Comparative genomic analysis of two novel plasmids from Acidithiobacillus ferrivorans strain PQ33 / Análisis genómico comparativo de dos nuevos plásmidos de la cepa PQ33 de Acidithiobacillus ferrivorans

Abstract Acidithiobacillus ferrivorans is a psychrotolerant acidophile capable of growing and oxidizing ferrous and sulphide substrates at low temperatures. To date, six genomes of this organism have been characterized; however, evidence of a plasmid in this species has been reported only once, whereby there is no conclusive role of the plasmids in the species. Herein, two novel plasmids of A. ferrivorans PQ33 were molecularly characterized and compared at a genomic scale. The genomes of two plasmids (12 kbp and 10 kbp) from A. ferrivorans PQ33 (NZ_LVZL01000000) were sequenced and annotated. The plasmids, named pAfPQ33-1 (NZ_CP021414.1) and pAfPQ33-2 (NZ_CP021415.1), presented 9 CDS and 13 CDS, respectively. In silico analysis showed proteins involved in conjugation (TraD, MobA, Eep and XerD), toxin-antitoxin systems (HicA and HicB), replication (RepA and DNA binding protein), transcription regulation (CopG), chaperone DnaJ, and a virulence gene (vapD). Furthermore, the plasmids contain sequences similar to phosphate-selective porins O and P and a diguanylate cyclase-phosphodiesterase protein. The presence of these genes suggests the possibility of horizontal transfer, a regulatory system of plasmid maintenance, and adhesion to substrates for A. ferrivorans species and PQ33. This is the first report of plasmids in this strain.

Resumen Acidithiobacillus ferrivorans es un acidófilo psicrotolerante capaz de hacer crecer y oxidar sustratos ferrosos y sulfurosos a bajas temperaturas. Hasta la fecha se han caracterizado seis genomas de este organismo; sin embargo, la evidencia de un plásmido en esta especie ha sido informado solo una vez, por lo que no hay un rol concluyente de los plásmidos en la especie. Aquí, dos plásmidos novedosos de A. ferrivorans PQ33 se caracterizaron molecularmente y se compararon a escala genómica. Se secuenciaron y anotaron los genomas de dos plásmidos (12 kpb y 10 kpb) de A. ferrivorans PQ33 (NZ_LVZL01000000). Los plásmidos, denominados pAfPQ33-1 (NZ_CP021414.1) y pAfPQ33-2 (NZ_CP021415.1), presentaron 9 CDS y 13 CDS, respectivamente. El análisis in silico mostró proteínas involucradas en la conjugación (TraD, MobA, Eep y XerD), sistemas de toxina-antitoxina (HicA y HicB), replicación (RepA y proteína de unión al ADN), regulación de la transcripción (CopG), chaperona DnaJ y un gen de virulencia (vapD). Además, los plásmidos contienen secuencias similares a las porinas selectivas de fosfato O y P y una proteína diguanilato ciclasa-fosfodiesterasa. La presencia de estos genes sugiere la posibilidad de transferencia horizontal, un sistema regulador de mantenimiento de plásmidos y adhesión a sustratos para especies de A. ferrivorans y PQ33. Este es el primer informe de plásmidos en esta cepa.

Bilirrubina: metabolismo, pruebas de laboratorio e hiperbilirrubinemia / Bilirubin: metabolism, laboratory tests and hyperbilirubinemia

Resumen La bilirrubina es el producto final de la degradación del grupo hem. La bilirrubina no conjugada (BNC) se forma en las células retículoendoteliales, transportada al hígado, donde es conjugada a glucurónidos y secretada a los canalículos. La BNC se solubiliza en el suero por medio de su fuerte unión con la albúmina. La unión bilirrubina-albúmina es una función de las concentraciones de la albúmina y de la bilirrubina y de la afinidad de unión por la bilirrubina. La fracción de bilirrubina no unida o bilirrubina libre plasmática (Bf) se incrementa significativamente conforme el nivel de bilirrubina sérica total (BST) alcanza la capacidad de unión de la albúmina. La Bf es considerada un mejor indicador de neurotoxicidad que la BST, a causa de que solamente la bilirrubina libre puede cruzar la barrera hematoencefálica. En la práctica médica la bilirrubina es un marcador de disfunción hepática, colestasis o enfermedad hemolítica. Una variedad de factores limita la sensibilidad y la especificidad de la medición de la bilirrubina para detectar anormalidades: lipemia, hemólisis, exposición a la luz visible y el estado de ayuno. La hiperbilirrubinemia puede ser clasificada como prehepática, hepática y poshepática, y esto brinda un marco útil para identificar la causa subyacente. Además, hay bilirrubina conjugada y no conjugada. La hiperbilirrubinemia y la ictericia neonatales se presentan en casi todos los recién nacidos y puede ser benigna si su progresión a hiperbilirrubinemia es reconocida, monitoreada y prevenida o tratada en una manera oportuna.

