Effectiveness of agricultural extension's farmer field schools (FFS) in Pakistan: the case of citrus growers of Punjab province / Eficácia das escolas de extensão agrícola de campo (FFS) no Paquistão: o caso dos produtores de frutas cítricas da província de Punjab

ABSTRACT: Citrus is one of the major exported fruits of Pakistan. Especially Kinnow cultivar is famous across the globe because of its aroma and taste. The overall production of citrus is reported as half of the potential because of the non-adoption of research-based practices and lack of agricultural extension services and training of the citrus growers. In the last few years, the department of agricultural extension has started training programs called Farmer Field Schools (FFS) for citrus growers in the major citrus growing zone of the Punjab province, i.e., Sargodha region. This research was conducted in the Sargodha district to evaluate the knowledge and skills gained by the farmers from the FFS. The interview schedule was designed for the purpose of data collection. The data was collected from 120 farmers randomly selected from 15 FFS in the study area. All the respondents were participants of the FFS. The data was analyzed using Statistical Package for Social Sciences (SPSS). The Results of the study showed that 40% of the farmers learned about citrus verities, one-third of respondents learned about the management of new plants/orchards, 28% of the respondents got knowledge about the cultivation of fruits, and one-fourth of respondents acquired knowledge and skills about layout and management of citrus orchards. These findings conclude that training course has a positive influence on farmers' farm management skills; hence emphasize on its persistence and further improvement by the concerned authorities.

RESUMO: Os citros são as principais frutas exportadas do Paquistão, especialmente, a cultivar Kinnow é famosa em todo o mundo por causa de seu aroma e sabor. A produção geral de citros é relatada como a metade do potencial devido a não adoção de práticas baseadas em pesquisas e a falta de serviços de extensão agrícola e treinamento dos citricultores. Nos últimos anos o departamento de extensão agrícola iniciou programas de treinamento chamados Farmer Field Schools (FFS) para citricultores na maior zona de cultivo de citros da província de Punjab, no distrito de Sargodha. Esta pesquisa é conduzida no distrito de Sargodha para avaliar o conhecimento e as habilidades adquiridas pelos agricultores da FFS. O cronograma de entrevistas foi elaborado para fins de coleta de dados. Os dados foram coletados de 120 agricultores aleatoriamente de 15 FFS na área de estudo. Todos os entrevistados eram participantes da FFS. Os dados foram analisados ​​por meio do programa estatístico "Statistical Package for the Social Sciences (SPSS"). Os resultados do estudo mostraram que 40% dos agricultores aprenderam informações importantes sobre citros, um terço dos entrevistados aprenderam sobre o manejo de novas plantas / pomares, 28% dos entrevistados aprenderam sobre o cultivo de frutas e um quarto dos entrevistados adquiriu os conhecimentos e habilidades sobre layout e manejo de pomares de citros. Essas descobertas concluem que o curso de treinamento tem uma influência positiva nas habilidades de gestão das propriedades; portanto, suporta a necessidade de sua persistência e melhorias adicionais pelas autoridades para alavancar ainda a produtividade essa atividade no futuro.

Performance of the pineapple sweet orange on different rootstocks / Desempenho da laranja doce abacaxi em diferentes porta-enxertos

This study aimed at evaluating the agronomical performance of 'Pineapple' sweet orange grafted on ten rootstocks, in 2011-2017 harvests, so as to recommend the best combinations to be commercially explored in citrus growing regions in Bahia and Sergipe states, Brazil. An experiment wasinstalled to test ten rootstock for 'pineapple' sweet orange: 'Santa Cruz' Rangpur lime, 'Red Rough' Lemon, 'Orlando' Tangelo, 'Sunki Tropical' Mandarin, 'Swingle' citrumelo, the citrandarins 'Indio' and 'Riverside' and the hybrids HTR-051, LVKxLCR-010 and TSKxCTTR-002. The trial was installed in 2008 in the municipalityof Umbauba in Sergipe. The experimental design was complete randomized blocks with four replications and two plants per plot. Plant spacing was 6 x 4 m which corresponds to 416 plants per hectare and the orchard was rainfed and followed conventional management. The following agronomical parameters were evaluated: vegetative growth, drought tolerance, yield and physico-chemical quality of fruits as well as the abundance of phytophagous mites. Both hybrids LVK x LCR ­ 010 and TSKC x CTTR-002 and the 'Santa Cruz' rangpur lime bestowed higher tolerance to the dry period on the 'Pineapple' orange tree, by comparison with higher water deficit susceptibility conferred by the 'Orlando' tangelo and the 'Swingle' citrumelo. Rootstocks HTR-051, 'Riverside' citrandarin, 'Swingle' citrumelo and TSKC x CTTR-02 induced plants to remain small and, thus, showed aptitude for culture densification. Cumulative yield of the 'Pineapple' orange was higher on rootstocks 'Red Rough' lemon and 'Santa Cruz' Rangpur lime, the hybrid LVK x LCR-010 and 'Sunki Tropical'. Yield efficiency was not influenced by the rootstocks. Physico-chemical quality of fruits of 'Pineapple' orange is affected by the rootstocks and meets the requirements of juice industries. Regarding plant resistance, the rootstocks did not influence the population density of mites P. oleivora, E. banksi and T. mexicanus on 'Pineapple' oranges. Results show that both rootstocks 'Red Rough' lemon and 'Santa Cruz' rangpur lime conferred high regularity to 'Pineapple' orange trees in citrus growing regions in Bahia and Sergipe states

O objetivo deste trabalho foi avaliar o desempenho agronômico da laranjeira 'Pineapple' em combinação com dez porta-enxertos, nas safras 2011-2017, com vistas à recomendação das melhores combinações para exploração comercial na região citrícola dos estados da Bahia e de Sergipe. O experimento consistiu de laranja doce 'pineapple' enxertado nos porta-enxertos limoeiros 'Cravo Santa Cruz', limoeiro 'Rugoso Vermelho', tangeleiro Orlando, tangerineira 'Sunki' Tropical, citrumelo 'Swingle', citrandarins 'Indio', 'Riverside', além dos híbridos HTR ­ 051 e LVK x LCR ­ 010 e 'TSKC x CTTR ­ 002'. O trabalho foi instalado em 2008, no município de Umbaúba, em Sergipe, no delineamento experimental de blocos ao acaso, com quatro repetições, duas plantas por parcela, no espaçamento de 6m x 4m, correspondendo a uma população de 416 plantas· ha-1, com manejo em sistema de produção convencional, sem o uso de irrigação. Os seguintes parâmetros agronômicos foram avaliados: crescimento vegetativo, tolerância à seca, produção e qualidade físico-química de frutos, além da abundância de ácaros fitófagos. Os híbridos LVK x LCR - 010 e TSKC x CTTR - 002, assim como o limoeiro 'Cravo Santa Cruz', conferiram um maior nível de tolerância ao período seco, em contraste com maior suscetibilidade à seca relacionada ao tangelo 'Orlando' e ao citrumelo 'Swingle'. Os porta-enxertos HTR - 051, citrandarin 'Riversidade', citrumelo 'Swingle' e TSKC x CTTR - 002 induziram menor porte às plantas, demonstrando aptidão ao adensamento de plantio. A produção acumulada da laranjeira 'Pineapple' foi maior sobre os porta-enxertos limoeiros 'Rugoso Vermelho' e 'Cravo Santa Cruz', híbrido LVK x LCR - 010 e tangerineira 'Sunki Tropical'. A eficiência produtiva não foi influenciada pelos porta-enxertos. A qualidade física e química de frutos da laranjeira 'Pineapple' foi afetada pelos porta-enxertos e atendeu aos padrões exigidos pela indústria de sucos. Os porta-enxertos estudados não causaram variações nos níveis de populações dos ácaros Phyllocptruta oleivora, Eutetranychus banksi e Tetranychus mexicanus. Com base nos resultados conclui-se que os limoeiros 'Rugoso Vermelho' e 'Cravo Santa Cruz' determinam maior regularidade de produção de frutos à laranjeira 'Pineapple' nas regiões produtoras da Bahia e de Sergipe

Occurrence and distribution of Diaphorina citri (Hemiptera: Liviidae) and Tamarixia radiata (Hymenoptera: Eulophidae) in Pará state, Brazil / Ocorrência e distribuição de Diaphorina citri (Hemiptera: Liviidae) e Tamarixia radiata (Hymenoptera: Eulophidae) no estado do Pará

