Analysis of the distribution of microhardness, mineral, and organic content of human, bovine, and ovine teeth / Análisis de la distribución de microdureza, contenido mineral y orgánico de dientes humanos, bovinos y ovinos

Objetive. Human teeth have been commonly used for in vitro and in situ studies. Cu­rrently, other animals' teeth have been purposed for dental research to overcome human teeth' problematic availability. This study aimed to investigate the enamel and dentin from human, bovine, and ovine teeth concerning the microhardness, organic, and in­ organic contents via micro­Raman spectroscopy. Methods. Human, bovine, and ovine teeth were divided according to their type and age into seven groups: Ovine; Bovine­12 months; Bovine­24 months; Bovine­36 months; Bovine­48 months; Bovine­+60 months; Human (control). The enamel's microhardness (superficial and deep) and den­tin (superficial, middle, and deep) were analyzed. The calcium/phosphate ratio and am­ide contents were determined by micro­Raman spectroscopy. Results. Overall, the mi­crohardness of human enamel was superior to the other species. Dentin's microhardness was similar among groups. Ovine group showed lower values of calcium/phosphate ratio than human. Amide content was similar between bovine and human. The microhardness and calcium/phosphate ratio of enamel and dentin, respectively, decreased as the age of bovine teeth increased. Conclusions. Researchers must be aware and take into consider­ation the differences of ovine and bovine enamel compared to human enamel. Other al­ternatives that are more similar to the microhardness of human enamel should be sought. Bovine teeth of 12 and 24 months are suitable substitutes for dentin of human teeth. Researchers must also be aware of the age of the animals and specify it in the studies.

Objetivo. Los dientes humanos se han utilizado comúnmente para estudios in vitro e in situ. Actualmente, los dientes de otros animales se han destinado a la investiga­ción dental para superar la disponibilidad problemática de los dientes humanos. Este estudio tuvo como objetivo investigar el esmalte y la dentina de los dientes humanos, bovinos y ovinos en relación con la microdureza y los contenidos orgánicos e inor­gánicos a través de la espectroscopia micro­Raman. Métodos. Los dientes humanos, bovinos y ovinos se dividieron según su tipo y edad en siete grupos: Ovinos; Bovino­12 meses; Bovino­24 meses; Bovino­36 meses; Bovino­48 meses; Bovino­+60 meses; Hu­mano (control). Se analizó la microdureza del esmalte (superficial y profunda) y de la dentina (superficial, media y profunda). La relación calcio/fosfato y los contenidos de amida se determinaron mediante espectroscopía micro­Raman. Resultados. En general, la microdureza del esmalte humano fue superior a la de otras especies. La microdureza de la dentina fue similar entre los grupos. El grupo ovino mostró valores más bajos de la relación calcio/fosfato que el humano. El contenido de amida fue similar entre bovinos y humanos. La microdureza y la relación calcio/fosfato del esmalte y la dentina, respectiva­mente, disminuyeron a medida que aumentaba la edad de los dientes bovinos. Conclusiones. El esmalte de los dientes ovinos y bovinos no es un sustituto adecuado del de los dientes humanos. Se deben buscar otras alternativas que sean similares a la microdureza del esmalte humano. Sin embargo, los dientes bovinos de 12 y 24 meses son sustitutos adecuados de la dentina de los dientes humanos. Los investigadores deben conocer la edad de los animales y especificarla en los estudios.

Alteración del colágeno en la Hipertrofia Gingival en pacientes con ortodoncia: caracterización histológica e inmunohistoquímica / Collagen alteration in gingival hypertrophy in orthodontic patients: histological and immunohistochemical characterization

