolvimento racional de formulações farmacêuticas líquidas, mas não para formulações sólidas orais. Este estudo demonstrou a importância de considerar parâmetros de estabilidade e modelagem molecular para elucidar os fenômenos químicos envolvidos na atividade antioxidante, sendo úteis para o uso racional de antioxidantes no desenvolvimento de formulações farmacêuticas.

Novos aspectos na evolução clínica da pitiríase versicolor / New aspects in the clinical course of pityriasis versicolor

FUNDAMENTO: A pitiríase versicolor é uma doença infecciosa causada por várias espécies de Malassezia com uma tendência a se tornar recidivante ou crônica. OBJETIVOS: Este trabalho foi conduzido na tentativa de conhecer a evolução clínica da pitiríase versicolor em relação ao número de recidivas após um tratamento adequado no período de 12 meses e correlacionar o número de recidivas com as espécies de Malassezia isoladas. MATERIAL E MÉTODOS: Cento e dois pacientes com diagnóstico clínico e laboratorial de pitiríase versicolor foram acompanhados por um período de 12 meses para observarmos o número de recidivas da doença. RESULTADOS: A pitiríase versicolor, após um tratamento adequado, apresentou três tipos de evolução clínica num período de 12 meses: pitiríase versicolor sem nenhum episódio de recidiva (32,35 por cento); pitiríase versicolor recidivante, com um a quatro episódios de recidiva (52,94 por cento) devidos a fatores de predisposição relacionados; e pitiríase versicolor crônica, com mais de quatro episódios de recidiva (14,70 por cento) sem nenhuma relação com fatores de predisposição. CONCLUSÕES: A pitiríase versicolor apresentou uma evolução clínica de acordo com o número de episódios de recidiva da doença analisados durante um período de 12 meses que pode ser considerada da seguinte maneira: pitiríase versicolor com cura clínica e micológica, pitiríase versicolor recidivante e pitiríase versicolor crônica.

BACKGROUND: Pytiriasis versicolor is an infectious disease caused by several Malassezia species which has a tendency to become relapsing or chronic. OBJECTIVES: This study was conducted in an attempt to investigate the clinical course of pityriasis versicolor with regard to the number of relapses after a 12-month therapy and correlate this number with isolates of Malassezia species. MATERIAL AND METHODS: 102 patients with clinical and laboratory diagnosis of pityriasis versicolor were monitored for 12 months to investigate the number of relapsing episodes of the disease. RESULTS: After appropriate treatment, pityriasis versicolor presented three types of clinical course: pity - riasis versicolor without relapsing episodes (32.35 percent), relapsing pityriasis versicolor with one to four relapsing episodes (52.94 percent ) due to associated predisposing factors, and chronic pityriasis versicolor with more than four relapsig episodes (14.70 percent) with no relation to predisposing factors. CONCLUSIONS: The clinical course of pityriasis versicolor varied according to the number of relapsing episodes of the disease analyzed over a period of 12 months and can be classified as follows: pityriasis versiolor with clinical and mycological clearing, relapsing pityriasis versicolor and chronic pityriasis versicolor.

Dermatite seborreica da face / Facial seborrheic dermatitis

Dermatite seborreica (DS) é uma afecção comum da pele, caracterizada por lesões eritêmato-descamativas que afetam principalmente o couro cabeludo e a face. Sua prevalência em populações sadias varia de 2% a 5%, segundo diferentes estudos. Acomete ambos os sexos, sendo mais comum em homens. As lesões se desenvolvem em áreas ricas em glândulas sebáceas, como couro cabeludo, face, pavilhão auricular, flexuras e tórax.A dermatite seborreica da face acomete sobrancelhas, base dos cílios, pregas nasolabiais e o canal auditivo externo e pode ser tratada com corticoide tópico, metronidazol e antifúngicos tópicos, sendo o cetoconazol o principal.

Estudo de metodologia analítica para a determinação do cetoconazol em formulações farmacêuticas / Study of analytical methodology for ketoconazole determination in pharmaceutical preparation

Cetoconazol é um antifúngico sintético, derivado imidazólico de amplo espectro de ação, efetivo no tratamento de infecções superficiais e sistêmicas. Foram estudadas diferentes metodologias para análise do cetoconazol em especialidades farmacêuticas diversas usando espectrofotometria no ultravioleta, no infravermelho e análise térmica. Os resultados mostram que a espectrofotometria ultravioleta é um método rápido, prático e econômico e apontam que outros métodos como a espectrofotometria no infravermelho e análise térmica são uma alternativa à análise do cetoconazol em diferentes especialidades farmacêuticas.