This study presents and discusses the results of a survey for the presence of Diaphorina citri Kuwayama and its natural enemies in Citrus spp. citrus and Murraya sp. myrtle plants in Pará State, Brazil. From 2013 to 2017, observations were made in five mesoregions of the State, and where D. citri was present, branches were examined to quantify eggs, nymphs and mummies with parasitoid emergence holes and to obtain parasitoids. D. citri adults were used to detected the bacterium through nested polymerase chain reaction (NESTED-PCR). Psyllids were found in citrus and myrtle plants. A total of 583 parasitoid specimens of Tamarixia radiata (Waterston) were obtained. The bacterial detection test was negative for Candidatus Liberibacter spp. Psyllids and parasitoids were present in the Lower Amazon, Metropolitan area, Northeastern Pará, Southeastern Pará and Southwestern Pará mesoregions. The presence of D. citri in citrus, with was previously absent in this host, alters the risk situation for Huanglongbing (HLB) in the State. These results will aid in developing preventive or containment measures through phytosanitary protection.(AU)

No presente estudo, são apresentados e discutidos os resultados de levantamento para a presença de Diaphorina citri Kuwayama e inimigos naturais em plantas de citros Citrus spp. e murta Murraya sp. no estado do Pará. No período de 2013 a 2017 foram realizadas observações em cinco mesorregiões do estado. Na presença de D. citri, ramos foram coletados com a quantificação de ovos, ninfas, múmias com orifício de emergência de parasitoide e obtenção de parasitoides. Adultos de D. citri foram analisados para a detecção da bactéria por meio de nested polymerase chain reaction (NESTED-PCR). O psilídeo foi constatado em citros e murta. Foram obtidos 583 exemplares do parasitoide Tamarixia radiata (Waterston). O teste de detecção da bactéria foi negativo, indicando ausência de Candidatus Liberibacter spp. O psilídeo e o parasitoide estão presentes nas mesorregiões do Baixo Amazonas, Metropolitana, Nordeste Paraense, Sudeste Paraense e Sudoeste Paraense. A presença de D. citri em citros, até então ausente nesse hospedeiro, altera a situação de risco do Huanglongbing (HLB) para o Estado. Esses resultados auxiliarão na formulação de medidas preventivas ou de contenção pela defesa fitossanitária.(AU)

Survival analyses of Diaphorina citri immatures on young citrus orchard in São Paulo, Brazil / Análises de sobrevivência de imaturos de Diaphorina citri em pomar jovem de citros em São Paulo, Brasil

The survival of eggs and nymphs of Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae) was estimated on young plants (< 1 year) of Citrus sinensis (cultivar Valencia) grafted on Citrus limonia in 3 seasons (Winter and Spring 2013; and Autumn 2014) in Ribeirão Preto, São Paulo State, Brazil. Young shoots with eggs were selected from natural or artificial infestations. Eggs, small nymphs (1st to 3rd instar), and large nymphs (4th and 5th instar) were counted every 3 days. Shoots with large nymphs were caged until the emergence of the adults. The lowest eggs and nymph survival were observed during Winter (0.0%), and Autumn (0.4%); the highest survival rates were recorded during Spring (12.2%). The biotic factor of mortality identified was the parasitism of large nymphs by Tamarixia radiata Waterston (Hymenoptera: Eulophidae), observed in all seasons. Air temperatures (minimum and maximum), and air relative humidity (minimum) could not explain the immature survival differences between Spring (12.2%) and Autumn (0.4%). Rainfall during Spring (165 mm) was higher than during Autumn (48 mm) and may have favored the survival of D. citri in the Spring. Adverse abiotic factors seem to be more important on immature D. citri survival than the biotic factor (parasitism).(AU)

A sobrevivência de ovos e ninfas de Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae) foi estimada em plantas jovens (< 1 ano) de Citrus sinensis (cultivar Valencia) enxertadas em Citrus limonia em 3 estações (inverno e primavera de 2013, e outono de 2014) em Ribeirão Preto, estado de São Paulo, Brasil. Ramos novos com ovos foram selecionados a partir de infestações naturais ou artificiais. Ovos, ninfas pequenas (ínstar 1 ao 3) e ninfas grandes (ínstar 4 e 5) foram contados a cada 3 dias. Ramos com ninfas grandes foram colocados em gaiolas até a emergência dos adultos. As menores sobrevivências de ovos e ninfas foram observadas no inverno (0,0%) e no outono (0,4%), e a maior sobrevivência ocorreu na primavera (12,2%). O principal fator biótico de mortalidade identificado foi o parasitismo de ninfas grandes por Tamarixia radiata Waterston (Hymenoptera: Eulophidae), observado em todas as estações. As temperaturas (mínima e máxima) e umidade relativa (mínima) do ar não explicaram as diferenças nas sobrevivências de imaturos entre a primavera (12,2%) e o outono (0,4%). As chuvas na primavera (165 mm) foram maiores que no outono (48 mm) e podem ter favorecido a sobrevivência de D. citri na primavera. Fatores abióticos adversos parecem ser mais importantes na sobrevivência de imaturos de D. citri que o fator biótico (parasitismo).(AU)

Oviposition of fruit flies (Diptera: Tephritidae) and its relation with the pericarp of citrus fruits / Oviposição de moscas-das-frutas (Diptera: Tephritidae) e sua relação com o pericarpo de frutos cítricos

Abstract Fruit flies (Diptera: Tephritidae) represent a threat to fruit growing worldwide, mainly the citrus culture, however, biological studies show that fruit flies are not perfectly adapted to this host. This study investigated oviposition of Anastrepha fraterculus (Wiedemann, 1830) and Ceratitis capitata (Wiedemann, 1824) and its relation with the pericarp of citrus fruits. We evaluated the relationship between depth of oviposition of A. fraterculus and C. capitata and epicarp thickness of orange [Citrus sinensis (L.) Osbeck)] 'Navelina' and tangerine [C. reticulata (L.)] 'Clemenules' and the influence of fruit mesocarp of tangerine 'Clemenules' on oviposition of these species. The study was conducted under controlled conditions of temperature (25 ± 2 °C), relative humidity (70 ± 10% RH) and photophase (12 h). A. fraterculus and C. capitata laid their eggs in the flavedo region of orange 'Navelina' and between the albedo and flavedo of tangerine 'Clemenules'. When fruits with mesocarp exposed were offered, there was no oviposition by both fruit fly species. The results show that epicarp thickness of citrus fruits did not influence oviposition of A. fraterculus and C. capitata as oviposition did not occur only in the presence of the mesocarp, suggesting that other factors are involved in oviposition of these species.

Resumo As moscas-das-frutas (Diptera: Tephritidae) representam um risco à fruticultura mundial, especialmente na cultura dos citros, entretanto estudos biológicos demonstram que as moscas-das-frutas não estão perfeitamente adaptadas à estes hospedeiros. Este estudo investigou a oviposição de Anastrepha fraterculus (Wiedemann, 1830) e Ceratitis capitata (Wiedemann, 1824) e sua relação com o pericarpo de frutos cítricos. Foi avaliada a relação entre a profundidade de oviposição de A. fraterculus e de C. capitata e a espessura do epicarpo dos frutos de laranjeira [Citrus sinensis (L.) Osbeck)] 'Navelina' e tangerineira [C. reticulata (L.)] 'Clemenules' e a influência do mesocarpo de frutos de tangerineira 'Clemenules' na oviposição destas espécies. O estudo foi conduzido em condições controladas de temperatura (25 ± 2 °C), umidade relativa (70 ± 10%) e fotofase (12 horas). A. fraterculus e C. capitata depositaram ovos no flavedo de frutos de laranjeira 'Navelina' e entre o flavedo e o albedo de frutos de tangerineira 'Clemenules'. Quando oferecido frutos com mesocarpo exposto, não houve oviposição por ambas as espécies de mosca. Os resultados demonstram que a espessura do epicarpo de frutos cítricos não influenciou a oviposição de A. fraterculus e de C. capitata, a qual não ocorreu na presença apenas do mesocarpo, sugerindo que outros fatores estão envolvidos na oviposição por estas espécies.

