Detección del alucinógeno 25C-NBOMe en orina por dos técnicas cromatográficas / Detection of hallucinogen 25C-NBOMe in urine by two chromatographic techniques / Detecção de alucinógeno 25C-NBOME na urina através de duas técnicas cromatográficas

El consumo de drogas de síntesis ha ido en aumento. Estos nuevos derivados sintéticos son análogos estructurales de la feniletilamina N-sustituida. Este grupo ha provocado severos casos de intoxicación e incluso probablemente la muerte de varios consumidores. El principal derivado es conocido como 25C-NBOMe y se consume en estampillas idénticas al LSD. En este trabajo se desarrolla una metodología analítica para la determinación de 25C-NBOMe mediante cromatografía planar instrumental (cromatografía en capa delgada de alta resolución) y cromatografía de gases con detector de masas (CG/EM) como técnicas alternativas de fácil manejo y costo. Estas metodologías demostraron ser robustas y confiables para el propósito previsto.

Consumption of synthetic drugs has increased. These new synthetic derivatives are structural analogs of N-substituted phenylethylamine, and this group has caused severe cases of poisoning and even probably the death of several users. The main derivative is known as 25C-NBOMe and it is consumed in blotters in the same manner as LSD. In this work, an analytical methodology for 25C-NBOMe determination by instrumental planar chromatography high-performance thin-layer chromatography (HPTLC) and gas chromatography with mass detector (GC/MS) were developed as alternative techniques; they are easy to use and low cost. These methods proved to be robust and reliable for the intended purpose.

O consumo de drogas sintéticas vem aumentando. Esses novos derivados sintéticos são análogos estruturais de feniletilamina N-substituída, este grupo tem causado casos graves de intoxicação e, até mesmo, provavelmente, a morte de vários consumidores. O principal derivado é conhecido como 25C-NBOMe e consumido em selos idênticos ao LSD. Neste trabalho é desenvolvida uma metodologia analítica para a determinação de 25C-NBOMe através de cromatografia planar instrumental (cromatografia em camada delgada de alta resolução) e cromatografia gasosa com detector de massas (CG/EM) como técnicas alternativas de fácil utilização e custo. Estas metodologias demonstraram serem robustas e fiáveis para a finalidade a que se destinam.

Occurrence of fungi and aflatoxins B in nuts and products marketed the Brazilian northeastern regions / Ocorrência de fungos e aflatoxinas do tipo B em castanhase produtos comercializados no nordeste brasileiro

Aflatoxin contamination has been considered as a public health problem, especially in tropical countries, including Brazil. In order to investigate the presence of type B aflatoxins in products marketed in the city of Fortaleza, 23 samples were analyzed by thin layer chromatography.Visible fungal contamination in food was identified according to their macroscopic and microscopic features. The contamination by aflatoxins was detected in 8.7 % of 23 analyzedsamples, and 12.5 % of Brazilian nuts samples were positive for AFB1 (<8 µg/kg) and for AFB2 in a contamination rate above the allowed value (16 µg/kg). Among the peanut samples,33.3 % were positive to AFB1 and AFB2, also in a contamination rate (317.1 µg/kg) which was higher than that recommended by ANVISA. The isolation and morphological characteristics of fungi detected mainly in Brazilian nuts with peel showed the occurrence of the followingspecies: Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Mucor sp, Cladosporium sphaerospermum, Cladosporium cladosporoides, Fusarium sp, Aspergillus terreus and bacteria of Actinomycetes phylum. These findings indicate that it is needed to apply the mostly effective quality monitoringof food available to consumers.

A contaminação por aflatoxinas tem sido considerada um problema de saúde públicaprincipalmente em países tropicais, incluindo o Brasil. Com o intuito de investigar a presença de aflatoxinas do tipo B em produtos comercializados na cidade de Fortaleza, 23 amostrasforam analisadas por meio de cromatografia em camada delgada. Os fungos visivelmentepresentes em alimentos foram identificados de acordo com suas características macroscópicase microscópicas. A contaminação por aflatoxina foi detectada em 8,7 % das 23 amostrasanalisadas; e 12,5 % das amostras de castanha-do-Brasil apresentaram positividade paraAFB1 (<8 μg/kg) e para AFB2 com taxa de contaminação acima do valor permitido (16 μg/kg). Quanto às amostras de amendoim, 33,3 % apresentaram positividade para AFB1 e AFB2, também com nível de contaminação (317,1 μg/kg) acima do preconizado pela ANVISA. O isolamento e a caracterização morfológica dos fungos encontrados principalmente nas castanhas-do-Brasilcom casca revelaram a presença das espécies: Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Mucor sp, Cladosporium sphaerospermum, Cladosporium cladosporoides, Fusarium sp, Aspergillus terreuse bactérias do filo Actinomicetos. Estes resultados demonstram que há necessidade de fiscalização mais efetiva da qualidade dos alimentos oferecidos aos consumidores.