Abstract Bilirubin is the end product of heme breakdown. Unconjugated bilirubin (UB) is formed in reticuloendothelial cells, transported to the liver where it is conjugated to glucuronides, and then secreted into the canaliculi. UB is solubilized in serum via very tight linkage to albumin. Bilirubin-albumin binding is a function of the concentration of bilirubin and albumin and the binding affinity for bilirubin. The fraction of unbound bilirubin or plasma free bilirubin (Bf) increases significantly as the total serum bilirubin (TSB) level approaches the binding capacity of albumin. Bf is thought to be better indicator of neurotoxicity than TSB, because only plasma free bilirubin can cross the blood-brain barrier. In medical practice bilirubin is a marker of liver dysfunction, cholestasis or hemolytic disease. A variety of factors limit both the sensitivity and the specificity of bilirubin measurement to detect the abnormalities: lipemia, hemolysis, exposure of visible light and fasting state. Hyperbilirubinemia can be categorised as prehepatic, hepatic or poshepatic, and this provides a useful framework for identifying the underlying cause. In addition, there are conjugated and unconjugated bilirubin. Neonatal hyperbilirubinemia and jaundice occur in almost all newborns and may be benign if its progression to extreme hyperbilirubinemia is recognized, monitored and prevented or managed in a timely manner.

Asociación de la resistencia al mercurio con la resistencia a antibióticos en Escherichia coli aislados del litoral de Lima, Perú / Association of mercury resistance with resistance to antibiotics in Escherichia coli isolated from the coast of Lima, Peru

El objetivo de este estudio fue investigar la resistencia al mercurio y los antibióticos, y la transferencia de resistencia al mercurio por plásmidos conjugativos en 55 cepas de Escherichia coli aisladas de aguas superficiales del litoral de Lima, Perú. Se determinó la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) a diversos antibióticos y al mercurio en las cepas aisladas. Para confirmar la resistencia plasmídica al mercurio, se realizó la curación de estos con dodecil sulfato de sodio (SDS) 10%. El ensayo de transferencia de plásmidos por conjugación se realizó usando la cepa receptora E. coli DH5α sólo con las cepas que mostraron sensibilidad al mercurio después de la curación. La extracción de los plásmidos de resistencia fue realizada sólo en las cepas transconjugantes resistentes al mercurio. 41 (74.5%) cepas fueron resistentes al mercurio (HgR), presentando CMIs entre 30 μM (8.25 ppm) y 300 μM (82.5 ppm), de estás, 33 fueron HgR mediante plásmidos y de este último grupo, 14 fueron también resistentes a antibióticos. Sólo 6 cepas poseían plásmidos conjugativos con resistencia al mercurio, mostrando una frecuencia de transconjugación entre 9.41x10-4 y 4.76x10-2%. La alta prevalencia de cepas de E. coli HgR aisladas de la costa limeña podría ser un problema de salud pública y ambiental. En este sentido, los plásmidos congugativos pueden contribuir con la diseminación de mercurio y/o resistencia a antibióticos entre comunidades bacterianas en ambientes marinos.