Comparison of protocols for the extraction of genomic DNA from Sharpshooters (Hemiptera: Cicadellidae) for the detection of Xylella fastidiosa / Comparação de protocolos para a extração de DNA genômico de cigarrinhas (Hemiptera: Cicadellidae) para a detecção de Xylella fastidiosa

The bacterium Xylella fastidiosa, the causal agent of citrus variegated chlorosis (CVC), is dependent on vector insects for its spread and infection of citrus hosts. The insects, leafhoppers (Hemiptera: Cicadellidae) transmit the bacteria to healthy plants after feeding on infected plants. The objective of this study was to develop and compare methods for extracting genomic DNA from sharpshooters to detect X. fastidiosa. The DNA extraction from insects was performed according to a phenol-chloroform based DNA extraction in conjunction with two commercial kits, Dneasy® Plant Mini Kit and blood & tissue Dneasy® Handbook (Qiagen Inc., Valencia, CA, USA). The heads of the following species of sharpshooter were used: Dilobopterus costalimai, Acrogonia citrina, Oncometopia facialis, Bucephalogonia xanthophis, Macugonalia leucomelas and Homalodisca ignorata. Based on the numeric differences between independent samples, the results showed the use of the phenol:chloroform extraction method (36/50 positives) and the DNeasy® Plant Mini Kit (33/50) resulting in the most detections of X. fastidiosa from leafhopper samples. As these two methods detected Xylella in the greatest number of infected samples, they may be more efficient to use for detection purposes in leafhoppers.(AU)

A bactéria Xylella fastidiosa, agente causal da clorose variegada dos citros, é dependente da ação de insetos vetores para sua disseminação e infecção em plantas cítricas hospedeiras. Os insetos cigarrinhas (Hemiptera: Cicadellidae) transmitem a bactéria para plantas sadias depois de se alimentarem das plantas contaminadas. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e comparar métodos de extração de DNA genômico de cigarrinhas a fim de detectar a bactéria X. fastidiosa. A extração de DNA foi realizada de acordo com protocolo à base de fenol-clorofórmio em conjunto com dois kits comerciais: Dneasy® Plant Mini Kit and Blood & Tissue Dneasy® Handbook (Qiagen Inc., Valencia, CA, USA). Utilizou-se a cabeça das seguintes espécies de cigarrinhas: D. costalimai, A. citrina, O. facialis, B. xanthophis, M. leucomelas e H. ignorata. Com base nas diferenças numéricas entre as amostras independentes, os resultados mostraram o uso do método de extração fenol-clorofórmio (36/50 positivos) e o kit comercial DNeasy® Plant Mini Kit (33/50) resultando nas maiores detecções de X. fastidiosa nas amostras de cigarrinhas. Como esses dois métodos detectaram a presença de X. fastidiosa no maior número de amostras infectadas, eles podem ser mais eficientes para o uso na detecção em cigarrinhas.(AU)

Lethal and sublethal effects of pesticides used in Brazilian citrus groves on Panonychus citri (Acari: Tetranychidae) / Efeitos letais e subletais de agrotóxicos utilizados em citros sobre o ácaro Panonychus citri (Acari: Tetranychidae)

Pesticides have been blamed as the principal factor responsible for biological disequilibrium favoring the population increase of Panonychus citri (McGregor) in Brazilian citrus groves. In order to generate subsidies for the integrated management of this pest, we evaluated the lethal and sublethal effects of pesticides used in citrus on P. citri. We tested 18 pesticides by evaluating mortality of adult female, egg viability and adult avoidance. For imidacloprid, pyriproxyfen, dimethoate, deltamethrin, lambda-cyhalothrin and lime sulfur, the principal insecticides used in Brazilian orchards, the oviposition behavior and the incidence of adult females on discontinuous pesticide residues were evaluated. The pesticides which caused adult P. citri mortality were: abamectin (94%), dimethoate (86%), lime sulfur (69%), fenpropathrin (44%), diafenthiuron (25%) and lambda-cyhalothrin (23%). The pesticides affecting egg viability were: fenpropathrin (53%), dimethoate (30%) and lime sulfur (22%). Fenpropathrin, lambda-cyhalothrin and lime sulfur caused repellent effects of 55, 45 and 22%, respectively. P. citri preferred areas untreated with deltamethrin, lambda-cyhalothrin and lime sulfur for oviposition and permanence, but the species could not distinguish areas treated with imidacloprid, pyriproxyfen and dimethoate. The insecticides abamectin, dimethoate and diafenthiuron affected survival and did not cause changes in P. citri behavior. These pesticides should be used mainly in periods P. citri occurs. On the other hand, fenpropathrin, lambda-cyhalothrin, lime sulfur and deltamethrin affect dispersal behavior, oviposition and P. citri incidence and their use should be avoided.(AU)

O intenso uso de pesticidas na citricultura tem sido apontado como o principal fator responsável por desequilíbrios biológicos, favorecendo o aumento populacional de Panonychus citri (McGregor) na citricultura brasileira. Para gerar subsídios ao manejo integrado dessa praga, avaliaram-se os efeitos letais e subletais de agrotóxicos utilizados em citros sobre P. citri. Avaliaram-se 18 agrotóxicos na mortalidade de fêmeas adultas, viabilidade de ovos e repelência de P. citri. Foram também avaliados o comportamento de oviposição e a incidência de P. citri em superfícies com áreas tratadas e não tratadas com imidacloprid, piriproxifem, dimetoato, deltametrina, lambda-cialotrina e calda sulfocálcica, por serem os principais inseticidas utilizados nos pomares brasileiros. Os pesticidas que causaram mortalidade em adultos de P. citri foram abamectina (94%), dimetoato (86%), calda sulfocálcica (69%), fempropatrina (44%), diafentiurom (25%) e lambda-cialotrina (23%). Os pesticidas que afetaram a viabilidade de ovos foram fempropatrina (53%), dimetoato (30%) e calda sulfocálcica (22%). Quanto aos efeitos subletais, fempropatrina, lambda-cialotrina e calda sulfocálcica ocasionaram repelências de 55, 45 e 22%, respectivamente. P. citri preferiu áreas não tratadas com deltametrina, lambda-cialotrina e calda sulfocálcica para oviposição e permanência. Em contraste, P. citri não foi capaz de distinguir superfícies tratadas com imidacloprid, piriproxifem e dimetoato. Os inseticidas abamectina, dimetoato e diafentiurom afetaram a sobrevivência e não causaram mudanças no comportamento de P. citri, podendo ser utilizados principalmente em períodos que P. citri ocorre. Em contrapartida, fempropatrina, lambda-cialotrina, calda sulfocálcica e deltametrina afetaram o comportamento de dispersão e oviposição de P. citri e deveriam ser evitados.(AU)

Farmer field school's training on knowledge level of citrus growers regarding improved production practices / Impacto do treinamento da escola de campo para agricultores quanto ao nível de conhecimento dos produtores de citros em relação às melhores práticas de produção

ABSTRACT: The major objective of this paper was to assess the impact of the Farmer field school (FFS) training program on the knowledge level of farmers (citrus growers) regarding improved citrus production practices. Distract Sargodha was the targeted research area for this study being the leading producer of citrus in Pakistan. Quantitative data were collected through interview schedule and analyzed through Statistical Package for Social Sciences (SPSS). It was conclude that young people were more tend towards getting training under FFS program than old age farmers. Educated farmers were in majority in FFS farmers while; conversely illiterate farmers were in majority in the category of non-FFs farmers. In category of FFS farmers livestock farming was their primary income as reported by majority (31.3%) of FFS farmers and in the case of non-FFS farmer's crop sale was their primary income source as reported by 28.4% of non-FFs farmers. In addition to that both FFS and non-FFS farmers also earn income from nonfarm sources like business, job, foreign remittances and labour. FFS training program had positive and significant impact on the knowledge level of farmers regarding citrus production and protection practices. T-test statistics showed highly significant (P<0.05) difference in knowledge level of FFS farmers and non-FFS farmers.