Occurrence of fungi and aflatoxins B in nuts and products marketed the Brazilian northeastern regions / Ocorrência de fungos e aflatoxinas do tipo B em castanhas e produtos comercializados no Nordeste brasileiro

Aflatoxin contamination has been considered as a public health problem, especially in tropical countries, including Brazil. In order to investigate the presence of type B aflatoxins in products marketed in the city of Fortaleza, 23 samples were analyzed by thin layer chromatography. Visible fungal contamination in food was identified according to their macroscopic and microscopic features. The contamination by aflatoxins was detected in 8.7 % of 23 analyzed samples, and 12.5 % of Brazilian nuts samples were positive for AFB1 (<8 µg/kg) and for AFB2 in a contamination rate above the allowed value (16 µg/kg). Among the peanut samples, 33.3 % were positive to AFB1 and AFB2, also in a contamination rate (317.1 µg/kg) which was higher than that recommended by ANVISA. The isolation and morphological characteristics of fungi detected mainly in Brazilian nuts with peel showed the occurrence of the following species: Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Mucor sp, Cladosporium sphaerospermum, Cladosporium cladosporoides, Fusarium sp, Aspergillus terreus and bacteria of Actinomycetes phylum. These findings indicate that it is needed to apply the mostly effective quality monitoring of food available to consumers.

A contaminação por aflatoxinas tem sido considerada um problema de saúde pública principalmente em países tropicais, incluindo o Brasil. Com o intuito de investigar a presença de aflatoxinas do tipo B em produtos comercializados na cidade de Fortaleza, 23 amostras foram analisadas por meio de cromatografia em camada delgada. Os fungos visivelmente presentes em alimentos foram identificados de acordo com suas características macroscópicas e microscópicas. A contaminação por aflatoxina foi detectada em 8,7 % das 23 amostras analisadas; e 12,5 % das amostras de castanha-do-Brasil apresentaram positividade para AFB1 (<8 µg/kg) e para AFB2 com taxa de contaminação acima do valor permitido (16 µg/kg). Quanto às amostras de amendoim, 33,3 % apresentaram positividade para AFB1 e AFB2, também com nível de contaminação (317,1 µg/kg) acima do preconizado pela ANVISA. O isolamento e a caracterização morfológica dos fungos encontrados principalmente nas castanhas-do-Brasil com casca revelaram a presença das espécies: Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Mucor sp, Cladosporium sphaerospermum, Cladosporium cladosporoides, Fusarium sp, Aspergillus terreus e bactérias do filo Actinomicetos. Estes resultados demonstram que há necessidade de fiscalização mais efetiva da qualidade dos alimentos oferecidos aos consumidores.

Identificação de aflatoxinas em paçocas de amendoim comercializadas na cidade de Lavras-MG / Identification of aflatoxins in peanut candy “paçoca” marketed in Lavras-MG, Brazil

Os alimentos estão sujeitos à contaminação por substâncias químicas, dentre elas, as aflatoxinas, as quais são potencialmente carcinogênicas, A presença de tais substâncias nos alimentos constitui importante risco para a população, tanto humana quanto animal, Em meio aos vários fatores que danificam a qualidade de um alimento, merece ênfase a contaminação de grãos por micotoxinas, especialmente as aflatoxinas, que são metabólitos tóxicos de fungos como Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus, compondo um sério problema de saúde pública em diversas regiões do mundo, O objetivo deste estudo foi identificar a presença de aflatoxinas B1 e B2 em amostras de paçocas adquiridas no comércio da cidade de Lavras - MG, Brasil, no período de janeiro a junho de 2011, A técnica utilizada para a separação e identificação das substâncias foi a cromatografia em camada delgada com prévia extração, líquido-líquido, dos analitos, Os resultados demonstraram que as amostras de paçocas utilizadas neste estudo não apresentaram contaminações por aflatoxinas B1 e B2, Torna-se importante um maior conhecimento da presença destas micotoxinas em alimentos visto os riscos que as mesmas possam causar no organismo humano...