The Lima coast is highly affected by anthropogenic effluents from wastewater from contaminated urban rivers that flow into the coast. The objective of this study was to investigate the resistance to mercury and antibiotics, and the transfer of resistance to mercury by conjugative plasmids in 55 strains of Escherichia coli isolated of surface seawater from coastal Lima, Peru. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) was determined for various antibiotics and for mercury in the isolated strains. To confirm the plasmid resistance to mercury, the curing was carried out with 10% sodium dodecyl sulfate (SDS). The plasmid transfer assay by conjugation was performed using the E. coli DH5α as recipient strain only with the strains that showed sensitivity to mercury after curing. The extraction of the resistance plasmids was carried out only in the transconjugant strains resistant to mercury. 41 (74.5%) strains were resistant to mercury (HgR), with MICs between 30 μM (8.25 ppm) and 300 μM (82.5 ppm), of these, 33 were HgR by plasmids and of this last group, 14 were also resistant to antibiotics. Only 6 strains had conjugative plasmids with mercury resistance, showing a transconjugation frequency between 9.41x10-4 and 4.76x10-2%. The high prevalence of HgR in E. coli strains isolated from the coast of Lima could be a public and environmental health problem. In this sense, congugative plasmids can contribute to the spread of mercury and/or resistance to antibiotics among bacterial communities in marine environments.

Caracterización de los plásmidos de cepas de escherichia coli aislados de coprocultivos de niños sanos / Characterization of plasmids of escherichia coli strains isolated from stool culture of healthy children

La microbiota intestinal representa una reserva potencial de organismos resistentes a los antimicrobianos, y el sitio donde los genes de resistencia pueden ser transferidos desde la microbiota comensal a los microorganismos virulentos. En este trabajo se caracterizaron los perfiles fenotípicos de resistencia a diversos agentes antimicrobianos, en aislados de Escherichia coli, obtenidos de niños sanos, menores de 5 años de edad, y la capacidad de transmisibilidad de esos determinantes de resistencia, mediante ensayos de conjugación. Los aislados de E. coli se obtuvieron partir de coprocultivos de niños sanos mediante el uso de placas de Mc Conkey suplementadas con ampicilina y se les determinó el perfil de resistencia a diversos antibióticos, para luego realizar ensayos de conjugación. A partir de 90 coprocultivos, fueron aisladas 33 cepas de E. coli resistentes a algún antibiótico, presentándose un 66,6% del total de las cepas resistentes en al menos dos antibióticos. Luego de los ensayos de conjugación, se encontró que un 47,4% de las cepas presenta plásmidos conjugativos, transfiriendo marcadores de resistencia. Los patrones generados por enzimas de restricción fueron distintos entre ellos. Estos resultados nos permiten sugerir que estos elementos extracromosomales sean los responsables de la rápida diseminación de la resistencia a los antimicrobianos en la población bacteriana de niños sanos.

Gastrointestinal microbiota represents the potential reserve of antimicrobial-resistant organisms, and the site where resistance genes can be transferred from the commensally microbiota to virulent microorganisms. In this work we characterized the phenotypic resistance profiles to various antimicrobial agents in strains of Escherichia coli isolated from healthy children, less than 5 years of age, and the ability of these determinants of resistance to be mobilized by conjugation. The isolation of E. coli strains from stool culture from healthy children was made through the use of Mc Conkey media supplemented with ampicillin. The profile of resistance to various antibiotics was determined and then conjugation was carried out. From 90-stool culture 33 strains of E. coli resistant to some antibiotic were isolated, 63.6% of bacteria were resistant to -at least- two antibiotic. It have be demonstrated that 47.4% of the isolates harbored conjugative plasmids, which can mobilize markers of resistance. Restriction profiles analysis showed that all patterns were different. These results allow us to suggest that these extracromosomals elements are responsible for the rapid spread of resistance to antimicrobials in the bacterial population of healthy children.

Production of a conjugate between the rK346 antigen from Leishmania infantum and the horseradish peroxidase C for the detection of rK346 antibodies / Producción de un conjugado entre el antígeno rK346 de Leishmania infantum y la peroxidasa C de rábano picante para la detección de anticuerpos rK346