Resumen Introducción: La hipertrofia gingival (HG) es el aumento del volumen de la encía asociado a ciertas enfermedades sistémicas, hereditarias (idiopático), ingesta de algunos medicamentos o a factores locales como el tratamiento ortodóntico, capaz de provocar cambios histológicos en el tejido conectivo gingival. Objetivo: Describir las características histológicas e identificar el colágeno tipo I y tipo III en tejidos gingivales de sujetos con hipertrofia gingival portadores de ortodoncia. Materiales y método: Se diseñó un estudio de casos y controles que incluyó el análisis de biopsias de tejido gingival de 12 pacientes sometidos a cirugías periodontales. La muestra se dividió en dos grupos: individuos sanos (control; n= 6) y pacientes con HG portadores de ortodoncia (pacientes; n= 6). Las muestras fueron procesadas e incluidas en parafina. Las tinciones Masson-Goldner y rojo sirius/verde rápido fueron empleadas. El colágeno tipo I y tipo III fueron identificados mediante inmunohistoquímica con anticuerpos monoclonales. Resultado: En los pacientes con HG portadores de ortodoncia se observó un epitelio hiperplásico y tejido conectivo denso con abundantes fibras de colágeno distribuidos aleatoriamente. La inmunodetención de colágeno tipo I indicó la presencia de abundantes fibras desorganizadas y el colágeno tipo III fue inmunolocalizado subyacente a la membrana basal, vasos sanguíneos y toda la extensión del tejido conectivo de los pacientes con HG con tratamiento ortodóntico. Conclusión: La acumulación de fibras de colágeno, particularmente del colágeno tipo I y tipo III, son hallazgos histológicos que caracterizan la HG en pacientes portadores de ortodoncia. Futuros estudios son necesarios para dilucidar el fenotipo de los fibroblastos gingivales y la probable pérdida homeostática entre la producción y degradación de colágeno en esta patología.

Abstract Introduction: Gingival hypertrophy (GH) is the increase in the volume of the gingiva associated with certain systemic, hereditary (idiopathic) diseases, the intake of some medications or local factors such as orthodontic treatment, capable of causing histological changes in the gingival connective tissue. Objective: To describe the histological characteristics and identify type I and type III collagen in gingival tissues of subjects with gingival hypertrophy wearing orthodontics. Method: A case-control study was designed that included the analysis of gingival tissue biopsies from 12 patients submitted to periodontal surgeries. The sample was divided into two groups: healthy individuals (Control; n= 6) and patients with GH wearing orthodontics (Patients; n= 6). The samples were processed and embedded in paraffin. Masson-goldner and sirius red/fast green stains were used. Type I and type III collagen were identified by immunohistochemistry with monoclonal antibodies. Result: A hyperplastic epithelium and dense connective tissue with abundant randomly distributed collagen fibers were observed in patients with orthodontic GH. Immunodetention of type I collagen indicated the presence of abundant disorganized fibers and type III collagen was inmunolocalized underlying the basement membrane, blood vessels and the entire extension of the connective tissue of patients with GH orthodontic. Conclusion: The accumulation of collagen fibers, particularly type I and type III collagen, are histological findings that characterize GH in orthodontic wearers. Future studies are necessary to elucidate the phenotype of gingival fibroblasts and the probable homeostatic loss between collagen production and degradation in this pathology.

Expression of type III collagen in hypertrophic gingival tissue of patients with orthodontic treatment: a pilot study / Expresión del colágeno tipo III en tejido con hipertrofia gingival de pacientes con tratamiento ortodóntico: un estudio piloto

ABSTRACT Introduction: gingival hypertrophy (GH) is the uncontrolled increase in gingival volume induced by different etiological factors, including orthodontic treatment. This pathology is characterized by changes in epithelial and connective tissue, including modifications in the extracellular matrix. The present study determined the presence and distribution of type III collagen in tissues of patients with GH wearing fixed orthodontic appliances. Methods: 12 samples of gingival tissue were obtained from patients undergoing periodontal surgery. They were divided into two groups, the first with healthy patients (control; n = 6) and the second with patients diagnosed with GH and orthodontic treatment (patients; n = 6). Each obtained sample was subjected to the hematoxylin-eosin stain, Masson-Goldner staining, and type III collagen immunohistochemistry. Results: the hematoxylin-eosin and Masson-Goldner histological stains showed hypertrophia of epithelial tissue and connective tissue with a marked collagen fiber increase in the gingival tissue of orthodontic wearers with GH compared to individuals in the control group. The gingival tissue of patients with GH caused by orthodontic treatment showed a distribution and location of type III collagen near the basal lamina, around the blood vessels, but unlike the control group, its location was noticeable throughout the connective tissue. Conclusion: the gingival tissues of orthodontic wearers with GH experience an increase in the number and density of collagen fibers. Type III collagen seems to lose its usual location in the gingival tissues of orthodontic wearers with GH.

