Distribuição ultraestrutural de colágeno tipo IV em feridas experimentais após tratamento com papaína / Ultrastructural distribution of type IV collagen in experimental wounds after treatment with papaine

RESUMO: Modelo do estudo: Experimental. Objetivo: Investigar a distribuição de fibras colágeno tipo IV, por microscopia eletrônica de transmissão, em feridas experimentais tratadas com soluções de papaína. Metodologia: Ratos Wistar (n=18), machos, adultos, foram submetidos a procedimento cirúrgico para a retirada de seção quadrada de pele da região cervical, e posteriormente separados em dois grupos: Grupo I (n = 9), sem tratamento; e Grupo II (n = 9), tratado com soluções de papaína a 10% (até o 7º dia), 6% (do 8º ao 14º dia) e 4% (do 15º ao 21º dia). Todos os animais foram sacrificados com 7, 14 e 21 dias, e as áreas lesadas retiradas, lavadas em PBS e fixadas em 2,5% de glutaraldeo, 4% de formaldeio recém preparado, em solução tamponada contendo 60 mM Pipes, 20 mM Hepes, 10 mM etilenoglicol-bis- (B-aminoetiléter) - Ácido N, N, N'-tetraacético, KCl 70 mM e MgCl2 5 mM pH 7,2 por 1h; pós-fixadas em solução contendo tetróxido de ósmio a 1%, ferrocianeto a 0,8% e cloreto de cálcio a 5 mM; desidratados em acetona graduada e embebidos em Epon® para confecção de secções finas, coradas com acetato de uranilo e citrato de chumbo, e examinadas em microscópio electrônico de transmissão Zeiss LEO EM 906 (TEM). Resultados: A distribuição das fibras colágeno tipo IV das lesões tratadas com papaína (Grupo II), com 14 e 21 dias, mostraram-se mais organizadas que as fibras do Grupo I. Conclusões: A papaína mostrou-se um importante facilitador para a organização de fibras colágeno tipo IV em feridas experimentais. (AU)

ABSTRACT Study model: Experimental. Objective: Investigate the distribution of type IV collagen fibers by transmission electron microscopy, in experimental wounds treated with papaine solutions. Methodology: Adult male Wistar rats (n = 18) underwent a surgical procedure to remove a square section of skin from the cervical region, and then separated into two groups: Group I (n = 9), without treatment; and Group II (n = 9), treated with papain solutions of 10% (up to the 7th day), 6% (from the 8th to the 14th day) and 4% (from the 15th to the 21st day). All animals were sacrificed at 7, 14 and 21 days, and the injured areas removed, washed in PBS, and fixed in 2.5% glutaraldehyde, 4% freshly prepared formaldehyde in buffered solution containing 60 mM Pipes, 20 mM Hepes, 10 mM ethyleneglycol-bis- (B-aminoethylether) -N, N, N'-tetraacetic acid, 70 mM KCl, and 5 mM MgCl 2 pH 7.2 for 1h; post-fixed in solution containing 1% osmium tethoxide, 0.8% ferrocyanide, and 5 mM calcium chloride; dehy-drated in graduated acetone and soaked in Epon® to make thin sections stained with uranyl acetate and lead citrate and examined under a Zeiss LEO EM 906 (TEM) transmission electron microscope. Results: The distribution of type IV collagen fibers from papaine-treated lesions (Group II) at 14 and 21 days was more organized than Group I fibers. Conclusions: Papaine has proven to be an important facilitator for the organization of type IV collagen fibers in experimental wounds. (AU)

Collagen IV and laminin expression in squamous cellcarcinomas of lower lip and tongue / Expressão de colágeno IV e laminina em carcinomas de células escamosas de lábio inferior e língua