The food can be subject of chemicals contamination, including aflatoxins, which are potentially carcinogenic. The presence of such substances in food is a serious risk to both human and animal population. Among many factors that damage the quality of food, the contamination of grain with mycotoxins deserves emphasis, particularly aflatoxins, which are toxic metabolites of fungi mainly Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus, which represent a serious public health problem. The aim of this study was to determine the presence of aflatoxins B1 and B2 in samples of the peanut candy called ?paçoca?, acquired randomly in the city of Lavras - MG, Brazil, from January to June in the year 2011. The separation and identification of substances were performed by thin layer chromatography with prior liquid-liquid extraction. The obtained results showed that the samples showed no contamination by aflatoxin B1 and B2. A greater knowledge of the presence of these mycotoxins in foods is important because of the risks for the human body...

Análise de amostras de flores de Calêndula (Calendula officinalis L, Asteraceae) comercializadas na grande Curitiba / Analysis of samples of flowers Calendula (Calendula officinalis L. ) Asteraceae commercially in Curitiba, PR, Brazil

A espécie Calendula officinalis L. é uma planta herbácea pertencente à família Asteraceae, suas flores apresentam propriedades antimicrobianas, emolientes, antiinflamatórias e tonificantes da pele. Os flavonoides são utilizados como marcadores para avaliar a qualidade da droga vegetal. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a identidade e qualidade de seis amostras de flores de C. officinalis L. comercializadas na Grande Curitiba (PR). Foram realizados os ensaios de identificação macroscópica e de pureza, determinação de flavonoides, perfil do extrato etanólico em cromatografia em camada delgada, avaliação das atividades antioxidante e atividade antibacteriana sobre Staphylococcus aureus ATCC 25923. Todas as seis amostras analisadas foram identificadas como C. officinalis L. e foram aprovadas no perfil cromatográfico, porém não atenderam aos requisitos farmacopeicos de pureza e teor de flavonoides, fatores que contribuíram para a diminuição da atividade antioxidante e antibacteriana. A má qualidade de plantas medicinais, decorrente de processos produtivos inadequados, pode ocasionar ausência ou diminuição do efeito terapêutico esperado, além de possíveis efeitos tóxicos.(AU)

Calendula officinalis L., is an herbaceous plant belonging to the family Asteraceae, its flowers have antimicrobial, emollient, anti-inflammatory and toning of the skin properties. Flavonoids are used as chemical markers to evaluate the quality of plant drug. The aim of this study was to evaluate the identity and quality of six samples of C. officinalis L. flowers commercialized in Curitiba City and Metropolitan Area (State of Paraná, Brazil). Tests of macroscopic identification, purity, determination of flavonoids were performed, in addition to the profile of the ethanolic extract in thin layer chromatography, evaluation of antioxidant activity and antibacterial activity against Staphylococcus aureus ATCC 25923. All six samples analyzed were identified as C. officinalis L. and were approved in chromatographic profile, but samples were in discordance with parameters established by Brazilian Pharmacopoeia of purity and content of flavonoids, factors that have contributed to the decline of antioxidant activity and antibacterial. The poor quality of medicinal plants as a result of productive processes inadequate can cause absence or reduction of the therapeutic effect expected, in addition to possible toxic effects.(AU)

Análise e monitoramento da qualidade de produtos farmacêuticos contendo Hypericum perforatum L. comercializados em Divinópolis Minas Gerais Brasil / Analysis and monitoring of the quality of pharmaceutical products containing Hypericum perforatum L. marketed in Divinópolis State of Minas Gerais Brazil

The growing trade market in herbal medicines is aworldwide phenomenon due to several factors, fromthe high cost of manufactured drugs to mere fashion.In this study, we tested the quality of pharmaceuticalproducts based on Hypericum perforatum L. (Eng. ?StJohn?s Wort?) marketed in Divinópolis City, State ofMinas Gerais, Brazil. Samples of products labeled H.perforatum were purchased at three commercial stores,at various times during one year. We assessed thefollowing items: pharmacobotanical characteristics,humidity, total ash, hypericin content and thin layerchromatographic profile. Close inspection showed that4 of the 12 samples sold as H. perforatum products werefrom a different plant from that advertised, representinga forgery in which the true species was replaced byAgeratum sp. Besides, the samples did not entirely meetthe legal requirements for herbal medicine. Therefore,there is a need to strengthen pharmaceutical vigilance,to ensure that herbal products are suitable for publicuse.