Ketoconazole is a synthetic broad-spectrum oral and topical antifungal drug derived from imidazole, effective in the treatment of superficial mycoses and systemic infections. In this study we have tested several methods to analyze ketoconazole in various pharmaceutical products containing this drug, employing techniques such as UV and IR spectrophotometry and thermal analysis. The results showed that UV spectrophotometryis a fast, practical and economical method and indicated that other methods, such as IR spectrophotometry and thermal analysis, could be good alternative methods for ketoconazole analysis in certain pharmaceutical forms.

Emulsões O/A contendo Cetoconazol 2,0%: avaliação da estabilidade acelerada e estudos de liberação in vitro / O/W Emulsion Containing 2.0% Ketoconazole: Accelerated Stability Test and in vitro Release

Os objetivos do estudo foram desenvolver e avaliar a estabilidade físico-química de emulsões O/A contendo cetoconazol a 2,0% e determinar seu perfil de liberação in vitro. As formulações foram preparadas com bases auto-emulsionáveis com diferentes características químicas. A estabilidade do sistema foi avaliada de acordo com o Guia para Realização de Testes de Estabilidade em Produtos Farmacêuticos, utilizando diferentes temperaturas (4ºC, 37ºC e 45ºC) por um período de tempo de três meses. Os parâmetros avaliados durante o ensaio foram: as características organolépticas,o pH, o comportamento reológico e a concentração do ativo. A emulsão considerada estável foi submetida ao ensaio de liberação in vitro utilizando célula de difusão de Franz. A quantificação do cetoconazol na formulação e na solução receptora foi realizada por método espectrofotométrico no ultravioleta a 244 nm. Dentre as formulações testadas, somente aquela preparada com álcool cetoestearílico e estearato de polietilenoglicol (PEG20) manteve suas características físico-químicas estáveis durante o teste. O estudo de liberação in vitro demonstrou que o fármaco foi liberado do sistema gradualmente no decorrer do tempo, apresentando uma cinética pseudo zero ordem.

The goal of this work was to develop and assess the physicochemical stability of O/W emulsions containing 2.0% ketoconazole and to determine their in vitro release profile. These formulations were prepared with self-emulsifying bases that differed in their chemical characteristics. The stability of the system was assessed, as recommended in the Guide to Drug Product Stability Tests, over 3 months at 3 different temperatures (4ºC, 37ºC and 45ºC). The characteristics assessed during the test were the organoleptic properties, pH, rheological behavior and drug concentration. The most stable emulsion was subjected to an in vitro release test in a Franz diffusion cell system. The ketoconazole in both the formulation and receptor phase was determined by UV spectrophotometry at 244 nm. The O/W emulsion prepared with cetearyl alcohol and polyethylene glycol (PEG20) stearate was the only one that maintained its physicochemical characteristics throughout the test. The in vitro release test demonstrated that the drug was released gradually, exhibiting pseudo zero-order kinetics.

Atividade in vitro de antifungicos frente a isolados de Malassezia spp. de animais atendidos no Hospital Veterinário da Unipar / Actividad in vitro de antifúngicos frente a aislados de Malassezia spp. de animales atendidos en el Hospital Veterinario de la UNIPAR / In vitro activity of antifungals against malassezia spp. isolates from animals assisted in the Unipar Veterinary Hospital

A otite externa em cães, na grande maioria das vezes, tem participação de espécies de Malassezia ssp. Fatores predisponentes e perpetuantes tornam esta levedura bastante importante, pois normalmente ocasiona uma otite recidivante. Drogas antifúngicas são amplamente utilizadas, porém a sua eficácia muitas vezes fica aquém do desejado. Considerando estes fatos, este estudo teve como objetivo estudar as concentrações inibitórias mínimas in vitro de cetoconazol e clorexidine, frente a isolados de Malassezia spp. Testes in vitro foram realizados e verificou-se que o cetoconazol necessita de uma menor concentração para inibir o crescimento de Malassezia spp., quando comparado ao clorexidine, mostrando-se mais eficiente.

External otitis in dogs usually present the occurance of species of Malassezia ssp. Predisponent and perpetuating factors make this yeast very important as it usually results in recurrent otitis. Antifungal drugs are largely used, however, their efficacy is usually above the expected. By considering these factors, the minimum inhibitory in vitro concentrations of cetoconazol against Malassezia spp. isolates were studied. In vitro tests were conducted and cetoconazol presented to be more efficient as it demands a lower concentration to inhibit the growth of Malassezia spp. when compared to clorexidine.