RESUMEN Introducción: la hipertrofia gingival (HG) es el aumento descontrolado del volumen de la encía debido a diversos factores etiológicos, entre ellos el tratamiento ortodóntico. Esta patología se caracteriza por cambios del tejido epitelial y conectivo, incluyendo modificaciones en la matriz extracelular. El presente estudio determinó la presencia y distribución de colágeno tipo III en tejidos de pacientes con HG portadores de ortodoncia fija. Métodos: se obtuvieron 12 muestras de tejido gingival de pacientes sometidos a cirugías periodontales. Se dividieron en dos grupos, el primero, integrado por pacientes sanos (control; n=6), y el segundo por pacientes diagnosticados con HG con ortodoncia (pacientes; n=6). Cada muestra obtenida fue sometida a la coloración hematoxilina-eosina, Masson-Goldner e inmunohistoquímica del colágeno tipo III. Resultados: las tinciones histológicas hematoxilina-eosina y Masson-Goldner permitieron constatar hiperplasia del tejido epitelial y un tejido conectivo denso con notable aumento de las fibras de colágeno en el tejido gingival de los pacientes con HG portadores de ortodoncia en comparación con los individuos del grupo control. El tejido gingival de pacientes con HG por ortodoncia evidenció una distribución y localización del colágeno tipo III cerca de la lámina basal, alrededor de los vasos sanguíneos, pero a diferencia del grupo control, su localización fue notoria en toda la extensión del tejido conectivo. Conclusión: los tejidos gingivales de pacientes con HG portadores de ortodoncia experimentan aumento en número y densidad de las fibras de colágeno. El colágeno tipo III parece perder su localización habitual en los tejidos gingivales de pacientes con HG portadores de ortodoncia.

Comparative analysis of the effects of Copaifera multijuga oil-resin and nitrofurazona in the cutaneous wound healing process / Análise comparativa dos efeitos do óleo-resina de Copaifera multijuga e da nitrofurazona na cicatrização de ferida cutânea

ABSTRACT Objectives: to evaluate, histologically and macroscopically, the influence of Copaifera multijuga (Copaíba) oil-resin on the healing process of cutaneous wounds, comparing it with nitrofurazone. Methods: we divided 36 rats into three groups of 12 animals, according to the treatment to be administered. Group SL (control) received saline on the lesion; the Group OIL received topical treatment with Copaíba oil; and the Group NITRO was treated with Nitrofurazone. We inflicted a circular wound of 8mm in diameter on the back of each animal. We subdivided each of the three groups of 12 animals into three subgroups, according to treatment time and euthanasia (7, 14 and 21 days). All animals received the proposed treatment daily. We photographed the lesions for area measurement, as well as for evaluation of macroscopic aspects. We resected and stained the scars to quantify and qualify elastic fibers, collagen, degree of epithelization, neovascularization and inflammation. Results: although the saline solution provided a faster wound closure in its initial phase, after 14 days the wound size of the three groups tested was the same. Levels of inflammation and neovascularization were similar in all three groups. The amount of collagen and elastic fibers was higher in the Nitrofurazone and Copaíba oil groups. Conclusion: in male Wistar rats, Copaifera multijuga oil-resin positively influences the healing process, but it is less effective than nitrofurazone in healing by secondary intention.

RESUMO Objetivo: avaliar histologicamente e macroscopicamente a influência do óleo-resina de Copaifera multijuga no processo de cicatrização de feridas cutâneas, comparando com o grupo submetido ao uso da nitrofurazona. Métodos: foram utilizados 36 ratos, divididos em três grupos de 12 animais, conforme o tratamento a ser administrado. Grupo SF (controle, recebeu soro fisiológico sobre a lesão), Grupo ÓLEO (tratamento tópico com óleo de Copaíba), Grupo NITRO (tratamento tópico com Nitrofurazona). Foi confeccionada uma ferida circular de 8mm de diâmetro no dorso de cada animal. Cada um dos três grupos de 12 animais foi subdividido em três subgrupos, de acordo com o tempo de tratamento e de eutanásia (7, 14 e 21 dias). Todos os animais receberam o tratamento proposto diariamente. As lesões foram fotografadas para mensuração de sua área, bem como, avaliados aspectos macroscópicos. As cicatrizes foram ressecadas e coradas, para quantificar e qualificar as fibras elásticas, colágenas, grau de epitelização, neovascularização e inflamação. Resultados: embora o soro fisiológico tenha proporcionado um fechamento mais rápido da ferida em sua fase inicial, a partir de 14 dias o tamanho das feridas dos três grupos testados se equivaleu. Níveis de inflamação e neovascularização foram semelhantes nos três grupos. A quantidade de fibras colágenas e elásticas foi maior nos grupos Nitrofurazona e Óleo de Copaíba. Conclusão: em ratos machos da linhagem Wistar, o óleo-resina de Copaifera multijuga influencia positivamente no processo de cicatrização, porém é menos eficaz que a nitrofurazona na cicatrização por segunda intenção.