O crescente comércio de plantas medicinais e fitoterápicos ocorre em todo o mundo em razão de diversos fatores, como o alto custo dos medicamentos industrializados ou modismo. Neste trabalho verificou-se a qualidade de produtos farmacêuticos contendo Hypericum perforatum L. comercializados em Divinópolis, Minas Gerais, Brasil. Adquiriram-se amostras de H. perforatum em três estabelecimentos distintos em diferentes épocas ao longo de um ano. Avaliaram-se os seguintes itens: aspectos farmacobotânicos, umidade, cinzas totais, doseamento de hipericina e cromatografia em camada delgada. Os resultados demonstraram que quatro amostras comercializadas como H. perforatum eram produtos diferentes daqueles anunciados, caracterizando uma falsificação e substituição da espécie verdadeira por Ageratum sp. Além disso, as amostras não cumpriram totalmente os requisitos exigidos pela legislação. Portanto, faz-se necessário reforçar a vigilância farmacêutica, buscando garantir produtos de qualidade adequados ao uso da população.

Caracterização físico-química e análises por espectrofotometria e cromatografia de Peperomia pellucida L. (H. B. K. ) / Physical chemical characterization and spectrophotometric analysis and chromatography (TLC) of the Peperomia pellucida L. (H. B. K. )

O objetivo deste trabalho foi realizar a caracterização físico-química do pó e da tintura, e análise por espectrofotometria e cromatografia do extrato seco de Peperomia pellucida L. (H. B. K.). As metodologias seguiram a Farmacopéia Brasileira IV ed., com exceção da prospecção química, da espectrofotometria, da obtenção do perfil cromatográfico do extrato seco, e determinação do resíduo seco. A prospecção química revelou a presença de saponinas espumídicas; açúcares redutores; proteínas e aminoácidos; fenóis; taninos; flavonóides; esteróides e triterpenóides. Na análise por CCD, o melhor perfil da fração flavonoídica foi obtido com MeOH/CHOOH (90:10). Foi confirmada, através de CLAE, a presença de 3',4',7-tri-O-metoxiflavona no extrato seco deste material vegetal. Os resultados obtidos contribuem para a determinação de especificações de uma futura monografia em Farmacopéias da Peperomia pellucida L. (H.B.K.).

The aim of this study was the physical chemical characterization of the powder and the tincture, and the chromatographic and spectrophotometric analysis of the Peperomiapellucida L. (H. B. K.) dry extract. The methodology followed the Farmacopeia Brasileira IV ed., except for the chemical prospection, the chromatographic profile obtained and the spectrophotometry of the dry extract, and determination of dried residues. The chemical prospection revealed the presence of foaming saponins; reducing sugars; proteins and amino acids; phenols; tannins; flavonoids; steroids and triterpenoids; depsideos and depsidones. The best profile from TLC for flavonoidic fraction was obtained with methanol/formic acid (90:10 v/v). HPLC confirmed the presence of 3 ',4',7-tri-methoxyflavone in the dry extract of the plant material. The results obtained in this work should contribute for the determination of specifications for a future monograph on Peperomia pellucida L. (H.B.K.).

Bioanalytical method development and validation for determination of metoprolol tartarate and hydrochlorothiazide using HPTLC in human plasma

A simple, sensitive, rapid and economic chromatographic method has been developed for determination of metoprolol tartarate and hydrochlorothiazide in human plasma using paracetamol as an internal standard. The analytical technique used for method development was high-performance thin-layer chromatography. HPTLC Camag with precoated silica gel Plate 60F254 (20 cm×10 cm) at 250 µm thicknesses (E. Merck, Darmstadt, Germany) was used as the stationary phase. The mobile phase used consisted of chloroform: methanol: ammonia (9:1:0.5v/v/v). Densitometric analysis was carried out at a wavelength of 239 nm. The rf values for hydrochlorothiazide, paracetamol and metoprolol tartarate were 0.13±0.04, 0.28±0.05, 0.48±0.04, respectively. Plasma samples were extracted by protein precipitation with methanol. Concentration ranges of 200, 400, 600, 800, 1000, 1200 ng/mL and 2000, 4000, 6000, 8000, 10000, 12000 ng/mL of hydrochlorothiazide and metoprolol tartarate, respectively, were used with plasma for the calibration curves. The percent recovery of metoprolol tartarate and hydrochlorothiazide was found to be 77.30 and 77.02 %, respectively. The stability of metoprolol tartarate and hydrochlorothiazide in plasma were confirmed during three freeze-thaw cycles (-20 ºC) on a bench for 24 hours and post-preparatively for 48 hours. The proposed method was validated statistically and proved suitable for determination of metoprolol tartarate and hydrochlorothiazide in human plasma.

