Estudo citofotométrico da expressão dos marcadores tumorais Ki-67 e CD34 no adenocarcinoma de próstata / Cytophotometric expression of tumor antigen markers Ki-67 and CD-34 in prostate adenocarcinoma

OBJETIVO: Quantificar a porcentagem da imunomarcação no índice de marcagem e densidade óptica do Ki-67 e CD34 no adenocarcinoma de próstata e compará-las entre si. MÉTODOS: Foram estudados, através de imunoistoquímica, o Ki-67 e o CD34 em 34 casos de adenocarcinoma de próstata provenientes de prostatectomia radical no período de 2000 a 2005 realizado no Hospital Regional do Gama em Brasília. Estes marcadores foram quantificados através do software SAMBA 4000 ® Sistema de Análise Microscópica de Busca Automática e do software IMMUNO® para análise das variáveis índice de marcagem e densidade óptica. Para avaliação da associação entre as expressões do marcador, foi estimado o coeficiente de correlação de Spearman. Para a comparação do tipo de lesão, foi usado o teste t de Student em amostras pareadas e não paramétrico de Wilcoxon. RESULTADOS: Dos 34 blocos que foram para leitura dos marcadores tumorais, 15 marcaram expressão com Ki-67, 34 com CD34 e 14 com ambos os marcadores. O índice de marcagem do CD34 teve valor mediano de 72,72 por cento, valor mínimo 5,14 por cento e valor máximo 88,81 por cento. O índice de marcagem do Ki-67 teve mediana de 73,78 por cento, mínimo de 16,87 por cento e máximo de 87,47 por cento. A densidade óptica do CD34 teve mediana de 48,33, mínimo de 35,65 e máximo de 85,86. Na densidade óptica do Ki-67 o valor da mediana foi 40,03 sendo a mínima de 21,53 e a máxima de 52,43. CONCLUSÃO: A expressão citofotométrica do Ki-67 teve índice médio de marcação de 64,04 por cento e o CD34 de 61,64 por cento. A expressão citofotométrica da densidade óptica média do Ki-67 foi de 39,49 e no CD34 de 53,69. Há diferença significativa entre a imunomarcação do Ki-67 e CD34 em relação à densidade óptica (p=0,025), não havendo diferença significativa no índice de marcagem (p=0,470).

OBJECTIVE: To quantify the percentage of immunostaining through the labeling index as well as the optical density of Ki-67 and CD34 in prostate adenocarcinoma and compare the results between markers. METHODS: Markers Ki-67 and CD34 were studied using immunohistochemistry in 34 cases of prostate adenocarcinoma from radical prostatectomies performed at the Hospital Regional do Gama in Brasilia, Brazil from 2000 through 2005. Those markers were quantified using the SAMBA 4000® software - Automated Scanning Microscopic Analysis System - and the IMMUNO® software in the analysis of the variables labeling index and optical density. Spearman's correlation coefficient was estimated in order to evaluate the association between the expression levels of the markers. For the comparison of lesion types, Student's paired t-test and the nonparametric Wilcoxon test were used. RESULTS: Of the 34 blocks referred for the study of the tumor markers, 15 were positive for Ki-67, 34 showed CD34 expression, and 14 were positive for both markers. The median value for the labeling index of CD34 was 72.72 percent; the minimum was 5.14 percent and the maximum, 88.81 percent. The median for the Ki-67 labeling index was 73.78 percent, while the minimum was 16.87 percent, and the maximum, 87.47 percent. The median value for the optical density of CD34 was 48.33, the minimum was 35.65 and the maximum, 85.86. For the optical density of Ki-67, the median was 40.03, while the minimum and maximum values were 21.53 and 52.43, respectively. CONCLUSION: The cytophotometric expression of Ki-67 had a mean labeling index of 64.04 percent, and the mean CD34 labeling index was 61.64 percent. The cytophotometric expression of the mean optical density of Ki-67 was 39.49, while for CD34 it was 53.69. There was a significant difference between Ki-67 and CD34 immunostaining with respect to optical density (P=0.025); no significant difference occurred regarding labeling index (P=0.470).