Avaliação da alteração do perfil de colágeno de dentes extraídos de pacientes submetidos a radioterapia de cabeça e pescoço

O comprometimento da saúde dental pela incidência de radiação é tido comoresultado da redução do fluxo salivar bem como de possíveis danos radiogênicosdiretos à estrutura dental. A natureza exata destes últimos ainda está por serelucidada. A partir deste contexto, o presente estudo objetiva analisar apredominância anatômica de colágeno tipo I e colágeno tipo III da dentina e doligamento periodontal assim como a quantidade de colágenos tipos I e III doligamento periodontal de dentes contidos nos campos de radiação extraídos depacientes submetidos a radioterapia (RT) para tratamento de neoplasias malignasde cabeça e pescoço. A amostra foi constituída de 20 dentes, sendo oito dentescariados submetidos à dose total de radiação menor que 60 Gy (grupo experimentalI - GE I), seis dentes cariados submetidos à dose total de radiação igual ou maiorque 60 Gy (grupo experimental II - GE II) e seis dentes hígidos erupcionados nãosubmetidos a radiação (grupo controle - GC). Foi realizado estudo histomorfométricoatravés da técnica de coloração Picrosirius Red com luz polarizada. Análisequalitativa: em relação à dentina, percebeu-se predominância de colágeno tipo IIInas regiões circunjacentes às lesões cariosas no GE I, predominância geral decolágeno tipo III em toda a dentina no GE II e predominância geral de colágeno tipo Ina dentina do GC...

Compromised dental health by incidence of radiation is taken as a result of thereduction in salivary flow as well as possible direct radiogenic damage to toothstructure. The exact nature of the latter remains to be elucidated. The aim of thispaper is to investigate the anatomical predominance of collagen type I and type III inthe dentin and periodontal ligament and the amount of these collagens in theperiodontal ligament of extracted teeth within the radiation fields of patients who haveunderwent radiotherapy (RT) for treatment of malignant head and neck tumors. Thesample consisted of 20 teeth, 8 carious teeth of patients who underwent total dose ofless radiation than 60 Gy (experimental group I - EG I), 6 carious teeth of patientswho underwent total radiation dose equal to or greater than 60 Gy (experimentalgroup II - EG II) and 6 healthy erupted teeth not subjected to radiation (control group- CG). A histomorphometrical study was conducted using the staining techniquePicrosirius Red with polarized light. Qualitative analysis of dentin noticed thepredominance of type III collagen in the surrounding regions to carious lesions in EGI, general predominance of type III collagen throughout the dentin of EG II andgeneral predominance of type I collagen in the dentin of the CG...

Influencia do tempo de exposicao a obesidade induzida por dieta hiperlipidica sobre os colagenos tipo I e III miocardico / Influence of Term of Exposure to High-Fat Diet-Induced Obesity on Myocardial Collagen Type I and III