It was designed and characterized a reporter system to be captured by antibodies bound to ELISA plates. The system was designed with the rK346 from Leishmania infantum, a highly antigenic and specific protein. The rK346 was coupled to the horseradish peroxidase C (HRPc) from Armoracia rusticana using glutaraldehyde or sulfo-SMCC. Glutaraldehyde conjugation was performed in two steps. Separation of conjugates was carried out using a Sepharose S-200 in size exclusion chromatography (SEC); fractions were analyzed via HRPc activity and through ELISA plates sensitized with polyclonal anti-rK346 IgG purified from rabbit serum. A heterogeneous population of conjugates rK346-HRPc was obtained with molecular weights ranging between 109.7 ± 16.5 to 67.6 ± 10.1 kDa; with rK346-HRPc stoichiometries of 1:2; 2:1; 3:1; and 2:2. Conjugation using sulfo-SMCC was carried out first by introducing -SH groups onto the HRPc using the SATA reagent and the antigen was modified with sulfo-SMCC during 45 min. Separation and analysis of conjugates was performed similarly as with glutaraldehyde, resulting in a heterogeneous population of conjugates rK346-HRPc with molecular weights between 150.5 ± 22.6 to 80.0 ± 12.0 kDa; with rK346-HRPC stoichiometries of 2:1; 1:2; 2:2; and 1:3, with an increased conjugation efficiency in comparison with glutaraldehyde. This enables sulfo-SMCC to be used as a potential reagent for coupling the antigen to the HRPc, to design an economic, specific and easy method to apply as a reporter system, available to assess individuals at risk and/or at early and late stages of visceral leishmaniasis.

Se diseñó y caracterizó un sistema reportero para ser capturado por anticuerpos enlazados a placas de ELISA. El sistema fue diseñado con una proteína altamente antigénica y específica, la rK346 de Leishmania infantum. La rK346 fue acoplada a la peroxidasa C de rábano picante (HRPc) de Armoracia rusticana usando glutaraldehido o sulfo-SMCC. La conjugación con glutaraldehido fue realizada en dos pasos. La separación de los conjugados fue llevada a cabo a través de una cromatografía de exclusión molecular sefarosa S-200 (CES), las fracciones fueron analizadas midiendo la actividad HRPc y por placas ELISA sensibilizadas con inmunoglobulina G policlonal anti-rK346, purificada desde suero de conejo. Se obtuvo una población heterogénea de conjugados rK346-HRPc en un rango de pesos moleculares entre 109,7 ± 16,5 a 67,6 ± 10,1 kDa; con estequiometria rK346-HRPc de 1:2; 2:1; 3:1; y 2:2. La conjugación usando sulfo-SMCC se llevó a cabo primero introduciendo grupos -SH en la HRPc usando el reactivo SATA; el antígeno se modificó con sulfo-SMCC. La separación y el análisis de los conjugados se realizaron de forma similar que con el glutaraldehido, resultando en una población heterogénea de conjugados rK346-HRPc con un rango de pesos moleculares entre 150,5 ± 22,6 a 80,0 ± 12,0 kDa; con estequiometria rK346-HRPC de 2:1; 1:2; 2:2 y 1:3, y con una eficiencia de conjugación incrementada en comparación con glutaraldehido. De esta forma, se habilitó al sulfo-SMCC como un reactivo potencial para acoplar antígenos a la HRPc, como método para el diseño de un sistema reportero económico, especifico y fácil de aplicar, útil en la evaluación de individuos en riesgo y/o en estados tempranos o avanzados de leishmaniasis visceral.

Resistencia antimicrobiana de bacterias aisladas de clínicas veterinarias de la ciudad de Ibagué, Colombia / Antimicrobial resistance of bacteria isolated from veterinary clinics in the city of Ibague, Colombia

Objetivo: Aislar bacterias que circulan en clínicas veterinarias de la ciudad de Ibagué, conocer su perfil de resistencia a antimicrobianos y en algunas, su capacidad de transferir dicha resistencia a bacterias sensibles. Materiales y métodos: Se tomaron muestras de 10 clínicas a las que se les realizó cultivo bacteriológico, identificación bioquímica, antibiograma y pruebas de conjugación bacteriana para transmitir dicha resistencia. El diseño metodológico fue de tipo cuasi-experimental, el análisis de los resultados se hizo mediante estadística descriptiva. Resultados: En todas las áreas de las 10 clínicas se encontraron bacterias potencialmente patógenas multirresistentes que pertenecían a 8 de 16 especies aisladas. Los microorganismos que aparecieron con mayor frecuencia en los diferentes sitios de las clínicas fueron: Staphylococcus intermedius, Acinetobacter baumannii, Pantoea agglomerans, Klebsiella pneumoniae y Burkhordelia cepacia. Los lugares donde se aislaron microorganismos multirresistentes con más frecuencia fueron el piso de consulta externa y la mesa de examen clínico. La resistencia se presentó principalmente a amoxicilina y cloranfenicol. El estudio muestra la presencia de patógenos potenciales de causar infecciones nosocomiales, que se constituyen en reservorio de genes de resistencia a los antibióticos para las bacterias patógenas no resistentes.