La otitis externa en perros, la mayoría de las veces, tiene participación de especies de Malassezia spp. Factores que predisponen y perpetúan esta levadura muy importante, pues normalmente ocasiona una otitis recidivante. Drogas antifúngicas son ampliamente utilizadas, sin embargo su eficacia muchas veces se queda aquende del deseado. Considerando estos hechos, este estudio tuvo como objetivo estudiar las concentraciones inhibitorias mínimas in Vitro de cetoconazol y clorhexidina, frente a aislados de Malassezia spp. Testes in Vitro fueron realizados y se verificó que el cetoconazol necesita de una menor concentración para inhibir el crecimiento de Malassezia spp., cuando comparado al clorhexidina, presentándose más eficiente.

Desenvolvimento e estudos de estabilidade preliminares de emulsões O/A contendo Cetoconazol 2,0% / Development and Preliminary Stability Evaluations of O/W emulsion containing Ketoconazole 2.0%

O objetivo deste trabalho foi desenvolver emulsões O/A contendo Cetoconazol 2,0% e avaliar sua estabilidade preliminar por meio da análise de suas características físicoquímicas, tais como homogeneidade, formação de agregados, floculação, cremeação ecoalescência. As emulsões foram formuladas utilizando diferentes bases autoemulsionantes, compostas por álcool cetoestearílico, álcool etoxilado, álcool graxos superiores, ácidoesteárico, lanolina e outros. As emulsões foram submetidas aos testes de centrifugação, estresse térmico e ciclo gela-degela, e suas características organolépticas e físico-químicasforam avaliadas no início e no final de cada ensaio. Todas as amostras mantiveram sua homogeneidade após o teste de centrifugação, mas somente os sistemas preparados com ceras autoemulsionáveis constituídas por álcool graxos superiores (Polawax NF®) e Copolímero de Amônio Acriloil dimetiltaurato VP, Trilauril 4 fosfato, Sesquisosterato de metil glicose, Óleo de flores de verão e Tetradibutil pentaeritritil hidroxihidrocinamato deGlicerina (Hostacerin NCB®)mantiveram sua estabilidade após testes de estresse térmico e ciclo gela-degela.

The objective of this work was thedevelopment of O/W emulsions containing Ketoconazole 2.0% and to evaluate their preliminary stability by analyzing physical-chemical characteristics such as homogeneity,aggregation formation, flocculation, creaming and coalescence. The emulsions were formulated using different self-emulsifying bases, composed of cetearyl alcohol, ethoxylalcohol, higher fatty alcohol, stearic acid, lanolin and others. The O/W emulsions were evaluated by centrifugation test, thermal stress test, and freezing/defrosting cycles, and itsorganoleptic and physical-chemistry characteristics were analyzed before and after each assay. All samples maintained their homogeneity after the centrifugation test, but only the systems prepared with self emulsifying composed of higher fatty alcohol (Polawax NF®) and ammonium acryloyl dimethyl taurate copolymer, Trilauryl 4 Phosphate, methyl glucose Sesquistearate, Summer flower oleum and Glycerin tetradibutyl pentaerythritylhydroxyhydrocinnamate (Hostacerin NCB®) remained stable after the thermal stress test and freezing/defrosting cycles.

Determinação da segurança biológica do xampu de cetoconazol: teste de irritação ocular e avaliação do potencial de citotoxicidade in vitro / Determination of the biological reactivity of ketoconazole in shampoo: draize eye test and cytotoxity test

Cetoconazol é um agente antifúngico, que pode ser incorporado em diferentes formas farmacêuticas, como, por exemplo, xampus e cremes. O objetivo do trabalho foi avaliar a segurança biológica in vivo (teste de irritação ocular) e in vitro (teste de citotoxicidade) do xampu de cetoconazol degradado sob ação da luz. Para tanto, a formulação foi exposta à radiação UV-C (254 nm) e foram empregados dois métodos para a determinação quantitativa do cetoconazol: CLAE e ensaio microbiológico. Os resultados demonstraram alteração do cetoconazol em presença da luz - presença de picos secundários no cromatograma e diminuição da atividade antifúngica - entretanto, não demonstraram alteração na segurança biológica entre xampu de cetoconazol e xampu de cetoconazol contendo produtos de degradação.

Ketoconazole is an antifungal agent and can be incorporated into several dosage forms, as an example it could be mentioned shampoos and creams. The aim of this work was to assess the biological reactivity in vivo (Draize eye test) and in vitro (cytotoxity test) of ketoconazole in shampoo degradeted under action of light. The formulation was exposed to UV-C (254 nm) radiation and two methods were used for the quantitative determination of ketoconazole: HPLC and microbiological assay. The results showed alteration in ketoconazole in presence of light - secondary peaks in chromatogram and decrease in antifungal activity - however, no alteration on the biological reactivity between ketoconazole shampoo and ketoconazole shampoo containing degradation products was observed.