FUNDAMENTO: A obesidade é um fator de risco para muitas complicações médicas; a pesquisa médica demonstrou que as alterações hemodinâmicas, morfológicas e funcionais estão correlacionadas com a duração e gravidade da obesidade. OBJETIVO: O presente estudo determinou a influência do tempo de exposição à obesidade induzida por dieta com alto teor de gordura no colágenos tipo I e III miocárdico. MÉTODOS: Ratos machos com trinta dias de idade, da raça Wistar, foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos: um grupo de controle (C) alimentado com ração padrão e um grupo de ratos obesos (Ob) alternadamente alimentados com uma de quatro dietas palatáveis ricas em gordura. Cada dieta foi mudada diariamente, e os ratos foram mantidos em suas respectivas dietas por 15 (C15 e Ob15) e 30 (C30 e Ob30) semanas consecutivas. A obesidade foi determinada pelo índice de adiposidade. RESULTADOS: O grupo Ob15 foi similar ao grupo C15 em relação à expressão de colágeno miocárdico tipo I; contudo, a expressão no grupo Ob30 foi menor do que no grupo C30. O tempo de exposição à obesidade foi associado com uma redução de colágeno do tipo I no grupo Ob30, quando comparado com o Ob15. A obesidade não afetou a expressão do colágeno tipo III. CONCLUSÃO: Este estudo mostrou que o tempo de exposição à obesidade por 30 semanas induzida por uma dieta rica em gordura insaturada causou uma redução na expressão do colágeno miocárdico tipo I em ratos obesos. No entanto, nenhum efeito foi observado em relação à expressão do colágeno miocárdico tipo III .

BACKGROUND: Obesity is a risk factor for many medical complications; medical research has shown that hemodynamic, morphological and functional abnormalities are correlated with the duration and severity of obesity. OBJECTIVE: Present study determined the influence of term of exposure to high-fat diet-induced obesity on myocardial collagen type I and III. METHODS: Thirty-day-old male Wistar rats were randomly distributed into two groups: a control (C) group fed a standard rat chow and an obese (Ob) group alternately fed one of four palatable high-fat diets. Each diet was changed daily, and the rats were maintained on their respective diets for 15 (C15 and Ob15) and 30 (C30 and Ob30) consecutive weeks. Obesity was determined by adiposity index. RESULTS: The Ob15 group was similar to the C15 group regarding the expression of myocardial collagen type I; however, expression in the Ob30 group was less than C30 group. The time of exposure to obesity was associated with a reduction in collagen type I in Ob30 when compared with Ob15. Obesity did not affect collagen type III expression. CONCLUSION: This study showed that the time of exposure to obesity for 30 weeks induced by unsaturated high-fat diet caused a reduction in myocardial collagen type I expression in the obese rats. However, no effect was seen on myocardial collagen type III expression. .

Análise da expressão das metaloproteinases e seus inibidores teciduais no músculo detrusor de pacientes com obstrução infravesical por hiperplasia prostática benigna / Expression of metalloproteinases and their tissue inhibitors in the detrusor muscle of patients with bladder outlet obstruction due to benign prostatic hyperplasia

Introdução: A obstrução infravesical (OIV) de longo prazo secundária a hiperplasia prostática benigna (HPB) pode causar alterações funcionais e morfológicas na bexiga. Um dos principais eventos consiste no aumento da deposição de colágeno e perda de complacência vesical, levando a alteração de armazenamento e esvaziamento urinário. O aumento da deposição de colágeno na matriz extracelular (MEC) da musculatura detrusora é a principal razão para a diminuição da complacência vesical. Na bexiga, assim como em outros órgãos, este fenômeno depende da atividade equilibrada de enzimas proteolíticas, incluindo as metaloproteinases (MMP) e os seus inibidores endógenos (inibidores teciduais de metaloproteinases-TIMPs). Como estes fenômenos são desconhecidos na bexiga obstruída, o objetivo deste estudo foi avaliar a expressão gênica de colágeno, MMPs e seus inibidores na bexiga de pacientes com obstrução infravesical. Material e Métodos: Foi realizada uma análise prospectiva e controlada de 43 pacientes com OIV devido a HPB, que foram submetidos à ressecção transuretral da próstata (RTUP) entre 2011 e 2012. Como grupo controle foram selecionados espécimes de músculo detrusor de 10 pacientes que foram submetidos a prostatectomia radical retropúbica devido adenocarcinoma de próstata. Todos estes pacientes tinham idade menor que 60 anos, tamanho de próstata menor que 30 gramas ao ultra-som e escore internacional de sintomas prostáticos (IPSS) menor que 7. Todos os pacientes foram submetidos a estudo urodinâmico pré e pós operatório (após 6 meses). A biópsia de fragmento de músculo da bexiga foi realizada ao final da RTUP e colocada em solução estabilizadora de RNA para quantificação da expressão de colágenos I e III, metaloproteinases de matriz 1, 2 e 9, e inibidores de MMPs (TIMP1, TIMP2 e RECK) na bexiga de pacientes com HPB. Os genes descritos foram avaliados através da técnica de reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qRT-PCR)....