Objective: To isolate bacteria circulating in veterinary clinics in the city of Ibague for knowing its antimicrobial resistance profile and in some cases, its ability to transfer this resistance to susceptible bacteria. Materials and Methods: Samples of 10 clinics that underwent bacterial culture, biochemical identification, antimicrobial susceptibility testing and bacterial conjugation to transfer this resistance were taken. The methodological design was quasi-experimental and the analysis of the results was made using descriptive statistics. Results: In all areas of the 10 clinical multiresistant potentially pathogenic bacteria which belonged to 8 of 16 species isolated were found. The microorganisms that occurred more frequently in different clinical places were: Staphylococcus intermedius, Acinetobacter baumannii, Pantoea agglomerans, Klebsiella pneumoniae and Burkhordelia cepacia. The places where multiresistant microorganisms were most frequently isolated were the outpatients' floor and the clinical examination table. The resistance occurred mainly to amoxicillin and chloramphenicol. The study shows the presence of potential pathogens causing nosocomial infections, which constitute a reservoir of resistance genes to antibiotics for non-resistant pathogenic bacteria.

Evaluación de la resistencia a agentes desinfectantes de bacterias aisladas de ambientes naturales / Evaluation of resistance to disinfectant agents of bacteria isolated from natural environments

Los antisépticos y desinfectantes son utilizados extensivamente para la prevención, vigilancia y control de las infecciones. Entre los más utilizados se encuentran los compuestos catiónicos de amonio cuaternario (QACs). El uso y abuso cotidiano de estos compuestos ha conllevado a la selección de cepas bacterianas resistentes. En este estudio, nos propusimos evaluar la resistencia a agentes desinfectantes en cepas bacterianas, multiresistentes a los antibióticos de uso frecuente, aisladas de ambientes naturales, y bacterias aisladas de pacientes hospitalizados. Se utilizó la prueba de suspensión cuantitativa para evaluar los niveles de resistencia, y ensayos de conjugación bacteriana para examinar la posible asociación de los determinantes de resistencia a moléculas plasmídicas transferibles. Los microorganismos gramnegativos, como Pseudomonas aeruginosa, resultaron ser los más resistentes. Las cepas ambientales presentaron niveles mayores de resistencia en comparación con las hospitalarias. Se obtuvieron transconjugantes con niveles de resistencia semejantes a las respectivas cepas donantes, indicando que estos determinantes de resistencia a desinfectantes están codificados en plásmidos, y cuyo análisis por patrones de restricción demostró que existen, al menos, dos moléculas plasmídicas diseminadas entre las cepas del mismo hábitat. Nuestros resultados representan un aporte que permitirá implementar medidas más exitosas para evitar la diseminación de estas bacterias resistentes.

Antiseptics and disinfectants are widely used for prevention, surveillance and control of infections. Among those most used are quaternary ammonium cationic compounds (QACs). The daily use and abuse of these compounds has resulted in the selection of resistant bacterial strains. In this study we decided to evaluate the resistance to disinfectant agents of bacterial strains multiresistant to frequently used antibiotics, both isolated from natural environments and isolated from hospital patients. The quantitative suspension test was used to evaluate resistance levels, and bacterial conjugation assays to examine the possible association of resistance determinants to transferable plasmid molecules. Gram negative microorganisms such as Pseudomonas aeruginosa appeared to be the most resistant. Environmental strains showed higher resistance levels as compared with hospital strains. We obtained transconjugants with resistance levels similar to those of the respective donor strain, indicating that these determinants of resistance to disinfectants are coded in plasmids; when analyzed by restriction patterns they showed that there were at least two plasmid molecules disseminated among the strains of the same habitat. Our results represent a contribution that will allow to implement more successful measures to avoid the dissemination of these resistant bacteria.