RESUMO: O objetivo principal deste trabalho foi avaliar o impacto do programa de treinamento da escola de campo para agricultores (FFS) quanto ao nível de conhecimento dos agricultores (produtores de citros) em relação às melhores práticas de produção de citros. O Distrito de Sargodha foi a área de pesquisa escolhida para este estudo por ser o principal produtor de citros no Paquistão. Os dados quantitativos foram coletados por meio de entrevistas e analisados por meio do Statistical Package for Social Sciences (SPSS). Conclui-se que os jovens eram mais tendenciosos à obtenção de treinamento através do programa FFS do que os agricultores mais velhos. Os agricultores escolarizados estavam, em sua maioria, na categoria de agricultores FFS, enquanto que os agricultores analfabetos estavam, na categoria de não FF. Na categoria de FFS, a pecuária se mostrou o principal rendimento, conforme relatado pela maioria dos agricultores (31,3%), enquanto que, em 28% dos agricultores não-FFs, a principal fonte de renda era a venda de suas colheitas. Além disso, tanto os agricultores FFS como não FFS também ganham renda com fontes não agrícolas. O programa de treinamento FFS teve impacto positivo e significativo sobre o nível de conhecimento dos agricultores em relação às práticas de produção e proteção de citrus. O teste-T mostrou diferença altamente significativa (P<0,05) no nível de conhecimento dos agricultores FFS dos não-FFS.

Caracterização do secretoma de cepas de Xylella fastidiosa / Characterization of the secretome Xylella fastidiosa strains

As doenças causadas pelo fitopatógeno Xylella fastidiosa, uma bactéria Gram-negativa, devem-se aos seus múltiplos fatores de virulência, tais como formação de biofilme, secreção de enzimas de degradação da parede celular do xilema (CWDE), expressão de proteínas de adesão e produção de vesículas de membrana externa (OMVs). Esses fatores de virulência são controlados por uma via de sinalização mediada por DSF (fatores de sinalização difusíveis de natureza lipídica) e relacionada com percepção de quórum. Nesse trabalho, tivemos como objetivo ampliar a caracterização do secretoma de cepas selvagens e mutantes de X. fastidiosa para evidenciar proteínas e metabólitos potencialmente associados à adaptação ao hospedeiro, virulência e patogenicidade. Desenvolvemos, paralelamente, três estudos empregando como abordagens metodológicas a proteômica, a metabolômica e a transcritômica. No primeiro estudo, comparamos o secretoma (exoproteoma) da cepa Temecula1 selvagem (WT) e do mutante no gene da sintase de DSF (ΔrpfF), o qual exibe fenótipo de hipervirulência em videiras. A este estudo associamos a comparação dos transcritomas dessas cepas. Os resultados mostraram que, mesmo no cultivo in vitro, X. fastidiosa expressa e secreta fatores de virulência previamente conhecidos (lipases-esterases e proteases), além de toxinas (microcinas) que, supostamente, teriam papel de controlar bactérias competidoras pelo mesmo nicho. No segundo estudo caracterizamos a composição de OMVs secretadas no cultivo in vitro por X. fastidiosa Fb7 e 9a5c (cepas isoladas de laranjeiras) e Temecula1 (cepa isolada de videira). Demonstramos que Fb7 produz até 57% mais OMVs que 9a5c e Temecula1 e identificamos um total de 202 proteínas distintas nas OMVs produzidas pelas 3 cepas, ampliando consideravelmente o número de proteínas secretadas por meio de OMVs descrito, até então, para X. fastidiosa. Entre as proteínas enriquecidas, citamos adesinas afimbriais, porinas, lipoproteínas, hidrolases (lipases/esterases, proteases e peptidases) e uma pectina-liase putativa. Destacamos a detecção da enzima L-ascorbato oxidase nas OMVs e sugerimos que esta enzima poderia atuar na depleção do ascorbato produzido pelo hospedeiro vegetal. Além disso, demonstramos, pela primeira vez, que OMVs de X. fastidiosa transportam ácidos graxos da família DSF, sugerindo um papel adicional para OMVs nesse fitopatógeno. Finalmente, no terceiro estudo verificamos alterações relevantes no perfil de metabólitos secretados por X. fastidiosa em resposta a sua interação com metabólitos secretados por Burkholderia phytofirmans, proposta como uma cepa para o biocontrole da doença de Pierce de videiras. Confirmamos que o sobrenadante de B. phytofirmans possui um composto de natureza apolar que induz a formação de biofilme em X. fastidiosa, contudo ainda não foi possível decifrar a natureza química deste composto

The diseases caused by the phytopathogen Xylella fastidiosa, a Gram-negative bacterium, are due to multiple virulence factors, such as biofilm formation, secretion of xylem cell wall degradation enzymes (CWDE), expression of adhesion proteins and production of outer membrane vesicles (OMVs). These virulence factors are controlled by a DSF (diffusible signaling factors of a lipidic nature) mediating signaling pathway and related to quorum sensing perception. In this work, we aimed to extend the characterization of the secretoma of wild type and mutants strains of X. fastidiosa to uncover proteins and metabolites potentially associated to host adaptation, virulence and pathogenicity. We developed three studies in parallel using proteomics, metabolomics and transcriptomics as methodological approaches. In the first study, we compared the secretome (exoproteome) of the wild type strain Temecula1 (WT) and of DSF synthase mutant (ΔrpfF) which exhibits hypervirulence phenotype in grapevines. We also compared the transcriptomes of these strains. Our results showed that, even in in vitro culture, X. fastidiosa expresses and secretes previously known virulence factors (lipasesesterases and proteases), as well as toxins (microcins) that might play a role in controlling competing bacteria in the same niche. In the second study, we characterized the composition of OMVs secreted by in vitro cultures of X. fastidiosa Fb7 and 9a5c (strains isolated from orange trees) and Temecula1 (strain isolated from grapevine). We have shown that Fb7 produces up to 57% more OMVs than the 9a5c and Temecula1. Moreover we identified a total of 202 distinct proteins in the OMVs produced by these three strains, increasing considerably the number of OMVs secreted proteins so far described for X. fastidiosa. Among the proteins enriched in OMVs, we point out afimbrial adhesins, porins, lipoproteins, hydrolases (lipases/esterases, proteases and peptidases) and a putative pectin-lyase. We highlight the detection of the enzyme L-ascorbate oxidase in the OMVs and we suggest that this enzyme could act in the depletion of ascorbate produced by the plant host. In addition, we have demonstrated, for the first time, that X. fastidiosa OMVs transport fatty acids from the DSF family, suggesting an additional role for OMVs in this phytopathogen. Finally, in the third study we verified relevant changes in the profile of metabolites secreted by X. fastidiosa in response to the interaction with metabolites secreted by Burkholderia phytofirmans that has been sugested as a biocontrol strain for Pierce's disease in grapevines. We confirm that the B. phytofirmans supernatant has a non-polar compound that induces biofilm formation in X. fastidiosa, but it has not yet been possible to elucidate the chemical nature of this compound

Oviposition of fruit flies (Diptera: Tephritidae) and its relation with the pericarp of citrus fruits

Abstract Fruit flies (Diptera: Tephritidae) represent a threat to fruit growing worldwide, mainly the citrus culture, however, biological studies show that fruit flies are not perfectly adapted to this host. This study investigated oviposition of Anastrepha fraterculus (Wiedemann, 1830) and Ceratitis capitata (Wiedemann, 1824) and its relation with the pericarp of citrus fruits. We evaluated the relationship between depth of oviposition of A. fraterculus and C. capitata and epicarp thickness of orange [Citrus sinensis (L.) Osbeck)] Navelina and tangerine [C. reticulata (L.)] Clemenules and the influence of fruit mesocarp of tangerine Clemenules on oviposition of these species. The study was conducted under controlled conditions of temperature (25 ± 2 °C), relative humidity (70 ± 10% RH) and photophase (12 h). A. fraterculus and C. capitata laid their eggs in the flavedo region of orange Navelina and between the albedo and flavedo of tangerine Clemenules. When fruits with mesocarp exposed were offered, there was no oviposition by both fruit fly species. The results show that epicarp thickness of citrus fruits did not influence oviposition of A. fraterculus and C. capitata as oviposition did not occur only in the presence of the mesocarp, suggesting that other factors are involved in oviposition of these species.