Um método simples, sensível, rápido e econômico empregando a cromatografia em camada delgada de alta eficiência (HPTLC) foi desenvolvido para determinação do tartarato de metoprolol e hidroclorotiazida em plasma humano, usando paracetamol como padrão interno. Placas prontas de sílica-gel 60F254 (20 cm×10 cm), 250 µm de espessura, para HPTLC Camag (E. A Merck, Darmstadt, Alemanha) foramutilizadas como fase estacionária. A fase móvel utilizada consistiu de clorofórmio: metanol: amônia (9:1:0,5 v/v/v). A análise densitométrica foi realizada no comprimento de onda 239 nm. Os valores de Rf de hidroclorotiazida, paracetamol e tartarato de metoprolol foram 0.13±0.04, 0.28±0.05, 0.48±0.04 respectivamente. As proteínas do plasma foram extraídas por precipitação com metanol. Para construção das curvas de calibração, empregaram-se intervalos de concentração de 200, 400, 600, 800, 1000, 1200 ng/mL e 2000, 4000, 6000, 8000, 10000, 12000 ng/mL de hidroclorotiazida e tartarato de metoprolol, respectivamente. Os percentuais de recuperação do tartarato de metoprolol e de hidroclorotiazida foram de 77,30 e 77,02, respectivamente. A estabilidade do tartarato de metoprolol e de hidroclorotiazida no plasma foi confirmada durante três ciclos de congelamento e descongelamento (-20 ºC), durante 24 horas e póspreparação durante 48 horas. O método proposto foi validado estatisticamente, sendo adequado para determinação do tartarato de metoprolol e hidroclorotiazida em plasma humano.

Identificação botânica e química de espécies vegetais de uso popular no Rio Grande do Norte, Brasil / Botanical and chemical identification of plant species of popular use in Rio Grande do Norte, Brazil

Plantas medicinais são utilizadas mundialmente como uma das principais formas de cuidado primário de saúde. No entanto, a literatura indica que muitas espécies podem apresentar composição química variável, toxicidade ou difícil identificação. O objetivo do presente estudo foi obter critérios úteis para o controle de qualidade farmacognóstico das principais espécies vegetais de uso popular no estado do Rio Grande do Norte, utilizando metodologias de análise botânica (morfodiagnose macro e microscópica) e química (triagem fitoquímica e cromatografia em camada delgada), evitando assim adulterações ou uso inadequado dessas plantas medicinais no estado. No total, sete espécies foram analisadas Acmella oleracea, Chenopodium ambrosioides, Lippia alba, Mentha piperita, Ocimum gratissimum, Peumus boldus e Rosmarinus officinalis. Diversos marcadores botânicos e fitoquímicos foram identificados, contribuindo dessa forma para a correta identificação destas espécies de plantas medicinais importantes no estado do Rio Grande do Norte.

Medicinal plants are worldwide used as one of the main forms of primary healthcare. However, the literature indicates that many species may have variable chemical composition, toxicity, or even difficult identification. The aim of this study was to obtain useful criteria for pharmacognostic quality control of the main plant species of popular use in the state of Rio Grande do Norte, using methods of botanical (macro and microscopic morphodiagnosis) and chemical (phytochemical screening and thin-layer chromatography) analysis, thus preventing adulteration or inappropriate use of these medicinal plants in the state. In total, seven species were analyzed Acmella oleracea, Chenopodium ambrosioides, Lippia alba, Mentha piperita, Ocimum gratissimum, Peumus boldus and Rosmarinus officinalis. Several botanical and phytochemical markers were identified, thereby contributing to the correct identification of these important medicinal plant species in the state of Rio Grande do Norte.