Evaluación de la inmovilización de un péptido de gp36 de VIH-2 en membranas de nitrocelulosa / Evaluation of the immobilization of one HIV-2 gp36 peptide in nitrocellulose membrane

Introducción: la inmovilización de antígenos a soportes sólidos se utiliza para el desarrollo de diversos inmunoensayos. Una de las primeras tecnologías desarrolladas fue la adsorción de proteínas por aplicación directa sobre la nitrocelulosa. Objetivo: normalizar la inmovilización de un péptido sintético de la proteína de transmembrana gp36 del VIH-2, a un soporte de nitrocelulosa para fines diagnósticos y evaluar los parámetros de desempeño en un grupo de muestras de sueros con reactividad de interés conocida. Métodos: el péptido se inmovilizó de forma libre, conjugado a la albúmina de suero bovina (BSA) y a la hemocianina de lapa marina (KLH) como proteínas portadoras. Se analizaron los parámetros de inmovilización y se determinó la variante óptima. Con la variante escogida se evaluó la sensibilidad y especificidad diagnóstica frente a paneles de referencia del Laboratorio de Investigaciones del SIDA. La especificidad analítica se evaluó con muestras reactivas a VIH-1 y HTLV-I. Resultados: el análisis de las variantes de péptido inmovilizadas a las membranas de nitrocelulosa, demostró que el péptido gp36-BSA, fue el que logró la mayor diferenciación entre muestras positivas y negativas. Se obtuvo 100 por ciento de sensibilidad y 95,2 por ciento de especificidad diagnóstica, así como 100 por ciento de especificidad analítica. Conclusiones: el péptido gp36-BSA inmovilizado en membranas de nitrocelulosa es eficaz en el diagnóstico serológico del VIH-2, lo cual permitirá considerarlo para su empleo con fines diagnósticos en sistemas que utilicen como fase sólida la nitrocelulosa.

Introduction: antigen immobilization in solid supports is used for the development of several immunoassays. One of the first technologies developed was the protein adsorption by direct application to nitrocellulose. Objective: to standardize the immobilization of a synthetic peptide of the HIV-2 transmembrane protein gp36 to nitrocellulose support for diagnostic purposes and to evaluate the performance parameters in a group of serum samples with recognized interesting reactivity. Methods: the peptide was freely immobilized, conjugated to bovine serum albumin (BSA) and to keyhole limpet hemocyanin (KLH) as carrier proteins. Immobilization parameters were analyzed and then, the optimal immobilization alternative was determined. Using the chosen variant, the diagnostic sensitivity and specificity against reference panels of the AIDS Research Laboratory were evaluated. Analytical specificity was evaluated with reactive samples to HIV-1 and HTLV-I. Results: the analysis of the immobilized peptide variants to nitrocellulose membranes showed that the gp36 peptide-BSA was the one that succeeded in setting the greatest differentiation between positive and negative samples. There were observed 100 percent sensitivity, 95.2 percent diagnostic specificity and 100 percent analytical specificity. Conclusions: the gp36-BSA peptide immobilized on nitrocellulose membranes showed efficacy for the serological diagnosis of HIV-2, which will allow considering this peptide for diagnostic uses in systems with nitrocellulose based solid phase.

Análisis de transferencia horizontal de genes en ensayos de biorremediación con grasas recalcitrantes / Analysing horizontal gene transfer in bioremediation trials using recalcitrant grease