Resumo As moscas-das-frutas (Diptera: Tephritidae) representam um risco à fruticultura mundial, especialmente na cultura dos citros, entretanto estudos biológicos demonstram que as moscas-das-frutas não estão perfeitamente adaptadas à estes hospedeiros. Este estudo investigou a oviposição de Anastrepha fraterculus (Wiedemann, 1830) e Ceratitis capitata (Wiedemann, 1824) e sua relação com o pericarpo de frutos cítricos. Foi avaliada a relação entre a profundidade de oviposição de A. fraterculus e de C. capitata e a espessura do epicarpo dos frutos de laranjeira [Citrus sinensis (L.) Osbeck)] Navelina e tangerineira [C. reticulata (L.)] Clemenules e a influência do mesocarpo de frutos de tangerineira Clemenules na oviposição destas espécies. O estudo foi conduzido em condições controladas de temperatura (25 ± 2 °C), umidade relativa (70 ± 10%) e fotofase (12 horas). A. fraterculus e C. capitata depositaram ovos no flavedo de frutos de laranjeira Navelina e entre o flavedo e o albedo de frutos de tangerineira Clemenules. Quando oferecido frutos com mesocarpo exposto, não houve oviposição por ambas as espécies de mosca. Os resultados demonstram que a espessura do epicarpo de frutos cítricos não influenciou a oviposição de A. fraterculus e de C. capitata, a qual não ocorreu na presença apenas do mesocarpo, sugerindo que outros fatores estão envolvidos na oviposição por estas espécies.

Utilização de óleo essencial de duas variedades de laranja na eclosão de Meloidogyne javanica / Use of essential oil from two varieties of orange in the hatching of Meloidogyne javanica / Utilización de aceite esencial de dos variedades de naranja en la eclosión de Meloidogyne javanica

O Brasil é o maior produtor de laranja do mundo. Cultura rica em óleos essenciais de ampla aplicação, como no controle de pragas e patógenos, dentre eles os fitonematoides, causadores de prejuízos relevantes à agricultura. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar a porcentagem de eclosão de juvenis de M. javanica submetidos à diferentes concentrações de óleos essenciais de duas variedades de laranja, Pêra Rio e Folha Murcha, em condições in vitro. Os óleos essenciais foram extraídos das variedades de laranja (Citrus sinensis) Pêra Rio e Folha Murcha, pela técnica de hidrodestilação. O experimento foi instalado em arranjo fatorial 2X8, DIC, sendo oito concentrações (0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 e 500 µg mL-1) e dois tipos de OE, avaliados em três períodos (4 e 16 dias). Em cada unidade experimental, tubos de ensaio 10x75 mm, adicionou-se 1 mL de suspensão de nematoides contendo 50 ovos e 1 mL de emulsão para cada concentração, avaliando-se a porcentagem de juvenis eclodidos. As concentrações dos óleos essenciais das variedades influenciaram (p≤0,05) na porcentagem de eclosão de juvenis de M. javanica, em todos os períodos avaliados. Para a maioria das concentrações, aos quatro e 16 dias, o óleo essencial da var. Pêra Rio foi mais eficiente na redução da eclosão, quando comparado a var. Folha Murcha.(AU)

Brazil is the largest producer of oranges in the world. This crop is rich in essential oils which are used in a wide range of applications, such as controlling pests and pathogens. Phytonematodes are among such pests, and are responsible for causing harmful damages to agriculture. Thus, the purpose of this study was to evaluate the percentage of hatching of M. javanica juveniles submitted to different concentrations of orange essential oil under in-vitro conditions. Oils were extracted from two varieties of orange (Citrus sinensis) popularly known in Brazil as Pera Rio and Folha Murcha, using the hydro-distillation technique. The experiment was carried out in a 2X8 factorial arrangement, at eight concentrations (0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 and 500 µg mL-1) and two types of essential oils, evaluated in two periods (4 and 16 days). In each experimental unit, 10x75-mm test tubes received 1-mL nematode suspension containing 50 eggs and 1-mL of emulsion added for each concentration. Then, the percentage of hatched juveniles was evaluated. The concentration of essential oils from the varieties influenced (p≤0.05) the percentage of hatching of M. javanica juveniles in all evaluated periods. For most concentrations, at 4 and 16 days, the Pera Rio variety was more efficient at reducing hatching when compared to the Folha Murcha variety.(AU)

Brasil es el mayor productor de naranja del mundo. Cultura rica en aceites esenciales de amplia aplicación, como en el control de plagas y patógenos, entre ellos los fitonematodos, causantes de perjuicios relevantes a la agricultura. Así, el objetivo del trabajo fue evaluar el porcentaje de eclosión de juveniles de M. javanica sometidos a diferentes concentraciones de aceites esenciales de dos variedades de naranja, Pera Río y Hoja Mustia, en condiciones in vitro. Los aceites esenciales fueron extraídos de las variedades de naranja (Citrus sinensis) Pera Río y Hoja Mustia, por la técnica de hidrodestilación. El experimento fue instalado en un arreglo factorial 2x8, DIC, siendo ocho concentraciones (0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 y 500 µg mL-1) y dos tipos de OE, evaluados en tres períodos (4 y 16 días). En cada unidad experimental, tubos de ensayo 10x75 mm, se añadieron 1 mL de suspensión de nematodos conteniendo 50 huevos y 1 mL de emulsión para cada concentración, evaluando el porcentaje de juveniles eclosionados. Las concentraciones de los aceites esenciales de las variedades influenciaron (p≤0,05) en el porcentaje de eclosión de juveniles de M. javanica, en todos los períodos evaluados. Para la mayoría de las concentraciones, a los cuatro y 16 días, el aceite esencial de la var. Pera Río fue más eficiente en la reducción de la eclosión, cuando comparado a var. Hoja Mustia.(AU)

Dissemination of Aleurocanthus woglumi in citrus plants, its natural enemies and new host plants in the state of Rio de Janeiro, Brazil / Disseminação de Aleurocanthus woglumi em citros, seus inimigos naturais e novas plantas hospedeiras no estado do Rio de Janeiro, Brasil

ABSTRACT: Aleurocanthus woglumi is an exotic pest, widely disseminated in Brazil, with a high preference for citrus plants, but with a polyphagous feeding habit. The contribution of the state of Rio de Janeiro in the Brazilian production of citrus fruits is small; however, there are still public policies that encourage citrus production in the state. In 2010, the appearance of this pest in Rio de Janeiro was confirmed in the municipality of Cachoeiras de Macacu. The objectives of this research were to evaluate the dissemination of A. woglumi in this state, conduct a survey of new species of host plants, identify and evaluate the population of natural enemies present at two orchards that grow 'Tahiti' limes ( Citrus latifolia ) infested by the pest in Cachoeiras de Macacu, RJ, Brazil. In 19 municipalities, leaves of citrus and other species of plants presenting aleyrodid nymphs were collected, and yellow sticky traps were installed to capture adults for subsequent identification. At the 'Tahiti' lime orchards, the leaf collections were done to confirm the species of Aleyrodidae , and regarding A. woglumi , the natural enemies associated with this pest were collected directly from the infested plants. The results showed that A. woglumi is wide-spread in 12 municipalities. Three new host plants for A. woglumi were identified: Artocarpus heterophyllus ( Moraceae ) , Pouteria caimito ( Sapotaceae ) and Struthanthus flexicaulis ( Loranthaceae ). In Cachoeiras de Macacu, a new species of parasitoid of A. woglumi nymphs was named: Encarsia pergandiella (Hymenoptera: Aphelinidae ), while the insects in the Coccinellidae (Coleoptera) family have stood out as predators of this pest.

RESUMO: Aleurocanthus woglumi é uma praga exótica, amplamente disseminada no Brasil, com grande preferência pelos citros, mas com hábito alimentar polífago. A participação do estado do Rio de Janeiro na produção brasileira de citros é pequena; todavia, ainda ocorrem políticas públicas de incentivo à citricultura no Estado. Em 2010, a ocorrência dessa praga no estado do Rio de Janeiro foi confirmada no município de Cachoeiras de Macacu. Os objetivos deste trabalho foram avaliar a disseminação de A. woglumi nesse Estado, levantar novas espécies de plantas hospedeiras, identificar e avaliar a população de seus inimigos naturais presentes em dois pomares de lima-ácida ( Citrus latifolia ) 'Tahiti', infestados pela praga em Cachoeiras de Macacu, RJ, Brasil. Foram realizadas coletas de folhas de citros e de outras espécies de plantas com presença de ninfas de aleirodídeos em 19 municípios, e armadilhas adesivas amarelas foram instaladas para a captura de adultos, para posterior identificação. Nos pomares de lima-ácida, coletas de folhas foram feitas para confirmar a espécie de aleirodídeo e, em se tratando de A. woglumi , coletaram-se inimigos naturais associados a essa praga diretamente nas plantas infestadas. Os resultados mostraram que A. woglumi está disseminada em 12 municípios. Três novas espécies de plantas hospedeiras de A. woglumi foram identificadas: Artocarpus heterophyllus ( Moraceae ), Pouteria caimito ( Sapotaceae ) e Struthanthus flexicaulis ( Loranthaceae ). Em Cachoeiras de Macacu, uma nova espécie de parasitoide de ninfas de A. woglumi foi assinalada: Encarsia pergandiella (Hymenoptera: Aphelinidae ), enquanto que os insetos representantes da família Coccinellidae (Coleoptera) se destacaram como predadores dessa praga.