Introduction: Long-term Bladder outlet obstruction (BOO) secondary to Benign prostatic Hyperplasia (BPH) can cause functional and morphological abnormalities in the bladder, such as increased collagen deposition and loss of compliance, leading to urinary storage and voiding symptoms. A decrease in bladder compliance is known to be correlated with deterioration of renal function. Increased deposition of collagen in the extracellular matrix (ECM) is the primary reason for a decreased compliance. In the bladder, as in other organs, this phenomenon is dependent on the balanced activity of proteolytic enzymes, including matrix metalloproteinases (MMPs) and their endogenous inhibitors, tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs). The imbalance between MMPs and TIMPs is a key regulator in ECM turnover. Since these mechanisms are unknown in the obstructed bladder, the objective of this study was to evaluate gene expression of collagen, MMPs and their inhibitors in patients with bladder outlet obstruction due to BPH. Material and Methods: We performed a prospective and controlled analysis of 43 patients with BOO due to BPH who underwent transurethral resection of the prostate (TURP) from 2011 to 2012. The control group was comprised of 10 bladder specimens from patients with < 60 years who underwent radical prostatectomy with an International Prostatic Symptom Score (IPSS) < 8 and prostate volume < 30 grams. All patients underwent urodynamic analysis pre and post operatively after 6 months. A biopsy of the bladder muscle was performed at the end of TURP for analysis of collagen, metalloproteinases and TIMPs gene expressions. For this purpose we used the quantitative real time polymerase chain reaction method (qRT-PCR)...

Distribution of Hepatic Myofibroblasts and Type I and III Collagen in Rat Liver Cirrhosis Induced by Thioacetamide / Distribución de Miofibroblastos y Colágeno Tipo I y III en Hígado de Ratas con Cirrosis Inducida por Tioacetamida

Thioacetamide (TAA) can induce various types of cirrhosis in the rat, including bridging fibrosis, biliary fibrosis, perisinusoidal/pericellular fibrosis and centrilobular fibrosis, in which different populations of hepatic myofibroblasts (MFs) are involved. The hepatic MFs can be classified into 3 groups: (a) portal/septal MFs; (b) activated hepatic stellate cell myofibroblasts (HSC/MFs); and (c) interface myofibroblasts (IF/MFs). The present study was carried out to examine the morphology and localization of hepatic MFs in relation to the distribution of type I and III collagen in rat cirrhotic livers. Immunohistochemistry to a-smooth muscle actin was employed to demonstrate the morphology and localization of the subpopulations of hepatic MFs. The distribution of type I and III collagen was investigated by using specific antibodies. Portal and septal MFs were windmill in shape and localized around tributaries of the portal and hepatic veins where type I and III collagen was accumulated. HSC/MFs with arachnoid in shape were localized in the spaces of Disse and spaces between neighboring hepatocytes where type I collagen was formed. IF/MFs showed arachnoid shapes and distributed along the margin of fibrous septa where type I collagen was condensed. MFs with polygonal shapes were also found around the wall of hepatic sinusoids, margin of fibrous septa and around the portal tract. They were probably transitional cells to the mature MFs. Our data suggest that each subpopulation of hepatic MFs shows characteristic morphology and localization, which correlates with localization of type I and/or type III collagen.