El empleo de microorganismos como herramienta para la mineralización de contaminantes orgánicos es una práctica que ha tomado mucha fuerza gracias a su eficiencia y bajo costo. La transferencia horizontal vía conjugación de genes es un requerimiento básico para optimizar procesos de biorremediación, por esta razón, además de conocer la diversidad metabólica es fundamental entender las interacciones que ocurren en una comunidad bacteriana para potenciar los procesos de biorremediación en campo.En este estudio se busca evaluar el potencial de transferencia horizontal (TH), tanto in vitro como en microcosmos de suelo, de aislamientos de bacterias obtenidas de un pasivo ambiental de grasas provenientes de la explotación carbonífera del Cerrejón. Inicialmente se agruparon los aislamientos de acuerdo con sus patrones de resistencia a antibióticos: ampicilina, cloramfenicol, gentamicina, tetraciclina y kanamicina. El potencial de TH de las cepas Vlf4, Ot3, Ot6, Pgt4, Blf11 y Vlf13 fue evaluado in vitro en medio sólido Luria-Bertani (LB) donde se obtuvieron nuevos fenotipos a partir de los cruces Vlf13xOt6 y Pgt4xOt6, el nuevo fenotipo indica resistencia a los dos marcadores (ampR, kanR) y su morfología sugiere que el receptor, en los dos casos, es la cepa Ot6. Los parentales Vlf13, Pgt4 y Ot6 fueron identificados por amplificación del gen RNAr 16S como Pseudomonas sp., Pseudomonas sp. y Chryseobacterium sp., respectivamente, y los transconjugantes como Chryseobacterium sp. Posteriormente, estos dos cruces fueron sometidos a ensayos de transferencia horizontal en microcosmos de suelos, donde se hizo evidente nuevamente la presencia de TH a una menor tasa. Los resultados obtenidos indican la posibilidad de un potencial de transferencia horizontal de genes entre los aislamientos seleccionados, dando lugar a la probabilidad de formular en futuros estudios un consorcio de bacterias que demuestran tener esta ventaja adaptativa.

The use of microorganisms as a tool for the mineralization of organic pollutants is a practice that has begun to gain strength due to its efficiency and low cost. Horizontal gene transfer by conjugation is important for the optimization of bioremediation processes. For this reason it is fundamental to study the metabolic diversity of catabolic pathways, but we must also understand the microbial interactions occurring in bioremediation consortia. This will help us improve bioremediation in field.The purpose of this study was to evaluate the horizontal gene transfer (HGT) potential, in vitro and in soil microcosms, of bacterial strains isolated from grease samples obtained from a disposal site situated in the coal mine “Cerrejon”. Initially the isolates were grouped by selective markers: Ampicillin, chloramphenicol, gentamicin, tetracycline and kanamycin. The HGT potential of strains: Vlf4, Ot3, Ot6, Pgt4, Blf11 y Vlf13 was evaluated in vitro on Luria-Bertani LB agar. New phenotypes were obtained from matings between Vlf13xOt6 and Pgt4xOt6. The new phenotype indicates resistances to both antibiotic markers and its morphology suggests that isolate Ogt6 is the receptor in both cases. The parental strains Vlf13, Pgt4 and Ot6 were identified by RNAr 16S as Pseudomonas sp. Pseudomonas sp. and Chryseobacterium sp. respectively and the transconjugants as Chryseobacterium sp. Subsequently soil microcosms were conducted with Vlf13xOt6 and Pgt4xOt6 and new phenotypes were detected at a lower rate again but with the same possible receptor but. These results suggest the possibility of horizontal gene transfer potential within the selected isolates, giving the possibility of formulating, in future studies, a bacterial consortium with an adaptive advantage.

Resistencia bacteriana / Bacterial resistance to antimicrobial agents

Se presenta un panorama de la resistencia bacteriana Incluyendo su fisiopatogenia y formas de presentación y se establecen algunas consideraciones generales de tipo clínico como auxiliares para racionalizar el uso de los antimicrobianos y evitar o retardar el problema de la resistencia; éste plantea la necesidad de un reordenamiento definitivo en la prescripción de antimicrobianos. No será tanto la creación o descubrimiento de nuevos antibióticos sino la racionalización del manejo de los existentes lo que permitirá alcanzar victorias sobre estos microorganismos. Es importante mantener educación continua sobre el uso adecuado de los antimicrobianos desde los puntos de vista epidemiológico, farmacocinético y fisiopatogénico.

An overvlew on bacterlal reslstance to an-tlmlcroblal agents Is presented. It Includes thedlfferent genetlc mechanlsms for Its develop-ment and the blochemlcal phenomena that ex-plaln It. Some cllnlcal conslderatlons areproposed In order to ratlonallze the use ofthese drugs and to avold or delay the ap-pearance of reslstance