Anastrepha aczeli Blanchard and Anastrepha similisGreene (Diptera: Tephritidae) in Minas Gerais, Brazil / Anastrepha aczeli Blanchard e Anastrepha similis Greene (Diptera: Tephritidae) em Minas Gerais, Brasil

The occurrence of Anastrepha aczeliBlanchard and Anastrepha similisGreene (Diptera: Tephritidae) is recorded in the state of Minas Gerais, Brazil. Specimens of A. aczeliwere found in traps placed in orchards of acerola, Malpighia emarginataDC (Malpighiaceae), and citrus, Citrus sinensis(L.) Osbeck (Rutaceae), and A. similiswas obtained in traps placed in citrus orchards located in the county of Bambuí, MG, Brazil.

As ocorrências de Anastrepha aczeliBlanchard e Anastrepha similisGreene (Diptera: Tephritidae) são registradas pela primeira vez no estado de Minas Gerais, Brasil. Os espécimes de A. aczeliforam encontrados em armadilhas montadas em pomares de acerola, Malpighia emarginataDC (Malpighiaceae), e citros, Citrus sinensis(L.) Osbeck (Rutaceae), e os de A. similisobtidos em armadilhas montadas em pomares de citros, em pomares instalados no município de Bambuí, MG, Brasil.

Control of fungal diseases and chilling injury in post-harvest tahiti lime / Controle de doenças fúngicas e de danos por frio em pós-colheita de lima ácida Tahiti

The Tahiti lime appears very susceptible to attack by post-harvest diseases, primarily by the fungi Penicillium and Phomopsis, and also because of its high sensitivity to storage at low temperatures. In order to reduce such damage, the present study aimed to verify the efficiency of heat treatment and disinfection of pathogens in the prevention of post-harvest chilling injury of this cultivar and to compare this treatment with other products using the conventional fungicides. The heat treatments were studied with hot-water temperatures ranging between 48 and 56° C. Water at room temperature was used as a control treatment. After treatment, the fruits were kept under cold temperature at 10° C and RH 90% for about 45 days. For comparison, three other treatments were carried out simultaneously, one using imazalil, one with baking soda, and a third with sodium carbonate, these three products being applied by baths in cold water. Two groups of fruit were evaluated, one treated by immersion considering pathogens coming from the field and another by inoculation with spores of the previously isolated pathogens. For the evaluation of physical and chemical parameters of fruits, determinations were made of the skin color, texture, weight loss, size, juice yield, soluble solids, total acidity and vitamin C content. The determination of the sensitivity of the fruit to cold was made by their exposure at temperatures inducing cold damage. The design was a randomized block design with nine treatments, analyzed by the Statgraphics statistical package. Heat treatments, especially at 52° C, were shown to be more promising in the control of pathogenic fungi and cold damage, surpassing the conventional fungicides. No changes were found in the intrinsic and extrinsic parameters in relation to the application of the different treatments.

A lima ácida Tahiti apresenta-se muito susceptível ao ataque de doenças pós-colheita e, também, por sua elevada sensibilidade, ao armazenamento em baixas temperaturas. Com a finalidade de reduzir estes danos, este trabalho objetivou verificar a eficiência do tratamento térmico na desinfestação de patógenos e na prevenção de danos por frio na pós-colheita deste cultivar e comparar este tratamento com outros utilizando os fungicidas convencionais. Os tratamentos térmicos estudados foram com água quente variando as temperaturas entre 48 a 56° C. A testemunha consistiu de tratamento com água em temperatura ambiente. Depois de tratados, os frutos foram divididos em dois lotes e mantidos em câmara fria com temperatura de 10° C e UR de 90%, por aproximadamente 45 dias. Para comparação foram feitos três outros tratamentos simultaneamente: um utilizando imazalil, outro com bicarbonato de sódio e o terceiro com carbonato de sódio, sendo as aplicações destes três produtos feitas em banhos com água em temperatura ambiente. Foram avaliados 2 grupos de frutos, um tratado por imersão considerando os patógenos oriundos do campo, e outro por inoculação com esporos dos fungos previamente isolados. Os parâmetros físico-químicos dos frutos avaliados foram a coloração da casca, a textura, a perda de massa, o tamanho, o rendimento de suco, de sólidos solúveis, o °brix, o ratio, a acidez total e a vitamina C. A determinação da sensibilidade dos frutos ao frio foi feita pela exposição deles a temperaturas indutoras de dano por frio. O delineamento experimental utilizado foi blocos ao acaso, com nove tratamentos, analisado pelo pacote estatístico Statgraphics. Verificram-se que os tratamentos térmicos, principalmente a 52° C, (...)

Resíduos de calda sulfocálcica sobre a eficiência de acaricidas no controle de Brevipalpus phoenicis / Lime sulfur residue on acaricide efficiency in the control of Brevipalpus phoenicis

O objetivo do trabalho foi verificar a influência dos resíduos de calda sulfocálcica sobre a eficiência de acaricidas empregados no controle de Brevipalpus phoenicis. Inicialmente, o experimento foi instalado em um pomar de citros, em que foram selecionadas 10 plantas que continham frutos com verrugose. Realizou-se a aplicação de calda sulfocálcica (8g i.a. L-1 de água) em cinco plantas e as outras cinco plantas permaneceram sem aplicação de produto fitossanitário. Protegeram-se, com copos de plástico transparente de 500mL, 64 frutos nas plantas tratadas com calda e 64 frutos nas plantas não-tratadas, totalizando 128 frutos protegidos. Decorridos 30 dias da aplicação, os frutos foram colhidos e levados para o laboratório. Estes frutos foram parcialmente parafinados, deixando-se em cada fruto uma arena de 2,5cm de diâmetro com verrugose e sem parafina, delimitada com cola entomológica. Em seguida, procedeu-se à aplicação sobre os frutos em Torre de Potter dos seguintes acaricidas nas concentrações expressas em mg de ingrediente ativo por litro de água: propargite a 720mg, óxido de fenbutatina a 400mg, cyhexatin a 250mg, azocyclotin a 250mg, fenpyroximate a 50mg, dicofol a 960mg e dinocap a 738mg e a testemunha sem aplicação de acaricida. Após 1, 7 e 16 dias da aplicação, transferiram-se para cada fruto 10 ácaros B. phoenicis para avaliar a mortalidade. Constatou-se que os resíduos de calda sulfocálcica não prejudicaram a eficiência dos acaricidas avaliados no controle de B. phoenicis.

The objective was to assess the influence of lime sulfur residues on the acaricidal efficiency against Brevipalpus phoenicis mite. Initially, the experiment was conducted in a citrus orchard where 10 plants presenting scab fruits were selected. Secondly, the application of lime sulfur (8mg a.i. L-1 of water) was performed in five plants, and the other five plants remained without application. Next lime sulfur application, 64 fruits in the plants with lime sulfur application were protected with plastic cups and others 64 fruits also were protected in the plants without lime sulfur application with plastic cups. After 30 days of field application, fruits were harvested and transported to the laboratory. These fruits were partially waxed, leaving an arena of approximately 2.5cm in diameter with scab and without paraffin and entrapped with entomological glue. Afterwards, acaricides application were done following the concentration expressed in mg of active ingredient per liter of water: propargite (720mg), fenbutatin oxide (400mg), cyhexatin (250mg), azocyclotin (250mg), fenpyroximate (50mg), dicofol (960mg), dinocap (738mg) and control treatment by using the petri dish-Potter tower method. After 1, 7 and 16 days of application, ten B. phoenicis were transferred per fruit, in order to evaluate their mortality, 24 and 48 hours after the transferences. The lime sulfur residue did not affect the acaricides efficiency.

