Reconhecimento de Candida albicans por fibroblastos murinos: envolvimento de receptores de reconhecimento de patógenos (TLR2 e CD14) e a proteína adaptadora MyD88 / The recognition of Candida albicans by fibroblasts: Toll like receptors pathogens (TLR2 and CD14) abt the MyD88 protein evaluation

Os tecidos pulpar e periodontal são frequentemente agredidos por fatores ambientais como calor, trauma mecânico e micro-organismos, sendo estes considerados o fator etiológico principal das periodontopatias e periapicopatias. Dentre as células residentes desses tecidos, especial atenção tem sido dada ao papel dos fibroblastos no desenvolvimento da resposta imune. Fibroblastos são células que respondem à estímulos microbianos e existem evidências do papel de receptores do tipo Toll (TLR) no reconhecimento desses estímulos. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo principal avaliar o reconhecimento de Candida albicans por fibroblastos gengivais e pulpares. Para tal, fibroblastos isolados a partir de tecido gengival e pulpar de camundongos do grupo controle e deficientes de TLR2, CD14 e MyD88 foram avaliados quanto à expressão de TLRs e moléculas de superfície, resposta proliferativa e produção de citocinas (TGF-β, IL-1β, TNF-α, IL-13 e IL-6), após a estimulação com agonistas de TLR2, TLR4 e C. albicans. Fibroblastos gengivais e pulpares, apesar de provenientes de tecidos diferentes, apresentaram características morfológicas semelhantes. Contudo, a cinética de crescimento dos fibroblastos gengivais deficientes de MyD88 foi mais lenta, e fibroblastos pulpares demoraram mais tempo para surgir a partir dos fragmentos de tecido. A ausência de TLR2 e da molécula adaptadora MyD88 não afetaram a produção de colágeno Tipo I pelos fibroblastos gengivais. Entretanto, fibroblastos deficientes de CD14 apresentaram baixa produção de colágeno. Ademais, os fibroblastos gengivais expressaram TLR2, TLR3, TLR4, assim como as moléculas de adesão ICAM-1 e CD44. A ausência de TLR2 e CD14 interferiu na resposta proliferativa de fibroblastos gengivais e pulpares, respectivamente. O reconhecimento de C. albicans por fibroblastos gengivais e pulpares modulou a produção das citocinas. A produção de TNF-α foi...

Pulpal and periapical tissue are frequently injured by heat, mechanical trauma and microorganisms, which are considered the main etiological factor of periodontal and endodontic diseases. Among these tissue resident cells, special attention has been given to fibroblasts in the immune response. Fibroblasts are cells that recognize pathogens through Toll like receptors (TLR). The aim of this study was to evaluate the recognition of Candida albicans by pulpal and gingival fibroblasts from TLR2, CD14, MyD88 knockout mice and control group mice. The results were analyzed concerning the expression of TLR(s) and surface molecules, proliferative response and citokynes production (TGF-β, IL-1β, TNF-α, IL-13 e IL-6) after the cells stimulation with TLR2, TLR4 and C.albicans agonists. Gingival and Pulpal fibroblasts, even isolated from different tissue, showed morphological similarities; however, gingival fibroblast deficient of MyD88 show lower proliferative response and pulpa l fibroblasts needed more time to detach from tissue fragments. The production of Type I collagen was affected in gingival cells deficient of CD14. Gingival fibroblasts expressed TLR2, TLR3, TLR4, and the adhesion molecules (ICAM-1 and CD44). The absence of TLR2 and CD14 interfered with the proliferative response of pulpal and gingival fibroblasts, respectively. The recognition of C. albicans by gingival and pulpal fibroblasts modulated the citokynes production. TNF-α production after the recognition of C. albicans was dependent from MyD88, CD14 and TLR2 molecules, whereas the production of IL-1β and IL-13 was dependent of TLR2.