La tioacetamida (TAA) puede provocar diversos tipos de cirrosis hepática en la rata, incluyendo fibrosis en puente, fibrosis biliar, fibrosis perisinusoidal/pericelular y fibrosis centrolobulillar, en los que diferentes poblaciones de miofibroblastos hepáticos (MFs) están involucrados. Los MFs hepáticos se pueden clasificar en tres grupos: (a) MFs portal/ septal; (b) células estrelladas hepática activada miofibroblásticas (HSC/MFs), y (c) miofibroblastos de interface (IF/MFs). El presente estudio se realizó para examinar la morfología y localización de los MFs hepáticos en relación con la distribución de colágeno Tipos I y III en el hígado de ratas cirróticas. Se utilizó inmunohistoquímica de a-actina de músculo liso para demostrar la morfología y localización de las subpoblaciones de MFs hepática. La distribución de colágenos Tipos I y III se investigó utilizando anticuerpos específicos. FMs portales y septales mostraron forma de molino de viento y se localizaron cerca de afluentes de las venas porta y hepática donde los colágenos Tipos I y III se acumularon. HSC/MFs con forma aracnoide se localizaron en los espacios de Disse y los espacios entre hepatocitos vecinos, donde se formó el colágeno Tipo I. IF/MFs mostraron formas aracnoides y se distribuyeron a lo largo del margen de los septos fibrosos donde se condensó el colágeno Tipo I . MFs con formas poligonales también fueron encontrados alrededor de la pared de los sinusoides hepáticos, en el margen de los septos fibrosos y en todo el tracto portal. Probablemente fueron células de transición a los MFs maduros. Nuestros datos sugieren que cada subpoblación de MFs hepáticos muestra una morfología y localización característica, que se correlaciona con la localización de colágenos Tipo I y o III.

Influência da dieta hipercolesterolêmica na remodelação do colágeno da matriz extracelular da parede vesical em ratos / Influence of the hypercholesterolemic diet on the collagen remodeling of the bladder wall extracellular matrix in rats

Introdução: A bexiga é responsável em armazenar urina em volume adequado e de esvaziar seu conteúdo de forma plena. Suas propriedades miogênicas intrínsecas e viscoelásticas são as responsáveis por esta função. Disfunções vesicais podem ser decorrentes, dentre outras causas, de anormalidades intrínsecas da musculatura detrusora ou da composição de sua matriz extracelular (MEC). O colágeno corresponde a 50% do estroma vesical, possuindo importante papel na adaptação vesical a condições fisiopatológicas específicas. Os colágenos tipo I e III são os mais comuns, sendo o colágeno tipo III o primeiro a ser sintetizado em processos de reparação e fibrose. Diversas afecções como a obstrução infravesical (OIV) parcial crônica podem induzir estes processos através da remodelação da MEC e conseqüentemente alterar a função vesical. Acredita-se que a hipercolesterolemia também o faça, porém ainda não foi reproduzida tal associação a nível morfológico. O objetivo deste estudo é avaliar se dieta hipercolesterolêmica promove alterações estruturais vesicais em ratos, especialmente no que diz respeito à remodelação colágena. Método: Foram utilizadas 45 ratas da raça Wistar, de quatro semanas de idade, divididas em três grupos: 1) controle com dieta comum padrão para roedores (DN); 2) modelo de OIV com DN e 3) controle com dieta de alto teor lipídico (DATL 1,25% colesterol). Análise sérica do colesterol e fração LDL e medição do peso corporal foram realizadas em todos os animais inicialmente e no final do estudo. Com quatro semanas de estudo, as ratas dos grupos 1 e 3 foram submetidas à cirurgia simulada, enquanto os animais do grupo 2 foram efetivamente submetidos à cirurgia de OIV parcial. Após dissecção da uretra, fez-se uma ligadura parcial com Nylon 5-0, com um lúmen residual de aproximadamente 1 mm. Após seis semanas, todos os animais foram submetidos à remoção de suas bexigas e então sacrificados. Análise morfológica foi realizada através da coloração...

Purpose: Preserved bladder function is defined as the adequate storage and emptying of its urinary content. Compliance is an important factor for these functions and is directly related to the extracellular matrix composition. Its abnormalities can lead to bladder dysfunctions. The collagen represents 50% of bladder stroma, playing an important role in the bladder adaptation to specific pathologic conditions. Types I and III collagens are the most prevalent in bladder wall whereas type III collagen is the first synthesized in reparation and fibrosis processes. Bladder outlet obstruction (BOO) promotes this process and hypercholesterolemia is also believed to create conditions for it, although no morphologic association has already been demonstrated. In this study we aimed to verify if hypercholesterolemic diet promotes structural bladder wall modifications, regarding the collagen remodeling. Methods: Forty-five female heterogenic Wistar 4 weeks-old rats were divided into three groups: 1) control fed on a normal diet (ND); 2) BOO model fed on a ND and 3) control fed on a hypercholesterolemic diet (HCD 1.25% cholesterol). Initially, serum cholesterol, LDL-cholesterol and body weight were measured. Four weeks later groups 1 and 3 underwent a sham operation while group 2 underwent a partial BOO operation. After the urethra was dissected a 5-zero nylon suture was passed and tied loosely around the urethra with a 22G needle besides it. Six weeks later the bladders of all animals were removed, serum cholesterol and LDL-cholesterol analysis was performed, body weight was measured and then they were sacrificed. Morphological analysis was performed by Picrosirius red staining and immunohistochemistry for types I and III collagen. Statistical analysis was done comparing groups by the Oneway-Anova method and Tukey multiple comparisons when needed. Significance was considered when p < 0.05. Results: Wistar rats fed on a HC diet had a significant increase...