Two fast screening methods (GC-MS and TLC-ChEI assay) for rapid evaluation of potential anticholinesterasic indole alkaloids in complex mixtures

The pharmacotherapyfor Alzheimer's disease (AD) includes the use of acetylcholinesterase inhibitors (AChEI). Recent investigations for novel AD therapeutic agents from plants suggested that Tabernaemontana genus is a promising source of novel anticholinesterasic indole alkaloids. In this work two fast screening techniques were combined in order to easily identify novel cholinesterase inhibitors (ChEI). Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) of the less polar alkaloidic fractions obtained from the acid-base extraction of the stalk of T. laeta revealed thirteen monoindole alkaloids, four of them confirmed by co-injection with previously isolated alkaloids. The others were tentatively identified by mass fragmentation analysis. By gas chromatography with flame ionization detection (GC-FID) and using isatin as internal standard, affinisine and voachalotine were determined as major compounds. These fractions and fourteen previously isolated alkaloids, obtained from root bark of T. laeta and T. hystrix were investigated for acetyl (AChE) and butyrylcholinesterase (BuChE) inhibitory activities by the modified Ellman's method in thin layer chromatography(TLC-ChEI). Results showed selective inhibition of the alkaloids heyneanine and Nb-methylvoachalotine for BuChE, and 19-epi-isovoacristine for AChE, whereas olivacine, affinisine, ibogamine, affinine, conodurine and hystrixnineinhibited both enzymes. In addition to confirming that monoterpenoid indole alkaloids can be novel therapeutic agents for AD, this is the first report of the ChEI activity of olivacine, a pyridocarbazole alkaloid.

Dentre os tratamentos da doença de Alzheimer (DA) está o uso de inibidores da enzima acetilcolinesterase. Pesquisas recentes visando a descoberta de novos agentes terapêuticos naturais para esta doença sugerem que o gênero Tabernaemontana é uma fonte promissora de alcalóides indólicos anticolinesterásicos. Neste trabalho, duas técnicas de análise em mistura foram associadas de modo a identificar facilmente novos inibidores colinesterásicos. A cromatografia em fase gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG-EM) das frações alcaloídicas apolares, obtidas da extração ácido-base do caule de T. laeta, revelou a presença de treze alcalóides monoindólicos, quatro deles confirmados por co-injeção com padrões previamente isolados. Os outros alcalóides foram tentativamente identificados pelo padrão de fragmentação de massas. Por cromatografia em fase gasosa com detecção por ionização de chama (CG-DIC) e utilizando isatina como padrão interno, affinisina e voachalotina foram identificadas como substâncias majoritárias. As frações alcaloídicas obtidas e os quatorze alcalóides previamente isolados das raízes de T. laeta e T. hystrix foram analisados quanto à atividade inibitória das enzimas acetil (AChE) e butirilcolinesterase (BuChE) pelo método de Ellman em cromatografia em camada delgada (CCD-ChEI). Os resultados revelaram uma inibição seletiva dos alcalóides heyneanina e Nb-metilvoachalotina para BuChE e de 19-epi-isovoacristina para AChE, enquanto que olivacina, affinisina, ibogamina, affinina, conodurina e hystrixnina inibiram ambas as enzimas. Além de confirmar que alcalóides indólicos monoterpênicos são agentes terapêuticos promissores para o tratamento da DA, este é o primeiro relato da atividade anticolinesterásica de olivacina, um alcalóide piridocarbazólico.

Cromatografia em camada delgada para o diagnóstico da intoxicação por aldicarb ("chumbinho") em cães e gatos / Thin-layer chromatography for aldicarb poisoning diagnosis in dogs and cats

Avaliou-se a cromatografia em camada delgada (CCD) como método de diagnóstico toxicológico para os casos de intoxicação por aldicarb em cães e gatos, utilizando-se 50 amostras de conteúdo gástrico obtidas durante a necropsia e 50 amostras de alimentos utilizados como iscas para intoxicar criminalmente os animais. Todas as amostras resultaram positivas para o aldicarb, mostrando ser a CCD uma técnica qualitativa eficiente, rápida e de baixo custo, com uso potencial na toxicologia veterinária forense

The present study concerns about the identification of aldicarb residues using thin-layer chromatography (TLC) in 50 samples of gastric content obtained from the necropsy of dogs and cats and 50 samples of foods suspected of being used as baits. All samples resulted positive for aldicarb showing that the TLC is an efficient, fast and not expensive qualitative method for the detection of aldicarb, being useful for this purpose in the forensic veterinary toxicology