Participação de fatores de crescimento e de citosinas nas alterações observadas na prole de ratas tratadas com o veneno do escorpião Tityus Bahiensis no período gestacional / Participation of growth factors and citokynes in alterations observed in offspring of rats treated with Tityus bahiensis scorpion venom during the pregnancy

No Brasil, o escorpionismo é um problema de saúde pública. O escorpião T. serrulatus é considerado o mais perigoso, mas um grande número de acidentes também acontece com o T. bahiensis. O objetivo do estudo foi verificar possíveis efeitos do veneno do escorpião T. bahiensis no desempenho reprodutivo materno e nos níveis de citocinas e fatores de crescimento em embriões de mães tratadas durante a gestação. Para os parâmetros reprodutivos foram utilizadas fêmeas prenhes injetadas com uma dose de 2,5mg/Kg (s.c.) do veneno no 5º (GD5) ou no 10º (GD10) dia gestacional. O grupo controle foi injetado com salina a 1,46% (1ml/Kg) em ambos os dias. No 21º dia gestacional, os filhotes foram retirados por laparotomia e divididos em dois grupos que receberam tratamento específico para a análise visceral e esquelética. Para avaliação dos níveis de citocinas e de fatores de crescimento, as fêmeas prenhes foram injetadas com salina (1ml/Kg), LPS (100μg/kg) ou veneno (2,5mg/Kg) no 10º (GD10) ou 16º (GD16) dia gestacional. Os filhotes foram removidos por laparotomia 6, 12 ou 24 horas após o tratamento materno. As amostras foram maceradas em um homogenizador de tecido e centrifugadas. Os níveis de citocinas e fatores de crescimento foram determinados por ensaios imunoenzimáticos. Nos parâmetros reprodutivos não houve alterações no peso materno durante a gestação, no número de corpos lúteos, número de filhotes, peso do útero e dos filhotes. Houve diminuição no número de implantações e reabsorções no grupo GD5. Houve aumento no peso das placentas em GD5 e GD10. No desenvolvimento dos filhotes foram observadas aumento no peso do coração e pulmão em GD5 e GD10 e no peso do fígado em GD10. Não foram observadas anomalias e malformações internas ou externas nos filhotes de ambos os grupos experimentais. Em GD10 não foram observadas alterações nos níveis de citocinas 6 horas após a aplicação do veneno, mas verificou-se diminuição do nível de INF-γ 24 horas depois...

In Brazil scorpionism is a public health problem. The scorpion T. serrulatus is considered the most dangerous, but a large number of accidents also occur with T. bahiensis. The objective of this work was to verify the possible effects of the T. bahiensis scorpion venom on the maternal reproductive parameters and on the cytokines levels and growth factors in embryos after the treatment of pregnancy females. To the reproductive parameters it was used pregnant females injected with a dose of 2.5mg/Kg (s.c.) of the venom. The experimental groups were injected with venom on the 5th (GD5) or on the 10th (GD10) gestational day. The control group was injected with NaCl 1.46% on both days. On the 21st gestational day, the pups were taken out by laparotomy and were divided into two groups that received specific treatments for skeletal or visceral analyses. To evaluate the cytokines levels, pregnant females were injected with saline (1ml/kg), LPS (100μg/kg) or crude venom (2.5mg/kg) on the 10th (GD10) or 16th (GD16) gestational day. The pups were removed by laparotomy 6, 12 or 24 hours after the mother’s treatment. The samples (embryo/placenta) were macerated by a tissue homogenizer and centrifuged. The cytokine levels were determined by enzyme immunoassays. In the reproductive parameters no changes were observed in the maternal weight during the gestational period, corpora lutea, number of pups, uterus weight and pups weight. There was a decrease on the number of implantation and resorption in GD5 There was alteration on the placenta’s weight in GD5 and GD10. In pups development there were observed alterations in the heart and lung weight on GD5 and GD10 and on the liver weight on GD10. There were not observed external or internal anomalies and malformations in the offspring of both experimental groups. The cytokines levels were not alterated after 6 hours in GD10. In GD16 there was an increase in the IL-1α levels...