Relationship between serum concetrations of type III procollagen, hyluronic acid and histopathological findings in the liver of HCV-positive blood donors

BACKGROUND: Serologic markers have been proposed for monitoring hepatic fibrosis in chronic liver disease. Among fibrosis markers, type III procollagen (PIIIP) and hyaluronic acid have been studied in these patients. AIM: To evaluate the association between these serum markers with histological findings. METHODS: A prospective cross-sectional study was carried out with HCV-positive blood donors. The studied population included men and women whose age ranged from 18 to 60 years, with elevated liver function tests [ALT levels > 1.5 times the normal value and alterations of two or more of the following: any changes in the levels of ALT, aspartate aminotransferase, conjugated bilirrubin, gammaglobulin, gammaglutamyltranspeptidase, albumin, platelet count; alkaline phosphatase levels >1.5 times the normal value, or prothrombin time below 70 percent and above 60 percent]. Fourty-nine patients were submitted to liver biopsy, blood analysis of PIIIP, hyaluronic acid, besides liver function tests. RESULTS: Liver function tests were not associated with tissular fibrosis, as assessed by ALT (>1.5 times above normal, fibrosis risk=18.8 percent; <1.5 times, 11.8 percent). Elevated PIIIP was correlated with 66.7 percent chance of fibrosis, whereas normal levels, 9.3 percent. Hyaluronic acid, when elevated, gave a chance of 33.3 percent of fibrosis; when normal, 12.5 percent. CONCLUSION: There was no association between liver function tests, hyaluronic acid and fibrosis. However, PIIIP was related with liver fibrosis. Maybe, this marker should be useful to assess fibrosis in patients with chronic hepatitis C.

RACIONAL: Marcadores sorológicos têm sido propostos para monitorar fibrose hepática em doença crônica do fígado. Dentre os marcadores de fibrose, ácido hialurônico e procolágeno tipo III têm sido estudados nestes pacientes. OBJETIVO: Avaliar a associação de marcadores séricos de fibrose com achados histológicos. MÉTODOS: Foi realizado estudo transversal prospectivo em doadores de sangue anti-HCV positivos. A população estudada incluiu homens e mulheres com idade entre 18-60 anos com provas de função hepática alteradas (níveis de alanina aminotransferase >1.5 vezes do normal e alterações de dois ou mais dos seguintes: qualquer alteração nos níveis de alanina aminotransferase, aspartato aminotransferase, bilirrubina conjugada, gamaglobulina, gamaglutamiltranspeptidase, albumina, plaquetas, níveis de fosfatase alcalina >1,5 vezes o valor normal, tempo de protrombina abaixo de 70 por cento e acima de 60 por cento). Quarenta e nove pacientes foram submetidos a biopsia hepática e coleta de sangue para análise de procolágeno tipo III, ácido hialurônico e provas funcionais hepáticas. RESULTADOS: Não houve relação entre elevação de provas de função hepática e a presença de fibrose - ALT (>1,5 vezes acima do normal, risco de fibrose = 18,8 por cento; <1,5 vezes, 11,8 por cento). Procolágeno tipo III elevado foi correlacionado com 66,7 por cento chances de fibrose, enquanto nível normal, 9,3 por cento. Ácido hialurônico, quando elevado, demonstrou chance de 33,3 por cento de fibrose; quando normal, 12.5 por cento. CONCLUSÕES: Não houve associação entre provas de função hepática, ácido hialurônico e fibrose, mas houve entre esta última e procolágeno tipo III. Talvez este marcador possa ser útil para avaliar fibrose em pacientes com hepatite crônica pelo vírus C.