In this study, the expression of extra cellular matrix proteins was immunohisto chemically studied and compared with the histological grading of squamous cell carcinomas of the lower lip and tongue. Material and Methods: The lower lip carcinomas (n =12) and the tongue carcinomas (n = 12) were histopathologically graded according to Bryne’smethod. The immunohisto chemical technique used specific antibodies for collagen IV and laminin. Histopathological and immunohisto chemical analysis were carried-out at the invasive tumor front. Results: Most of the lower lip carcinomas(91.7%) were classified with lower scores and all tongue carcinomas (100%) with high-grade malignant scores (p < 0.01). Collagen type IV expression was absent in the peri tumoral basement membrane in 50% of lower lip carcinomas and in66. 7% of tongue carcinomas (p = 0.09). Laminin expression was absent in the peritumoral basement membrane in 66.7% of lower lip carcinomas and in 58.3% of tongue carcinomas (p = 0.48). When these two glycoproteins were expressed, they showed alinear, thin and discontinuous pattern and a weak intensity of expression. Conclusion: The high gradem alignancy score of the tongue carcinomas was associated with the pattern of expression of the matrix proteins studied. This suggested that tonguesquamous cell carcinomas have more invasive potential and more aggressive biological behaviorthan the lower lip carcinomas...

Neste estudo, a expressão das proteínas da matriz extracelular foi estuda da imunoisto quimicamente e comparada com a classificação histológica dos carcinomas de células escamosas do lábio inferior e língua. Material e Métodos: Os carcinomas de lábio inferior (n = 12)e os carcinomas de língua (n = 12) foram graduados histopatologicamente de acordo com o método de Bryne. A técnica de imunoistoquímica utilizou anticorpos específicos para colágeno IV e laminina. Análises histopatológica e imunoistoquímica foram conduzidas na frente invasiva tumoral. Resultados: A maioria dos carcinomas de lábio inferior (91,7%) foi classificada em baixo grau e todos os carcinomas de língua (100%) em alto grau de malignidade (p < 0,01). A expressão de colágeno tipo IV estava ausente na membrana basal peri tumoral em 50% dos carcinomas de lábio inferior e em 66,7% dos carcinomas de língua (p = 0,09). A expressão de laminina estava ausente na membrana basal peri tumoral em 66,7%dos carcinomas do lábio inferior e em 58,3% dos carcinomas de língua (p = 0,48). Quando estas duas glicoproteínas foram expressas, mostraram-se comum padrão linear, fino e descontínuo e uma fraca intensidade de expressão. Conclusão: O alto grau de malignidade dos carcinomas de língua associou-se com o padrão de expressão das proteínas de matriz estudadas. Isso sugere que carcinomas de células escamosas de língua têm comportamento biológico mais agressivo e potencial mais invasivo do que os carcinomas de lábio inferior...

Bullous pemphigoid in a 3-month-old infant: case report and literature review of this dermatosis in childhood / Penfigoide bolhoso em lactente de 3 meses: relato de caso e revisao de literatura da dermatose na infancia

Bullous pemphigoid is an autoimmune subepidermal blistering dermatosis that is uncommon in childhood. We report a case of a female infant, 3 months old, which presented clinical and laboratory data for the confirmatory diagnosis of bullous pemphigoid. The authors used immunohistochemical staining for collagen type IV that allowed the differentiation of bullous pemphigoid from other subepidermal bullous diseases. Opportunely we review the clinical, immunological, therapeutic and prognostic features of this pathology in children.

O penfigoide bolhoso é uma dermatose bolhosa autoimune subepidérmica, incomum na infância. Relatamos um caso de lactente feminina, com 3 meses de idade, que apresentou dados clínicos e laboratoriais confirmatórios para o diagnóstico de penfigoide bolhoso. Os autores utilizaram a coloração de imuno-histoquímica para o colágeno tipo IV que permitiu a diferenciação do penfigoide bolhoso de outras buloses subepidérmicas. Oportunamente, revisamos as características clínicas, imunológicas, terapêuticas e prognósticas da patologia na criança.

Edema de Reinke: estudo da imunoexpressão da fibronectina, da laminina e do colágeno IV em 60 casos por meio de técnicas imunoistoquímicas / Reinkes'edema: immunoexpression study of fibronectin, laminin and colagen IV in 60 cases by imunohistochemical techniques