Efeito in vitro do óleo essencial de Eucalyptus globulus sobre o crescimento e desenvolvimento de Penicillium sp / In vitro effect of Eucalyptus globulus essential oil on Penicillium sp

O fungo Penicillium sp. é o agente causal dos bolores, considerada a principal doença pós-colheita em citros, levando à perdas na qualidade e quantidade dos frutos comercializáveis. Além de perdas econômicas, uma vez que nas perdas pós-colheitas estão inclusos os custos, transporte e armazenagem de frutos. O presente trabalho teve por objetivo verificar a ação fungitóxica do óleo essencial de Eucalyptus globulus no controle in vitro de Penicillium sp., avaliando seu crescimento micelial, produção e a germinação de esporos. O experimento foi conduzido no laboratório de Microbiologia da PUC, campus Toledo, e constituiu-se de oito tratamentos, sendo: uso do óleo essencial de eucalipto nas concentrações de 1%, 0,5%, 0,25%, 0,1%, 0,05% e 0,025% adicionados ao meio de cultura BDA (Batata Dextrose-Ágar) autoclavado, testemunha negativa (meio de cultura com adição de 40 mg de ingrediente ativo azoxystrobin/L do fungicida) e testemunha positiva (apenas meio de cultura). O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, com cinco repetições em cada tratamento. O óleo essencial de eucalipto inibiu o crescimento de forma significativa nas concentrações de 1%, 0,5% e 0,25%, não diferindo estatisticamente do controle com o fungicida azoxystrobin. Os tratamentos apresentaram o mesmo comportamento em relação a produção de esporos. Já na germinação de esporos, as concentrações de 1% e 0,5% obtiveram controle superior ao tratamento com azoxystrobin e a concentração de 0,25%. As demais concentrações de óleo não obtiveram resultados significativos nas avaliações, igualando-se estatisticamente a testemunha positiva (BDA).

Penicillium sp. is the casual agent of moulds, considered the main citrus post-harvest disease, causing loss on the quality and quantity of marketable fruits. Besides economic loss, it can be included costs, transportation and fruit storage problems. The present work had the objective to verify the fungitoxic action of Eucalyptus globules essential oil on the in vitro control of Penicillium sp., evaluating mycelial growth, production and spores germination. The experiment was conduced on the Microbiology laboratory of PUC, Toledo campus, with eight treatments: 1%, 0,5%, 0,25%, 0,1%, 0,05% e 0,025% concentrations of eucalyptus oil added to PDA media (potato-dextrose-agar), negative control (PDA with addition of 40mg of azoxystrobin/L) and positive control (PDA media only). The experimental design was according to a completely randomized design, with five replicates each treatment. The eucalyptus essential oil inhibited significantly the growth in the 1%, 0,5% e 0,25% concentrations, not differing statistically from control with fungicide azoxystrobin. The treatments presented the same behavior for spores production. For spores germination, the 1% e 0,5% concentrations had better control than treatment with azoxystrobin and the concentration of 0,25%. Others oil concentrations did not present significative results on the evaluations, being statistically equal to positive control (PDA).

Toxicidade de acaricidas a ovos e adultos de Ceraeochrysa cubana (Hagen, 1861) (Neuroptera: Chrysopidae) / Toxicity of acaricides to eggs and adults of Ceraeochrysa cubana (Hagen, 1861) (Neuroptera: Chrysopidae)

Objetivou-se, neste trabalho, avaliar o efeito de treze acaricidas sobre ovos e adultos de Ceraeochrysa cubana (Hagen, 1861). Os acaricidas foram pulverizados por meio de torre de Potter, nas concentrações recomendadas para o controle de ácaros na cultura dos citros. Os ensaios foram conduzidos sob condições controladas de 25 ± 2º C, umidade relativa de 70 ± 10 por cento e fotofase de 12 horas. Os acaricidas não foram tóxicos ao predador em sua fase de ovo. Em relação aos adultos, o carbosulfan e o triazophos foram altamente tóxicos (100 por cento de mortalidade), enquanto que os piretróides bifenthrin e fenpropathrin causaram mortalidade aproximadamente de 60 por cento. Os acaricidas dicofol, bromopropylate, tetradifon, clofentezine, abamectin, hexythiazox, cyhexatin e óxido de fenbutatin não provocaram mortalidade dos adultos de C. cubana. Flufenoxuron inibiu a capacidade de oviposição e provocou a inviabilização dos ovos. Baseando-se na escala da IOBC, os acaricidas carbosulfan, triazophos e flufenoxuron foram enquadrados na classe 4 = nocivos; bifenthrin e fenpropathrin na classe 2 = levemente nocivos, e dicofol, bromopropylate, tetradifon, clofentezine, abamectin, hexythiazox, cyhexatin e óxido de fenbutatin na classe 1 = inócuos a C. cubana. Os compostos enquadrados na classe 1 podem ser recomendados em programas de manejo integrado de pragas de citros objetivando a integração entre os métodos químico e biológico por meio dessa espécie de predador.

The objective of this work was to evaluate the effects of thirteen acaricides on eggs and adults of the lacewing Ceraeochrysa cubana (Hagen, 1861). The acaricides were sprayed using a Potter's tower at the rate recommended for mite control in citrus orchard. The trials were performed in climatic chamber at 25 ± 2º C, 70 ± 10 percent RH and photophase of 12 hours. The egg stage showed high tolerance to the tested acaricides. Carbosulfan and triazophos caused 100 percent adult mortality, whereas bifenthrin and fenpropathrin caused around 60 percent. All other acaricides, dicofol, bromopropylate, tetradifon, clofentezine, abamectin, hexythiazox, cyhexatin and fenibutatin oxide did not cause mortality of C. cubana adult. Flufenoxuron reduced adult egg laying and all eggs were nonviable. According to IOBC scale, the acaricides carbosulfan, triazophos and flufenoxuron were classified into class 4 = harmful; bifenthrin and fenpropathrin into class 2 = slightly toxic; and dicofol, clofentezine, abamectin, hexythiazox, cyhexatin, and fenbutatin oxide into class 1 = harmless to C. cubana. The compounds classified as first class may be recommended in programs of integrated pest management of citrus aiming at the integration between the biological and chemical control through this kind of predator.

Monitoramento populacional das cigarrinhas vetoras de Xylella fastidiosa, através de armadilhas adesivas amarelas em pomares comerciais de citros / Population monitoring of leafhopper vectors of Xylella fastidiosa, through yellow sticky traps in commercial citrus orchards

A Clorose variegada dos citros (CVC) é uma doença causada pela bactéria de xilema Xylella fastidiosa Wells. A disseminação ocorre por meio de insetos vetores pertencente à ordem Hemiptera, família Cicadellidae (subfamília Cicadellinae), os quais transmitem a bactéria depois de se alimentarem em plantas contaminadas. Neste trabalho, objetivou-se identificar e monitorar as espécies de cigarrinhas vetoras em um pomar comercial no município de Paranavaí, Paraná. O experimento foi realizado em um talhão comercial de laranja doce (Citrus sinensis (L.) Osbeck), variedade Pera, com 1.000 plantas de dez anos de idade. A amostragem foi realizada por meio de armadilhas adesivas amarelas, distribuídas na área periférica e central do pomar, com duas repetições por rua amostrada. As etiquetas foram distribuídas entre a 5ª e 30ª plantas em 10 ruas, totalizando 20 armadilhas que foram renovadas no pomar, a cada trinta dias, durante o período de avaliação que foi entre junho de 2005 e setembro de 2006. As principais espécies de Cicadellinae capturadas foram Acrogonia citrina Marucci & Cavichioli, Dilobopterus costalimai Young e Macugonalia cavifrons Stal. Essas espécies apresentaram ocorrência constante e frequência de 3,97 por cento, 4,2 por cento, 13,0 por cento respectivamente, em relação ao total de cigarrinhas coletadas.