Desenvolvimento e aplicação de metodologia por cromatografia em camada delgada para determinação do perfil de alcalóides oxindólicos pentacíclicos nas espécies sul-americanas do gênero Uncaria / Development and application of a thin layer chromatographic method for the determination of the pentacyclic oxindole alkaloid profile in South-American species of the genus Uncaria

O gênero Uncaria (Rubiaceae) é representado na América do Sul e Central por duas espécies: U. tomentosa (Willd.) DC. e U. guianensis (Aubl.) Gmel., conhecidas popularmente como unha-de-gato. Ambas são trepadeiras perenes, sendo empregadas na prevenção e cura de várias doenças. Nessas plantas são encontrados alcalóides oxindólicos e indólicos, triterpenos glicosilados, taninos e flavonóides. Seis alcalóides oxindólicos pentacíclicos, considerados seus marcadores: especiofilina, mitrafilina, uncarina F, isomitrafilina, pteropodina e isopteropodina, são usados na padronização do material vegetal e fitoterápicos derivados. O presente trabalho descreve o desenvolvimento de metodologia analítica qualitativa utilizando cromatografia em camada delgada (CCD) para determinação do perfil dos seis alcalóides oxindólicos pentacíclicos marcadores das espécies. O desenvolvimento do método incluiu a comparação entre o uso do extrato metanólico bruto, e de frações enriquecidas obtidas por partição ácido-base clássica ou pelo uso de resina básica Poliamida 6. Utilizou-se gel de sílica como fase estacionária, e variaram-se alguns parâmetros como: eluentes, concentração da amostra, espaço de eluição e tipos de reveladores. O método desenvolvido em CCD mostrou-se confiável, reprodutível e seletivo para os alcalóides alvos, sendo aplicado na análise de amostras de folhas e caule das duas espécies e também de fitoterápicos comerciais à base de U. tomentosa.

The species Uncaria tomentosa (Willd.) DC. and U. guianensis Gmel. (Rubiaceae), known as cat's claw, are large woody vines occurring in the Amazon rain forest and other tropical areas of South and Central America. It has been used medicinally by indigenous peoples for at least 2,000 years for several diseases. Tetra- and pentacyclic oxindole alkaloids, triterpenoid glycosides, sterols and flavonoids are found in these plants. Among these metabolites, six pentacyclic oxindole alkaloids, speciophylline, mitraphylline, pteropodine, uncarine F, isopteropodine and isomitraphylline, are considered to be the biochemical markers and are used to standardize commercial herbal medicines. The present study describes the development of an analytical methodology to determine the profile of these alkaloid markers through thin layer chromatography (TLC). This development has also included a comparison among the use of the crude methanol extract and fractions obtained through the classical acid-base partition or by using the basic resin Polyamide 6. Silica gel was used as stationary phase with the variation of some parameters such as solvent systems, sample concentration, distance of development and detection method. The TLC method developed was shown to be reliable, reproducible and selective for the target alkaloids. It has been applied to the analysis of leaves and stems from both species as well as phytopharmaceutical derivatives based on U. tomentosa.

Comparaçäo entre Elisa e cromatografia em camada delgada na quantificaçäo de aflatoxinas em amendoim / Comparision between ELISA and thin layer chromatography in the quantification of aflatoxins in peanut

Um método imunoenzimático (ELISA) e a cromatografia em camada delgada (CCD) com comparaçäo visual, foram comparados na determinaçäo de aflatoxinas em amostras de amendoim cru naturalmente contaminado. Para níveis de aflatoxina total até de 50 ug/Kg näo houve diferença significativa (p<0,001) entre os resultados obtidos pelos dois métodos. Para valores de aflatoxinas total superiores a 50 ug/Kg, a técnica de ELISA foi estatisticamente equivalente à cromatografia em camada delgada (p<0,0001) somente quando as amostras foram diluídas para obter níveis de aflatoxinas total até o máximo de 50 ug/Kg. Näo foram observados falsos positivos ou negativos por ELISA quando comparado com cromatografia em camada delgada. (AU)

A method of enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and a thin layer chroma- tography were compared to determine the aflatoxins in naturally contaminated peanut samples. For val- ues of total aflatoxin concentration until 50 ug/Kg , a significant difference was not observed at the Ievel of p < 0,001 , when compared to the results obtained by the two methods. For values of total aflatoxin concentration higher than 50 ug/Kg , the ELISA Method was onIy statiscally equivalente to thin layer chromatography ( p < 0,001 ) when the samples were diluted at maximum levei of 50 ug/Kg. No false positives and negatives were obtained by ELISA when it was compared with thin layer chromatography. (AU) .