Edema de Reinke é doença crônica da laringe na qual a camada superficial da lâmina própria é expandida por muco espesso conferindo-lhe aspecto gelatinoso. Relaciona-se ao tabagismo e acomete, preferencialmente mulheres, as quais apresentam a voz mais grave. Suas características histológicas nem sempre conseguem diferenciá-lo das demais lesões benignas da laringe, havendo necessidade de técnicas histológicas adicionais. Objetivos: Estudar a imunoexpressão da fibronectina, do colágeno IV e da laminina no edema de Reinke por meio de técnicas imunoistoquímicas. Estudo prospectivo. Material e métodos: Blocos histológicos de 60 casos cirúrgicos de edema de Reinke foram resgatados, submetidos a novos cortes e às reações imunoistoquímicas para fibronectina, laminina e colágeno IV pelo método da Avidina Biotina Peroxidase. Todos os pacientes eram fumantes e adultos, sendo 50 mulheres e 10 homens. Resultados: As análises da imunoexpressão da fibronectina, do colágeno IV e da laminina foram mais expressivas no endotélio dos vasos (68,33 por cento, 76,66 por cento, 73,33 por cento, respectivamente), e menos relevantes na membrana basal (25,0 por cento, 5,0 por cento e 3,3 por cento, respectivamente). Conclusões: No edema de Reinke, a imunoexpressão da fibronectina, da laminina e do colágeno IV na membrana basal não apresentam relevância, havendo predomínio desses anticorpos no endotélio do vasos.

Reinke's edema is chronic laryngeal disease in which the superficial layer of the lamina propria is expanded by thick mucus, giving it a gelatin aspect. The disease is directly related to smoking and more frequent in women, who end up having a lower tone of voice. Its histological characteristics cannot always distinguish it from other benign lesions of the larynx for which additional histological techniques are necessary. AIM: to study the immunoexpression of fibronectin, collagen IV and laminin in Reinke's edema by immunohistochemical technique. Prospective study. Materials and methods: histological blocks of 60 cases of surgical Reinke's edema were saved, submitted to new cross-sections and to immunohistochemical reactions for fibronectin, laminin and collagen IV by the Avidin-Biotin-Peroxidase method. Fragments of five normal vocal folds were used as control, removed during autopsy. All patients were chronic smokers and adults- 50 women and 10 men. Results: the immunoexpression of fibronectin, collagen IV and laminin was more important in the endothelium of blood vessels (68.33 percent, 76.66 percent, 73.33 percent, respectively) and less relevant in the basement membrane (25.0 percent, 5.0 percent and 3.3 percent, respectively). Conclusions: the immunoexpression of fibronectin, laminin and of collagen IV in the basal membrane of Reinke's edema was not relevant, with a predominance of these antibodies in the endothelium of blood vessels.

Dados clínicos e da audição em indivíduos com Síndrome de Alport / Clinical data and hearing of individuals with Alport syndrome

A Síndrome de Alport (SA) é uma desordem hereditária, caracterizada por nefropatia, muitas vezes, com perda auditiva sensorioneural e com defeitos oculares. OBJETIVO: Analisar os dados clínicos e da audição em indivíduos com SA, com ênfase na correlação entre alteração renal e perda auditiva (PA). FORMA DE ESTUDO: clínico prospectivo com coorte transversal. CASUÍSTICA E MÉTODO: 37 indivíduos realizaram avaliação otorrinolaringológica e testes audiológicos. Foram considerados para a análise estatística da PA os resultados das audiometrias de tons puros. RESULTADOS: Nos 28 indivíduos que apresentavam alterações clínicas foram encontrados 46,4 por cento de DLX e 53,6 por cento de AD. A PA ocorreu em 46,1 por cento dos avaliados. 12 pacientes tinham PA no exame audiométrico 11,5 por cento, leve e 34,6 por cento, moderada. Comparados os familiares normais aos que tinham alteração renal, todos os que apresentavam PA mostravam comprometimento renal. Em 30,8 por cento a configuração era descendente suave em agudos e em 11,5 por cento era plana. CONCLUSÕES: A distribuição dos padrões de herança não coincide com o descrito na literatura. A PA é um achado extra-renal freqüente. Existe associação entre acometimento renal e PA (p= 0,009). As configurações mais freqüentes foram: descendente suave em agudos e plana. Não há associação entre a PA e a idade. Não existe correlação entre PA e sexo neste grupo.