Citrus variegated chlorosis (CVC) is the disease caused by the bacteria Xylella fastidiosa Wells. Dissemination occurs through insect vectors belonging to the order Hemiptera, family Cicadellidae (subfamily Cicadellinae), which transmit the bacteria after feeding on infected plants. The objective of this study was to identify the species of insect vectors in an orchard in the municipality of Paranavaí, in the State of Paraná. The experiment was conducted in a commercial stand of sweet orange (Citrus sinensis (L.) Osbeck), Pêra variety with 1,000 10-year-old plants. Monitoring was performed using yellow sticky traps, distributed in the central and peripheral areas of the orchard with two traps on each one. The stickers were distributed between the 5th and 30th plant in each 10 rows, totaling 20 traps in the orchard and renewed every thirty days during the evaluation period, which was between June 2005 and September 2006. The main species caught were Cicadellinae Acrogonia citrina Marucci & Cavichioli Dilobopterus costalimai Young and Macugonalia cavifrons Stal. These species occurred constantly, with frequencies of 3.97 percent, 4.2 percent, and 13.0 percent respectively, compared to the total leafhoppers collected.

Identificação de genes com expressão modulada por estreptomicina e de genes associados à virulência e patogenicidade em Xylella fastidiosa / Identification of genes modulated by streptomycin and of genes related to virulence and pathogenicity in Xylella fastidiosa

Em concentrações subletais, agentes antimicrobianos modulam a expressão gênica bacteriana, sendo que o conjunto de genes que é modulado depende tanto da cepa bacteriana, como da natureza do agente antimicrobiano. Neste trabalho, avaliamos o perfil de expressão gênica de Xylella fastidiosa cepa 9a5c em resposta ao tratamento por até 60 minutos com dose subletal do antibiótico estreptomicina. Esta é uma cepa virulenta, originalmente isolada de laranjeiras com sintomas de clorose variegada dos citros. A hibridização de microarranjos de DNA representando 2608 das 2848 sequências codificadoras (CDS) previamente anotadas no genoma desta cepa, revelou que 136 CDS apresentaram expressão gênica diferencial em resposta à exposição à estreptomicina, sendo que destas 109 foram negativamente moduladas e 27 positivamente moduladas. Realizamos, também, ensaios de PCR quantitativo precedido de transcrição reversa (RTqPCR) de 21 CDS para confirmar a modulação observada na análise global da expressão gênica. O perfil de expressão gênica de X. fastidiosa em resposta à estreptomicina foi analisado de forma integrada com outros perfis de expressão gênica desta bactéria. Entre as CDS positivamente moduladas, destacamos aquelas codificadoras das chaperoninas GroEL e GroES, que estão associadas a resposta de choque térmico, e CDS associadas à tradução, tais como proteínas ribossomais e fatores de tradução. Interessantemente, a exposição à estreptomicina induz a expressão da CDS que codifica poligalacturonase, que é um fator de virulência em algumas cepas de X. fastidiosa. Por outro lado, o tratamento com estreptomicina promoveu a modulação negativa de CDS relacionadas à formação e manutenção de biofilme ao contrário do observado quando estas bactérias foram submetidas ao tratamento com gomesina, um peptídeo antimicrobiano. O conjunto destas observações sugere que a exposição à dose subletal de estreptomicina possa promover um fenótipo de maior virulência, contrariamente ao efeito...

At sublethal concentrations, antimicrobials compounds modulate bacterial gene expression and the gene set that is modulated depends not only on the bacterial strain but also on the nature of antimicrobial agent. In this study, we evaluated changes in gene expression profile of Xylella fastidiosa strain 9a5c exposed up to 60 min to sublethal concentration of streptomycin. This a virulent strain originally isolated from orange trees with symptoms of citrus variegated chlorosis. Hybridization of DNA microarrays representing 2,608 out of 2848 coding sequences (CDS) previously annotated in strain 9a5c genome revealed 136 CDS differentially expressed upon streptomycin treatment. Of which 109 were down-regulated and 27 up-regulated. Differential expression for a subset of 21 CDS was further evaluated by reverse transcriptionquantitative PCR (RT-qPCR). In addition, we performed an integrated analysis of the gene expression profile of X. fastidiosa in response to streptomycin along with other gene expression profiles available for this bacterium. Among the up-regulated CDS, we highlight those encoding chaperonins GroEL and GroES, which are associated with heat shock response, and those CDS related to translation, such as ribosomal proteins and translation factors. Interestingly, exposure to streptomycin induces the expression of a CDS encoding polygalacturonase, which is a virulence factor for some X. fastidiosa strains. Furthermore, treatment with streptomycin down-regulates some CDS related to biofilm formation oppositely to treatment with gomesin, an antimicrobial peptide. Together, these observations suggest that exposure to sublethal dose of streptomycin might promote a higher virulent phenotype, in contrast to the effect previously observed with gomesin. In the present work, we also describe the pyrosequencing of J1a12 genome, a X. fastidiosa strain that exhibits a less virulent phenotype in citrus and tobacco if compared to strain 9a5c. A comparison of genome...

Levantamento populacional de cigarrinhas (Hemiptera: Cicadellidae) associadas à transmissão de Xylella fastidiosa em pomares cítricos do Litoral Norte da Bahia / Survey of sharpshooters (Hemiptera: Cicadellidae) associated with Xylella fastidiosa transmission in citrus groves of the North Coast of Bahia State

The causal agent of citrus variegated clorosis, Xylella fastidiosa, is transmitted by leafhoppers of the subfamily Cicadellinae, whose species vary regionally. The goal of this study was to identify potential vectors of this pathogen in citrus groves of Bahia North Coast, Brazil. The survey was done from March/2002 to February/2003 in three seven- to nine-year-old sweet orange (Citrus sinensis, Pêra variety) groves located in Rio Real, BA. Fifteen yellow sticky cards (8.5x11.5 cm) were installed 40 m apart in each grove, hanged at 1.5 m high on the upper north side of citrus canopies, and replaced fortnightly. A sweep net was periodically used to sample leafhoppers on herbaceous weeds inside the groves, by selecting five points at random and performing 30 sweeps in each point. A total of 1,360 specimens of 49 Auchenorrhyncha species were collected in this study, mostly in the family Cicadellidae (90.2 percent). The subfamily Cicadellinae, which includes the sharpshooter vectors of X. fastidiosa, showed the largest number of species (14) and specimens (84.8 percent). Acrogonia flagellata Young, A. citrina Marucci & Cavichioli, Homalodisca spottii Takiya, Cavichioli & McKamey and an unidentified Cicadellini (species 1) were the dominant species trapped on citrus canopies, while Hortensia similis (Walker) and Erythrogonia dubia (Medler) were dominant in the weedy vegetation. Among the Cicadellinae species already known as vectors of X. fastidiosa in citrus, only A. citrina, Bucephalogonia xanthophis (Berg) e Ferrariana trivittata (Signoret) were found. The two latter species were accidentally trapped by sweep net in the weedy vegetation.

O agente causal da clorose variegada dos citros, Xylella fastidiosa, é transmitido por cigarrinhas da subfamília Cicadellinae, cujas espécies variam regionalmente. O objetivo deste trabalho foi identificar potenciais vetores do patógeno em pomares cítricos do Litoral Norte da Bahia. Os levantamentos foram conduzidos de mar/2002 a fev/2003, em três propriedades no município de Rio Real, em pomares de laranjeira doce (Citrus sinensis) variedade Pêra, com sete a nove anos. Em cada pomar, 15 cartões adesivos amarelos foram dispostos a 40 m entre si, instalados a 1,5 m de altura em ramos da face norte, na periferia da copa, sendo substituídos quinzenalmente. Também foram realizadas amostragens com rede de varredura na vegetação rasteira dos pomares, em cinco pontos escolhidos aleatoriamente, efetuando-se 30 redadas por ponto. No total, foram coletados 1360 espécimes pertencentes a 49 espécies de Auchenorrhyncha, a maioria da família Cicadellidae (90,2 por cento). A subfamília Cicadellinae, que inclui os vetores de X. fastidiosa, apresentou maior número de espécies (14) e de indivíduos coletados (84,8 por cento). Entre as espécies de Cicadellinae, Acrogonia flagellata Young, A citrina Marucci & Cavichioli, Homalodisca spottii Takiya, Cavichioli & McKamey e uma espécie não-identificada de Cicadellini (espécie 1) foram dominantes na copa das plantas cítricas, enquanto que Hortensia similis (Walker) e Erythrogonia dubia (Medler) foram dominantes na vegetação rasteira. Entre os cicadelíneos já conhecidos como vetores de X. fastidiosa em citros, apenas A. citrina, Bucephalogonia xanthophis (Berg) e Ferrariana trivittata (Signoret) foram observados, sendo que as duas últimas espécies tiveram ocorrência acidental na vegetação rasteira.