Ocorrência de aflatoxina B1 em produtos alimentícios e rações animais, consumidos no Estado de Säo Paulo e em várias outras regiões do Brasil no período de 1980 a 1987 / Incidence of aflatoxin B1 in foodstuffs and animal feed, consumed in Säo Paulo and in various areas of Brazil

Aflatoxina B1 foi identificada e quantificada por cromatografia em camada delgada em 666 amostras de produtos alimentícios e 308 amostras de rações animais expostas ao consumo no Estado de São Paulo e em várias outras regiões do Brasil. Foi detectada aflatoxina B1 em 3,39% do total das amostras analisadas, com concentração superior a 30 mg/kg(ppb), que é o limite tolerado pela legislação brasileira. Os resultados foram expressos em tabelas (AU).

L-asparaginase de soro de cutia (Dasyproctasp.). III - Anticorpos precipitantes antienzima / Serum L-asparaginase from agouti (Dasyproctasp.). III - Anti-enzyme precipitating antibodies

Dez imune-soros foram estudados quanto à presença de anticorpos precipitantes anti-L-asparaginase. Após reação de precipitação em meio líquido, usando como antígeno preparação enzimática parcialmente purifica da do soro de cutia, sobre na dantes e precipitados foram incubados em presença de substrato, a L-asparagina. A presença de enzima convertia a L-asparagina em ácido L-aspártico e ambos os aminoácidos eram posteriormente caracterizados por cromatografia em camada delgada de sílica-gel. Dentre os dez imune-soros, sete possuíam alto nível de anticorpos precipitantes antienzima que inibiam parcialmente a atividade catalítica da L-asparaginase. Três imune-soros possuíam anticorpos anti-L-asparaginase em baixo nível. Não foi encontrada correlação entre o conteúdo protéico dos imune-soros e o nível dos anticorpos antienzima (AU).

Determinação espectrofotométrica do sulfato de neomicina em medicamentos, diretamente e após separação por cromatografia em camada delgada / Spectrophotometric determination of neomycin sulfate in drugs, directly and after separation by thin layer chromatography

Usando-se a reação da neomicina com ninhidrina em meio glicerínico, em condições pré-estabelecidas , pode-se determinar rapidamente o teor de neomicina em um medicamento que a contena. O metodo baseia-se na reação de noemicina com um reagente ninhidrina contendo glicerina: nestas condições, a reação é mais sensivel e os resultados são reproduzidos.A lei de Beer é obedecida entre 4 e 40 ug de sulfato de neomicina por ml. Alguns interferentes foram estudados. Quando necessários uma prévia de separação por cromotografia em camada delgada foi aplicado (AU).

Determinação espectrofotométrica de eritomicina em medicamentos / Spectrophotometric determination of erythromycin in drugs

Neste trabalho foi descrito um metodo simples para a dosagem de eritromicina em medicamentos. O método envolve a determinação espectrofotométrica, a 540nm, do composto formado quando da reação da eritromicina com xantidrol em meio ácido. Estabeleceram-se as condições ideais para a reação e verificou-se a possibilidade de interferência de algumas substâncias que possam ser encontradadas em mistura com eritromicina em medicamentos. Testes de recuperação foram feitos. O erro do método é da ordem de 2%. Também foram estabecidas condições para separações e dosagem da eritromicina e seus sais, quando em mistura com teraciclina e espiramicina, por cromatografia em camada delgada (AU).

Método para identificação de sorbitol por cromatografia em camada delgada / Method for identification of sorbitol by thin layer chromatography

É descrito um método cromatografia em camada delgada para identificação de sorbitol, em presença de seus possíveis contaminantes(manitol, maltose, glicose, xilose, frutose, sacarose). O solvente é uma mistura de água, propanol e acetado de etila e o revelador, uma solução de permanganato de potássio. O método detecta até 0,5ug/ul de sorbitol e o separa nitidamente até 5% de manitol em sorbitol (AU).