Alport Syndrome (AS) is a hereditary disease, characterized by nephropathy, often times with sensorineural hearing loss and ocular defects. AIM: to analyze the clinical and hearing information from individuals with AS, more specifically the correlation between renal disorder and hearing loss (HL). STUDY DESIGN: clinical prospective with cross-sectional cohort. MATERIALS AND METHODS: 37 individuals underwent otorhinolaryngological evaluation and were submitted to audiologic tests. For HL statistical analysis we considered only the results from the pure tone audiometries. RESULTS: of the 28 individuals with clinical alterations, we found 46.4 percent of DLX and 53.6 percent of AD. HL happened to 46.1 percent of the individuals evaluated. 12 patients presented HL in the audiometric test: 11.5 percent mild and 34.6 percent moderate. Comparing the normal relatives with those with renal disorder; all that had HL also had renal disorder. In 30.8 percent the curve shape was mild descending in the high frequencies and in 11.5 percent it was flat. CONCLUSIONS: The inheritance pattern distribution does not match literature descriptions. HL is a frequent extra-renal finding. There is an association between renal involvement and HL (p= 0.009). The most frequent curve shapes: mild descending in the high frequencies and flat. There was no association between HL and age. There is no correlation between the HL and gender in this group.

Expressão imuno-histoquímica de colágeno IV, tenascina-C e fibronectina em lesões centrais e periféricas de células gigantes / Immunohistochemical expression of collagen IV, tenascin-C and fibronectinin central and peripheral giant cell lesions

Introdução - As lesões centrais e periféricas de células gigantes constituem um grupo de entidades patológicas que apesar de apresentarem características histopatológicas semelhantes, possuem etiologia e natureza incompletamente elucidadas. Material e Métodos - Procedeu-se análise imuno-histoquímica em 8 casos de lesões periféricas de células gigantes (LPCGs) e 16 casos de lesões centrais de células gigantes (LCCGs), obtidos dos arquivos do Serviço de Anatomia Patológica do Departamento de Odontologia da Universidade Federal do Rio Grande do Norte, quanto à expressão e distribuição das proteínas da matriz extracelular colágeno IV, tenascina-C e fibronectina. Resultados - A análise dos espécimes revelou expressão descontínua de colágeno IV na membrana basal subepitelial das LPCGs, comumente associadas às áreas de infiltrado inflamatório, bem como, em membrana basal perivascular de LPCGs e LCCGs, com padrão contínuo, diminuindo de intensidade da periferia para o centro das lesões. A tenascina-C exibiu imunorreatividade na matriz extracelular intersticial, nos padrões reticular e fibrilar, com distribuição predominantemente dispersa e não uniforme, nas lesões pesquisadas. A fibronectina demonstrou expressão imuno-histoquímica semelhante entre LPCGs e LCCGs, exibindo distribuição uniforme por toda a matriz extracelular intersticial, com padrão reticular e fibrilar, freqüentemente associados à presença de células gigantes multinucleadas e células mononucleadas. Conclusão - Os resultados obtidos não revelaram diferenças significativas na expressão imuno-histoquímica das proteínas, entre as lesões estudadas.

Introdution - The central and peripheral giant cells lesions represent a group of pathological entities that despite exhibiting similar histopatological features, etiology and nature are not entirely clear. Methods - It was performed an immunohistochemical analysis of 8 cases of peripheral giant cell lesion (PGCLs) and 16 cases of central giant cell lesion (CGCLs) obtained from the archives of Surgical Oral Pathology of Federal University of Rio Grande do Norte, in relation to expression and distribution of extracellular matrix proteins collagen IV, tenascin-C and fibronectin. Results - The specimens revealed discontinuous expression of collagen IV in epithelial basement membrane of PGCLs, commonly associated with areas showing inflammatory cells. Additionally, collagen IV was observed in vascular basal membrane of PGCLs and CGCLs, showing continuous pattern, fading from periphery to center areas. Tenascin-C expression was verified in extracellular matrix displaying reticular and fibrillar patterns and predominantly diffuse and heterogeneous distribution both in PGCLs and CGCLs. Immunohistochemical expression of fibronectin was observed equally in PGCLs and CGCLs, exhibiting a uniform distribution through extracellular matrix, with reticular and fibrillar patterns, mainly in the neighborhood of mononucleated and multinucleated cells. Conclusion - The results obtained demonstrated no significant differences in the pattern of expression of collagen IV, tenascin-C and fibronectin among PGCLs and CGCLs studied.