Significado clínico-patológico das expressões citofotométricas do Ki-67 e Caspase-3 no carcinoma de células escamosas do esôfago / Clinicopathologic significance of the Ki-67 and Caspase-3 cytophotometric expressions in the esophageal squamous cell carcinomal

RACIONAL: A escolha da forma de tratamento do carcinoma de células escamosa de esôfago ainda hoje é orientada pelo estadiamento tumoral, onde as características histopatológicas do tumor são o maior determinante. Parale-lamente, desenvolvem-se estudos para entender o comportamento da biologia tumoral por método imunoistoquímico de quantificação manual, avaliando a ati-vidade proliferativa ou apoptótica do tecido em análise. As desvantagens conti-das no modo manual fizeram surgir e desenvolver método computadorizado de análise de imagem. OBJETIVOS: Verificar as expressões dos marcadores KI-67 e Caspase-3 e correlacioná-las com as características clínico-patológicas do tumor. MÉTODOS: Foram estudados 29 blocos parafinados provenientes de pa-cientes portadores de carcinoma de células escamosas de esôfago submetidos à esofagectomia e pertencentes a acervos de laboratórios de patologia. Proce-deu-se preparo das lâminas por técnica imunoistoquímica convencional. A quantificação da imunorreatividade às proteínas Ki-67 e Caspase-3 foi realizada pelo software de análise de imagem computadorizada SAMBA (Systeme d'Analyse Microphotometrique a Balayage Automatique) através do índice de marcagem encontrado. RESULTADOS: Predominaram na amostra o sexo mascu-lino (82,7 por cento); maiores de 50 anos; tumores moderadamente diferenciados (68,98 por cento); estágio III (72,42 por cento); lesões >3cm e localizadas no ⅓ inferior do ór-gão. Os índices médios de marcagem identificados foram de 62,05 por cento para o Ki-67 e 86,06 por cento para a Caspase-3, e não mostraram correlação com as caracterís-ticas clínico-patológicas como sexo, idade, estadiamento tumoral, grau de pro-fundidade da lesão e comprometimento linfonodal. Houve significante diferença de expressão do Ki-67 entre os graus histológicos (P=0,047) e correlação entre os índices dos marcadores estudados (r=0,41 e P =0,032). CONCLUSÃO: Na presente investigação as atividades das proteínas estudadas se mostraram in-tensas sendo que a da Caspase-3 foi superior ao Ki-67 mas sem correlação com as características clínico-patológicas.

BACKGROUND: The esophageal squamous cell carcinoma treatment strategy is still based on the tumor staging, where tumor histopathologic charac-teristics are the major determinants. In parallel, studies have been developed in order to better understand the tumor biology using immunohistochemical meth-ods with manual quantification evaluating the proliferative and apoptotic activi-ties of the cells. The disadvantages related to the manual method rose the de-velopment of computerized ways to do the image analysis. OBJETIVES: To verify the expressions of the markers Ki-67 (proliferative) and Caspase-3 (apoptotic) and to correlate them with the clinic and pathologic characteristics of the tumor. METHODS: Twenty-nine paraffin embedded blocks were studied, each one con-taining tissue samples from patients with esophageal squamous cell carcinoma submitted to esophagectomies. The clinic and pathological data were obtained from histopathologic informations and from medical records. The slides were prepared following the routine immunohistochemical method until the point to utilize the specific antibodies (MIB-1 and CPP32). Positive quantification of the immunoreactivity to the proteins Ki-67 and Caspase-3 was performed by the software for computerized image analysis SAMBA (Systeme d' Analyse Micro-photometrique a Balayage Automatique). Statistical analysis was done having P<0.05 considered significant. RESULTS: There was predominance of males (82.7 percent); age over 50 years; moderately differentiated tumors (68.98 percent); tumor stage III (72.42 percent); diameter of lesions >3cm; and lesions located in the lower third of the organ. The mean score indexes found were 62.05 percent for Ki-67 and 86.06 percent for Caspase-3 and there was no correlation with the clinic or pathologi-cal characteristics as gender, age and tumor staging. There was significant dif-ference of Ki-67 expression among the histological grades (P=0.047) and corre-lation between the evaluated indexes (r=0.41 and P=0.032). CONCLUSION: The protein expressions were high and the Caspase-3 protein activity was higher than the Ki-67, without correlation with clinic or pathological characteristics as gender, age, tumor staging, grade of lesion depth and lymph node invasion.